CC BY
97
27. Cori A.D., Bongiorni M.G., Arena G. et al. New-onset ventricular tachycardia after cardiac resynchronization therapy // J. Interv. Card. Electrophysiol. - 2005. - Vol. 12. - P. 231-235.
28. Guerra J.M., Wu J., Miller J.M. et al. Increase in ventricular tachycardia frequency after biventricular implantable cardioverter defibrillator upgrade // J. Cardiovasc. Elecrophysiol. - 2003. -Vol. 14. - P. 1245-1247.
29. Adamson P.B., Kleckner K.J., VanHour W.L. et al. Cardiac resynchronization therapy improves heart rate variability in patients with symptomatic heart failure // Circulation. - 2003. - Vol. 108. - P. 266-269.
30. Livanis E.G., Flevari P., Theodorakis G.N. et al. Effect of biventricular pacing on heart rate variability in patients with chronic heart failure // Eur. J. Heart Fail. - 2003. - Vol. 5. - P. 175-178.
Поступила 26.03.2010
УДК 616.12-008.331.1
ВЛИЯНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА GLU298ASP ГЕНА ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ NO СИНТАЗЫ НА РАЗВИТИЕ ПОРАЖЕНИЙ ОРГАНОВ-МИШЕНЕЙ ПРИ УСТАНОВЛЕНИИ АРТЕРИАЛЬНОЙ ГИПЕРТЕНЗИИ В МОЛОДОМ ВОЗРАСТЕ
Т.Ю. Кузнецова1, Д.В. Гаврилов2, Л.М. Самоходская3, А.Ю. Постнов4, С.А. Бойцов4
1 ГОУ ВПО Петрозаводский государственный университет
2 Больница скорой медицинской помощи, Петрозаводск
3 ФФМ МГУ им. М.В. Ломоносова
4 ФГУ РКНПК МЗ и СР РФ, Москва
E-mail: eme@karelia.ru
INFLUENCE OF POLYMORPHISM GLU298ASP OF GENE OF ENDOTHELIAL NO-SYNTHASE ON THE DEVELOPMENT OF TARGET ORGANS DAMAGE IN THE ESTABLISHMENT OF ARTERIAL HYPERTENSION AT AN EARLY AGE
T.Yu. Kuznetsova1, D.V. Gavrilov2, L.M. Samokhodskaya3, A.Yu. Postnov4, S.A. Boitsov4
1 Petrozavodsk State University 2 Emergency hospital, Petrozavodsk 3 Moscow State University n. a. M.V. Lomonosov 4 Russian Cardiology Research and Productive Complex, Moscow
Целью исследования явился анализ распределения генотипов и аллелей полиморфизма Glu298Asp гена эндоте-лиальной NO синтазы (eNOS) у больных артериальной гипертензией (АГ), имеющих поражения органов-мишеней, в зависимости от возраста. Обследовано 672 пациента АГ, средний возраст - 50,6 лет, мужчин - 67%. Выполнялись лабораторные исследования, включая микроальбуминурию (МАУ); ЭКГ, ЭХО КС, УЗИ сонных артерий (СА). Группа контроля составила 184 человека. Генотипирование по замене Glu298Asp гена eNOS проводилось методом ПЦР с анализом полиморфизма длины рестрикционных фрагментов. Анализировалось распределение генотипов у больных АГ, в группе контроля в зависимости от наличия МАУ, гипертрофии левого желудочка (ГЛЖ), поражения СА с учетом возраста установления АГ: до 35 лет (128 чел.) и более 35 лет. Ультразвуковые признаки поражения СА выявлены в 65% случаев. ГЛЖ диагностирована в 39%. МАУ выявлена у 10,5% больных АГ. Установлены отличия в распределении генотипов и аллелей полиморфизма Glu298Asp гена eNOS в подгруппах в зависимости от возраста установления АГ. У пациентов, которым АГ установлена в возрасте до 35 лет, патологические изменения сонных артерий ассоциированы с аллелем G полиморфизма Glu298Asp гена eNOS (ОШ 2,3, р=0,016), с алле-лем А ассоциировались ГЛЖ (ОШ 1,9, р=0,037) и МАУ (ОШ 3,6, р=0,02).
Ключевые слова: артериальная гипертензия, поражение органов-мишеней, Glu298Asp гена eNOS.
The aim of the study was to analyse the distribution of genotypes and alleles polymorphism Glu298Asp of endothelial nitric oxide synthase gene in patients with arterial hypertension (AH), having damage of target organs, depending on age. We observed 672 AH patients, middle age - 50,6 y.o., men - 67%. Different laboratory tests were carried out, including microalbuminuria, electrocardiogram, echocardioscopy, carotid artery (CA) ultrasound. Control group consisted of 184 people. Genotyping on replacing Glu298Asp of gene eNOS was conducted using PCR method with the analysis of polymorphism of length of restriction fragments. Genotype distribution in AH patients of the control group was analysed depending on the presence of microalbuminuria, left ventricular hypertrophy (LVH), CA damage in the subgroups: the age of AH ascertainment before 35 years (128 people) and older. Ultrasound signs of CA damage were revealed in 65% of cases. LVH was diagnosed in 39% of cases. Microalbuminuria was diagnosed in 10,5% of AH patients. Differences in the distribution of genotypes and alleles of polymorphism Glu298Asp of gene eNOS were ascertained in the subgroups depending on the age of AH establishment. Pathologic CA changes were associated with allel G of polymorphism Glu298Asp of gene eNOS (Estimation scale 2,3, р=0,016) in patients who established AH in the age earlier than 35 y.o., LVH (Estimation scale 1,9, р=0,037) and Microalbuminuria (Estimation scale 3,6, р=0,02) were associated with allel A. Key words: arterial hypertension, target organs damage, Glu298Asp of gene eNOS.
При изучении физиологических механизмов артериальной гипертензии (АГ) было показано, что большой вклад в ее развитие вносят изменения периферических сосудов. Важная роль в регуляции сосудистого тонуса принадлежит оксиду азота (N0) [1]. N0 синтезируется из L аргинина посредством ферментов семейства N0-^^ таз, которое состоит из нескольких типов. Эндотелиаль-ная N0-синтаза (€N08) третьего типа и «конституциональная» N0-синтаза нервной ткани экспрессируются постоянно как в условиях физиологической нормы, так и при патологии. «Индуцибельная» N0-синтаза может экс-прессироваться в клетках сосудистой стенки и макрофагах при патологических процессах (например, воспалении) [1-3].
Физиологическая роль оксида азота состоит в том, что он проникает из эндотелия в гладкомышечные клетки сосуда, способствуя вазодилатации, а так же ингибирует высвобождение ренина и ангиотензина, таким образом, опосредованно способствуя вазодилатации, кроме того, ингибируется пролиферация гладкомышечных клеток сосудов [4]. Сначала в эксперименте было показано, что блокада синтеза N0 способствует повышению АД, далее в клинических исследованиях выявлена дисфункция эндотелия, одним из проявлений которой является снижение N0-зависимой вазодилатации [5]. В связи с этим начато изучение генов, ответственных за уровень N0 и их взаимоотношения с АГ.
Ген, определяющий структуру эндотелиальной N0-синтазы, расположен в 7 хромосоме, в локусе 7q35-36. Было обнаружено несколько полиморфизмов этого гена, один из них - структурный полиморфизм экзона 7: замена гуанина тимидином в 894-й позиции, которая приводит к замене глутамина аспарагином в 298-й позиции самого фермента [6].
Были проведены исследования по изучению влияния данного полиморфизма на возникновение АГ, а также на развитие поражений органов-мишеней [7-10]. Однако результаты проведенных исследований очень противоречивы, зависят от этнической принадлежности, пола, особенностей течения АГ. Кроме того, при проведении генетических исследований важно учитывать возраст больных [11, 12].
Целью данного исследования был анализ распределения генотипов полиморфизма 01и298А8р гена эндотелиальной N0 синтазы у больных АГ, имеющих поражения органов-мишеней, в зависимости от возраста.
Материал и методы
Всего обследовано 672 пациента АГ, состоявших на диспансерном наблюдении в поликлинике. В исследование было включено 450 мужчин (67%) и 222 женщины, составивших основную группу. Средний возраст больных АГ составил 50,9±8,7 лет (от 18 до 83 лет), у мужчин -50,6±9,5 (от 18 до 83 лет), у женщин - 51,6±6,7 (от 27 до 77 лет). По национальности 89% пациентов с АГ - представители славянских народностей (русские, украинцы, белорусы), 7% - финны и карелы, 4% - другие (литовцы, чуваши, немцы, евреи и др.).
Диагноз гипертонической болезни, ее стадия, расчет
риска определялись на основании данных анамнеза, лабораторных и инструментальных исследований согласно принятой стратификации риска при АГ [13].
В группу контроля вошли 184 человека без АГ, сахарного диабета, клинических проявлений ишемической болезни сердца, и отсутствием признаков гипертрофии левого желудочка (ГЛЖ) по ЭКГ, средний возраст - 37±14 лет (от 21 до 66 лет), преобладали мужчины (154 человека, 83%). Средний возраст мужчин - 33,9±13,8 (от 21 до 66 лет), женщин - 51,4±4,9 (от 46 до 65 лет). В группе контроля по национальности так же преобладали славяне - 96%, 4% составили финны, эстонцы, немцы.
ГЛЖ диагностировалась при помощи методов ЭКГ (критерий Соколова-Лайона > 38 мм, Корнелльское произведение >2440 мм х мс), эхокардиографии (индекс массы миокарда левого желудочка (ИММ ЛЖ) > 125 г/м2 для мужчин и > 110 г/м2 для женщин). ИММ Лж считали более объективным критерием ГЛЖ по сравнению с ЭКГ-признаками. По ЭХО КС частота выявления ГЛЖ составила 41% (244 человека из 596), по ЭКГ - 42% (285 из 672 чел.).
Поражение сонных артерий (СА) выявляли с помощью цветового дуплексного сканирования (ультразвуковой аппарат Vivid 7 Pro). О наличии патологических изменений в СА делали заключение при наличии следующих признаков: изменение комплекса интима-медиа сонных артерий (увеличение толщины интима-медиа (ТИМ) общей сонной артерии более 0,9 мм, изменение эхо-структуры и эхогенности, нарушение дифференциров-ки на слои), атеросклероз СА (увеличение ТИМ более 1,3 мм или локальное утолщение на 0,5 мм или на 50% относительно соседних участков в области бифуркации или внутренней сонной артерии).
В программу лабораторного обследования входило определение липидного спектра, сахара крови, креати-нина, а так же исследование общего анализа мочи и анализа мочи на микроальбуминурию (МАУ). Выявление МАУ производили иммунологическим полуколичественным методом при помощи тест-полосок Micral-test (фирма «Roche Diagnostics GmbH», Германия). Положительный результат на МАУ считался >20 мг/л, выявленный дважды.
Методика определения полиморфизма Glu298Asp гена eNOS. ДНК из проб крови выделялась стандартным методом с обработкой цельной крови протеиназой К и последующей экстракцией ДНК смесью фенола и хлороформа. Для детекции полиморфизма были использованы следующие праймеры: сенс-праймер 5'GGCTGGACCCCAG GAAAC3'; антисенс-праймер для амплификации мутант-ного аллеля 5'CCACCCAGTCAATCCCTTTG3'.
Конечный объем ПЦР-смеси, равный 25 мкл содержал 100 нг ДНК; 200 мкМ каждого дНТФ; ПЦР-смесь, включающую в себя 2 мМ MgCl2, Taq ДНК-полимеразу и краситель «Крезоловый красный» (AmpliSens Biotechnologies, Москва); 8 пмоль каждого праймера для амплификации. После горячего старта и цикла денатурации при 95 °C в течение 5 мин проводилась амплификация, состоявшая из 35 циклов, в каждом из которых были следующие этапы: денатурация при 95 °C в течение 35 с, отжиг при 61 °C в течение 30 с и элонгация при 72 °C в течение 45 с. Пос-
ледняя элонгация при 72 °С длилась 2 мин. Длина ампли-кона составила 152 п.о. Полученный ДНК-продукт обрабатывали специфичной рестриктазой МЬо I (аналог Си-бЭнзим - Кго9 I) с использованием Буфера G (Сибэн-зим) (состав буфера 10 тМ ^-НС1 (рН 7.6 при 25 °С);10 тМ МяС12; 50 тМ ШС1; 1 тМ DTT). Смесь для реакции рестрикции: рестриктаза 5 и (1 ц1); буфер 10х 1 ц1; ПЦР-продукт 8,5 ц1. Время рестрикции при 37 °С не менее 4 ч. Детекцию продуктов рестрикции проводили с помощью электрофореза в 2% агарозном геле.
Достоверность различий определяли с использованием критерия %2, рассчитанного по таблицам сопряженности с помощью программы STATISTICA 5,0. Кроме того, для количественной оценки риска развития поражения органов использовали показатели относительного риска (ОР) и отношения шансов (ОШ).
Результаты
Анализ распределения генотипов проводился у больных АГ, в группе контроля, в подгруппах в зависимости от наличия поражений органов-мишеней, и в подгруппах с различным возрастом установления АГ. В таблице 1 представлены данные по возрасту и полу в исследуемых группах. Подгруппа пациентов с возрастом установления АГ до 35 лет составила 128 человек.
Таблица 1 Объект исследования
Группа N Средний возраст Муж. N Средний возраст Жен. N Средний возраст Возраст установления АГ
АГ 672 50,9+8,7 450 50,6+9,5 222 51,6+6,7 До 35 лет После 35 лет
128 544
контроль 184 37+14 154 33,9+13,8 30 51,4+4,9 До 50 лет Старше 50 лет
136 48
Распределение генотипов полиморфизма G1u298Asp гена eNOS у больных АГ следующее: генотип GG обнаружен у 393 человек (58%, ОР 1,05, ОШ 1,29, ДИ: (1,04; 1,06), р>0,05), генотип АЛ - у 47 человек (7%, ОР 0,93, ОШ 0,73, ДИ: (0,8; 1,07), р>0,05), генотип GA - у 232 человек (35%, ОР 0,96, ОШ 0,83, ДИ: (0,94; 0,98), р>0,05). В группе контроля: GG - 52%, ЛЛ - 9%, GA - 39%. Частота аллеля А гена eNOS 24% при АГ против 29% в группе контроля, и величина относительного риска меньше единицы, однако разница оказалась статистически незначимой (ОР 0,95, ОШ 0,8, ДИ: (0,93; 0,96), р=0,07б). У больных с возрастом выявления АГ до 35 лет частота аллеля А 23% (ОР 0,82, ОШ 0,73, ДИ: (0,79; 0,86)), при возрасте более 35 лет 25% (ОР 0,94, ОШ 0,81, ДИ: (0,93; 0,96), р>0,05).
Ультразвуковые признаки поражения сонных артерий анализировались в группе больных АГ, состоящей из 557 человек. Изменения в СА по данным УЗИ выявлены в 65% случаев.
Распределение генотипов у больных АГ с признаками поражения СА без таковых следующее: GG - 61 и 54% (ОР 1,12, ОШ 1,37, ДИ: (1,1; 1,13), р>0,05), АА - 7 и 5% (ОР
1,15, ОШ 1,59, ДИ: (0,87; 1,52), р>0,05), GA - 32 и 41% (ОР 0,84, ОШ 0,63, ДИ: (0,82; 0,87), р>0,05), частота аллеля А -23 и 25% (ОР 0,95, ОШ 0,86, ДИ: (0,92; 0,97), р>0,05), аллеля G - 77 и 75% (ОР 1,05, ОШ 1,15, ДИ: (1,04; 1,054). Как видно, отличия статистически незначимы. В группе контроля генотип GG составил 52%, АА - 9%, GA - 39%, частота аллеля А оказалась самой высокой - 29% и, по сравнению с группой больных, имеющих изменения в сосудах, статистически значимой (ОР 0,89, ОШ 0,73, ДИ: (0,87; 0,91), р=0,038). Частота аллеля G в группе контроля 71% и в сравнении с подгруппой больных с поражением сосудов ОР 1,11, ОШ 1,35, ДИ: (1,1; 1,116), р=0,038.
При анализе распределения генотипов и аллелей полиморфизма G1u298Asp гена eNOS в различных возрастных подгруппах было обнаружено, что данный генетический фактор у пациентов с ранним возрастом установления АГ ассоциируется с поражением сосудов еще в большей степени. Показатели ОШ для генотипов и аллелей данного полиморфизма у больных АГ с наличием изменений в СА и без них в различных возрастных подгруппах представлено в таблице 2.
Таблица 2
Показатели ОШ для генотипов и аллелей полиморфизма Glu298Asp гена eNOS у больных АГ с наличием изменений в сонных артериях в различных возрастных подгруппах
Генотипы и аллели Изменения сонных артерий Возраст установления АГ до 35 лет Возраст установления АГ позже 35 лет
GG 1,37 2,54 1,34
GA 0,63 0,32 0,65
АА 1,59 1,31 1,61
G 1,15 1,85* 1,13
А 0,86 0,53* 0,88
* - в сравнении с группой контроля р=0,016.
У больных АГ с возрастом ее установления до 35 лет, поражение СА сопровождалось еще меньшей частотой аллеля А - 15 против 24% у больных с отсутствием сосудистых изменений при раннем установлении АГ (ОР 0,64, ОШ 0,53, ДИ: (0,52; 0,8), р=0,11), статистическая значимость отличий получена при сравнении с группой контроля (ОР 0,48, ОШ 0,43, ДИ: (0,4; 0,57), р=0,016). Преобладал аллель G полиморфизма G1u298Asp гена eNOS - 85 против 71% в группе контроля (ОР 2,07, ОШ 2,31, ДИ: (2,06; 2,09), р=0,016).
ГЛЖ диагностирована у 262 человек (39%). Изучаемый полиморфизм оказывал влияние на развитие ГЛЖ, и в большей степени это проявилось при раннем возрасте установления АГ.
Генотипы полиморфизма G1u298Asp гена eNOS в подгруппах с ГЛЖ и без нее распределились следующим образом: GG - 58 и 58%, ОР 0,99, ОШ 0,99, ДИ: (0,98; 1,00), М - 9 и 6% , ОР 1,27, ОШ 1,54, ДИ: (1,09; 1,49), GA - 33 и 36%, ОР 0,92, ОШ 0,88, ДИ: (0,9; 0,94) ф>0,05). По показателям риска видно, что ГЛЖ ассоциировалась с генотипом АА. По частоте аллеля А полиморфизма гена eNOS подгруппы значимо не отличались (25 и 24%, ОР 1,05, ОШ
1,08, ДИ: (1,03; 1,07), р>0,05), частота аллеля С - 75 и 74%, ОР 0,95, ОШ 0,92, ДИ: (0,94; 0,95), р>0,05.
Обнаруженная ассоциация ГЛЖ с аллелем А С1и298Л8р полиморфизма гена €N08 была подтверждена при анализе распределения генотипов и аллелей в подгруппах с различным возрастом установления АГ (табл. 3).
Таблица 3
Показатели ОШ для генотипов и аллелей полиморфизма Glu298Asp гена eNOS у больных АГ с гипертрофией левого желудочка в различных возрастных подгруппах
Генотипы и аллели Гипертрофия левого желудочка Возраст установления АГ до 35 лет Возраст установления АГ позже 35 лет
GG 0,99 0,61 1,09
GA 0,88 0,9 0,86
AA 1,54 6,66 1,15
G 0.92 0,5* 1,03
A 1,08 1,98* 0,96
* - р=0,037.
Так, если АГ выявлялась в более молодом возрасте, частота аллеля А при ГЛЖ составила 33%, и 20% в группе без ГЛЖ (ОР 1,66, ОШ 1,98, ДИ: (1,49; 1,85), р=0,037). Частота аллеля С соответственно 70 и 80%, ОР 0,6, ОШ 0,5, ДИ: (0,59; 0,61), р=0,037. Генотип АА С1и298Л5р полиморфизма гена €N08 в первой возрастной подгруппе составил 17% при наличии ГЛЖ и только 3% при ее отсутствии, ОР 3,12, ОШ 6,66, ДИ: (1,19; 8,14), но отличия статистически незначимы. МАУ была выявлена у 10,5% обследованных больных АГ. Распределение генотипов и аллелей у больных с МАУ: вариант СС составил 69%, АА - 13%, СЛ - 18% случаев. У больных АГ без МАУ также преобладал генотип СС - 60%, ОР 1,47, ОШ 1,54, ДИ: (1,43; 1,51) в меньшем проценте выявлен генотип АА - 5%, ОР 2,12, ОШ 2,42, ДИ: (1,37; 3,29), но большее количество пациентов с гетерозиготным вариантом СЛ - 35%, ОР 0,44, ОШ 0,4, ДИ: (0,34; 0,56) привело к тому, что частота аллеля А оказалась примерно одинаковой - 22 и 23%, ОР 0,93, ОШ 0,92, ДИ: (0,84; 1,02). При сравнении с частотой аллеля А гена €N08 в контрольной группе он оказалась меньше у больных АГ с МАУ (22 против 29%), все различия были статистически незначимы, можно отметить немного большую частоту аллеля С при наличии МАУ у больных АГ - 78 против 77%, ОР 1,07, ОШ 1,08, ДИ: (1,06; 1,08).
При анализе частоты аллеля А и генотипа АА гена €N08 подгруппах в зависимости от возраста установления АГ нами получены статистически значимые отличия (табл. 4). С наибольшей частотой аллель А преобладал у больных с МАУ, имеющих более молодой возраст установления АГ - 50% по сравнению с 22% у больных без МАУ с таким же ранним началом болезни (ОР 3, ОШ 3,6, ДИ: (2,43; 3,68), р=0,02). Очень высокими оказались показатели риска для генотипа АА в этой возрастной группе - ОР 8,25, ОШ 19,12, ДИ: (2,21; 30,77). Аллель С ассоциировался со снижением риска развития МАУ - 50 против 78%, ОР 0,33, ОШ 0,27, ДИ: (0,28; 0,38), р=0,02, так же, как и генотип СС - ОР 0,53, ОШ 0,49, ДИ: (0,35; 0,79) (р>0,05).
Таблица 4
Показатели ОШ для генотипов и аллелей полиморфизма Glu298Asp гена eNOS у больных АГ с микроальбуминурией в различных возрастных подгруппах
Генотипы и аллели МАУ Возраст установления АГ до 35 лет Возраст установления АГ позже 35 лет
GG 1,54 0,49 2,07
GA 0,407 0,29 0,43
AA 2,4 19,1 1,02
G 1,08 0 27*, ** 1,65*
A 0,92 3,6* ** 0,6*
* - в сравнении с различным возрастом установления АГ, р=0,005, ** - в сравнении с пациентами без МАУ, р=0,02.
Наименьшей оказалась частота аллеля А в подгруппе пациентов с возрастом установления АГ в возрасте старше 35 лет, где она оказалась при МАУ - 17 против 23%, ОР 0,63, ОШ 0,6, ДИ: (0,52; 0,75), и ассоциировалась МАУ с аллелем G - 83 против 77%, ОР 1,58, ОШ 1,65, ДИ: (1,57; 1,59), р=0,15.
При сравнении подгрупп с МАУ с различным возрастом установления АГ получены статистически значимые отличия - 50 против 17%, ОР 3,47, ОШ 5,2, ДИ: (2,55; 4,7), р=0,005.
Обсуждение
Ассоциация Glu298Asp полиморфизма гена eNOS с АГ обнаружена в нескольких исследованиях. Это, например, исследование Lacolley Р. et al., в котором обследовано 309 пациентов АГ и 123 человека контрольной группы, показало, что G аллель чаще встречалась в группе больных АГ [7]. Японские исследователи [8, 14] также обнаружили зависимость, но в виде увеличения частоты аллеля А (обследовано более 800 человек). Полученные нами данные по распространенности данного полиморфизма среди больных АГ согласуются с некоторыми европейскими исследованиями, в которых частота АА генотипа составила около 10% [15, 16]. Среди афро-американцев описана частота АА генотипа 5,6% [17], а в азиатских исследованиях значительно меньшая - около 1% [18, 19].
В большинстве проведенных исследований достоверного различия в частоте аллелей Glu298Asp полиморфизма гена eNOS среди лиц, страдающих АГ, и в контрольных группах не получено. Это австралийское исследование Benjafield A. et al. (112 человек) [20], сербское исследование Djuric T. et al. (372 чел.) [21], крупное финское исследование Karvonen J. et al. (1200 чел.) [22], японские данные [9, 18, 23], пакистанское исследование Khawaja M.R. et al. (332 чел.) [24].
Было проведено несколько исследований по изучению влияния данного полиморфизма на развитие поражений органов-мишеней.
Нами была получена ассоциация поражения СА при АГ с аллелем G Glu298Asp полиморфизма гена eNOS, если АГ установлена в возрасте до 35 лет. В американском исследовании Chen W. et al. анализировали показатель толщина интима/медиа у 403 молодых людей (возраст от 25
до 37 лет) в зависимости от данного полиморфизма [25], и обнаружили, что А аллель взаимосвязан с меньшей толщиной интима\медиа. Обратная зависимость генотипа и ТИМ обнаружена польскими исследователями Czarnecka D. et al. [26]. При обследовании 167 родителей и 127 детей выявлено, что А аллель ассоциируется с большей толщиной интима/медиа у родителей (0,94 против 0,70 мм у гомозигот GG; р=0,007), и у детей сохраняется данная тенденция (0,60 против 0,53 мм; р=0,10). В исследовании Karvonen J. et al. при обследовании 600 пациентов с АГ не обнаружили зависимости ТИМ от генотипа Glu298Asp [22].
Lembo G. et al. при обследовании 375 пациентов с АГ выявили, что Glu298Asp полиморфизм достоверно коррелирует с наличием атеросклеротической бляшки, выявленной при УЗИ брахиоцефальных сосудов (р<0,05). По сравнению с гомозиготами GG, риск бляшки в каро-тидной артерии у гомозигот АА выше в 3 раза [27]. В итальянском исследовании Leoncini G. et al. при обследовании 375 больных АГ с выявленными по УЗИ атероскле-ротическими бляшками в сонных артериях было обнаружено, что у носителей гомозиготного варианта АА риск каротидного атеросклероза увеличивается в 3 раза по сравнению с носителями гомозиготного варианта GG гена эндотелиальной NO синтазы [28]. Положительная зависимость показателя ТИМ от наличия А аллеля показана в исследовании Paradossi U.et al. при обследовании здоровых людей [29], а также в исследовании SHIP (Study of Health in Pomerania), в него были включены 2448 человек, которым выполнено УЗИ сонных артерий [16, 30].
Противоречивыми оказались результаты анализа влияния полиморфизма Glu298Asp гена eNOS на формирование ГЛЖ при АГ. В нашем исследовании показана ассоциация аллеля А с ГЛЖ при установлении АГ в молодом возрасте, что согласуется с данными Lapu-Bula R. et al., которые показали, что аллель А ассоциируется с большей частотой ГЛЖ [31], в то же время в исследовании Л. О. Минушкиной с соавт. была показана зависимость гомозиготного варианта GG и ГЛЖ [32]. Проведены исследования, в которых влияние данного полиморфизма на развитие ГЛЖ не получено [22, 26, 33].
В нашем исследовании МАУ в обследованной выборке больных с установлением АГ в возрасте до 35 лет ассоциировалась с аллелем А полиморфизма Glu298Asp гена eNOS. Среди немногочисленных подобных исследований по данным Dell'Omo G. et al. (2007), полиморфизм Glu298Asp гена eNOS не влиял на развитие МАУ при АГ [34].
Таким образом, при установлении АГ в молодом возрасте развитие поражения органов-мишеней может определяться генетическими факторами, в частности полиморфизмом генов, кодирующих белки, участвующих в регуляции сосудистого тонуса.
Выводы
1. Частота аллелей полиморфизма Glu298Asp гена eNOS
у больных АГ, в группе контроля, подгруппах по возрасту установления АГ не отличалась.
2. У пациентов, которым АГ установлена в возрасте до
35 лет с аллелем G полиморфизма Glu298Asp гена eNOS ассоциируются патологические изменения сонных артерий (Ош 2,3, р=0,01б), с аллелем А - ГЛЖ (ОШ 1,9, р=0,037) и МАУ (ОШ 3,6, р=0,02).
Литература
1. Soubrier F. Nitric oxide synthase genes: candidate genes among many others // Hypertension. - 1999. - Vol. 33(4). - P. 924926.
2. Бражник В.А., Затейщиков Д.А., Сидоренко Б.А. Наследственные факторы и гипертрофия левого желудочка // Кардиология. - 2003. - №1. - С. 78-86.
3. Минушкина Л.О., Затейщиков Д.А., Сидоренко Б.А. Генетические аспекты регуляции эндотелиальной функции при артериальной гипертензии // Кардиология. - 2000. - №3.
- С. 68-76.
4. Takami S., Wong Z.Y.H., Stebbing M., Harrap S.B. Linkage analysis of endothelial nitric oxide synthase gene with human blood pressure // Hypertension. - 1999. - Vol. 17(10). - P. 1431-1436.
5. Leclercq B., Jaimes E. A., Raij L. Nitric oxide synthase and hypertension // Curr. Op. Nephrol. Hypertension. - 2002. - Vol. 11(2).
- P. 185-189.
6. Soma M., Nakayama T., Kanmatsuse K. Nitric oxide synthase gene polymorphism and its influence on cardiovascular disease // Curr. Op. Nephrol. Hypertension. - 1999. - Vol. 8 (1). - P. 8387.
7. Lacolley P., Gautier S., Poirier O. et al. Nitric oxide synthase gene polymorphisms, blood pressure and aortic stiffness in normo-tensive and hypertensive subjects // Hypertension. - 1998. -Vol. 16(1). - P. 31-35.
8. Miyamoto Y., Saito Y., Kijiama N. et al. Endotelial nitric oxide synthase gene is positivity associated with essential hypertension // Clin. Gen. - 1997. - Vol. 51. - P. 26-30.
9. Kato N., Sugiyama T., Morita H. et al. Lack of Evidence for Association Between the Endothelial Nitric Oxide Synthase Gene and Hypertension // Hypertension. - 1999. - Vol. 33(4). -P. 933-936.
10. Bonnardeaux A., Nadaud S., Charru A. et al. Lack of evidence for linkage of endothelial cell nitric oxide synthase gene to essential hypertension // Circulation - 1995. - Vol. 91. - P. 96-102.
11. Castellano M., Rossi F., Giac^ М. et al. [beta]2-Adrenergic Receptor Gene Polymorphism, Age, and Cardio2vascular Pheno-types // Hypertension. - 2003. - Vol. 41(2). - P. 361-367.
12. Sobstyl J., Dzida G., Puzniak A. et al. Analysis of association of human endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism with myocardial infraction // Polski Merkuriusz Lekarski. -2002. - Vol. 3(73). - P. 10-13.
13. Профилактика, диагностика и лечение артериальной гипертензии. Российские рекомендации (третий пересмотр) // Кардиоваскулярная терапия и профилактика. - 2008. -№7, прил. 2. - С. 5-16.
14. Miyamoto Y., Saito Y., Kijiama N. et al. Endothelial nitric oxide synthase gene is positively associated with essential hypertension // Hypertension. - 1998. - Vol. 32. - P. 3-8.
15. Chrysohoou C., Panagiotakos D. B., Pitsavos C. et al. Evidence for association between endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism (G894T) and inflammatory markers: the ATTICA study // Am. Heart J. - 2004. - Vol. 148(4). - P. 733-738.
16. Wolff B., Grabe H.J., Schluter C. et al. Endothelial nitric oxide synthase Glu298Asp gene polymorphism, blood pressure and hypertension in a general population sample // Hypertension.
- 2005. - Vol. 23(7). - P. 1361-1366.
17. Li R., D. Lyn, R. Lapu-Bula et al. Relation of endothelial nitric oxide synthase gene to plasma nitric oxide level, endothelial function, and blood pressure in African Americans // Am. J. Hypertension. - 2004. - Vol. 17(7). - P. 560-567.
18. Kishimoto T., Misawa Y., Kaetu A. et al. eNOS Glu298Asp polymorphism and hypertension in a cohort study in Japanese // J. Prevent. Med. - 2004. - Vol. 39(5). - P. 927-931.
19. Lustberg M. E., Schwartz B. S., Lee B. K. et al. The G(894)-T(894) polymorphism in the gene for endothelial nitric oxide synthase and blood pressure in lead-exposed workers from Korea // J. of Occup. Environ. Med. - 2004. - Vol. 46(6). - P. 584-590.
20. Benjafield A.V., Morris B. J. Association analyses of endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms in essential hypertension // Am. J. Hypertension. - 2000. - Vol. 13. - P. 994-998.
21. Djuric T., Zivkovic M., Stankovic A. et al. Endothelial NOS G894 T and MMP-3 5A/6A gene polymorphisms and hypertension in Serbian population //J. Clin. Lab. Anal. - 2005. - Vol. 19(6). -P. 241-246.
22. Karvonen J., Kauma H., Kervinen K. et al. Endothelial nitric oxide synthase gene Glu298Asp polymorphism and blood pressure, left ventricular mass and carotid artery atherosclerosis in a population-based cohort // J. Int. Med. - 2002. - Vol. 251(2).
- P. 102-110.
23. Tsujita Y., Baba S., Yamauchi R. et al. Association analyses between genetic polymorphisms of endothelial nitric oxide syn-thase gene and hypertension in Japanese: The Suita Study // Hypertension. - 2001. - Vol. 19(11). - P. 1941-1948.
24. Khawaja M. R., Taj F., Ahmad U. et al. Association of endothelial nitric oxide synthase gene G894T polymorphism with essential hypertension in an adult Pakistani Pathan population // Int. J. Cardiol. - 2007. - Vol. 116(1). - P. 113-115.
25. Chen W., Srinivasan S. R., Bond m. G. et al. Nitric oxide synthase gene polymorphism (G894T) influences arterial stiffness in adults: The Bogalusa Heart Study // Am. J. Hypertension. - 2004.
- Vol. 17(7). - P. 553-559.
26. Czarnecka D., Kawecka-Jaszcz K., Stolarz K. et al. Ambulatory blood pressure, left ventricular mass and vascular phenotypes in relation to the endothelial nitric oxide synthase gene Glu298Asp and intron 4 polymorphisms in a population-based
family study // J. Hum. Hypertension. - 2005. - Vol. 19(5). -P. 413-420.
27. Lembo G., De Luca N., Battagli C. et al. A common variant of endothelial nitric oxide synthase (Glu298Asp) is an independent risk factor for carotid atherosclerosis // Stroke. - 2001. -Vol. 32(3). - P. 735-40.
28. Leoncini G., Ratto E., Viazzi F. et al. Increased ambulatory arterial stiffness index is associated with target organ damage in primary hypertension // Hypertension. - 2006. - Vol. 48(3). -P. 397-403.
29. Paradossi U., Ciofini E., Clerico A. et al. //Endothelial function and carotid intima-media thickness in young healthy subjects among endothelial nitric oxide synthase Glu298—>Asp and T-786—>C polymorphisms // Stroke. - 2004. - Vol. 35(6). -P. 1305-1309.
30. Wolff B., Braun C., Schlbter C. et al. //Endothelial nitric oxide synthase Glu(298)—>Asp polymorphism, carotid atherosclerosis and intima-media thickness in a general population sample // Clinical Science. - 2005. - Vol. 109(5). - P. 475-481.
31. Lapu-Bula R., Quarshie A., Lyn D. et al. The 894T allele of en-dothelial nitric oxide synthase gene is related to left ventricular mass in African Americans with high-normal blood pressure // J. Nat. Med. Assoc. - 2005. - Vol. 97(2). - P. 197-205.
32. Минушкина Л.О., Затейщиков Д.А., Затейщикова А.А., и др. Полиморфизм гена эндотелиальной NO синтетазы и гипертрофия миокарда у больных артериальной гипертензией // Кардиология. - 2002. - №3. - С. 30-34.
33. Zhu H., Wang X., Dong Y. et al. Influence of the eNOS gene on development of blood pressure and left ventricular mass: longitudinal findings in multiethnic youth // Pharmacogen. Genom. - 2005. - Vol. 15(9). - P. 669-675.
34. Dell'Omo G., Penno G., Pucci L. et al. Lack of association between endothelial nitric oxide synthase gene polymorphisms, microalbuminuria and endothelial dysfunction in hypertensive men // Hypertension. - 2007. - Vol. 25(7). - P. 1389-95.
Поступила 26.02.2010
УДК 6l6.12:6l6.379-008.6-053.2/.6
РОЛЬ ЭНДОТЕЛИАЛЬНОЙ ДИСФУНКЦИИ В РАЗВИТИИ И ПРОГРЕССИРОВАНИИ СОСУДИСТЫХ ОСЛОЖНЕНИЙ САХАРНОГО ДИАБЕТА
1-ГО ТИПА У ДЕТЕЙ И ПОДРОСТКОВ
А.В. Энерт1, С.Н. Иванов2, Ю.Г. Самойлова1
1 ГОУ ВПО Сибирский государственный медицинский университет Росздрава, Томск 2 ФГУ НИИ патологии кровообращения им. акад. Е.Н. Мешалкина Росмедтехнологий, Новосибирск
E-mail: anastasiya_enert@mail.ru
ROLE OF ENDOTHELIAL DYSFUNCTION IN THE DEVELOPMENT AND PROGRESSING OF VASCULAR EVENTS OF 1 TYPE DIABETES MELLITUS
IN CHILDREN AND TEENAGERS
A.V. Enert1, S.N. Ivanov2, Yu.G. Samoilova1
1 Siberian State Medical University, Tomsk 2 Blood Circulation Pathology Research Institute n. a. E.N. Meshalkin, Novosibirsk
Проведено исследование уровня эндотелина 1-21 в сыворотке крови у пациентов с сахарным диабетом 1-го типа. Анализ полученных данных свидетельствует о диагностически значимом повышении уровня эндотелина 1-21 при длительности сахарного диабета 1-го типа более 5 лет. При повышенных значениях эндотелина 1-21 частота
