CC BY
177
Козловская М. А., Мартынкевич И. С., Петрова Е. В., Мартыненко Л. С., Цыбакова Н. Ю., Иванова М. П., Шуваев В. А., Шабанова Е. С., Абдулкадыров К. М.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург.
ГЕНЕТИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА Р^ОТРИЦАТЕЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИХ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ (ХМПЗ)
Молекулярные события, лежащие в основе патогенеза ХМПЗ, связаны с дефектами генов, кодирующих белки, которые обеспечивают нормальное поддержание миелопоэза. По литературным данным частота встречаемости диагностически значимых при ХМПЗ мутаций (V617F гена JAK2, в 12 экзоне гена JAK2, гена MPL) варьирует при различных нозологиях. Вместе с этим ряд исследователей пытаются объяснить клональный гемопоэз при Ph-отрицательных ХМПЗ, основываясь на результатах цитогенетических исследований клеток костного мозга.
Целью нашего исследования было определение частоты встречаемости мутаций генов JAK2 и MPL и выявление прогностических особенностей течения заболевания в зависимости от
характера цитогенетических аберраций у пациентов с Ph-отрицательными ХМПЗ. В исследование были включены 619 пациентов — с истинной полицитемией (ИП) 249 больных, с эссенциаль-ной тромбоцитемией (ЭТ) — 120, с хроническим идиопатическим миелофиброзом (ХИМФ) — 110 и 140 пациентов обследовались с целью дифференциальной диагностики с Ph(-) ХМПЗ. Возраст больных варьировал от 18 до 80 лет, медиана при этом составила 52 года. Пик заболеваемости приходится на возраст от 50 до 60 лет, в этой возрастной категории было 88 пациентов. Для детекции V617F мутации гена JAK2 использовался метод аллель-специфической ПЦР, мутации 12 экзона гена JAK2 определялись методом сиквенирования, мутации в гене MPL определя-
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ,, том IX, № 2, 2013
лись методом Real-time PCR в двух повторностях. В результате проведенных исследований было выявлено, что частота встречаемости мутации V617F в гене JAK2 варьировала у пациентов в зависимости от варианта заболевания. Так при ИП мутация V617F в гене JAK2 определялась у 245 из 249 (98,3 %) исследуемых больных, при ЭТ — у 65 из 120 (54,2 %) пациентов, при ХИМФ — у 54 из 110 (49,1 %) проанализированных больных. У 140 больных не гематологического профиля, обследованных с целью дифференциальной диагностики с Ph(-) ХМПЗ, V617F в гене JAK2 обнаружена у 12 (8,6 %), что позволило достоверно подтвердить Ph(-) ХМПЗ. Мутация в 12 экзоне гена JAK2 выявлялась у 2 из 69 (2,9 %) исследуемых V617FJAK2-отрицательных больных исключительно с диагнозом ИП. В то время как мутация W515L гена MPL обнаруживалась при ЭТ и ХИМФ в 2,2 % (у 1 из 46) и 2 % (1 из 51) больных, соответственно. Цитогенетические исследования клеток костного мозга у 129 больных ХМПЗ позволили стратифицировать больных по прогностическим группам. Так нормальный ка-риотип обнаружен у 110 (85,3 %) из 129 исследу-
емых. Среди 19 (14,7 %) пациентов с патологическим кариотипом, у 5 (3,9 %) из 129 выявлены изолированные хромосомные аберрации (del(20q), del(13q)), обуславливающие благоприятное течение заболевания, у 8 (6,2 %) пациентов — аномалии кариотипа промежуточного риска, и у 6 (4,7 %) из 129 — комплексные нарушения кариотипа, относящиеся к неблагоприятным вариантам кариотипа. Причем хромосомные аберрации благоприятного прогноза достоверно чаще (р = ,0000) встречались у больных с ИП в сравнении ХИМФ, а частота встречаемости множественных комплексных нарушений кариотипа была достоверно выше у больных с ХИМФ, чем у больных с ИП и ЭТ (р = 0,0000). Причем 2 из 6 больных с комплексным кариотипом констатирована трансформация заболевания в ОМЛ.
Таким образом, установлено, что мутации в генах JAK2 и MPL являются высокоспецифичными диагностическими маркерами пациентов с Р^отрицательными ХМПЗ, а включение цитогенетических исследований в алгоритм обследования больных в дебюте заболевания позволяет стратифицировать пациентов на группы риска.
Колюбаева С. Н., Иванов А. М., Сухина И. А., Никитин В. Ю., Исакова Т. В.,
Дмитриева О. В., Поляков А. С., Бондарчук С. В.
Федеральное государственное казенное военно-образовательное учреждение высшего профессионального образования «Военно-медицинская академия имени С. М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации, Санкт-Петербург.
ВОЗМОЖНАЯ КОРРЕЛЯЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМОВ ГЕНОВ, АССОЦИИРОВАННЫХ С МЕТАБОЛИЗМОМ ВАРФАРИНА И ФОЛАТОВ У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЦИТАРНЫМ ЛЕЙКОЗОМ
В последние годы получены данные в пользу того, что одним из важных факторов развития и прогрессирования злокачественных опухолей, в том числе и хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), является функционально значимый полиморфизм генов, кодирующих ферменты системы биотрансформации ксенобиотиков. К ним относится около 90 % всех лекарственных препаратов. 1-ая фаза биотрансформации (окислительная) обеспечивается, в основном, семейством генов цитохрома Р450. Основной функцией 2-й фазы биотрансформации ксенобиотиков является детоксикация за счет действия гидролаз и трансфераз. И, наконец, 3-я фаза биотрансформации связана с выведением из организма лекарственных форм. Кроме генов, отвечающих за экспрессию энзимов с широкой субстратной специфичностью, в организме имеются гены, обеспечивающие функции
энзимов с узкой направленностью действия. К ним относится ген MTHFR, который кодирует энзим метилентетрагидрофолат редуктазу, участвующий в метаболизме фолатов и препаратов, близких по структуре к фолиевой кислоте. В настоящей работе были исследованы цитогенетические повреждения методом флуоресцентной in situ гибридизации. Для этого метода применяли ДНК-зонды фирмы ABBOT, направленные на детекцию характерных для ХЛЛ повреждений: делеция генов ATM и P53, делеция в q плече хромосомы 13, трисомия по хромосоме 12. Исследование полиморфизма генов производили только в группе больных ХЛЛ с цитогенетическими повреждениями, предсказывающих хороший прогноз течения заболевания: del (13) (q14.3), del (13)(q34), del (13)(q14.3-34).
Таким образом, у одних и тех же больных исследовали полиморфизмы генов, ассоцииро-
