CC BY
58
скохозяйственные животные. Физиологические и биохимические параметры организма. -Боровск, 2002. - 354 с.
2. Белоусов, М.В. Исследование химических и токсических свойств гуминовых кислот низинного древесно-травяного торфа Томской области / М.В. Белоусов, Р.Р. Ахмеджанов, М.В. Гостищева // Бюллетень сибирской медицины. - 2009. - № 4 (2). -С. 27-33.
3. Грибан, В.Г. Щодо ефективносп використання гумшових препаратов у скотарс-твi та мехашзму 1'х ди на органiзм / В.Г. Грибан, В.Г. £фiмов, В.М. Ракитянський [та ш.] // Наук.-техн. бюл. 1БТ i ДНДК1 ветпрепарат1в та корм. доб. - Львiв, 2010. - Вип. 11. -№ 2-3.- С. 402-405.
4. Долгополов, В.Н. Перспективы применения Гумивала в продуктивном животноводстве / В.Н. Долгополов // Итоги и перспективы применения гуминовых препаратов в продуктивном животноводстве, коневодстве и птицеводстве (Москва, 21 декабря 2006 г.). - М., 2006. - С. 40-43.
5. £фiм ов, В.Г. Стан мшерального обмшу у свиней на промисловому комплекс / В.Г. £фiмов, К.Л. Костюшкевич, £.О. Лосева // Наук. вюник вет. мед. - Бша Церква, 2010. - Вип. 5 (78). - С. 68-71.
6. Комиссаров, И.Д. Биологическая активность гуминовых препаратов / И.Д. Комиссаров // Досягнення та перспективи застосування гумшових речовин у сшьському господарствг - Дншропетровськ, 2008. - С. 75-78.
7. Понд, У.Дж. Биология свинки / Дж.У. Понд, К.А. Хаупт. - М.: Колос, 1983. - 334 с.
8. Степченко, Л.М. Регуляторш мехашзми ди бюлопчно активних речовин гу-мшово!' природи на органiзм продуктивно!' птищ / Л.М. Степченко // Фiзiологiчний журнал. - 2010. - Т. 56. - № 2. - С. 306.
9. Фiзiолого-бiохiмiчнi методи дослщжень у бюлогп, твариннищта та ветеринарнiй медицинi / В.В. Влiзло, Р.С. Федорук, 1.А. Макар [та ш.]. - Львiв, 2004. - 400 с.
10. Czech, A. Biochemical and haematological blood parameters of sows during pregnancy and lactation fed the diet with different source and activity of phytase / A. Czech // Animal Feed Science and Technology. - 2004. - Vol. 116. - P. 211-223.
УДК 636. 92:616.15
ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОЛИКОВ В УСЛОВИЯХ СТРЕССА И ПРИ ЕГО ИММУНОКОРРЕКЦИИ
Т.Я. ВИШНЕВСКАЯ, Л.Л. АБРАМОВА ФГБУ ВПО «Оренбургский государственный аграрный университет» г. Оренбург, Российская Федерация, 460014
(Поступила в редакцию 23.01.2012)
Введение. Организм кроликов, как животных с хорошо развитой нервной системой, в течение жизни подвергается влиянию многочисленных факторов, вызывающих стресс. Возникновение стресса у животных - результат изменяющихся внешних условий среды: резкая смена распорядка дня, изменение рациона, длительное отсутствие воды, отлов и пересадка в новые клетки, скученное содержание, перевозка и другие действия персонала. Температура воздуха является одним из важнейших микроклиматических факторов, ее изменения могут повлечь за собой серьезные нарушения в адаптационных механизмах животных. Так, нарушение микроклимата в помещении, где содержатся животные, приводит к накоплению в воздухе пыли и вредных газов,
203
что также способствует развитию стресса. Все это нередко приводит к смерти животных [3, 5, 8, 10].
Иммунодефицитные состояния организма неотделимы от стресса и наблюдаются у новорожденных, молодняка и старых животных. Механизмы развития стресса сопровождаются ограничением адекватного проявления иммунной реактивности организма, образуя основу имму-нопатогенеза различных его заболеваний и состояний [1, 2, 7, 11]. В настоящее время для улучшения иммунобиологического статуса и повышения продуктивности сельскохозяйственных животных широко применяются иммунные модуляторы. Их практическое использование осуществляется по трем направлениям: иммунопротекция, иммуно-коррекция и с целью иммунореставрации [4, 6, 9].
Цель работы - изучить динамику показателей морфологии и биохимии крови кроликов в условиях стресса и иммунокоррекции препаратом Ронколейкин®.
Материал и методика исследований. Объектом исследования служили 24 половозрелых самца кроликов породы советская шиншилла в возрасте 8 месяцев, аналогичные по массе, из которых сформировали три группы: контрольную (1-я) и две опытные (2-я и 3-я).
Экспериментальное моделирование стрессового состояния животных производили в течение 14 суток с использованием уплотненной посадки и теплового климатического фактора на базе КФХ «Раздолье» Тюльганского района Оренбургской области. Для иммунокоррекции организма кроликов, находящихся в стрессе, животным вводили препарат Ронколейкин®.
Животных 2-й группы подвергали стрессу (п=9). Кроликам 3-й группы перед постановкой на эксперимент вводили Ронколейкин® подкожно из расчета 5000 МЕ/кг массы тела двукратно один раз в сутки с интервалом 48 ч. Последнюю инъекцию Ронколейкина® производили за 48 ч до начала эксперимента (п=9).
Кролики 1 -й группы служили контролем, содержались отдельно от остальных, им не применяли препараты и не подвергали их стрессу (п=9). Все животные находились в одинаковых условиях содержания, их кормление осуществляли по нормам ВИЖа.
Препарат Ронколейкин® получают современными биотехнологическими методами из клеток продуцента рекомбинантного штамма пекарских дрожжей Saccharomyces cerevisiae, в генетический аппарат которых встроен ген человеческого интерлейкина-2 (рИЛ-2), солюби-лизатор-додецилсульфат натрия (ДСН), стабилизатор Б-маннит и восстановитель дитиотреитол (ДТТ). Активная субстанция Ронколейки-на® - рекомбинантный дрожжевой интерлейкин-2 человека - является полипептидом, состоящим из 133 аминокислот с молекулярной массой около 15,4 кДа. По внешнему виду препарат представляет собой прозрачную опалесцирующую жидкость.
Для получения материала в целях исследования осуществляли взвешивание животных до и после эксперимента, забор проб крови из
204
краевой ушной вены. Морфологические и биохимические исследования крови проводили по следующим показателям и методикам: концентрацию гемоглобина определяли колориметрическим методом, количество эритроцитов, общих и агранулярных лейкоцитов в крови -гематологическим анализатором ММотс СА 620, общий белок в сыворотке крови - рефрактометром ИРФ-22 и биуретовой реакцией, белковые фракции - турбидиметрически, активность АсАТ и АлАТ - по Райтману - Френкелю, содержание глюкозы - с помощью набора «ГЛЮКОЗА-ФКД», кортизол - методом твердофазного иммунофер-ментного анализа (ИФА), ДГЭА-С (дигидроэпиандростерон-сульфат) -методом твердофазного иммуноферментного анализа (ИФА). Для оценки различий показателей двух групп применяли критерий достоверности Стьюдента.
Результаты исследований и их обсуждение. Проведенные исследования показали, что у животных 2-й опытной группы (стресс) по сравнению с контрольной количество эритроцитов в крови увеличивалось на 72,0 % (Р<0,001), в 3-й группе - на 5,4 %. Применение Ронко-лейкина® животным на фоне стресса по сравнению со 2-й группой снижало количество эритроцитов на 38,7 % (Р<0,001).
Уровень гемоглобина в крови животных 2-й группы повышался по сравнению с контролем и с 3-й группой на 17,6 (Р<0,05) и 18,2 % (Р<0,01) соответственно.
Количество общих лейкоцитов у животных, находящихся в условиях стресса, по сравнению с контролем и 3-й группой увеличилось на 13,8 (Р<0,01) и 16,0 % (Р<0,01) соответственно. У кроликов 3-й группы (Ронколейкин®) данный показатель не отличался от контрольного значения.
Численность агранулярных лейкоцитов у животных 2-й и 3-й групп в сравнении с контролем снизилась в 1,17 раза (на 14,2 %) (Р<0,01) и в 1,08 раза (на 7,4 %) (Р<0,05) соответственно. Применение Ронколей-кина® животным в условиях стресса увеличило значение аналогичного показателя в 1,08 раза (на 7,9 %) (Р<0,05) по сравнению с животными, находящимися в условиях стресса.
Стресс оказал влияние на биохимические показатели крови животных. Так, содержание общего белка и альбуминов достоверно (Р<0,001) понижалось соответственно на 6,9 и 5,4 % по отношению к контролю. Применение Ронколейкина® на фоне стресса повышало концентрацию общего белка в сыворотке крови на 8,6 % (Р<0,05), а концентрацию альбуминов понижало на 3,2 % (Р<0,05) по отношению к контролю, в сравнении со 2-й группой, животные находились в условиях стресса, значения данных показателей повышались на 16,6 % (Р<0,001) и на 2,4 % (Р<0,01) соответственно.
При сопоставление показателей содержания у-глобулинов в сыворотке крови кроликов 2-й группы по сравнению с контролем выявлено их достоверное (Р<0,01) понижение на 21,3 %. Использование Ронко-лейкина® на фоне стресса способствовало повышению концентрации
205
у-глобулинов по сравнению с контролем и 2-й группой в 1,11 раза (Р<0,01) и в 1,41 раза (Р<0,001) соответственно.
Количественное содержание ферментов АсАТ и АлАТ в сыворотке крови кроликов 2-й группы было ниже, чем в контрольной, на 16,2 (Р<0,01) и 26,3 % (Р<0,01) соответственно. Применение Ронколейкина® животным на фоне стресса повышало содержание ферментов АсАТ и АлАТ по отношению ко 2-й группе на 5,2 и 23,8 % (Р<0,01) соответственно, а в сравнение с контролем различия в аналогичных показателях были не существенны.
Показатель коэффициента де Ритиса 2-й группы превышал в 1,14 раза (Р<0,01) его контрольное значение и в 1,18 раза (Р<0,01) показатель 3-й группы.
У животных, находящихся в условиях стресса, по сравнению с контролем уровень глюкозы в крови повышался на 50,1 % (Р<0,01), применение препарата Ронколейкин® кроликам увеличивало этот показатель на 15,8 % (Р<0,05). Выявлена достоверная (Р<0,01) разница в концентрации глюкозы в крови между 2-й и 3-й группами животных, которая составила 22,8 %.
В сыворотке крови кроликов на фоне стресса по сравнению с контролем регистрировалось повышение концентрации кортизола на 42,1 % (Р<0,01). Использование Ронколейкина® животным на фоне стресса по сравнению с контролем повышало концентрацию кортизо-ла на 22,8 % (Р<0,01), а при сопоставлении данного показателя со 2-й группой наблюдалось его понижение на 13,6 % (Р<0,01).
Содержание в сыворотке крови половых гормонов ДГЭА-С у животных, находящихся в условиях стресса, снижалось на 24,2 % (Р<0,01) по сравнению с контролем. Ронколейкин® увеличивал концентрацию ДГЭА-С на 28,0 % (Р<0,01) по сравнению с животными, находящимися в условиях стресса.
На момент завершения эксперимента живая масса животных в контрольной группе увеличилась на 4,1 % (Р<0,05) (в 1,04 раза), в то время как при стрессе по сравнению с контролем отмечали снижение ее на 18,6 % (в 1,22 раза) (Р<0,001). При воздействии Ронколейкина® изменения в живой массе кроликов относительно контроля не наблюдали, но в сравнении со 2-й группой (стресс) отмечали ее повышение на 21,7 % (в 1,22 раза) (Р<0,01).
Анализ морфологических показателей крови животных, находящихся в условиях стресса, показал отрицательное его воздействие на адаптационные механизмы организма, выразившееся в увеличении концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, общих лейкоцитов и в снижении агранулярных лейкоцитов. Последнее можно объяснить механизмом развития стресса, а именно: в организме возникает недостаток кислорода, который восполняется увеличением количества эритроцитов в крови и соответственно уровня гемоглобина, что дает возможность для менее травмирующей адаптации животных к изменяющимся условиям среды.
По результатам биохимических показателей сыворотки крови животных на фоне стресса наблюдалось понижение содержания общего белка, у-глобулинов, что свидетельствует о замедлении процессов: синтеза белков, транспортировки питательных веществ для клеточных структур, защиты организма от неблагоприятных факторов внешней среды. Кроме того, снижение содержания ферментов АсАТ и АлАТ в сыворотке крови животных способствовало увеличению коэффициента де Ритиса.
Во время стресса повышение уровня кортизола (поддерживающего нормальный баланс сахара) в крови в 1,42 раза приводит к увеличению концентрации глюкозы в 1,5 раза и, как следствие, к выработке энергии, необходимой для тканей и органов животных. Однако увеличение уровня кортизола оказало влияние на выработку надпочечниками полового гормона ДГЭА-С, снизив их концентрацию в 1,32 раза.
Воздействие иммунокорректора Ронколейкина® на организм кроликов при стрессе обусловило поддержание численности эритроцитов, концентрации гемоглобина, числа общих лейкоцитов на уровне контроля и повышение численности агранулярных лейкоцитов в крови. Кроме того, иммунокорректор усиливал белковый обмен и повышал иммунобиологическую реактивность организма, что выражалось в повышении уровня общего белка, альбуминов и концентрации у-глобулинов. Ронколейкин® способствовал увеличению концентрации ферментов АлАТ и АсАТ и соответственно снижению коэффициента де Ритиса, существенно сдерживал повышение концентрации кортизола и глюкозы. При этом содержание полового гормона надпочечников ДГЭА-С в сыворотке крови животных оставалось в пределах нормы.
Заключение. Таким образом, изменения морфологических показателей крови после воздействия стресс-факторов свидетельствуют о резком изменении реактивности организма, об его отрицательном влиянии на гормонально-метаболический статус и в целом на физиологическое состояние животного.
Фон Ронколейкина® при стрессе способствует активизации механизмов адаптации организма животных под влиянием биологически активных веществ, обусловливая снижение численности эритроцитов, концентрации гемоглобина, числа общих лейкоцитов и снижение уровня глюкозы в крови. В целом отмеченная у животных 3-й опытной группы тенденция к повышению количества у-глобулинов свидетельствует о положительном влиянии Ронколейкина®, улучшающего физиологическое состояние, инициирующего естественные компенсаторные механизмы организма кроликов, находящихся в условиях стресса.
ЛИТЕРАТУРА
1. Гаркави, Л.Х. Адаптационные реакции и резистентность организма / Л.Х. Гаркави, Е.Б. Квакина, М.А. Уколова. - Ростов н/Д.: Наука, 1990. - 224 с.
207
2. Горизонтов, П.Д. Стресс и система крови / П.Д. Горизонтов, О.И. Белоусова, М.И. Федотова. - М.: Медицина, 1983. - С. 240
3. Гуськов, А.Н. Влияние стресс-фактора на состояние сельскохозяйственных животных / А.Н. Гуськов. - М.: Агропромиздат, 1994. - С. 38-41.
4. Добрица, В.П. Современные иммуномодуляторы для клинического применения / В.П. Добрица, Н.М. Ботерашвили, Е.В. Добрица. - СПб.: Изд-во «Политехника», 2001.
5. Ковальчикова, М. Адаптация и стресс при содержании и разведении сельскохозяйственных животных / М. Ковальчикова. - М.: Изд-во «Колос», 1986. - 270 с.
6. Малычева, В.Н. Разработка препаратов на основе геноинженерных цитокинов / В.Н. Малычева, Н.М. Пустошилова, Е.Д. Даниленко // Медицинская иммунология. - 2001. -Т. 3. - № 2. - С. 326-378.
7. Преображенский, Д. И. Стресс и патология размножения сельскохозяйственных животных / Д.И. Преображенский. - М.: Наука, 1993. - С. 22-25.
8. Пьянов, В.Д. Моделирование стрессовых ситуаций и влияние их на физиологический статус собак: учен. записки / В.Д. Пьянов, М.С. Галицкая, Е.С. Шутенков // Матер. Междунар. науч.-практ. конф., посвящ. 100-летию со дня рожд. Е.Н. Павловского / Казанская гос. акад. вет. медицины. - Казань, 2004. - Т. 179. - С. 265-271.
9. Слободяник, В.И. Иммуномодуляторы ронколейкин и фоспренил при выращивании кроликов / В.И. Слободяник, С.П. Жуков, М.В. Слободяник // Кролиководство и звероводство. - 2009. - № 1. - С. 27-28.
10. Сеин, Б.С. Интерьерные показатели у кроликов при иммобилизационном стрессе / Б.С. Сеин, А.А. Аксенов // Проблемы сельскохозяйственного производства на современном этапе и пути их решения: матер. XI Междунар. науч.-произв. конф. - Белгород, 2007. - С. 217.
11. Шмидт, Ю.Д. Терапевтическая коррекция метаболических расстройств, вызываемых транспортным стрессом и гипоксией / Ю.Д. Шмидт // Актуальные вопросы ветеринарной медицины мелких домашних животных: мат. межрегион. науч.-практ. конф. - Новосибирск, 2002. - С. 50-51.
УДК 619:616.2-079.4:636.4
ПАТОМОРФОЛОГИЧЕСКАЯ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНАЯ ДИАГНОСТИКА БОЛЕЗНЕЙ СВИНЕЙ С РЕСПИРАТОРНЫМ СИНДРОМОМ
В.С. ПРУДНИКОВ, М.В. КАЗЮЧИЦ УО «Витебская ордена «Знак Почета» государственная академия ветеринарной медицины» г. Витебск, Республика Беларусь, 210026
(Поступила в редакцию 22.01.2012)
Введение. В последние 10-15 лет респираторный симптомоком-плекс (РСКС) у свиней часто выявляется в США и в большинстве стран Европы. Под этим названием объединяют несколько болезней, которые могут развиваться самостоятельно, но очень часто имеет место смешанная инфекция как минимум трех этиологических агентов -бактерий (Pasteurella multocida, Actinobacillus pleuropneumoniae, Haemophilus pleuropneumoniae, Mycoplasma hyopneumoniae) и вирусов (особенно вируса РРСС) [2, с. 5]. Виды микроорганизмов, участвующих в патогенезе РСКС, многочисленны и неодинаково распространены на фермах с разными системами содержания свиней [3, с. 17; 8, с. 5].
