CC BY
72
Мартынкевич И. С., Мартыненко Л. С., Цыбакова Н. Ю., Иванова М. П.,
Волошин С. В., Абдулкадыров К. М.
Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург.
РОЛЬ ЦИТОГЕНЕТИЧЕСКИХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В ДИАГНОСТИКЕ И ТЕРАПИИ ХРОНИЧЕСКОГО ЛИМФОЛЕЙКОЗА
Клинические проявления и прогноз при хроническом лимфолейкозе (ХЛЛ) гетероген-ны. Некоторые пациенты живут 20 и более лет, однако у 50 % больных наблюдается быстрая прогрессия с последующим неблагоприятным исходом. Становится очевидным, что у этих пациентов терапию необходимо начинать, не дожидаясь прогрессии. И это обусловлено открытием новых прогностических маркеров, отражающих биологию опухолевых клеток. К одним из наиболее важных из них, обуславливающих неблагоприятное течение заболевания, относятся комплексный кариотип, делеция р53-гена (17р) и повреждения АТМ-гена.
Целью нашего исследования была сравнительная характеристика частоты встречаемости цитогенетических аберраций у больных ХЛЛ в дебюте заболевания и на различных стадиях прогрессии заболевания.
Материалы и методы. В исследование включены 87 больных с хроническим лимфолейкозом (ХЛЛ), составивших две исследуемых группы: 60 пациентов с впервые диагностированным
ХЛЛ (группа 1) и 27 больных, обследованных на различных стадиях прогрессии заболевания (группа 2). По гендерному соотношению группы достоверно (р = 0,0034) отличались друг от друга, 31 мужчина (51,7 %) и 29 женщин (48,3 %) в группе 1, тогда как в группе 2-16 мужчин (59 %) и 11 женщин (41 %). По возрасту, пациенты не отличались в группах, медиана составила 62 года и 59,3 года, соответственно. В то время как по уровню лейкоцитов были получены достоверные (р = 0,0412) отличия между группами — 52,4 х 109/л в 1 группе и 97,6 х109/л во 2 группе. У всех больных проводилось стандартное цитогенетическое исследование (СЦИ) клеток периферической крови, стимулированной В-митогенами (LPS,TPA), и FISH исследование с использованием зондов LSI ATM(11q22), LSI ТР53(17р13.1), CEP12 и LSI 13q14 (Abbott).
Результаты. При цитогенетическом исследовании пациентов двух исследуемых групп нормальный кариотип определялся у 13 из 60 (21,7 %) в группе 1 и у 13 (48,1 %) из 27 пациентов группы 2. Как правило, выявленные хро-
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ,, том IX, № 2, 2013
мосомные аберрации были высокоспецифичными для лимфопролиферативных заболеваний в обоих группах и обнаружены у 47 (78,3 %) из 60 и у 14 (51,9 %) из 27 больных, соответственно. Чаще обнаруживались + 12 хромосома — у 18 (30 %) из 60 и у 4 (14,8 %) из 27 больных; del(11q) в точке локализации прогностически значимого АТМ-гена — у 14 (23,3 %) из 60 и у 8 (29.6 %) из 27 пациентов; аномалии 13 хромосомы — у 9 (15 %) из 60 и у 5 (18,5 %) из 27 исследуемых; де-леция р53 гена — у 4 (6,7 %) из 60 и у 3 (11,1 %) из 27 больных, соответственно. При этом комплексные нарушения кариотипа обнаруживались у 12 (20 %) из 60 пациентов в группе 1 и у 8 (29,6 %) из 27 больных группы 2.
Сравнительный анализ цитогенетических результатов в двух изучаемых группах пациентов, полученных при проведении стандартного и молекулярно-цитогенетического FISH метода, не показали достоверных отличий в частоте вы-
явления нормального кариотипа (р = 0,0698) и трисомии +12 хромосомы (р = 0,2330). Однако аберрации, обуславливающие неблагоприятное течение заболевания (комплексный кариотип (р = 0,0250); делеция ATM-гена (р = 0,0509); де-леция р53-гена (р = 0,0001)), достоверно чаще встречались в группе резистентных пациентов в сравнении с впервые диагностированным ХЛЛ. Использование FISH анализа параллельно со стандартным кариотипированием позволило нам повысить выявляемость патологического карио-типа у больных ХЛЛ на 36 %.
Таким образом, цитогенетические исследования, выполненные у больных ХЛЛ, позволяют выделить группу пациентов высокого риска с де-лецией р53 — и АТМ-генов и комплексным ка-риотипом. В динамике заболевания проведение цитогенетических исследований необходимо для выявления клональной эволюции, свидетельствующей о прогрессии заболевания
Мисюрин А. В.1,2,3, Кесаева Л. А.12, Мисюрина Е. Н.12, Крутов А. А.12, Солдатова И. Н.12, Кайсина К. С.1
1 ООО «ГеноТехнология», Москва.
2 ФГБУ «ФНКЦ ДГОИ им. Дмитрия Рогачева МЗ РФ», Москва.
3 НИИ ЭД и ТО ФГБУ «РОНЦ им. Н. Н. Блохина» РАМН.
ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА БСЯ-АБЬ ПРИ ХРОНИЧЕСКИХ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЯХ
В 2010 году мы обнаружили высокую частоту встречаемости экспрессии гена BCR-ABL (30 %) в группе больных с длительно протекающими (более 5 лет) Jak2 V617F-положительными хроническими миелопролиферативными заболеваниями (хМПЗ) с признаками прогрессии и резистентности к терапии гидроксимочевиной и ИНФ-а (EHA 2010, #1504). Это свидетельствовало о том, что длительное течение Jak2 V617F-положительных хМПЗ предрасполагает к появлению дополнительного опухолевого клона с экспрессией химерного онкогена BCR-ABL, из-за чего заболевание прогрессирует и развивается резистентность к проводимой терапии. Недавно было опубликовано несколько случаев миелопролифертивных заболеваний, при которых наблюдалось сочетание мутации Jak2 V617F и экспрессии гена BCR-ABL. При этом некоторые авторы устанавливали своим больным диагноз BCR-ABL-положительного ХМЛ с дополнительной мутацией Jak2 V617F, другие — Jak2 V617F-положительного хМПЗ с дополнительной экспрессией гена BCR-ABL (Kramer A. (2007);
Conchon M. R. M. (2008); JalladesL. (2008); Laib S. (2009); Toogeh G. (2010); Bee P C. (2010)). Отсутствие единого подхода к трактовке подобных случаев и различия мнений при установке диагноза может приводить к выбору неверной терапевтической тактики, поэтому феномен сочетания этих молекулярных маркеров у одного больного требует дальнейшего изучения. В настоящей работе нами был проведен анализ частоты встречаемости экспрессии гена BCR-ABL у первичных больных Jak2 V617F-положительной эритремией. Сочетание этих маркеров было обнаружено только у 2 из 55 больных (3,66 %).
Таким образом, было обнаружено существенное различие (р = 0,003) частот встречаемости сочетания экспрессии BCR-ABL и мутации Jak2 V617F у первичных больных эритремией в сравнении с длительно протекающими хМПЗ с признаками прогрессии и резистентности. Мы предположили, что причиной возникновения дополнительного клона с химерным геном BCR-ABL при хМПЗ может быть активация рекомбиназы V(D)J в результате повышенной напряженности
З4
