CC BY
7
УДК: 615.32:582.542.1:633.87 DOI: 10.15587/2313-8416.2016.59254
Ф1ТОЗАС1Б НА ОСНОВ1 СИРОВИНИ РОСЛИН РОДИНИ ЗЛАКОВ1 © I. С. Бурлака, G. В. Дьомiна, В. С. Кисличенко, З. I. Омельченко
Цiлющi властивостi лтарських рослин обумовленi наявнiстю в ïx CKnadi бiологiчно активних речовин (БАР), як в органiзмi людини зумовлюють певний терапевтичний ефект. До таких перспективних культур належать куничник звичайний - Calamagrostis epigeios (L.) Roth. та щучник дернистий - Des-champsia cаespitosa (L.) P. Beauv. родини злаковi - Poaceae Barnh., яю досить широко розповсюдженi на територи Украти та крат СНД.
Мета. Метою нашо'1 роботи було розробка способу одержання настойки куничника звичайного трави та щучника дернистого трави, ïï стандартизацiя та визначення фармакологiчноï активностi. Методи. Попереднiми до^дженнями були визначенi технологтт параметри сировини, iдентифiкацiя груп БАР проводилася за допомогою яюсних реакцш та методу тонкошарово'1 хроматографа' (ТШХ). Для кшьюсного визначення флавоно'1^в та гiдроксикоричниx кислот застосовували спектрофотомет-ричний метод, фармакологiчну активтсть вивчали класичними бiологiчним методами. Результати. В результатi роботи було обтрунтовано метод одержання настойки куничника звичайного трави та щучника дернистого трави, стандартизовано настойку та визначено ïï гостру токсич-тсть, дiуретичну та протизапальну дт.
Висновки. Розроблено технологю одержання настойки куничника звичайного трави та щучника дернистого трави i визначенi оптимальт параметри екстракцИ' сировини. У вiдповiдностi до вимог ДФУ, ро-зробленi параметри стандартизацИ' отриманого фтозасобу. Для розробленого фiтозасобу експери-ментально було визначено гостру токсичнкть, дiуретичну та протизапальну активтсть Ключовi слова: куничника звичайного трава, щучника дернистого трава, настойка, стандартизацiя, фармакологiчна дiя
The healing properties of medicinal plants are conditioned by biologically active substances (BAS) in their composition, which in humans cause some therapeutic effect. These promising crops are Reedgrass - Calamagrostis epigeios (L.) Roth. and Tufted hairgrass - Deschampsia caespitosa (L.) P. Beauv., family cereals - Poaceae Barnh., which are widely distributed in Ukraine and CIS countries.
Aim. The aim of our study was to develop a method of making tincture of Reedgrass and , Tufted hairgrass standardization and definition of pharmacological activity.
Methods. Technological parameters of raw material were identified, BAS group identification was made using a qualitative method of reactions and thin layer chromatography (TLC). Flavonoids and hydroxycinnamic acids quantitative determination was carried out by spectroscopy method; pharmacological activity by biological methods was performed.
Results. Method of obtaining the tincture of Reedgrass and Tufted hairgrass was substantiated, tincture was standardized and ifs acute toxicity, diuretic and anti-inflammatory activities were defined as a result of the study.
Conclusion. Method for obtaining of Reedgrass and Tufted hairgrass tincture was developed, and optimal parameters for extraction of herbal material were determined. Standardization parameters of the obtained phyto-therapeutic remedy were developed according to the SPU requirements. Acute toxicity, diuretic and antiinflammatory activities of the developed phytotherapeutic remedy were determined experimentally Keywords: Reedgrass, Tufted hairgrass, tincture, standardization, pharmacological activity
1. Вступ
Хрошчт патологи, початкова стадш захво-рювання, перюд peMiciï, профшактика - у вах цих випадках перевагу вщдають фггозасобам, дiя яких ро-звиваеться поступово, пов№но, але дуже коректно стосовно живоï клпини, оргашзму. Куничник звичайний i щучник дернистий - дикоросл рослини флори Украни родини злаковi (Poaceae), хiмiчний склад трави яких досить piзноманiтний i мютить полюахариди, амшо- та каpбоновi кислоти, фенольт сполуки, вгтамши, макро-, мшроелементи, речовини лшофшь-но1 природи, тгменти тощо. Цштстъ цих рослин по-лягае ще й в тому, що вони мають достатню сировин-ну базу в Укрш'ш i можуть застосовуватися при iм-портозамщенш сировини i фггопрепарапв [1-10].
2. Постановка проблеми у загальному ви-гляд1, актуальшсть теми та ïï зв'язок з важливими науковими чи практичними питаннями
В Укрш'ш i куничник звичайний, i щучник дернистий е рослинами неофщшальними. Тому з метою розробки нацюнальних специфшацш якосп, встановлення стандарпв на лшарську рослинну сиро-вину (ЛРС) з достатньою сировинною базою в Укра-rni, на лшарсьш засоби рослинного походження з не].', а також з метою забезпечення яшсного контролю сировини i фiтозасобiв, е актуальним i доцшьним розробка способу одержання настойки куничника звичайного трави та щучника дернистого трави, стандартиза^ ïï та визначення фармаколопчно. ак-тивносп [11, 12].
3. Ана^з останнiх досл1джень i публiкацiй
Анал1з лггературних даних показав, що види куничника 1 щучника здавна застосовувалися народною медициною як д!уретичний, антисептичний за-аб - при асциту дизури, гоноре!, захворюваннях ор-гашв дихання. ЛРС проявляе також фунпстатичну актившсть [7, 10, 13, 14].
Впчизняною промисловктю випускаеться про-тив1русний препарат «Протефлазид», до складу якого входять куничника звичайного трава (500 г/1000 мл) 1 щучника дернистого трава (500 г/1000 мл). Препарат застосовуеться як против1русний зааб для л1кування в1русних шфекцш, викликаних в1русом простого герпесу першого та другого тишв, опер1зуючого герпесу, у комплексному лшувант гепатипв В 1 С, СН1ДУ. 1му-нофармаколопчт дослвдження препарату «Протефлазид», яш були проведет на культур! клтин людини, показали, що препарат е активатором продукци гама-!нтерферону, виступае !нг!б!тором прозапального цито-к!ну ! знижуе апоптозозалежн!сть л!мфоципв. Також в!тчизняною промислов!стю випускаються сиропи «Флавозид» ! «1мунофлазид» для застосування у пе-д!атричн!й практиц!. На баз! Льв!вського нац!онального медичного ушверситету ¡мен! Данила Галицького про-водилися дослвдження по опрадюванню складу, технолог!!' та дослвдження ваг!нальних супозиторив про-тив!русно! д!!' з «Протефлазидом» [15].
4. Видiлення не виршених ршише частин загальноТ проблеми
Препарати, представлен! на фармацевтичному ринку Укра!ни, до складу яких входять дослвджуват види ЛРС, застосовуються як против!руст засоби. Проте наявн!сть р!зноман!тних клаав БАР можуть обумовлювати й шш1 види фармаколог!чно! д!! рос-линно! сировини та засоб!в, розроблених на Г! основ!. Тому перспективним в даному аспект! е розробка фгтозасобу на основ! куничника звичайного трави ! щучника дернистого трави з р!зним спрямуванням фармаколог!чно! д1!.
5. Формулювання мети (задач) статтi
Метою роботи було розробка технолог!! одер-
жання ф!тозасобу на основ! куничника звичайного трави ! щучника дернистого трави, його стандартиза-ц!я та вивчення фармаколопчно! активност!.
Для досягнення поставлено! мети необхвдно було виршити так! задач!:
- розробити технологш одержання ф!тозасобу з досл!джуваних вид!в ЛРС, визначити параметри стандартизацп розробленого фпозаабу;
- п!дтвердити перспективн!сть створення но-вих л!карських засоб!в з сировини, що дослвджува-лась, шляхом вивчення фармаколопчно! активност! дослвджуваних обекпв.
6. Виклад основного матерiалу дослвдження (методiв i об'eктiв) з обгрунтуванням отриманих результатiв
Обектом дослвдження стали куничника зви-чайного трава, щучника дернистого трава, настойка на основ! цих вид!в ЛРС. Попередшми дослвдження-
ми було визначено наявшсть основних груп БАР ! обран! основн! параметри стандартизац!! сировини. 1дентиф!кац!я ЛРС проводилася за макро-, мжро-скоп!чними ознаками, наявн!стю пол!сахарид!в ! ре-човин фенольно! природи, стандартизац!я за вмютом пол!сахарид!в ! флавонощв. На наступному етап! досл!джень було визначено технолопчш параметри сировини, як! були враховаш при одержанн! фгтоза-собу [11, 16, 17].
При виробницта настойки загальноприйнятим сп!вв!дношенням сировина-екстрагент е 1:5 або 1:10, але !нод! бувають ! виключення. Нами було експери-ментально доведено, що для одержання ф!тозасобу оптимальним сп!вв!дношенням сировина-екстрагент було 1:10 та тривалють настоювання протягом 3 д!б.
Одержання настойки. Зважували по 125,00 г ку-ничника звичайного трави та щучника дернистого трави, подабнено! до розм!ру часток, як! проходили кр!зь сито з даметром отвор!в 3-5 мм. У змшувач додавали таку квдьшсть 40 % етанолу (з урахуванням коеф!ц!енту поглинання екстрагенту сировиною 4,25), щоб об'ем витяжки при першому зливанн! був 1250 мл. Через добу витяжку повтстю зливали, а сировину заливали свшим екстрагентом ! п!сля настоювання протягом доби отри-мували другий злив (625 мл). Аналог!чно отримували трет!й злив (625 мл). Ус! зливи об'еднували, ввдстоюва-ли при температур! 8 °С та декантували. Настойку роз-ливали у флакони з темного скла по 100 мл.
Стандартизащя настойки. З метою стандартизац!! настойки куничника звичайного трави та щучника дернистого трави ! розробки методик контролю якосп (МКЯ) визначали ряд числових показнишв на 5 сер!ях настойки [18].
Опис. Настойка - однорвдна прозора р!дина без сторонн!х включень коричневого кольору з прием-ним запахом ! г!ркуватим смаком.
1дентифка^я. Фенольт сполуки. До 3 мл настойки додавали дешлька крапель 1 % розчину феруму (III) хлориду - утворювалося темно-зелене забарвлення.
Полюахариди. 5 мл настойки упарювали до 2 мл ! додавали трикратну шлькють 96 % етанолу. Утворювався аморфний осад.
Важк метали. Визначення проводили за методикою, наведеною у ДФУ. Вм!ст важких метал!в не б!льше 0,001 %.
Вiдносна густина. Визначення проводили за методикою, наведеною у ДФУ. Ввдносна густина повинна бути не бвдьше 1,0 г/см3.
Сухий залишок. Визначали за методикою, на-веденою у ДФУ. Сухий залишок повинен бути не менше 0,5 %.
Вмiст етанолу. Визначали за методикою, наведеною у ДФУ. Вмют етанолу повинен бути не менше 35 %.
Юльюсний вмкт. Встановлення юльшсного вмюту флавонощв проводили спектрофотометричним методом, у перерахунку на лютеол!н-7-глюкозид: не менше 0,05±0,002 %. Визначення вм!сту суми гвдрок-сикоричних кислот проводили спектрофотометричним методом, у перерахунку на хлорогенову кислоту: не менше 0,06±0,002 %.
pH. pH настойки повинно бути в межах 5,6-5,9.
Дослвдження фармакололчно! активносп настойки куничника звичайного трави та щучника дернистого трави проводилися на баз1 Проблемно! лабора-торй' морфофункцюнальних дослвджень кафедри бюлоги, ф1з1олог11 та анатомй' людини Нацюнального фармацевтичного ушверситету (атестат акредитаци № 2Н502) та складалося з визначення гостро1 токсичности д1уретично1 та протизапально1 ди. Вивчення гостро1 токсичносп проводили експрес-методом визначення середньолетальних доз х1м1чних речовин за методом Т.В. Пастушенко [19]. Дана доза, згтдно пе-рерахунку на сух1 активн речовини, ввдповвдала доз1, яка бвдьша за 10000 мг/кг за класифшащею К. К. Сидорова, що дозволило ввднести цю субстанцш до практично нетоксичних сполук. Д1уретична i протиза-пальна актившсть настойки перевищувала дш рефе-ренс-препарату «Нефрофп».
Таким чином, експериментально доведено перспективнiсть застосування куничника звичайного трави i щучника дернистого трави при створенш но-вих фггопрепарапв на 1х основi.
7. Висновки
Аналiз лiтературних даних сввдчить про те, що трава куничника звичайного i трава щучника дернистого використовуються народною та науковою медициною для лшування рiзних захворювань. На фарма-цевтичному ринку Украши представленi впчизняш препарати «Протефлазид», «Флавозид» i «1мунофла-зид», як1 застосовуються як противiруснi засоби.
Розроблено технологш одержання настойки куничника звичайного трави та щучника дернистого трави i визначеш оптимальнi параметри екстракцп сировини. У вiдповiдностi до вимог ДФУ, розроблеш параметри стандартизацп отриманого фiтозасобу.
Для розробленого фггозасобу експерименталь-но було визначено гостру токсичнiсть, дiуретичну та протизапальну актившсть, що пвдтверджено патентом Украши на корисну модель № 75786 ввд 10.12.2012 «Лiкарський засiб дiуретичноï та протиза-пально1 дiï».
Лггература
1. Беффа, М. Т. Лекарственные растения [Текст] / М. Т. Беффа. - М.: АСТ Астрель, 2005. - 255 с.
2. Бурлака, I. С. Амшокислотний та мшеральний склад трави Calamagrostis epigeios (L.) Roth. та трави Deschampsia caespitosa (L.) P. Beauv. Вип. 20 [Текст]: зб. наук. пр. / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко, В. В. Вельма. -К., 2011. - С. 476-481.
3. Бурлака, I. С. Дослвдження лшофшьних фракцш трави куничника звичайного та щучника дернистого [Текст] / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко // Украшський медичний альманах. - 2011. - Т. 14, № 2. - С. 38-39.
4. Бурлака, I. С. Дослвдження полюахаридш та ор-гашчних кислот трави куничника звичайного та щучника дернистого [Текст] / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко, В. В. Поздняков // Украшський медичний альманах. - 2011. -Т. 14, № 3. - С. 50-52.
5. Бурлака, I. С. Шгмеши трави щучника дернистого i трави куничника звичайного [Текст] / I. С. Бурлака,
B. С. Кисличенко // Украшський журнал клшчно! та лабо-раторно! медицини. - 2012. - Т. 7, № 2. - С. 14-16.
6. Верещагин, Л. Н. Атлас сорных, лекарственных и медоносных растений [Текст] / Л. Н. Верещагин. - К.: Юнивест маркетинг, 2002. - С. 50-51.
7. Вульф, Е. В. Мировые ресурсы полезных растений. Пищевые, кормовые, технические, лекарственные и другие [Текст]: справочник / Е. В. Вульф, О. Ф. Малеева. -Л.: Наука, 1969. - С. 30-31.
8. Гулько, Р. Словник лжарських рослин свггово! медицини. Латинсько - украшсько - росшсько - англшсь-кий [Текст] / Р. Гулько. - Л^в: Лгга-Прес, 2005. - 506 с.
9. Прокудин, Ю. Н. Злаки Украины [Текст]: мо-ногр. / Ю. Н. Прокудин, А. Г. Вовк, О. А. Петрова и др. -К.: Наук. думка, 1977. - 518 с.
10. Растительные ресурсы России и сопредельных государств. Цветковые растения, их химический состав, использование. Семейства Butomaceae - Typhaceae [Текст] / ред. П. Д. Соколов. - СПб.: Наука, 1994. - 271 с.
11. Бурлака, I. С. Деяю параметри стандартизацп трави куничника звичайного [Текст]: мат. II наук. -практ. конф / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко. - Х., 2011. - С. 29-30.
12. Бурлака, I. С. Дикоро^ злаки Украши - пер-спективш джерела одержання фгтопрепаратав [Текст]: наук. -практ. конф. / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко. -Фармацевтична наука: юторичш аспекти формування та шляхи вдосконалення. - Луганськ, 2010. - С. 110.
13. Бурлака, I. С. Пошук нових перспективних рос-лин - джерел лжарських препарапв [Текст]: конф. / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко. - Молодь - медицин май-бутнього. - Одесса: Одес. держ. мед. ун-т, 2010. - С. 82-83.
14. Бурлака, I. С. Щучник дернистий - нове джерело фитопрепарата. Т. 1 [Текст] / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко. -Фармацш Украши. Погляд у майбутне. - Х., 2010. - С. 225.
15. Зейдо, Ф. Протефлазид в комплексном лечении вирусных инфекций [Текст] / Ф. Зейдо, Б. Д. Луцик,
C. А. Сорокивська // International Journal on Immuno rehabilitation. - 2004. - Т. 6, № 1. - С. 108-109.
16. Бурлака, I. С. Макро- i мжроскотчне дослвдження трави щучника дернистого (Deschampsia caespitosa (L.) Roth.) [Текст] / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко // Украшський медичний альманах. - 2012. - Т. 15, № 1. - С. 33-35.
17. Бурлака, I. С. Оцшка доброяюсносл трави щучника дернистого [Текст]: наук.-практ. конф. / I. С. Бурлака, В. С. Кисличенко. - Науково-техшчний прогрес i оп-тимiзацiя технолопчних процеив створення лжарських засобiв. - Тернопшь, 2011. - С. 30-31.
18. Державна фармакопея Украши [Текст]. - Дер-жавне тдприемство «Науково-експертний фармакопейний центр. - 1-е вид. - Харюв: РГРЕГ, 2001. - 556 с.
19. Доклшчш дослвдження лжарських засобiв [Текст] / за ред. О. В. Стефанова. - К.: Видавничий дiм "Авщенна", 2001. - 528 с.
References
1. Beffa, M. T. (2005). Lekarstvennye rastenija. Moscow: AST Astrel', 255.
2. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S., Vel'ma, V. V. (2011). Aminokyslotnyj ta mineral'nyj sklad travy Calamagrostis epigeios (L.) Roth. ta travy Deschampsia caespitosa (L.) P. Beauv. Issue 20. Kyiv, 476-481.
3. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2011). Dos-lidzhennja lipofil'nyh frakcij travy kunychnyka zvychajnogo
ta shhuchnyka dernystogo. Ukrai'ns'kyj medychnyj al'manah, 14 (2), 38-39.
4. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S., Pozdnjakov, V. V. (2011). Doslidzhennja polisaharydiv ta organichnyh kyslot travy kunychnyka zvychajnogo ta shhuchnyka dernystogo. Ukrai'ns'kyj medychnyj al'manah, 14 (3), 50-52.
5. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2012). Pigmenty travy shhuchnyka dernystogo i travy kunychnyka zvychajnogo. Ukrai'ns'kyj zhurnal klinichnoi' ta laboratornoi' medycyny, 7 (2), 14-16.
6. Vereshhagin, L. N. (2002). Atlas sornyh, lekarstven-nyh i medonosnyh rastenij. Kyiv: Junivest marketing, 50-51.
7. Vul'f, E. V., Maleeva, O. F. (1969). Mirovye resursy poleznyh rastenij. Pishhevye, kormovye, tehnicheskie, lekar-stvennye i drugie. Leningrad: Nauka, 30-31.
8. Gul'ko, R. (2005). Slovnyk likars'kyh roslyn svitovoi' medycyny. Latyns'ko - ukrai'ns'ko - rosijs'ko - anglijs'kyj. Lviv: Liga-Pres, 506.
9. Prokudin, Ju. N., Vovk, A. G., Petrova, O. A. et. al (1997). Zlaki Ukrainy. Kyiv: Nauk. dumka, 518.
10. Sokolov, P. D. (Ed.) (1994). Rastitel'nye resursy Rossii i sopredel'nyh gosudarstv. Cvetkovye rastenija, ih himicheskij sostav, ispol'zovanie. Semejstva Butomaceae -Typhaceae. Sankt-Peterburg: Nauka, 271.
11. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2011). Dejaki parametry standartyzacii' travy kunychnyka zvychajnogo. Kharkiv, 29-30.
12. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2010). Dy-korosli zlaky Ukrai'ny - perspektyvni dzherela oderzhannja fitopreparativ. Farmacevtychna nauka: istorychni aspekty for-muvannja ta shljahy vdoskonalennja. Lugansk, 110.
13. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2010). Poshuk no-vyh perspektyvnyh roslyn - dzherel likars'kyh preparativ. Molod' -medycyni majbutn'ogo. Odessa: Odes. derzh. med. un-t, 82-83.
14. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2010). Shhuch-nyk dernystyj - nove dzherelo fitopreparativ. Vol. 1. Farmacija Ukrai'ny. Pogljad u majbutnje. Kharkiv, 225.
15. Zejdo, F., Lucik, B. D., Sorokivs'ka, S. A. (2004). Proteflazid v kompleksnom lechenii virusnyh infekcij. International Journal on Immuno rehabilitation, 6 (1), 108-109.
16. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2012). Makro- i mikroskopichne doslidzhennja travy shhuchnyka dernystogo (Deschampsia caespitosa (L.) Roth.). Ukrai'ns'kyj medychnyj al'manah, 15 (1), 33-35.
17. Burlaka, I. S., Kyslychenko, V. S. (2011). Ocinka dobrojakisnosti travy shhuchnyka dernystogo. Naukovo-tehni-chnyj progres i optymizacija tehnologichnyh procesiv stvorenn-ja likars'kyh zasobiv. Ternopol, 30-31.
18. Derzhavna farmakopeja Ukrai'ny (2001). Derzhav-ne pidpryjemstvo «Naukovo-ekspertnyj farmakopejnyj centr. Kharkiv: RIREG, 556.
19. Stefanova, O. V. (Ed.) (2001). Doklinichni doslidzhennja likars'kyh zasobiv. Kyiv: Vydavnychyj dim "Avicen-na", 528.
Дата надходження рукопису 28.12.2015
Бурлака 1рина Сергп'вма, кандидат фармацевтичних наук, кафедра бюлогп, Нацюнальний фармацев-тичний ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харкав, Украша, 61002 E-mail: [email protected]
Дьомiна Свгешя В1кч ор1вма. кандидат медичних наук, кафедра бюлогп, Нацюнальний фармацевтичний ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Украша, 61002 E-mail: [email protected]
Кисличенко Вiкторiя Сергп'вма, доктор фармацевтичних наук, професор, кафедра х1ми природних спо-лук, Нацюнальний фармацевтичний ушверситет,вул. Пушк1нська, 53, м. Харшв, Украша, 61002 E-mail: [email protected]
Омельчемко 3iMaifla L^apioHiBHa, кандидат фармацевтичних наук, доцент, кафедра х1мп природних сполук, Нацюнальний фармацевтичний ушверситет, вул. Пушк1нська, 53, м. Харшв, Украша, 61002 E-mail: [email protected]
