CC BY
37
Колюбаева С. Н., Иванов А. М., Сухина И. А., Никитин В. Ю., Исакова Т. В.,
Дмитриева О. В., Поляков А. С., Бондарчук С. В.
Федеральное государственное казенное военно-образовательное учреждение высшего профессионального образования «Военно-медицинская академия имени С. М. Кирова» Министерства обороны Российской Федерации, Санкт-Петербург.
ВОЗМОЖНАЯ КОРРЕЛЯЦИЯ ПОЛИМОРФИЗМОВ ГЕНОВ, АССОЦИИРОВАННЫХ С МЕТАБОЛИЗМОМ ВАРФАРИНА И ФОЛАТОВ У БОЛЬНЫХ С ХРОНИЧЕСКИМ ЛИМФОЦИТАРНЫМ ЛЕЙКОЗОМ
В последние годы получены данные в пользу того, что одним из важных факторов развития и прогрессирования злокачественных опухолей, в том числе и хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), является функционально значимый полиморфизм генов, кодирующих ферменты системы биотрансформации ксенобиотиков. К ним относится около 90 % всех лекарственных препаратов. 1-ая фаза биотрансформации (окислительная) обеспечивается, в основном, семейством генов цитохрома Р450. Основной функцией 2-й фазы биотрансформации ксенобиотиков является детоксикация за счет действия гидролаз и трансфераз. И, наконец, 3-я фаза биотрансформации связана с выведением из организма лекарственных форм. Кроме генов, отвечающих за экспрессию энзимов с широкой субстратной специфичностью, в организме имеются гены, обеспечивающие функции
энзимов с узкой направленностью действия. К ним относится ген MTHFR, который кодирует энзим метилентетрагидрофолат редуктазу, участвующий в метаболизме фолатов и препаратов, близких по структуре к фолиевой кислоте. В настоящей работе были исследованы цитогенетические повреждения методом флуоресцентной in situ гибридизации. Для этого метода применяли ДНК-зонды фирмы ABBOT, направленные на детекцию характерных для ХЛЛ повреждений: делеция генов ATM и P53, делеция в q плече хромосомы 13, трисомия по хромосоме 12. Исследование полиморфизма генов производили только в группе больных ХЛЛ с цитогенетическими повреждениями, предсказывающих хороший прогноз течения заболевания: del (13) (q14.3), del (13)(q34), del (13)(q14.3-34).
Таким образом, у одних и тех же больных исследовали полиморфизмы генов, ассоцииро-
ГЕНЕТИЧЕСКИЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ГЕМОБЛАСТОЗОВ
ванные с метаболизмом варфарина и фолатного цикла (фирма ДНК-технология), амплификацию проводили на приборе ДТ-прайм (ДНК-технология). В варфариновый цикл входит определение вариантов генов CYP2C9: С > Т; CYP2C9 А > С; VKORC1: 1639 G >А; CYP4F2 С > Т, CYP2C9. В фолатный цикл входит определение вариантов генов MTR:2756 А > G, MTHFR:1298 А > С, МТ№^ 677 С > Т, МТКЯ:66 А> G. При исследовании больных ХЛЛ с более сложными
хромосомными перестройками в кариотипе чаще выявляются аллельные различия по сравнению с контрольным генотипом. Так, например, у больного с клональной транслокацией между 11 и 13 хромосомами, делецией в локусе (13)^14-34) выявлены аллельные различия от контроля в трех генах, в отличие от тех случаев, когда при одном хромосомном повреждении (например, ёе1(13)(^14.3) аллельные различия выявляются реже и в меньшем количестве генов.
Кузник Б. И.3, Хавинсон В. Х.1,2, Тарновская С. И.2, Линькова Н. С.2
1 Институт физиологии им. И. П. Павлова РАН, Санкт-Петербург.
2 Санкт-Петербургский институт биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН.
3 ГБОУ ВПО «Читинская государственная медицинская академия», г. Чита.
ЭПИГЕНЕТИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ РЕГУЛЯТОРНЫХ ПЕПТИДОВ НА ЦИТОКИНОВЫЙ ПРОФИЛЬ И СИСТЕМУ ГЕМОСТАЗА
Многочисленные исследования, проведенные нами и нашими сотрудниками (Хавинсон В. Х. и др., 1982-2012; Кузник Б. И. и др., 1982-2012; Патеюк А. В. и др., 1990-2012), показали, что регуляторные пептиды (РП) — тималин, вилон, эпиталамин, эпиталон, кортексин и др. — при введении больным с различной патологией способствовали ликвидации вторичных иммунодефицитов, восстанавливали баланс в содержании про- и противовоспалительных цитокинов, а также нормализовали состояние системы гемостаза. Приведенные факты свидетельствовали о том, что существуют общие механизмы действия РП на гуморальные защитные системы организма. Одним из таких механизмов могло быть эпигенетическое влияние РП на систему иммунитета и гемостаза.
Для проверки высказанной гипотезы из базы данных GenBank [Benson D.A., Karsch-Mizrachi] нами были взяты нуклеиновые последовательности генов провоспалительных (IL-1 a, IL-6, IL-17A, TNFa), противовоспалительных (IL-4, IL-10) и иммунных (IL-2, IL-5) цитокинов, а также генов тканевого фактора (TF), антитромбина III (AT-III) и протеина С (PC). Изучалось наличие сайтов связывания в промоторных зонах указанных генов с РП, обладающими геропротектор-ными и иммуномодулирующими свойствами: Lys-Glu (вилон) и Ala-Glu-Asp-Gly (эпиталон).
Оказалось, что Lys-Glu способен взаимодействовать с генами про- (IL-6, Ш-17Аи TNFa) и противовоспалительных цитокинов (IL-4 и IL-10), а также иммунного цитокина IL-5. Ala-Glu-Asp-
G1y, кроме того, может вступать во взаимосвязь с геном ^-1а и Ш-2. Последовательности нуклеотидов, вступающих во взаимодействие с Lys-G1u, представлены GCAG и в меньшей мере — СGTC, а для А1а^1и^р^1у — АТТТС, ТА-ААС, АТТГО, CTTTG и TAAAG. Число сайтов связывания для Lys-G1u и A1a-G1u-Asp-G1y в гене ^-6 одинаково; в гене TNFa для Lys-G1u в 2,5 раза, а Ш-17А — в 2 раза больше, чем для А1а-G1u-Asp-G1y. Число последовательностей, связывающихся с A1a-G1u-Asp-G1y, в генах Ш-4 и Ш-10 в 2-3 раза превышает число таковых для Lys-G1u. Наконец, число последовательностей в гене Ш-5, способных реагировать с A1a-G1u-Asp-G1y, в 10 раз превышает содержание таковых для Lys-G1u. В промоторной зоне гена ^-2 не содержатся сайты связывания к Lys-G1u, тогда как к A1a-G1u-Asp-G1y их число достигает 16.
Исследуемые нами РП способны взаимодействовать с последовательностями нуклеотидов генов ТБ, АТ-111 и РС. Сайтами связывания в гене ТБ для Lys-G1u являются последовательности ОСАО и комплементарная ей CGTC, а для A1a-G1u-Asp-G1y — САААО, СТТТА, САААТ, GTTTC и СТТТА. Сайты связывания в гене АТ-111 для A1a-G1u-Asp-G1y представлены последовательностями АТТТС, GTTTC, TAAAG, СТТТА и CTTTG, а для Lys-G1u — лишь GCAG, встречаемый всего один раз. В промоторном участке гена РС сайтами связывания для A1a-G1u-Asp-G1y служат последовательности: ATTTG, САААТ, ATTTG, а для Lys-G1u — GCAG.
