CC BY
32
60 ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ
ВОЗМОЖНОСТИ УПРАВЛЕНИЯ ЭФФЕКТАМИ ФДТ Р.И. Якубовская1, ТА. Кармакова1, Н.Б. Морозова1, А.А. Панкратов1, В.В. Соколов1, В.И. Чиссов1, А.В. Феофанов2, Е.А. Лукъянец3, А.Ф. Миронов4 Московский научно-исследовательский онкологический институт им. П.А. Герцена 2 Институт биоорганической химии им. М.М. Шемякина и Ю. А. Овчинникова РАН, Москва 3ФГУП Государственый научный центр “НИОПИК”, Москва 4 Московская государственная академия тонкой химической технологии им. М. В. Ломоносова
В настоящее время метод фотодинамической терапии (ФДТ) все шире используется при лечении предопухолевых заболеваний, начальных поверхностно расположенных злокачественных новообразований как малых, так и больших размеров, при множественных опухолях, а также при первичных и метастатических поражениях у инкурабельных больных и у пациентов с тяжелыми сопутствующими патологиями.
Противоопухолевая эффективность ФДТ обусловлена широким спектром механизмов действия, влияющих на ключевые звенья развития новообразования. Это -противососудистый эффект, который осуществляется как за счет окклюзии или разрушения сосудов, питающих опухоль, так и в результате нарушения процессов неоангиогенеза; непосредственное цитотокси-ческое действие по отношению к опухолевым клеткам; разрушение стромальных элементов, а также активация апоптоза, систем противоопухолевой защиты и др.
Включение того или иного механизма в реализацию противоопухолевого эффекта ФДТ определяется локализацией фотосенсибилизатора в ткани опухоли (сосуд, опухолевая клетка, окружающая ткань), уровнем его накопления в той или иной структуре, а также фотохимической активностью красителя, т.е. способ-
ностью генерировать свободно-радикальные процессы в условиях данного микроокружения.
Характер биораспределения красителя и его фотоактивность взаимосвязаны и в значительной степени определяются природой фотосенсибилизатора и условиями проведения ФДТ. Это означает, что при использовании различных фотосенсибилизаторов, варьировании дозы хромофора, интервала времени между введением красителя и облучением, а также режима облучения (дозы света, плотности мощности энергии) можно изменять направленность механизмов действия ФДТ и выраженность их противоопухолевого эффекта, т.е. управлять эффектами ФДТ.
На примере более 100 фотосенсибилизаторов, производных порфинов и тетраазопорфинов, на моделях in vitro (культуры опухолевых'клеток человека) и in vivo (животные с перевиваемыми опухолями) с использованием методов оценки фототоксичности, а также внутриклеточного и внутритканевого распределения хромофоров показано, что биораспределение в опухолевой ткани зависит главным образом от класса фотосенсибилизатора, а эффективность фо-тоиндуцированного воздействия - от дозы красителя и режимов ФДТ.
ФТАЛОСЕНС - НОВЫЙ ПРЕПАРАТ НА ОСНОВЕ БЕЗМЕТАЛЬНОГО ФТАЛОЦИАНИНА ДЛЯ ФДТ РАКА
Р.И. Якубовская1, Н.Б. Морозова1, Т.А. Кармакова1, АД. Плютинская1, В.М. Деркачева2, Е.А. Лукъянец2, В.И. Чиссов1, Г.Н. Ворожцов2
‘МНИОИ им. П.А. Герцена, Москва 2ФГУП «ГНЦ «НИОПИК», Москва.
в ~25 раз больше, чем у Фотосенса, - препарата, разрешенного для клинического применения. In vivo, на мышах с лимфолейкозом Р-388, привитым подкожно, показано, что PcH2S2 и PcH2S3, как и Фотосенс, быстрее накапливаются во внутренних органах и тканях, чем в коже, мышце и опухоли, и выводятся из них с различной скоростью. Из почек PcH,S, и PcH2S3 выводятся
Успешное применение ФДТ для лечения злокачественных новообразований стимулировало поиск новых фотосенсибилизаторов и изучение механизма их действия. Интенсивные исследования фталоцианинов свидетельствуют об их перспективности.
In vitro, на опухолевых клетках человека (А-549) было показано, что фотоактивность этих производных
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
№2/томЗ/2004
ФОТОДИНАМИЧЕСКАЯ ТЕРАПИЯ
61
значительно медленнее, чем Фотосенс, а из печени быстрее выводится PcH2S3 и PcH2S2. Уровень нормированной флюоресценции PcH2S2 и PcH2S3b опухоли Р-388 на все сроки наблюдения превосходит таковой для Фотосенса. Сравнение фотоактивности субстанций PcH2S2, PcH2S3 и Фотосенса показало, что в одних й тех же условиях с интервалом между введением красителя и облучением, равным 24 ч, противоопухолевая эффективность безметальных сульфофталоцианинов, оцененная по критерию ТРО (торможение роста опухоли), выше, чем таковая для Фотосенса, что согласуется с данными, полученными in vitro.
Сопоставление физико-химических и биологических свойств изученных безметальных производных фтало-цианина свидетельствовало о том, что PcH2S3, получивший название Фталосенс, - более перспективный фотосенсибилизатор для фотодинамической терапии рака.
Показана высокая фотоиндуцированная активность
Фталосенса на ряде культур опухолевых клеток человека и мыши (ИК50=О,23н-О,5 мкг/мл) при отсутствии тем-новой токсичности. В системе in vivo на животных с Р-388 для Фталосенса получены высокие значения ТРО (60-80 %) без увеличения продолжительности жизни (УПЖ) мышей при использовании длительных интервалов (16 и 24 ч) между введением красителя и началом облучения, независимо от дозы фотосенсибилизатора. При облучении опухоли через короткие интервалы времени после введения Фталосенса (15 мни - 4 ч) в низких дозах (0,25; 0,5 мг/кг) наблюдались как более высокие значения ТРО (70-90 %), так и увеличение УПЖ до биологически значимых величин (25,0-31,0 %).
В настоящее время проводится доклиническое изучение Фталосенса, предназначенного для ФДТ злокачественных новообразований.
Работа выполнена при поддержке гранта Правительства г. Москвы.
РАЗРАБОТКА РЕАКЦИЙ ПОДЛИННОСТИ ПРИ СТАНДАРТИЗАЦИИ ФОТОДИТАЗИНА
И. В. Ярцева1, Л. Г. Гатинская1, Н.А. Дмитричева1, Е.В. Игнатьева1, Б. С. Кикоть1, Г.В. Пономарев2 1ГУРОНЦим. Н.Н. Блохина РАМН, Москва 2000 «ВЕТА-ГРАНД», Москва
Фотодитазин - оригинальный отечественный препарат нового поколения фотосенсибилизаторов, созданный ООО «ВЕТА-ГРАНД» и изучаемый в Российском онкологическом научном центре им. Н.Н. Блохина РАМН.
Фотодитазин представляет собой раствор ди(К-ме-тилглюкаминовой) соли хлорина е6темно-зеленого цвета с желтоватым оттенком. Для подтверждения подлинности препарата, в первую очередь, был использован электронный спектр поглощения его разбавленного спиртового раствора, т.к. в области 350 - 700 нм он имеет характеристический для хлорина е6 вид: максимумы поглощения при длинах волн 400±2 нм, 504±2 нм, 534±2 нм, 608±2 нм, 662±2 нм и минимумы - при длинах волн 460+2 нм, 522±2 нм, 578±2 нм, 624±2 нм.
Обнаружение N-метилглюкамина в Фотодитази-не затруднено тем, что из-за интенсивной окраски препарата невозможно проведение цветных качественных реакций. Однако и после предварительного высаживания хлорина е6 добавлением хлористоводородной кислоты проведение типовых качественных реакций неосуществимо, поскольку после отделения осадка
получается очень разбавленный раствор солянокислой соли ТЧ-метилглкжамина, и это не позволяет получить контрастного цветового перехода при реакциях с меди(П) гидроксидом или фуксинсернистой кислотой. Для подтверждения присутствия 1Ч-метилглюка-мина в субстанции Фотодитазина был использован метод тонкослойной хроматографии на пластинках Клеэе^е! 60 Р254 (“Мегск”, Германия). Следует подчеркнуть, что молекула N-метилглюкамина содержит 5 свободных гидроксильных групп, вследствие чего чрезвычайно склонна к адсорбции и остается на старте пластины при хроматографии в системах, обычно используемых для ТСХ порфиринов. Нами экспериментально подобрана полярная система растворителей: спирт этиловый 96 %-ный - аммиак водный (7:3), в которой пятно Т4-метилглюкамина поднимается со старта. Ы-метилглюкамин обнаруживается при обработке высушенной пластинки аммиачным раствором серебра нитрата с последующим нагреванием её в течение 20 мин при 100 °С. >Т-метилглюкамин проявляется в виде четкого темно-коричневого пятна с около 0,13. Открываемый минимум 5x10 8 г.
№2/томЗ/2004 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
