CC BY
41
Функциональная характеристика органа слуха при генетической и негенетической тугоухости: анализ аудиограмм
Левая-Смоляк А.М.1, Меркулова Е.П.1, Олейник О.А.2, Лёле Е.3, Стринкевич Э.А.4
1 Белорусский государственный медицинский университет, Минск
2 Институт генетики и цитологии НАН РБ, Минск
3 Университетская клиника г. Фрайбурга, Германия
4 Белорусская медицинская академия последипломного образования, Минск
Levaya-Smaliak A.M.1, Merkulova E.P.1, Oleynik O.A.2, Lohle E.3, Strinkevich E.A.4
1Belarusian State Medical University, Minsk 2 Institute of genetics and cytology of the National Academy of Sciences of the Republic of Belarus, Minsk
3University hospital of Freiburg, Germany 4 Belarusian Medical Academy of Post-Graduate Education, Minsk
Functional characteristics of hearing organ for genetic and non-genetic hearing loss: analysis of audiogramms
Резюме. Настоящее исследование описывает аудиологический профиль генетической сенсоневральной тугоухости (СНТ), обусловленной однонуклеотидной мутацией 35delG в гене коннексина 26, наиболее частой причиной детской врожденной СНТ в странах Европы. 142 ребенка (55%) из 258, страдающих несиндромальной двусторонней тугоухостью, имели в своем генотипе данную мутацию. Аудиологический профиль 35delG-ассоциированной тугоухости соответствует более тяжелым нарушениям слуха (3-4 степень по ВОЗ). Качественный анализ форм аудиограмм не выявил достоверных различий между группами с различной этиологией СНТ. Ключевые слова: врожденная СНТ, коннексин 26, мутация 35delG, тональная пороговая аудиограмма (ТПА).
Summary. The present study describes the audiological profile of genetic hearing loss caused by single-nucleotide mutation 35delG in gene GJB2, as one of the common cause of childhood sensorineural hearing loss in European countries. The mutation 35delG was detected in 142 (55%) of 258 patients suffered from non-syndromic hearing loss. Audiological profile is that of a profound or severe hearing loss. Qualitative analysis of shapes of audiograms has showed no significant differences between groups with different ethiology of sensorineural hearing loss. Keywords: congenital sensоrineural hearing loss, connexin 26, mutation 35delG, pure-tone audiogram.
Сенсоневральная тугоухость (СНТ) является одним из самых частых врожденных нарушений органов чувств с частотой встречаемости 1-2 ребенка на 1000 новорожденных для двусторонних глубоких нарушений слуха (> 70 дБ) и более 4 детей на 1000, если включать легкие, средние и односторонние нарушения слуха [9, 11]. Врожденная тугоухость может иметь различные причины, хотя как мимнимум в 50% случаев установлена генетическая причина тугоухости в развитых странах мира, две трети из них носят несиндромальный характер, при котором тугоухость не сочетается с другими патологическими состояниями [5, 6]. Мутация в гене, кодирующем коннексин 26, ответственна за практически половину случаев генетических нарушений слуха. За двадцать лет описано более 70 различных мутаций в этом гене, но наибольший интерес для исследователей представляет однонуклеотидная мутация 35delG, которая составляет около 70% всех мутаций гена GJB2 [1-3, 15]. Высокая частота вышеупомянутой мутации требует описания ее фенотипических проявлений. Первоначально сообщалось
о глубоких нарушениях слуха при 35delG-ассоциированной тугоухости, но последние исследования показали, что данная мутация может быть причиной нарушения слуха и при менее тяжелых степенях тугоухости [8, 12, 16].
Цель исследования - сравнительный анализ аудиологического профиля 35delG-вызванной тугоухости и негенетических форм несиндромальной сенсо-невральной тугоухости.
Материалы и методы
Нами обследовано 258 детей в возрасте от 4 лет до 18 с несиндромальной двусторонней СНТ. Дети с односторонней тугоухостью и с признаками синдромальной тугоухости (поражение почек, щитовидной железы, глаз, сердечно-сосудистой системы, когнитивными расстройствами) были исключены из исследования. Всем пациентам выполнено клиническое и аудиологическое обследование. Клиническое обследование включало сбор анамнеза на наличие факторов риска развития тугоухости, педиатрическое обследование и осмотр ЛОР-органов. Аудиологическое обследование проводилось методом тональной
пороговой аудиометрии (ТПА) на диагностическом аудиометре МА-31 (1ермания) в стандартном диапазоне частот (125— 8000 Гц) с предварительной стандартизацией нулевого уровня воздушного проведения по международному стандарту JSO-64. Методом акустической тимпано-метрии было диагностировано отсутствие кондуктивного компонента тугоухости у всех детей. Анализ ТПА проводили по количественным (средним тональным порогам слуха воздушной проводимости в стандартном диапазоне частот на лучше слышащее ухо, порогами слуха на четырех речевых частотах и степени тугоухости) и качественным (форма аудиограмм) характеристикам. Степень тугоухости определялась по порогу слуха на четырех речевых частотах (500, 1000, 2000 и 4000 Гц) для лучше слышащего уха. Для оценки тяжести нарушений слуха использовалась классификация ВОЗ: 20-50 дБ потери слуха - 1-я степень, 51-70 дБ -2-я, 71-90 дБ- 3-я, более 90 дБ - 4-я степень. Качественный анализ форм ТПА проведен в соответствии с классификацией Liu и Xu [14], наиболее
Таблица ll Стандарты для классификации формы аудиограмм (Liu и Xu)
Форма ТПА Определение
Асимметричная Отличие в 15 дБ между ушами как минимум на 2 частотах и в 10 дБ -на 4 частотах
Плоская Высокие, средние и низкие частоты отличаются менее чем на 10 дБ
Нисходящая Низкие частоты лучше воспринимаются, чем средние и высокие
Остаточная Только остатки слуха на низких частотах
и-образная Средние частоты воспринимаются хуже, чем низкие и высокие, на 15 дБ и более
Восходящая Низкие частоты воспринимаются хуже, чем высокие, на 10 дБ и более
Таблица 2 Стандарты для классификации формы аудиограмм и Xu)
Форма ТПА 1енотип
Абсолютное число % Общее число %
c мутацией без мутации c мутацией без мутации
Асимметричная 23 16 16.2% 13.8% 39 15.1%
Симметричная: нисходящая остаточная плоская и-образная 64 51 45.1% 44.0% 115 44.6%
40 41 28.2% 35.3% 81 31.4%
6 1 4.2% 0.9% 7 2.7%
5 6 3.5% 5.2% 11 4.3%
Общее число 142 116 100.0% 100.0% 258 100.0%
полно отражающей многообразие форм аудиограмм (табл. 1).
Всем пациентам был выполнен молекулярно-генетический анализ на наличие мутации 35СеЮ в Институте генетики и цитологии. ДНК лейкоцитов периферической крови изолировалась методом ПЦР по общепринятой методике со специфическими праймерами, после чего амплифицированный фрагмент подвергался эндонуклеазной обработке для выявления мутации. Наличие мутации 35СеЮ в гомозиготном состоянии свидетельствует о несиндромальной СНТ вызванной данной мутацией. Если мутация не определялась, тугоухость классифицировалась как негенетическая СНТ.
Статистический анализ выполнен с использованием лицензированной системы «В-5у$1ет-Огд». Для сравнения групп с генетической и негенетической СНТ по порогам слуха, формам ТПА использовались тест Уилкоксона (для непараметрических данных), точный критерий Фишера (для данных, которые можно представить в виде таблицы 2x2) и метод повторяющихся событий для по-
строения графиков усредненных аудио-грамм.
Результаты и обсуждение
Результаты молекулярно-генетиче-ского анализа. Среди наших пациентов генетическая этиология СНТ диагностирована у 109 детей (42,2%) с определением мутации 35СеЮ в гомозиготном состоянии, 33 пациента (12,8%) были носителями данной мутации в гетерозиготном состоянии. Наличие мутации 35СеЮ в генотипе ребенка, страдающего двусторонней СНТ стало поводом для объединения таких пациентов в одну группу с генетической этиологией заболевания. Их общее количество составило 142 (55%), что свидетельствует о превалирующей роли генетической СНТ в структуре врожденных нарушений слуха. У 116 (45%) детей с несиндромальной СНТ мутация 35СеЮ не обнаружена, что говорит о негенетической (инфекционной, приобретенной или другой) природе заболевания.
Результаты аудиологического обследования. Различные формы ТПА представлены в табл. 2. Восходящей формы ТПА у обследуемых детей с СНТ не выявлено.
МЕДИЦИНСКИЕ НОВОСТИ
№7^ 2012
88
Точный тест Фишера показал отсутствие статистически значимых различий (р=0,36) в отношениях каждой формы ау-диограммы в двух исследуемых группах пациентов с СНТ.
С помощью метода повторяющихся событий, используя абсолютное значение тональных порогов слуха по воздушной проводимости на лучше слышащее ухо в диапазоне частот от 250 до 6000 Гц и число каждой из форм ТПА, нами получены усредненные графики ТПА для группы с генетической и негенетической СНТ (рис. 1). Все формы ТПА практически идентичны в двух группах, исключая нисходящую, которая в группе детей с негенетической СНТ носит пологий характер, а в группе детей с 35СеЮ-ассоциированной СНТ - крутонисходящий. Но, повторим, эти отличия статистически недостоверны.
Высокое соотношение 35СеЮ-ассоциированной СНТ среди пациентов с прелингвальной несиндромальной СНТ имеет большое значение в клинической практике. До недавнего времени считалось, что особенности форм аудиограмм могут помочь в определении генетической этиологии СНТ. Сейчас появились исследования, которые ставят под сомнения этот факт. Результаты наших исследований также свидетельствуют о том, что по форме аудиограммы мы не можем судить об этиологии нарушений слуха.
Сравнительный анализ медиан абсолютных значений порогов слуха на 4 речевых частотах на лучше слышащее ухо (для группы с генетической СНТ она составляет 92,5 ({81,6; 97,5}), а в группе с негенетической СНТ - 90,62 ({75,0; 97,5}) также не выявил статистически достоверных различий в двух сравниваемых группах, тест Уиллкоксона равен 0,3. Эти данные представлены на рис. 2. По вертикали - число (%) пациентов с СНТ от общего количества, по горизонтали - порог слуха (ПС) на 4 речевых частотах. Указана градация порога слуха в зависимости от степени потери слуха в диапазоне 20-50 дБ, 51-70 дБ, 71-90 дБ и более 90 дБ).
Проанализировав степени СНТ мы получили несколько иные данные. Между двумя группами СНТ различной этиологии установлены статистически достоверные различия в сторону превалирования более глубоких нарушений слуха в группе с 35СеЮ-ассоциированной СНТ (точный критерий Фишера составляет 0,02). Распределение детей с разной степенью СНТ в зависимости от наличия мутации 35СеЮ в гене коннексина 26 представлено на рис. 3.
Рисунок 1
Графические изображения усредненных форм ТПА в двух сравниваемых группах (N=258), построенные методом повторяющихся событий
Рисунок 2
Медиана абсолютных порогов слуха на лучше слышащее ухо на 4 речевых частотах (500, 1000, 2000 и 4000 Гц) в группах детей с генетической и негенетической СНТ (N=258, тест Уиллкоксона = 0,3). Пояснения в тексте статьи
Используя метод повторяющихся событий для средних тональных порогов слуха по воздушной проводимости в стандартном диапазоне частот, мы построили усредненные графики ТПА для двух сравниваемых групп (рис. 4). ТПА незначительно отличаются в области речевых частот в сторону более грубых нарушений слуха в группе с з5СеЮ-ассоциированной СНТ но эти различия статистически недостоверны.
Данная работа подтверждает результаты других европейских исследований о более тяжелых нарушениях слуха у пациентов - носителей ядерной
мутации 35СеЮ в гене GJB2 [7, 8, 10, 12, 16, 17].
Наши исследования свидетельствуют о том, что молекулярно-генетическое тестирование на наличие мутации 35СеЮ в гене коннексина 26 следует включить в комплексный клинико-аудиологический протокол обследования детей с прелинг-вальной СНТ как первый шаг для определения причины снижения слуха.
Выводы
Молекулярно-генетическое исследование детей Беларуси, страдающих не-синдромальной двусторонней сенсонев-ральной тугоухостью, выявило высокую
встречаемость генетических нарушений слуха (55%), обусловленных мутацией 35delG в гене коннексина 26.
Установлено, что в группе с генетически детерминированной (35delG) сен-соневральной тугоухостью статистически достоверно (р<0,05) превалируют более тяжелые нарушения слуха (3-4-й степени тяжести по ВОЗ).
По качественным характеристикам ТПА статистически значимых отличий по формам аудиограмм между группами детей, страдающих генетической и негенетической сенсоневральной тугоухостью не выявлено (р>0,05).
Рисунок 3
Распределение детей (абс.) с разной степенью СНТ в зависимости от наличия мутации 35delG в гене коннексина 26 (точный тест Фишера = 0,02)
Рисунок 4
Динамика средних тональных порогов слуха у обследуемых детей в стандартном диапазоне частот в группах детей с генетической и негенетической СНТ (N=258)
-с мутациеи
----без мутации
1SÖÖ 3DCE
Л И Т Е Р А Т У Р А
1. Маркова Т.Г. Клинико-генетический анализ врожденной и доречевой тугоухости: автореф. дис. ...д-ра мед.наук. - М., 2008.
2. Маркова Т.Г., Поляков А.В. // Вестн. оториноларингологии. - 2007. - №4. - С.7-10.
3. Журавский С.Г., Иванов С.А., Тараскина А.Е. и др. // Мед. акад. журн. - 2009. - Т.9. - С.41-45.
4. Antoniadi T., Rabionet R., Kroupis C, Aperis G.A. et al. // Clin. Genet. - 1999. - Vol.55, N5. - P.381-382.
5. Apps S., Rankin W, Kurmis A. // Int. J. Audiol. -2007. - N46. - P.75-81.
6. Bitner-Giindzicz M. // Br. Med. Bull. - 2002. -Vol.63. - P.73-94.
7. Cohn E.S., KelleyP.M. // Am. J. Med. Genet. (Semin. Med. Genet.). - 1999. - Vol.89. - P.130-136.
8. Cryns K, Orzan E, Murgia A. et al. // J. Med. Genet. - 2004. - Vol.41. - P.147-154.
9. Dureux - Smith A, Fitzpatrcck E, Whittingham J. // Int. J. Audiol. - 2008. - Vol.47. - P.1-10.
10. Hilgert N, Huentelman M, Thorburn A. et al. // Eur. J. Hum. Genet. - 2009. - Vol.17. - P.517 -524.
11. Mehl A.L., Thompson V. // Pediatrics. - 2002. -Vol.109. - P.E7.
12. Yan M, Tao Y, Yun L. et al. // Am. J. Med. Gen. -2010.- Vol.6. - P.2912-2915.
13. Murgia A, Orzan E, PolliR. et al. // J. Med. Genet. -1999. - Vol.36. - P.829-832.
14. Liu J, Xu G. // Eur. Arch. Otorhinolaryngol. - 1999. -Vol.154. - P.231-235.
15. Putcha G, Bejani B, Bleoo S. et al. // Genetics in Medicine. - 2007. - Vol.9. - P.413-426.
16. Snoeckx R, Huygen P., Feldmann D. et al. // Am. J. Hm. Gen. - 2005. - Vol.77. -P.945-957.
17. SalvinelliF, CasaleM, FiriisiL. et al. // J. Laryngolog. Otolog. - 2004. - Vol.118. - P.8-11.
Поступила 27.04.2012г.
К СВЕДЕНИЮ АВТОРОВ И РЕКЛАМОДАТЕЛЕЙ
Среди основных задач журнала «Медицинские новости» - целенаправленное и гарантированное продвижение статей, авторов, идей, новых технологий, лекарственных препаратов и медицинской техники; повышение цитируемости статей и их авторов посредством возможностей научного периодического издания и сайта www.mednovosti.by, использующих современные информационные PR-технологии.
Продвижение информационных материалов осуществляется следующим образом:
1. Ваши статьи и информационные материалы размещаются в базе данных Научной электронной библиотеки eLIBRARYru (Москва), единственной в странах СНГ анализирующей цитируемость включенных в нее журналов и статей.
По данным этой библиотеки, журнал «Медицинские новости» - самое высокоцитируемое периодическое издание среди журналов медицинского профиля в Беларуси. Кроме того, журнал «Медицинские новости» занимает 184-е место в мире по цитируемости среди зарубежных медицинских журналов в рейтинге SCIENCE INDEX, 2010. Публикуясь в журнале «Медицинские новости», Вы автоматически становитесь автором крупнейшего научного информационного ресурса eLIBRARYru сети Интернет и, как следствие, повышаете свою цитируемость и читаемость в зарубежных странах (услуга бесплатная).
2. Тексты Ваших статей в полном объеме и информационные материалы как из текущего номера, так и опубликованные в номерах предыдущих лет, могут быть размещены на сайте www.mednovosti.by в разделе «Архив МН». По данным Google Analitics, только в марте 2012 года наш сайт посетили более 98 600 уникальных пользователей из 100 стран мира (услуга платная, тексты размещаются для постоянного доступа).
3. В разделе «Новости» на главной странице сайта www.mednovosti.by дважды в квартал может быть размещен PR-реферат статьи или информационного материала, опубликованного в любом номере журнала, с активной ссылкой на полный текст статьи или информационного материала, размещенных в «Архиве МН» на сайте www.mednovosti.by (услуга платная).
4. Информация о Ваших монографиях, статьях, патентах, зарегистрированных в РБ лекарственных препаратах и медицинской технике, об учреждениях, фирмах и предприятиях может стать доступной любому посетителю сайта www. mednovosti.by с помощью баннеров, обеспечивающих выход на развернутый рекламный текст (услуга платная).
Подробнее об этих и других услугах - на сайте www.mednovosti.by.
Заявки присылайте на адрес e-mail: [email protected] или звоните: (017) 226-03-95; (029) 695-94-19.
ВЫХОДНЫЕ ДАННЫЕ
«Медицинские новости» № 7(214) 2012 г. Рецензируемый научно-практический информационно-аналитический журнал. Свидетельство о регистрации № 965 выдано Министерством информации Республики Беларусь 9 июля 2010 года. Периодичность - 1 раз в месяц
Учредитель
Частное издательское
унитарное предприятие «ЮпокомИнфоМед» Юридический адрес: 220018, г. Минск, ул. Якубовского, 70-5 УНП191350993
Редакция
Шарабчиев Юрий Талетович (гл. редактор, директор)
Третьякова Ирина Георгиевна (отв. секретарь, реклама)
Марковка С.Н., Пручковская О.Н. (редакторы)
Шусталик М.В. (дизайн) Колоницкая О.М. (верстка) Вашкевич С.В. (зам. директора)
Адрес для переписки: 220030, Минск, пл. Свободы, 23-35. Тел./ факс (+375-17) 226-03-95, 327-07-54 (гл. редактор), моб. (029) 695-94-19 (Velcom).
Е-mail: [email protected] www.mednovosti.by
Для сведения
Рукописи рецензируются независимыми специалистами.
C информацией «К сведению авторов»
можно ознакомиться на сайте www.mednovosti.by
Ответственность за достоверность и интерпретацию предоставленной информации несут авторы. Редакция оставляет за собой право
по своему усмотрению размещать полные тексты публикуемых статей на сайте редакции www.mednovosti.by и в электронных базах данных (на сайтах) своих партнеров.
Перепечатка материалов только с разрешения редакции. Рукописи не возвращаются.
Подписано в печать 16.07.2012 г
Формат 60х84 1/8.
Гарнитура Helvetica Narrow.
Уч.-изд. л. 12,92 . Тираж 1607 экз. Заказ 1500
Цена свободная.
Подписка: по каталогу РУП «Белпочта» индексы: 74954 (инд.), 749542 (вед.); по каталогу ОАО «Агентство Роспечать» индекс: 74954
Типография ООО «Поликрафт» Лицензия №02330/0494199 от 03.04.09 Минск, ул. Кнорина, 50
