РОЗРОБКА МЕТОДИКИ КіЛЬКіСНОГО ВИЗНАЧЕННЯ ДИГіДРОКВЕРЦЕТИНУ. ПОВіДОМЛЕННЯ 1 Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

УДК: 543.062:543.422.7:615.225.3 DOI: 10.15587/2313-8416.2016.59243

РОЗРОБКА МЕТОДИКИ К1ЛЬК1СНОГО ВИЗНАЧЕННЯ ДИГ1ДРОКВЕРЦЕТИНУ. ПОВ1ДОМЛЕННЯ 1

© О. Ю. Владимиров, О. А. Здорик, В. А. Георпянц, Г.О. Бур'ян, А. I. Абу Шарк, Л. О. Петрушова, Т. В. Алексеева, I. А. Данилова, В. В. Гриненко

На сьогоднi помтно зростае науковий ттерес до вивчення флавоно'Шв в рослинних об'ектах, що пов'я-зано з гх високою бiологiчною активнктю. У зв'язку з цим актуальним завданням аналтичног xiMii е ро-зробка доступних аналiтичних методик визначення флавоноШв в рослинних об'ектах. Мета. Метою роботи була розробка специфiчног методики юльюсного визначення дигiдрокверцетину i визначення гг валiдацiйних характеристик.

Методи. Розроблена фотоколориметрична методика юльюсного визначення ДКВ, яка базувалась на специфiчнiй реакцИ утворення цiанiдинхлориду при додаваннi до розчину дигiдрокверцетину цинкового порошку у кислому середовищi.

Результати. Розроблено фотоколориметричну методику визначення флавоно 'Шв в перерахунку на ДКВ, визначенi гг основнi валiдацiйнi характеристики. Отриманг метрологгчнг характеристики фотоколори-метричног методики визначення ДКВ не перевищували критергг прийнятностг вгдповгдно до вимог Дер-жавног фармакопег Украгни.

Висновки. За результатами статистичног обробки експериментальних даних встановлено, що розроблена методика може бути використана для кшьюсного визначення ДКВ. Отримат метрологiчнi даннi свiдчать, що методика вiдтворювалась в умовах двох ргзних лабораторш, з довiрчою вiрогiднiстю 95 % вiдхилення одиничного значення складало 101,85±2,54 %

Ключовi слова: фотоколориметричний метод, юльюсне визначення, валiдацiйнi характеристики, Державна фармакопея Украгни, дигiдрокверцетин

Today is markedly increasing scientific interest in the study of flavonoids in plant objects due to their high biological activity. In this regard, the urgent task of analytical chemistry is in developing available analytical techniques of determination for flavonoids in plant objects.

Aim. The aim was to develop specific techniques of quantitative determination for dihydroquercetin and determination of its validation characteristics.

Methods. The technique for photocolorimetric quantification of DQW, which was based on the specific reaction of cyanidine chloride formation when added zinc powder to dihydroquercetin solution in an acidic medium has been elaborated.

Results. Photocolorimetric technique of determining flavonoids recalculating on DQW has been developed, its basic validation characteristics have been determined. The obtained metrological characteristics of photocolorimetric technique for determining DQW did not exceed admissibility criteria in accordance with the requirements of the State Pharmacopoeia of Ukraine.

Conclusions. By the results of statistical analysis of experimental data, it has been stated that the developed technique can be used for quantification of DQW. Metrological data obtained indicate that the method reproduced in conditions of two different laboratories with confidence probability 95 % unit value deviation was 101,85±2,54 %

Keywords: photocolorimetric method, quantitative determination, validation characteristics, the State Pharmacopoeia of Ukraine, dihydroquercetin

1. Вступ

Захисна роль пол1фенол1в i бюфлавонощв обумовлена ix антиоксидантними властивостями. KpiM того, деяш бюфлавоно1ди мають антибактеpiа-льш i фунпцидш (протигрибков^ властивосл. В xодi лабораторних i ещдемюлопчних дослвджень було доведено, що флавоно1ди мають щнт xiмiчнi, бюло-пчш i бiоxiмiчнi якосп, важливi для захисту здоров'я i запобтання захворюванням.

Флавоно1ди впливають на дiяльнiсть багатьох ферменпв i переб^ бiоxiмiчниx процеав, тому ix застосування мае комплексний вплив на весь орга-шзм. Сьогодш флавоно1двмкна лшарська рослинна сировина i препарати на ii основi використовують як у традицшнш, так i народнш медицин [1-3].

2. Постановка проблеми у загальному ви-гляд1, актуальшсть теми та ТТ зв'язок i3 важливи-ми науковими чи практичними питаннями

На сьогодш помггно зростае науковий штерес до вивчення флавонощв в рослинних об'ектах, що пов'язано з ix високою бюлопчною актившстю. Фла-воно1ди застосовують у склащ профшактичних i m-кувальних засобiв, а також функцюнальних харчових продуктах [4-6].

3. Аналiз останшх дослщжень i публшацш, в яких започатковано розв'язання даноТ проблеми i на як спираеться автор

Вiдомi спектрофотометричш методики визначення вмюту флавонощв, заснованi на pеакцiяx

утворення комплекйв з iонами алюшшю або залiза (III), обмежено придатш для виконання масових ана-лiзiв, оск1льки лежать в ix основi фотометричнi реак-цй' е кшетично уповiльненими [7-10].

5. Формулювання цшей (завдання) статтi

Метою роботи була розробка специф!чно! методики кшькюного визначення ДКВ 1 визначення и валвдацшних характеристик.

4. Видiлення мевир1шеми\ рашше частин загальноТ проблеми, якiй присвячена стаття

У зв'язку з цим актуальним завданням аналгти-чно! х1мИ е розробка методик визначення флавонощв в рослинних об'ектах. При цьому для фармацевтич-них лабораторш найб1льший штерес являють методики, засноваш на принципах широкодоступних ана-лгтичних метод1в, зокрема фотоколориметричного методу.

6. Виклад основного матерiалу дослвдження (методiв та об'eктiв) з обгрунтуванням отриманих результатiв

Розробка фотоколориметрично! методики кшькюного визначення ДКВ базувалась на специф!чнш реакци утворення щашдинхлориду при додаванш до розчину ДКВ цинкового порошку у кислому середовищ1, за до-помогою яко! можна в1др1знити ДКВ в1д шших БАР (рис. 1) [7, 11].

ЮН

ОН

НО

НО

\ }-ОН Zn, HCl

ОН

О ОН

Рис. 1. Специфiчна реакщя утворення цiанiдинxлориду

ОН

Методика ктьтсного визначення. У колбу на 25 мл ввдвшували 0.40 г цинкового пилу, попм вносили 10.0 мл модельного розчину ДКВ, перем1шува-ли та додавали 2.0 мл розчину сумш1 кислот (сумш концентровано! хлористоводнево! кислоти, льодяно! оцтово! кислоти та води у сшввщношенш 3:3:1 (об.%)). Не перемшуючи, колбу помщали на водяну баню (50 °С) 1 витримували 1 хв, тсля чого виймали 1 штенсивно струшували 1 хв. Розчин ввдстоювали протягом 3 хв, попм вмют колби декантували у про-б1рку 1 через 2 хв фотометрували при 550 нм. Як розчин пор1вняння використовували розчин, що мютив 2.0 мл сумш1 кислот 1 10.0 мл спирту етилового 96 %. Паралельно проводили вим1рювання погли-нання розчину робочого стандартного зразка ДКВ аналопчно за методикою. Вим1рювання оптичних густин анал1тичних розчишв 1 розчину робочого стандартного зразка проводили з використанням кювети з товщиною шару 3 см при температур! (20±2) °С за одних 1 тих самих умов з мшмальним штервалом у чай. Розрахунок вмюту ДКВ у г/мл здшснювали за формулою для методу стандарту.

Приготування модельних розните ДКВ. Готу-вали п'ять модельних розчишв ДКВ у спирт етило-вому 96 % наступних концентрацш 110-5, 2 10-5, 3 10-5, 4 10-5, 5 10-5 г/мл. Для кожного з розведень вим1рювання оптично! густини проводили трич1 за методикою наведеною вище, таким чином сумарна кшькють випробувань становила п=15.

Розчин робочого стандартного зразка ДКВ: 0.3000 г ДКВ помщали у м1рну колбу мюткютю 100 мл, додавали 70 мл спирту етилового 96 %, тсля повного розчинення доводили об'ем до мггки та зно-ву перемшували. 1 мл отриманого розчину помщали у м1рну колбу мюткютю 100 мл та доводили об'ем до мгтки тим самим розчинником.

Розчин сумгш! кислот: сумш концентровано! хлористоводнево! кислоти, льодяно! оцтово! кислоти та води у сшввщношенш 3:3:1 (об.%).

Основш завдання, яш виршувалися при роз-робщ методики к1льк1сного визначення ДКВ:

- визначення умов перебну реакци;

- пвдб1р розчинника, сшввщношень реактив1в та створення рН середовища, як1 б давали змогу ста-бшзувати забарвлення аналггачних розчишв;

- виб1р аналтгачно! довжини хвил1.

Експериментально було встановлено, що при

вщновленш ДКВ цинковим порошком в середовищ1 концентровано! хлористоводнево! кислоти, стабшь-н!сть щанвдинхлориду незначна. При використанш сум!ш! розведено! хлористоводнево! та льодяно! оцтово! кислоти у сшввщношенш 1:1 (об.%) стшкють продукту реакци дещо зб1льшувалась, але не пере-вищувала 5 хв. Вщновлення спиртового розчину ДКВ в ацетон! 10 % хлористоводневою кислотою призводило до появи забарвлення тшьки через 60 хв. Оптимальним вар!антом виявилося в!дновлення ДКВ цинковим порошком та сумшшю, що складалася !з концентровано! хлористоводнево! кислоти, льодяно! оцтово! кислоти та води у сшвввдношенш 3:3:1 (об.%). Маса цинкового порошку (0,4 г), що викорис-тана для ввдновлення, була визначена, виходячи з достатньо! !! к1лькост! для в!дновлення ДКВ ! суттево не впливала на утворення забарвленого продукту. Максимум поглинання продукту вщновлення ДКВ спостер!гався при 550 нм, спектр поглинання представлений на рис. 2. Слщ зазначити, що спиртовий розчин ДКВ у д1апазош 500-600 нм не поглинав, що було доведено вщтворенням дослщу для розчину робочого стандарту за методикою без додавання цинкового порошку - аыш4=0,001; оптична густина ро-бочого стандартного зразку за методикою арсз=

=0,372, отже 5еХс=100 % 0,001/0,372=0,27 %, що тдт-верджувало специф!чнють методики.

В якосл розчинник1в були випробуваш ацетон, спирт етиловий 96 % та водно -спиртов! розчини, ДКВ добре розчинявся в уйх !з вказаних, однак за результатами дослщжень, стаб!льн!сть оптично! гус-тини у час! ввдр!знялась.

Розчинення ДКВ в ацетон!, водно-спиртових розчинах та подальше проведения х!м!чно! реакц!! приводило до появи малинового забарвлення розчи-ну, але штенсивнють забарвлення !, вщповвдно, оп-тична густина були нестабшьними. Оптимальним розчинником ДКВ для проведення колориметрично! реакц!! виявився спирт етиловий 96 %. Отриманий в результат! реакц!! продукт ввдновлення мав достатне забарвлення та стаб!льн!сть у час! (табл. 1).

За результатами визначення стабшьносп бу-ло встановлено, що за даною методикою бшьш точш результати можна отримати при фотометру-ваннi аналiтичних розчинiв через 15 хв шсля дека-нтування.

Використовуючи шдхвд одночасного визначення валщацшних характеристик, правильнiсть,

АН

0 1111........................................................ А,'НМ»|

490 500 510 520 530 540 550 560 570 580 590 600 610

Рис. 2. Спектр поглинання продукту вщновлення ДКВ

Таблиця 1

лшшнють та збiжнiсть визначали за отриманими результатами для 15 проб модельних зразшв рiзних концентрацiй. Вивчення валвдацшних характеристик методики проводили у концентрацшному дiапазонi 110"5-5 10"5 г/мл (табл. 2-7). Дослщження впливу мiжлабораторних варiацiй ^зне обладнання, рiзнi аналiтики) проводили у двох рiзних лабораторiях.

Таблиця 2

Розрахунок правильносп i прецизiйностi методики визначення кшькюного вмiсту флавоноiдiв в перерахунку на __ДКВ (лаборат^я 1)___

№ модельного розчину Розведення, г/мл Введено Xi, % Оптична густина At Знайдено Yi, % Zi, %

1 0,0001 33,33 0,120 32,44 97,32

2 0,0001 33,33 0,122 32,98 98,95

3 0,0001 33,33 0,121 32,71 98,13

4 0,0002 66,67 0,254 68,67 103,00

5 0,0002 66,67 0,253 68,40 102,60

6 0,0002 66,67 0,251 67,86 101,78

7 0,0003 100,00 0,370 100,03 100,03

8 0,0003 100,00 0,372 100,57 100,57

9 0,0003 100,00 0,373 100,84 100,84

10 0,0004 133,33 0,502 135,71 101,78

11 0,0004 133,33 0,504 136,25 102,19

12 0,0004 133,33 0,501 135,44 101,58

13 0,0005 166,67 0,628 169,78 101,87

14 0,0005 166,67 0,628 169,78 101,87

15 0,0005 166,67 0,627 169,51 101,70

середне Z, % 100,95

ввдносне стандартне вщхилення, Sz, % 1,66

ввдносний довiрчий iнтервал Az, % 2,92

систематична похибка 5, % 0,95

Дослвдження оптично!.' густини в часi

Р-н ДКВ Час дослвдження, хв. / Ai А -^сер. RSDt,% At,%

0 15 30 45 60

2,0х10-5 г/мл 0,310 0,309 0,307 0,305 0,303 0,307 1,12 2,39

0,312 0,310 0,306 0,306 0,303

0,312 0,309 0,306 0,304 0,302

0,311 0,309 0,306 0,305 0,303

Таблиця 3

Розрахунок правильносл i прецизшносп методики визначення шльшсного вмюту

_флавоно1д1в в перерахунку на ДКВ (лабораторiя 2)__

№ модельного розчину Розведення, г/мл Введено Хъ % Оптична густи-на А; Знайдено Уъ % Zi, %

1 0,0001 33,33 0,123 33,25 99,76

2 0,0001 33,33 0,122 32,98 98,95

3 0,0001 33,33 0,125 33,79 101,38

4 0,0002 66,67 0,249 67,32 100,97

5 0,0002 66,67 0,249 67,32 100,97

6 0,0002 66,67 0,247 66,77 100,16

7 0,0003 100,00 0,375 101,38 101,38

8 0,0003 100,00 0,374 101,11 101,11

9 0,0003 100,00 0,375 101,38 101,38

10 0,0004 133,33 0,499 134,90 101,18

11 0,0004 133,33 0,498 134,63 100,97

12 0,0004 133,33 0,502 135,71 101,78

13 0,0005 166,67 0,624 168,69 101,22

14 0,0005 166,67 0,623 168,42 101,05

15 0,0005 166,67 0,625 168,96 101,38

середне Z, % 100,91

ввдносне стандартне вщхилення Sz, % 0,74

ввдносний довiрчий iнтервал Az, % 1,30

систематична похибка 5, % 0,91

Таблиця 4

Дат перевiрки лшшносп методики визначення кiлькiсного вмiсту флавоноедв в перерахунку на ДКВ

Валвдацшш характеристикики Лабораторiя 1 Лабораг^я 2

b 1,02 1,02

Sb % 0,0042 0,0019

a -1,04 -0,49

Sa, % 0,47 0,21

So, % 0,77 0,35

r 0,9999 1,0000

Таблиця 5

Даш перевiрки м1жлабораторно1 прецизшносп методики визначення кiлькiсного _вмюту флавоновдв в перерахунку на ДКВ__

№ модельного розчину Лабораторiя 1 Лабораторiя 2

1 97,32 99,76

2 98,95 98,95

3 98,13 101,38

4 103,00 100,97

5 102,60 100,97

6 101,78 100,16

7 100,03 101,38

8 100,57 101,11

9 100,84 101,38

10 101,78 101,18

11 102,19 100,97

12 101,58 101,78

13 101,87 101,22

14 101,87 101,05

15 101,70 101,38

середне, % 100,95 100,91

об'еднане середне Z, % 100,93

ввдносне стандартне ввдхилення Szl, % 1,66 0,74

ввдносний довiрчий штервал AZ, % 2,92 1,30

об'еднана середня систематична похибка 5, % 0,93

Taблиця 6

Пеpевipкa cтaбiльноcтi методики визтачення кiлькicного вмicтy флaвоноïдiв в _пеpеpaxyнкy нa ДKB (лaбоpaтоpiя 1) ___

Розчин Д^ теpмiн достижения cтaбiльноcтi nt, xв. / оитичта густита Ai Сеpеднe зтачення А RSDt, % At, %

0 15 30 45 60

2,0x10-5 г/мл 0,310 0,309 0,307 0,305 0,303 0,307 1,12 2,39

0,312 0,310 0,306 0,306 0,303

0,312 0,309 0,306 0,304 0,302

0,311 0,309 0,306 0,305 0,303

Taблиця 7 Пеpевipкa cтaбiльноcтi методики визтачення шлькюного вмюту флaвоноïдiв в пеpеpaxyнкy та даВ (лaбоpaтоpiя 2)

Розчин Д^ теpмiн до^^^ення cтaбiльноcтi nt, xв. / оитичта густита Ai Сеpеднe зтачення А RSDt, % At, %

0 15 30 45 60

2,0х10-5 г/мл 0,303 0,299 0,295 0,293 0,289 0,296 1,71 3,65

0,302 0,299 0,296 0,293 0,290

0,302 0,300 0,295 0,292 0,290

0,302 0,299 0,295 0,292 0,289

За результатами статистично1 обробки експе-риментальних даних встановлено, що розроблена методика може бути використана для кшьшсного визначення ДКВ. На значения стандартного в1дхи-лення та штервалу ненадшносп результапв анал1зу в значнш м1р1 вплинули результати першого модельного розчину (концентрац1я - Ы0-5 г/мл, A1=0,122, 0,118, 0,120), що не входило у рекомендован! рамки для оптично1 густини (0,2-0,8) [12, 13]. Взагал1 ж отримаш метролопчш данш сввдчать, що методика вщтворювалась в умовах двох р1зних лабораторш, з дов1рчою в1ропдшстю 95 % ввдхилення одиничного значення складало 101,85±2,54 %.

7. Висновки

Розроблено фотоколориметричну методику визначення флавонощв в перерахунку на ДКВ, ви-значеш ïï основш валвдацшш характеристики. Отри-манi метролопчш характеристики фотоколориметри-чноï методики визначення ДКВ не перевищували критерiï прийнятносп вiдповiдно до вимог ДФУ.

За результатами статистичноï обробки експе-риментальних даних встановлено, що розроблена методика може бути використана для кшьшсного визначення ДКВ.

Лггература

1. Galleano, M. Hypertension, nitric oxide, oxidants, and dietary plant polyphenols [Text] / M. Galleano, O. Pecha-nova, C. G. Fraga // Current pharmaceutical biotechnology. -2010. - Vol. 11, Issue 8. - Р. 837-848. doi: 10.2174/138920 110793262114

2. Przybylski, R. A review of nutritional and nutraceutical components of Buckwheat [Text] / R. Przybylski, E. Gruczynska // Eur. J. Plant Sci. Biotechnol. - 2009. - Vol. 3, Isuue 1. - Р. 1022. - Available at: http://www.globalsciencebooks.info/Online/ GSB0nline/images/0906/EJPSB_3(SI1)/EJPSB_3(SI1)10-22o.pdf

3. Cucciolla, V. Resveratrol: from basic science to the clinic [Text] / V. Cucciolla, A. Borriello, A. Oliva, P. Galletti, V. Zappia, F. D. Ragione // Cell Cycle. - 2007. - Vol. 6, Issue 20. - Р. 2495-2510. doi: 10.4161/cc.6.20.4815

4. Zielinska, D. Determination of the antioxidant activity of rutin and its contribution to the antioxidant capacity of

diversified buckwheat origin material by updated analytical strategies [Text] / D. Zielinska, D. Szawara-Nowak, H. Zielin-ski // Polish journal of food and nutrition sciences. - 2010. -Vol. 60, Issue 4. - Р. 315-321.

5. Крикова, А. В. Биологическая активность растительных источников флавоноидов [Текст] / А. В. Крикова и др. // Фармация. - 2006. - Т. 54, № 3. - C. 17-18.

6. Евдокимова, О. В. Препараты растительного происхождения при хронической венозной недостаточности [Текст] / О. В. Евдокимова // Новая аптека. - 2006. - № 4. -С. 11-12.

7. Еськин, А. П. Метод количественного фотометрического определения дигидрокверцетина [Текст] / А. П. Еськин, В. А. Левданский, Н. И. Полежаева // Химия растительного сырья. - 1998. - № 3. - С. 41-46.

8. Bagdonaite, E. Variation in concentrations of major bioactive compounds in Hypericum perforatum L. from Lithuania [Text] / E. Bagdonaite, P. Martonfi, M. Repcak, J. Labokas // Industrial Crops and Products. - 2012. - Vol. 35, Issue1. -P. 302-308. doi: 10.1016/j.indcrop.2011.07.018

9. Liu, B. Extraction of flavonoids from flavonoid-rich parts in tartary buckwheat and identification of the main flavonoids [Text] / B. Liu, Y. Zhu // Journal of Food Engineering. -2007. - Vol. 78, Issue 2. - P. 584-587. doi: 10.1016/j.jfoodeng. 2005.11.001

10. Бобков, Ю. Г. Общие методы анализа: Государственная фармакопея СССР. Вып. 1 [Текст] / Ю. Г. Бобков, Э. А. Бабаян и др. - изд.11-е, доп. - М.: «Медицина», 1987. - 336 с.

11. Владимиров, О. Ю. Розробка та стандартизащя профшактичних засобш на основi рослинних джерел ди-пдрокверцетину [Текст]: автореф. дис. ... канд. фарм. наук: 15.00.03 / О. Ю. Владимиров. - Харюв, 2015. - 24 с.

12. Державна Фармакопея Украши [Текст]. - Держ. п-во "Науково-експертний фармакопейний центр". - 1-е вид., 2 допов. - Х.: Р1РЕГ, 2008. - 617 с.

13. Свтафеева, О. А. Стандартизащя тдходш до ощнки якосл екстемпоральних лжарських засобiв [Текст]: автореф. дис. ... докт. фарм. наук. 15.00.02 / О. А. Свть феева. - Харюв, 2011. - 42 с.

References

1. Galleano, M., Pechanova, O., G. Fraga, C. (2010). Hypertension, Nitric Oxide, Oxidants, and Dietary Plant Polyphenols. Current Pharmaceutical Biotechnology, 11 (8), 837848. doi: 10.2174/138920110793262114

2. Przybylski, R., Gruczynska, E. (2009). A review of nutritional and nutraceutical components of Buckwheat. Eur. J. Plant Sci. Biotechnol., 3 (1), 10-22. Available at: http:// www.globalsciencebooks.info/Online/GSBOnline/images/0906 /EJPSB_3(SI1)/EJPSB_3(SI1)10-22o.pdf

3. Cucciolla, V., Borriello, A., Oliva, A., Galletti, P., Zap-pia, V., Ragione, F. D. (2007). Resveratrol: From Basic Science to the Clinic. Cell Cycle, 6 (20), 2495-2510. doi: 10.4161/cc.6.20.4815

4. Zielinska, D., Szawara-Nowak, D., Zielinski, H. (2010). Determination of the antioxidant activity of rutin and its contribution to the antioxidant capacity of diversified buckwheat origin material by updated analytical strategies. Polish journal of food and nutrition sciences, 60 (4), 315-321.

5. Krikova, A. V. et. al (2006). Biologicheskaja aktivnost' rastitel'nyh istochnikov flavonoidov. Farmacija, 54 (3), 17-18.

6. Evdokimova, O. V. (2006). Preparaty rastitel'nogo proishozhdenija pri hronicheskoj venoznoj nedostatochnosti. Novaja apteka, 4, 11-12.

7. Es'kin, A. P., Levdanskij, V. A., Polezhaeva, N. I. (1998). Metod kolichestvennogo fotometricheskogo opredeleni-ja digidrokvercetina. Himija rastitel'nogo syr'ja, 3, 41-46.

8. Bagdonaite, E., Martonfi, P., Repcak, M., Labo-kas, J. (2012). Variation in concentrations of major bioactive compounds in Hypericum perforatum L. from Lithuania. Industrial Crops and Products, 35 (1), 302-308. doi: 10.1016/ j.indcrop.2011.07.018

9. Liu, B., Zhu, Y. (2007). Extraction of flavonoids from flavonoid-rich parts in tartary buckwheat and identification of the main flavonoids. Journal of Food Engineering, 78 (2), 584-587. doi: 10.1016/j.jfoodeng.2005.11.001

10. Bobkov, Ju. G., Babajan, Je. A. et. al (1987). Ob-shhie metody analiza: Gosudarstvennaja farmakopeja SSSR. Issue 1. Moscow: «Medicina», 336.

11. Vladymyrov, O. Ju. (2015). Rozrobka ta standartyzacija profilaktychnyh zasobiv na osnovi roslynnyh dzherel dygidrokvercetynu. Kharkiv, 24.

12. Derzhavna Farmakopeja Ukrai'ny (2008). Derzh. p-vo "Naukovo-ekspertnyj farmakopejnyj centr". Kharkiv: RIREG, 617.

13. Jevtifjejeva, O. A. (2011). Standartyzacija pidho-div do ocinky jakosti ekstemporal'nyh likars'kyh zasobiv. Kharkiv, 42.

Дата надходження рукопису 21.12.2015

Владимиров Олександр Юршович, кандидат фармацевтичних наук, старший лаборант, кафедра якосп, стандартизацii та сертифiкацii лiкiв, Нацюнальний фармацевтичний унiверситет, вул. Пушк1нська, 53, м. Харшв, Украша, 61002 E-mail: [email protected]

Георпянц В1кчор1я Акоповна, доктор фармацевтичних наук, професор, заыдувач кафедри, кафедра фармацевтичноi хiмii, Нацiональний фармацевтичний Ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Украша, 61002

Бур'ян Ганна Олександрiвна, кандидат фармацевтичних наук, доцент, кафедра фармацевтично1' хiмп, Нацюнальний фармацевтичний Ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Укра1на, 61002 E-mail: [email protected]

Абу Шарк Амжад 1брапм, кандидат фармацевтичних наук, доцент, кафедра фармацевтичноi хiмii, На-цiональний фармацевтичний Ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Укра1на, 61002 E-mail: [email protected]

Петрушова Лiдiя Олександрiвна, кандидат фармацевтичних наук, доцент, кафедра фармацевтично1' хь ми, Нацiональний фармацевтичний Унiверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Украша, 61002 E-mail: [email protected]

Алексеева Тетяна Вiкторiвна, кандидат фармацевтичних наук, доцент, кафедра фармацевтично1' хiмii, Нацiональний фармацевтичний Унiверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Укра1на, 61002

Здорик Олександр Анатолшович, кандидат фармацевтичних наук, доцент, кафедра фармацевтично1' хь ми, Нацiональний фармацевтичний Ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Укра1на, 61002 E-mail: [email protected]

Гриненко Василь Васильович, доцент, кандидат фармацевтичних наук, кафедра фармацевтично1' хiмii, Нацюнальний фармацевтичний Ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Украша, 61002

Данилова 1рина Анатоливна, кандидат фармацевтичних наук, асистент, кафедра фармацевтично1' хiмii', Нацюнальний фармацевтичний ушверситет, вул. Пушшнська, 53, м. Харшв, Украша, 61002