CC BY
21М.Д. Амельянович, П.М. Морозик, А.Л. Гончар, И.Б. Моссэ
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ РИСКА РАЗВИТИЯ МЕТАБОЛИЧЕСКОГО СИНДРОМА
ГНУ «Институт генетики и цитологии НАН Беларуси» Республика Беларусь, 220072, г. Минск, ул. Академическая, 27
Введение
Всемирная организация здравоохранения признала метаболический синдром (МС) новой пандемией XXI века. В развитых странах каждый четвертый гражданин страдает данным недугом, и, согласно расчетам экспертов, в ближайшие годы будет происходить увеличение темпов роста заболеваемости [1]. Необходимо также подчеркнуть, что большинство пациентов с МС - это люди активного трудоспособного возраста, т.е. наиболее продуктивная и значимая часть общества. Кроме того, за последние два десятилетия изучаемый синдром демонстрирует устойчивый рост среди молодежи. Однако до сих пор МС не относят к разряду истинных заболеваний, поэтому он не включен в перечень Международной классификации болезней 10-го пересмотра.
Метаболический синдром - результат взаимодействия внешних факторов, образа жизни (диета, физическая активность, стресс, забота о здоровье и т.д.) с индивидуальными генетическими особенностями.
Существует множество критериев определения метаболического синдрома [2-4], наиболее традиционным из которых является наличие минимум трех из следующих компонентов [5]:
• центральное ожирение (окружность талии > 102 см у мужчин, > 88 см у женщин);
• нарушение регуляции глюкозы (уровень глюкозы в плазме натощак > 110 мг/дл);
• артериальная гипертензия (> 130/85 мм рт. ст.);
• дислипидемия (уровень триглицеридов > 150 мг/дл, уровень липопротеидов высокой плотности < 40 мг/дл у мужчин, < 50 мг/дл у женщин).
Другими компонентами, которые часто ассоциированы с МС, являются повышенные уровни С-реактивного белка и ингибитора активатора плазминогена, а также пониженный уровень плазменного адипонектина.
Среди основных средовых факторов, способствующих развитию МС, выделяют избыточное питание, гиподинамию, курение, чрезмерное употребление алкоголя. В последнее время появились многочисленные научные работы, посвященные генетическим аспектам МС.
Наследственный характер МС подтвержден наблюдениями за монозиготными близнецами, у которых конкордантность по этому заболеванию достигает 90%. По разным данным, вклад наследственности в развитие МС составляет 51-60% [6].
По некоторым данным, первопричиной МС может быть проявление эффектов полиморфных вариантов обширной группы взаимодействующих генов, принимающих участие в реализации эффектов инсулина, глюкозы, факторов пролиферации пероксисом, ангиотен-зинпревращающего фермента и т.д. В основе генетической составляющей МС как комплексного генетического заболевания, лежат как моногенные формы инсулиновой резистентности, так и сочетанный характер полиморфизмов целого ряда генов [7], которые влияют на распределение жировой ткани в организме, пищевое поведение, активность ферментных систем, участвующих в регуляции метаболических процессов. Особое значение в системе гомеостаза организма и поддержании нормального углеводного обмена придается функциональному состоянию Р-клеток поджелудочной железы, которое, в свою очередь, также предопределяется генетическими факторами.
В случае моногенных форм синдрома единственная генная мутация вызывает обычно ранние фенотипические проявления (например, мутации в генах LEPR и MC4R отвечающих за контроль аппетита [8, 9]). Такие формы достаточно хорошо изучены и составляют
небольшую часть среди МС, они обусловлены полностью наследственностью и не корректируются профилактическими мерами.
Гораздо больший интерес в данном аспекте представляет МС, имеющий генетическую предрасположенность и развивающийся под влиянием средовых факторов. В этом случае гены проявляют себя лишь под действием предрасполагающих факторов, среди которых определяющее значение имеют особенности образа жизни, а именно гиподинамия и несбалансированное питание с избыточным поступлением калорий.
В связи с этим, все больше внимания исследователи уделяют изучению молекулярно-генетических факторов предрасположенности к МС и анализу ассоциации их полиморфизмов с различными компонентами синдрома. Для этого используют различные подходы, один из которых - анализ генов-кандидатов предрасположенности к МС.
Имеются сообщения об ассоциации МС с полиморфизмами генов, продукты которых вовлечены в метаболизм липопротеинов (гены АРОА1, АРОА5, СЕТР, LDLR) [10, 11], адре-нергическую передачу сигнала (гены ADRA1A, ADRB1, ADRB3) [12], синтез липидов и диф-ференцировку адипоцитов (гены SCD1, LPIN1
и PPARG) [13, 14], секрецию цитокинов (гены и ADIPOQ) [15], контроль аппетита (гены LEPR, MC4R и FTO) [11, 16], функцию бета-клеток (гены TCF7L2 и WFS1) [11, 17], определение чувствительности к глюкозе (гены GCK и GCKR) [18], передачу сигнала инсулина/ инсулино-подобного ростового фактора (гены INSR, SHIP2, IGF2BP2) [18, 19] и функционирование митохондрий (ген иСР2) [20].
Известно, что проявление эффектов полиморфных вариантов генов зависит от пола, возраста, этнической принадлежности их носителей [17]. В связи с этим, изучение генов предрасположенности к МС в каждой конкретной популяции является необходимым и актуальным. Это позволит оценить взаимодействие генетических и внешнесредовых факторов, метаболических и сосудистых нарушений, определяющих риск развития таких кардиова-скулярных осложнений, как инфаркт миокарда, инсульт и застойная сердечная недостаточность.
Выявление аллельных вариантов генов, обусловливающих повышенный генетический риск развития МС, позволит более эффективно проводить мероприятия по профилактике данного заболевания, а также правильно выбирать методы лечения, существенно улучшить прогноз и избежать возможных осложнений.
Материалы и методы
В исследовании были проанализированы образцы ДНК 126 человек с МС в возрасте от 20 до 84 лет (средний возраст 53,03 ± 14,98), 73 мужчины, 53 женщины, которые проходили обследование в Минском городском эндокринологическом центре. Контрольная группа состояла из случайной выборки жителей города Минска и включала 362 человека.
Выделение ДНК из клеток буккального эпителия и лейкоцитов периферической крови проводили с помощью классической фенол-хлороформной экстракции [22]. Данный метод обладает хорошей воспроизводимостью, способен обеспечить высокую степень чистоты ДНК, полученные этим методом образцы стабильны и могут храниться длительное время.
Исследования проводили с использованием амплификатора Applied Biosystems™ Thermal Cycler 2720 (BIO-RAD, США), а также системы детекции продуктов ПЦР в реальном времени CFX96 (BIO-RAD, США).
Для определения генотипа по полиморфизму гена ACE использовали двухпраймерную систему. Для генотипирования образцов по генам PPARG, TCF7L2 применяли методику на основе Tetra-primer ARMS PCR с использованием отдельных стандартных компонентов реакционной смеси и аллель-специфичных праймеров. Разделение продуктов амплификации проводили с помощью электрофореза в 8%-ном полиакриламидном геле. Визуализировали в проходящем УФ-свете после окраски в растворе бромистого этидия.
Идентификацию полиморфизма гена UCP2 проводили с помощью Real-time PCR, с использованием специально синтезированных меченных праймеров. Для выявления мутации G20210A и мутации FVL генов 2-го и 5-го факторов свертываемости крови применяли методику на основе Multiplex Real-time PCR, которая позволяет определить генотип образца одновременно по двум мутациям. В результате амплификации флуоресценция меченных аллель-специфичных
зондов возрастает пропорционально росту количества копий участка исследуемого гена. Каждый краситель флуоресцирует в определенном спектре, что позволяет сделать заключение о генотипе исследуемого образца.
Статистическую обработку полученных данных проводили с помощью стандартного критерия х2, для редких генотипов расчет проводился с учетом поправки Иегса. Для оценки влияния полиморфизмов на риск развития заболевания при-
В табл. 1 приведены нуклеотидные последовательности использованных специфических праймеров. Температурно-временные условия проведения ПЦР подбирали экспериментально.
Таблица1
меняли коэффициент соотношения шансов (OR). Распределение соответствующих генотипов в исследуемых группах для всех проанализированных полиморфизмов проверяли на соответствие ожидаемому распределению Харди-Вайнберга.
Последовательность ПЦР-праймеров, использованных для определения полиморфизмов генов предрасположенности к МС
Ген Полиморфизм Праймеры
ACE I/D F: 5-CTGGAGACCACTCCCATCCTTTCT-3' R: 5-GATGTGGCCATCACATTGGTCAGAT-3'
PPARG Pro12Ala F: 5' -AATTACAGCAAACCCCTATTCCATGC-3' R: 5'-ATTTTACCCTTACATAAATGCCCCCA-3' C: 5-GAAACTCTGGGAGATTCTCCTATTGTCC-3' G: 5-GTATCAGTGAAGGAATCGCTTTCAGC-3'
TCF7L2 C/T 1: 5'-AATTTTTTCACATGTGAAGACATAC-3' 2: 5'-AAGAGATGAAATGTAGCAGTGAAG-3' C: 5'-TAGAGAGCTAAGCACTTTTTAGAGAC-3' T: 5'-CTCATACGGCAATTAAATTATAGAA-3'
UCP2 Ala55Val F: 5,-TTGCAGATCCAAGGAGAAAGTCA-3' R: 5-CCCTCAGTACGCACCATGGT-3' 1: 5-FAM-CGCTACAGCCAGCGCCAGTACC-BHQ1-3' 2: 5-ROX-CGCTACAGTCAGCGCCAGTACCG-BHQ2-3'
FII G20210A PTII(G) 5 -Cy5-TGACTCTCAGCGAGCCTCAATGCT-BHQ2-3' PTII(A) 5 -TET-TGACTCTCAGCAAGCCTCAATGCT-BHQ1-3' PTII(1) 5'-CTGGAACCAATCCCGTGAAAGA-3' PTII(2) 5'-CCAGAGAGCTGCCCATGAATAG-3'
FV 1691 G>A FVL(A) 5'-FAM-ATCCCTGGACAGGCAAGGAATACA-BHQ1-3' FVL(G) 5-ROX-ATCCCTGGACAGGCGAGGAATACA-BHQ2-3' FVL(1) 5'-AGGACTACTTCTAATCTGTAAGAGCA-3' FVL(2) 5'-CCCATTATTTAGCCAGGAGACC-3'
Результаты и обсуждение
Для проведения молекулярно-генетического риального давления и водно-солевого об-анализа нами были выбраны гены, оказываю- мена. Полиморфизм Alu Ins/Del гена ACE щие влияние на различные компоненты мета- имеет два варианта, отличающихся наличи-
болического синдрома. ем (insertion, I) или отсутствием (deletion, D) Ген ACE кодирует аминокислотную после- Alu-последовательности в интроне гена ACE довательность ангиотензин-превращающего [23]. С данным полиморфизмом связана раз-фермента (АПФ), который является важ- личная степень экспрессии гена АСЕ. Вариант ным физиологическим регулятором арте- D характеризуется более активной выработ-
кой АПФ, что является фактором риска артериальной гипертензии и других сердечнососудистых заболеваний.
Ген TCF7L2 кодирует транскрипционный фактор, который является составной частью сигнального пути Wnt. Данный сигнальный путь задействован в регуляции механизмов роста, развития и функционирования различных клеток, в том числе и в- клеток поджелудочной железы [24]. Связь полиморфизма С/Т гена TCF7L2 с развитием сахарного диабета 2 типа (СД 2) была подтверждена во многих ассоциативных исследованиях в популяциях разной этнической природы [25]. Было показано, что носительство генотипов с минорным аллелем увеличивает риск развития СД 2 типа в среднем в 1,5 раза [26]. Однако популяцион-ные частоты в различных странах имели значительные различия.
Ген PPARG2 кодирует гамма рецепторы, активируемые пролифераторами пероксисом. Естественными лигандами этих рецепторов являются свободные жирные кислоты и эйко-заноиды. После активации рецептор перемещается в клеточное ядро и активирует транскрипцию большого числа генов. Ген PPARG2 экспрессируется в жировой ткани и регулирует дифференцировку адипоцитов и генную экспрессию в адипоцитах. Кроме того, ген экс-прессируется и в в-клетках поджелудочной железы [27]. Поэтому, возможно, влияет на секрецию инсулина поджелудочной железой.
Полиморфизм Рго12А1а гена PPARG2 связан с риском ожирения, инсулинорезистентности и развития СД 2 типа.
Ген разобщающего белка 2 (иСР2) принадлежит к семейству митохондриальных транспортных белков, разобщающих окислительное фос-форилирование. иСР2 выступает в роли канала, по которому жирные кислоты могут покидать митохондриальный матрикс, регулируя процесс их окисления [28]. Показано, что иСР2 благодаря своей активности, играет важную роль в патофизиологии СД2. В частности, гипергликемия вызывает патологическую активацию иСР2 в панкреатических островках, которая, в свою очередь, приводит к снижению стимулированной глюкозой секреции инсулина [29].
Мутация 5-го фактора свертываемости крови (FVL, лейденская мутация) и мутация 2-го фактора ^20210А, мутация гена протромбина) являются известными факторами риска возникновения тромбозов и тромбоэмболий. Некоторые данные указывают на тесную связь нарушения процесса коагуляции крови с развитием метаболического синдрома.
Результаты генотипирования основной и контрольной группы по анализируемым генам предрасположенности к метаболическому синдрому представлены в табл. 2.
Распределение соответствующих генотипов в исследуемых группах для всех проанализированных полиморфизмов соответствовало ожидаемому распределению Харди-Вайнберга.
Таблица 2
Распределение частот генотипов и аллелей изученных полиморфизмов в группе лиц с МС и в контрольной группе
Ген, полиморфизм Генотипы, аллели Частота, %
МС, n = 126 Контроль, n = 362 X2 P OR (95% CI)
I/I 14,3 23,8 0,53 (0,31-0,93)
АСЕ 1Ю I/D 54,0 50,3 4,49 0,03* 1,16 (0,77-1,74)
D/D 31,7 25,9 1,33 (0,85-2,06)
I 41,3 48,9 4,36 0,04* 0,73 (0,55-0,98)
D 58,7 51,1 1,36 (1,02-1,82)
TCF7L2 T/T 7,2 6,4 1,13 (0,51-2,52)
T/C 44,4 27,9 8,10 <0,01* 2,07 (1,36-3,15)
С/Т C/C 48,4 65,7 0,49 (0,32-0,74)
T 29,4 20,3 8,76 <0,01* 1,63 (1,18-2,26)
C 70,6 79,7 0,61 (0,44-0,85)
Продолжение табл. 2
Ген, полиморфизм Генотипы, аллели Частота, % X2 P OR (95% CI)
МС, n = 126 Контроль, n = 362
PPARG Pro/Ala Ala/Ala 1,6 3,0 1,30 0,52 0,51 (0,11-2,35)
Pro/Ala 19,8 22,7 0,85 (0,51-1,40)
Pro/Pro 78,6 74,3 1,27 (0,78-2,06)
Ala 11,5 14,4 1,30 0,26 0,78 (0,50-1,20)
Pro 88,5 85,6 1,29 (0,83-2,00)
UCP2 Ala/Val Ala/Ala 37,3 26,0 6,48 0,04* 1,70 (1,10-2,61)
Ala/Val 42,9 54,1 0,64 (0,42-0,96)
Val/Val 19,8 19,9 1,00 (0,60-1,66)
Ala 58,7 53,0 2,44 0,12 1,26 (0,94-1,68)
Val 41,3 47,0 0,79 (0,59-1,06)
G20210A G/G 96,8 97,8 0,36 0,83 0,69 (0,20-2,33)
G/A 3,2 2,2 1,45 (0,43-4,90)
A/A 0,0 0,0 -
G 98,4 98,9 0,36 0,55 0,69 (0,21-2,32)
A 1,6 1,1 1,44 (0,43-4,84)
FVL G/G 97,6 96,1 0,61 0,74 1,65 (0,47-5,84)
G/A 2,3 3,9 0,61 (0,17-2,15)
A/A 0,0 0,0 -
G 98,8 98,1 0,60 0,44 1,64 (0,47-5,74)
A 1,2 1,9 0,61 (0,17-2,14)
* - различия статистически достоверны.
По результатам генотипирования выявлено статистически достоверное различие в распределении частот генотипов и аллелей полиморфизма I/D гена АСЕ среди пациентов с МС и контрольной группой (х2 = 4,49 и х2 = 4,36, соответственно, P < 0,05). При этом наличие генотипа D/D способствует увеличению риска заболевания в 1,33 раза, а частота аллеля риска D достоверно выше среди пациентов с МС по сравнению с контролем (OR = 1,36 95% CI 1,02-1,82).
Взаимосвязь полиморфизма I/D гена ACE с уровнем артериального давления хорошо изучена и считается доказанной. Показано, что уровень циркулирующего в крови ангиотензин-превращающего фермента у носителей D/D генотипа был в 2 раза выше, чем у I/I индивидуумов, у I/D индивидуумов был промежуточный уровень [21]. В то же время объяснить взаимосвязь данного полиморфизма с развитием МС только его влиянием на уровень артериального давления не представляется возможным. Вероятно, полиморфизм I/D гена ACE оказывает
влияние и на другие компоненты МС. Некоторые исследователи предполагают, что ренин-ангиотензиновая система может влиять на секрецию адипокинов и инсулина [30].
Наиболее выраженные различия между частотами генотипов и аллелей в исследованных выборках наблюдалось для полиморфизма С гена TCF7L2 (с2 = 8,10 и с2 = 8,76, соответственно, P < 0,01). В связи с низкой частотой гомозигот T/T в популяции, генотипом риска для этого полиморфизма является гетерозигота T/C: среди пациентов с МС частота этого генотипа значительно выше, чем в контрольной группе (44,4% и 27,9% соответственно). В то же время генотип C/C является протекторным ДО = 0,49 95% С1 0,32-0,74). Полученные данные свидетельствуют о значительном вкладе полиморфизма C/Tгена TCF7L2 в патогенез развития МС.
Проведенный Yu Tong1 et а1. мета-анализ подтвердил достоверную связь данного полиморфизма, как с артериальной гипертензией, так и с сахарным диабетом [31], поэтому выяв-
ление полиморфизма C/T гена TCF7L2 может служить важным прогностическим фактором при определении риска развития МС.
Статистически достоверных различий в распределении частот генотипов и аллелей полиморфизма Pro12Ala гена PPARG2 в исследованных группах нами не выявлено, частота аллеля Ala в контрольной группе была не намного выше, чем в группе с МС. По литературным данным [32], частота гетерозигот в популяциях европейского типа достигает 20%, гомозиготных носителей генотипа Ala/ Ala - около 2%, что вполне соотносится с данными, полученными в нашем исследовании.
Проведенный Gouda H.N. et al. мета-анализ, включающий исследование более чем 30 000 человек, показал протективный эффект наличия 12Ala аллеля в генотипе. Этот эффект включал не только предупреждение развития СД2, но и большую чувствительность к инсулину, то есть предупреждение развития инсу-линорезистентности, что особенно проявлялось у лиц с ожирением [32].
При анализе результатов генотипирования по полиморфизму Ala/Val гена UCP2 нами наблюдалось статистически достоверное увеличение частоты гомозигот Ala/Ala (OR = 1,70 95% CI 1,10-2,61) среди пациентов с МС по сравнению с контролем (с2 = 6,48, P < 0,05). При анализе распределения аллелей по этому полиморфизму не было выявлено статистически достоверной зависимости. В то же время
генотип Ala/Val, по-видимому, является протекторным (OR = 0,64 95% CI 0,42-0,96).
Исследования физиологической роли белка UCP2 [24] показали, что он принимает участие в процессе окисления жирных кислот, регуляции работы Р-клеток поджелудочной железы, а также влияет на пищевое поведение индивидуума. Таким образом, исследование взаимосвязи полиморфизмов и мутаций генов, ассоциированных с данным белком, с развитием МС является весьма перспективным.
Как показали полученные нами результаты, не наблюдается статистически достоверного отличия в распределении частот генотипов и аллелей среди пациентов с МС и контролем по обоим полиморфизмам генов системы свертываемости крови (G20210A и FVL). Определенная нами частота встречаемости мутации G20210A в контрольной группе (2,2%) соответствует среднеевропейской частоте, описанной в литературе [33]. Исследование полиморфизмов и мутаций генов, оказывающих влияние на реологические свойства крови, у лиц с МС необходимо проводить с целью прогнозирования и предотвращения возможных осложнений в виде тромбозов и тромбоэмбо-лий. Именно изменения в системе гемостаза и фибринолиза при метаболическом синдроме, по мнению некоторых исследователей, являются независимыми и одними из решающих факторов риска возникновения сердечнососудистых заболеваний [34, 35].
Заключение
По результатам проведенного исследования, наибольшим вкладом в генетическую предрасположенность к метаболическому синдрому из проанализированных генов обладают TCF7L2, ACE и UCP2. Генетическое тестирование по этим генам можно проводить с целью формирования среди населения групп повышенного риска развития данного заболевания. В то же время, представляет интерес более подробное изучение тех генов, которые в данном исследовании не показали ассоциации с риском развития МС.
Скрининг проанализированных генетических маркеров позволяет проводить раннюю идентификацию групп риска развития метаболического синдрома для проведения своевременных превентивных мероприятий, а также более эффективную терапию, избежать осложнений, снизить инвалидизацию и смертность среди этих пациентов, а также снизить затраты на лечение. Особое значение имеет применимость данного метода для проведения тестирования среди всех возрастных групп до момента появления клинических признаков заболевания.
Список использованных источников
1. Zimmet, P. Preventing type 2 diabetes and the medicine. - 2003. - Vol. 20, № 9. - P. 693-702.
dysmetabolic syndrome in the real world: a realistic view / P. Zimmet, J. Shaw, G. Alberti // Diabetic.
2. World Health Report. Making a Difference. -Geneva: World Health Organization, 1999. - 136 p.
3. Balkau, B. Comment on the provisional report from the WHO consultation. European Group for the Study of Insulin Resistance (EGIR) / B. Balkau, M.A. Charles // Diabetic Medicine. - 1999. - Vol. 16, № 5. - P. 442-443.
4. The metabolic syndrome - a new worldwide definition / K.G. Alberti [et al.] // Lancet. -2005. - Vol. 366, № 9491. - P. 1059-1062.
5. Diagnosis and management of the metabolic syndrome: an American Heart Association/ National Heart, Lung, and Blood Institute Scientific Statement / S.M. Grundy [et al.] // Circulation. - 2005. - Vol. 112, № 17. - P. 2735-2752.
6. Heritabilities of the metabolic syndrome phenotypes and related factors in Korean twins / J. Sung [et al.] // Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. - 2005. - Vol. 94, № 12. -P. 4946-4952.
7. McCarthy, J.J. Evidence for substantial effect modification by gender in a large-scale genetic association study of the metabolic syndrome among coronary heart disease patients / J.J. McCarthy , J. Meyer, D.J. Moliterno // Hum Genet. - 2003. - Vol. 114. - P. 87-98.
8. A mutation in the human leptin receptor gene causes obesity and pituitary dysfunction / K. Clement [et al.] // Nature. - 1998. - Vol. 392, № 6674. - P. 398-401.
9. A frameshift mutation in human MC4R is associated with a dominant form of obesity / C. Vaisse [et al.] // Nature Genetics. - 1998. -Vol. 20, № 2. - P. 113-114.
10. Dominant negative mutations in human PPAR gamma associated with severe insulin resistance, diabetes mellitus and hypertension / I. Barroso [et al.] // Nature. - 1999. - Vol. 402, № 6764. - P. 880-883.
11. Genetic risk for metabolic syndrome: examination of candidate gene polymorphisms related to lipid metabolism in Japanese people / Y. Yamada [et al.] // Journal of Medical Genetics. - 2008. - Vol. 45, № 1. - P. 22-28.
12. Genetic variants and the metabolic syndrome: a systematic review / C.M. Povel [et al.] // Obesity Reviews. - 2011. - Vol. 12, № 11. -P. 952-967.
13. Association between ADRA1A gene and the metabolic syndrome: candidate genes and functional counterpart in the PAMELA population / G. Grassi [et al.] // Journal of Hypertension. - 2011. - Vol. 29, № 6. - P. 1121-1127.
14. Genetic variation in stearoyl-CoA desaturase 1 is associated with metabolic syndrome prevalence in Costa Rican adults / J. Gong [et al.] // Journal of Nutrition. - 2011. - Vol. 141, № 12. - P. 2211-2218.
15. Genetic variants within the LPIN1 gene, encoding lipin, are influencing phenotypes of the metabolic syndrome in humans / S. Wiedmann [et al.] // Diabetes. - 2008. - Vol. 57, № 1. - P. 209-217.
16. Adiponectin SNP276 is associated with obesity, the metabolic syndrome, and diabetes in the elderly / W.S. Yang [et al.] // American Journal of Clinical Nutrition. - 2007. - Vol. 86, № 2. - P. 509-513.
17. Leptin receptor polymorphisms interact with polyunsaturated fatty acids to augment risk of insulin resistance and metabolic syndrome in adults / C.M. Phillips [et al.] // Journal of Nutrition. - 2010. - Vol. 140, № 2. - P. 238-244.
18. The search for putative unifying genetic factors for components of the metabolic syndrome / M. Sjogren [et al.] // Diabetologia. -2008. - Vol. 51, № 12. - P. 2242-2251.
19. Association between insulin receptor gene polymorphism and the metabolic syndrome in Han and Yi Chinese / C. Wang [et al.] // Asia Pacific Journal of Clinical Nutrition. - 2012. -Vol. 21, № 3. - P. 457-463.
20. Association of rs780094 in GCKR with metabolic traits and incident diabetes and cardiovascular disease: The ARIC Study / M. Bi [et al.] // PLoS One. - 2010. - Vol. 5, № 7. - P. e11690.
21. The ACE insertion/deletion polymorphism and its association with metabolic syndrome / B. Xi [et al.] // Metabolism. - 2012. - Vol. 61, № 6. - P. 891-897.
22. Маниатис, Т. Методы генетической инженерии. Молекулярное клонирование / Т. Маниатис, Э. Фрич, Дж. Сэмбрук. - М.: Мир, 1984. - 399 с.
23. Weir, M.R. The renin-angiotensin-aldoste-rone system: a specific target for hypertension management / M.R. Weir, V.J. Dzau // Am. J. Hypertens. - 1999. - Vol. 12, № 3. - P. 205-213.
24. Jin, T. The WNT signalling pathway and diabetes mellitus / T. Jin // Diabetologia. -2008. - Vol. 51, № 10. - P. 1771-1780.
25. Allele-specific PCR assay to genotype SNP rs7903146 in TCF7L2 gene for rapid screening of diabetes susceptibility / L.A. Dutra [et al.] // Arq. Bras. Endocrinol. Metabol. - 2008. -Vol. 52, № 8. - P. 1362-1366.
26. Campbell, A.I. The effect of some latent virus infections of the growth and cropping apples / A.I. Campbell // Journal of Horticultural Sciences. - 1963. - Vol. 38. - P. 15-19.
27. The PPARgamma Pro12Ala variant is associated with insulin sensitivity in Russian normoglycaemic and type 2 diabetic subjects / D A. Chistiakov [et al.] // Diab. Vasc. Dis. Res. -2010. - Vol. 7, № 1. - P. 56-62.
28. Structural organization and mutational analysis of the human uncoupling protein-2 (hUCP2) gene / N. Tu [et al.] // Life Sci. -1999. - Vol. 64. - P. 41-50
29. The common 866G/A polymorphism in the promoter region of the UCP-2 gene is associated with reduced risk of type 2 diabetes in Caucasians from Italy / A. Bulotta [et al.] // J. Clin. End. Metab. - 2005. - Vol. 90. - P. 1176-1180.
30. Engeli, S. Role of the renin-angiotensin-aldosterone systemin the metabolic syndrome / S. Engeli // Contrib. Nephrol. - 2006. -Vol. 151. - P. 122-134.
31. Association between TCF7L2 gene polymorphisms and susceptibility to Type 2 Diabetes
Mellitus: a large Human Genome Epidemiology (HuGE) review and meta-analysis / Y. Tong [et al.] // BMC Medical Genetics. - 2009. -Vol. 10. - P. 15.
32. The association between the peroxisome proliferator-activated receptor-gamma2 (PPARG2) Pro12Ala gene variant and type 2 diabetes mellitus: a HuGE review and meta-anal-ysis / H.N. Gouda [et al.] // Am J Epidemiol. -2010. - Vol. 171, № 6. - P. 645-655.
33. Geographic distribution of the 20210G to A prothrombin variant / F.R. Rosendaal [et al.] // Thrombosis and Haemostasis. - 1998. -Vol. 79. - P. 706-708.
34. Метаболический синдром и тромбофи-лии в акушерстве и гинекологии / А.Д. Ма-кацария [и др.] // Москва: МИА, 2006. -477 с.
35. Перова, Н.В. Патогенетические основы метаболического синдрома как состояния высокого риска атеросклеротических заболе-ваний/Н.В. Перова,А.В. Метельская,Р.Г. Ога-нов // Междунар. мед. журн. - 2001. - Т. 7, № 3. - С. 6-10.
Дата поступления статьи 11 июня 2013 г.
