CC BY
61
Медицинская иммунология Medical Immunology (Russia)/
2022, Т. 24, № ^ Оригинальные статьи Meditsinskaya Immunologiya
стр. 367-378 ^ , . . . . 2022, Vol. 24, No 2, pp. 367-378
© 2022, СПбРО РААКИ Original OVÍlCleS © 2022, SPb RAACI
ФЕНОТИПЫ ПОСТВАКЦИНАЛЬНОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ВАКЦИНЫ «ЭпиВакКорона» У ЛИЦ, ПЕРЕНЕСШИХ COVID-19
Сизякина Л.П.1, Андреева И.И.1, Харитонова М.В.1, Зайцева Н.С.1, Любимов Д.С.1, Закурская В.Я.1, Тотолян Арег А.2, 3
1ФГБОУВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Ростов-на-Дону, Россия
2 ФБУН«Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера», Санкт-Петербург, Россия
3 ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
Резюме. Создание надежной иммунологической прослойки — основополагающий фактор воздействия на неуклонное развитие пандемии COVID-19, где иммунопрофилактике принадлежат главенствующие позиции. Ввиду отсутствия четких данных о напряженности иммунитета после новой коронавирусной инфекции, для исключения возможности повторного вовлечения в эпидемический процесс переболевших, актуальной становится задача закрепления иммунологической памяти посредством вакцинации. Между тем, многие вопросы, связанные с вакцинацией лиц, перенесших новую коронавирусную инфекцию, в настоящее время не имеют однозначных ответов. Для изучения особенностей формирования иммунного ответа при использовании у переболевших COVID-19 вакцины на основе пептидных антигенов SARS-CoV-2 («ЭпиВакКорона») проведено наблюдение за 81 участником исследования. Критериями включения служили данные, подтверждающие COVID-19 в анамнезе (медицинская документация), низкий уровень либо отсутствие антител к нуклеокапсидно-му белку SARS-CoV-2, отрицательный результат ПЦР на наличие вируса SARS-CoV-2. По результатам оценки поствакцинального иммунитета (уровень специфических антител к антигенам пептидной вакцины) на 21-й день после введения первой дозы пациенты разделены на 2 группы: не ответившие и сформировавшие иммунный ответ. С целью выявления причин, лежащих в основе оппозитных фе-нотипических вариантов гуморального ответа на вакцинацию, проведен сопоставительный анализ изменений показателей В-лимфоцитов в соответствующих группах участников исследования. Методом проточной цитофлюориметрии определяли количество, субпопуляционный состав и актива-ционный потенциал В-лимфоцитов периферической крови, используя соответствующие монокло-нальные антитела с различным набором цветных меток производства Весктап Coulter. Результаты сопоставления показателей В-лимфоцитов переболевших до введения первой дозы вакцины показали, что у лиц, не ответивших на нее, меньшее число циркулирующих В памяти как в процентом, так и абсолютном исчислении, нежели в группе сравнения, так же как и показатель соотношения субпопуляций В1 и В2. Через 21 день после введения первой дозы, когда был зафиксирован оппозитный вари-
Адрес для переписки:
Сизякина Людмила Петровна
ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский
университет» Министерства здравоохранения РФ,
344022, Россия, г. Ростов-на-Дону,
пер. Нахичеванский, 29.
Тел.: 8 (863) 263-44-41.
E-mail: [email protected]
Address for correspondence:
Sizyakina Lyudmila P.
Rostov State Medical University
344022, Russian Federation, Rostov-on-Don,
Nakhichevansky lane, 29.
Phone: 7 (863) 263-44-41.
E-mail: [email protected]
Образец цитирования:
Л.П. Сизякина, И.И. Андреева, М.В. Харитонова, Н.С. Зайцева, Д.С. Любимов, В.Я. Закурская, Арег А. Тотолян «Фенотипы поствакцинального иммунитета при использовании вакцины "ЭпиВакКорона"у лиц, перенесших COVID-19» // Медицинская иммунология, 2022. Т. 24, № 2. С. 367-378. doi: 10.15789/1563-0625-РУ1-2457 © Сизякина Л.П. и соавт., 2022
For citation:
L.P. Sizyakina, I.I. Andreeva, M.V. Kharitonova,
N.S. Zaitseva, D.S. Lyubimov, V.Ya. Zakurskaya,
Areg A. Totolian "Post-vaccination immunityphenotypes upon
usage of EpiVacCorona vaccine in the persons who suffered
COVID-19", Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya
Immunologiya, 2022, Vol. 24, no. 2, pp. 367-378.
doi: 10.15789/1563-0625-PVI-2457
DOI: 10.15789/1563-0625-PVI-2457
ант антительного ответа на V1, отличия в параметрах В-лимфоцитов состояли в меньшем процентном и абсолютном количестве регуляторных В-лимфоцитов у не ответивших участников. Кроме того, в группе нон-респондеров меньше, чем в группе сравнения, количество В-лимфоцитов минорной субпопуляции, и, соответственно, значение соотношения В1:В2. Совокупность представленных данных демонстрирует, что отсутствие вторичного иммунного ответа на антигены SARS-CoV-2 пептидной вакцины сопряжено с изменениями дифференцировки В1- и В2-субпопуляций, В-регуляторных лимфоцитов, В-клеток памяти.
Ключевые слова: COVID-19, поствакцинальный иммунитет, постинфекционный иммунитет, В-лимфоциты, ЭпиВакКорона
POST-VACCINATION IMMUNITY PHENOTYPES UPON USAGE OF EpiVacCorona VACCINE IN THE PERSONS WHO SUFFERED COVID-19
Sizyakina L.P.a, Andreeva I.I.a, Kharitonova M.V.a, Zaitseva N.S.a, Lyubimov D.S.a, Zakurskaya V.Ya.a, Totolian Areg A.b с
a Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
b St. Petersburg Pasteur Research Institute of Epidemiology and Microbiology, St. Petersburg, Russian Federation с First St. Petersburg State I. Pavlov Medical University, St. Petersburg, Russian Federation
Abstract. The dominance of reliably immunized population is a fundamental factor in prevention of COVID-19 pandemia, with immune prophylaxis taking a dominant position. Due to lack of clear data on the intensity of specific immunity after a new coronavirus infection, consolidation of immunological memory by vaccination becomes the urgent task, in order to exclude the risk of re-involvement of previously ill patients into the epidemic process. Meanwhile, many questions related to vaccination of COVID-19 survivors do not get distinct answers. To study the features of immune response, using a vaccine based on SARS-CoV-2 peptide antigens (EpiVacCorona), we monitored 81 participants. The inclusion criteria were data confirming COVID-19 in the anamnesis (medical documentation), low levels or absence of antibodies to the SARS-CoV-2 nucleocapsid protein, and negative PCR tests for SARS-CoV-2. When assessing the data of post-vaccinal immunity checked 21 days after 1st dose of the vaccine, the patients were divided into 2 groups: those who did not respond, and those who developed the immune response. In order to identify possible reasons for different phenotypic patterns of humoral response to vaccination, a comparative analysis of B lymphocyte indexes was carried out in these groups. Absolute counts, subpopulation composition and activation potential of peripheral blood B lymphocytes were determined by flow cytofluorometry using appropriate labeled monoclonal antibodies purchased from Beсkman Coulter. Comparative analysis of B lymphocyte indexes on the day of first vaccination showed that the persons who did not respond to the vaccine had smaller counts of circulating B cells, i.e., both percentage and absolute cell numbers, than in comparison group, as well as changed ratio of B1-to-B2 subpopulations. After administration of the first vaccine dose (by day +21), in alternative variant of the antibody response to V1, the differences in the parameters of B cells were presented as a smaller percentage and absolute numbers of regulatory B lymphocytes in non-responding participants. Moreover, the contents of minor B cell subpopulations were decreased in the non-responding group than in the comparison group, thus affecting the values of the B1:B2 ratio. In general, the presented data demonstrate that the absence of secondary immune response to antigens of the SARS-CoV-2 peptide vaccine could be is associated with altered differentiation of B1 and B2 subpopulations, B regulatory lymphocytes, B memory cells.
Keywords: COVID-19, post-infectious immunity, post-vaccination immunity, B lymphocytes, EpiVacCorona vaccine
Введение
Пандемия СОУГО-19, вызванная SARS-СоУ-2, по-прежнему остается самой актуальной медико-социальной проблемой современности Основополагающим фактором купирования распространения инфекционного процесса является
формирование иммунной прослойки, что достигается массовой вакцинацией населения [5, 7, 13]. Значимая доля людей, переболевших СОУГО-19, вносит свой вклад в создание коллективного иммунитета [2, 3, 14]. Однако в настоящее время по-прежнему нет четких представлений о том, обеспечивает ли перенесенная инфекция имму-
нологическую память, если да, то на какой срок, какие условия функционирования иммунной системы необходимы для формирования и поддержания эффективной защиты при повторном контакте с SARS-CoV-2. Тем не менее вакцинация переболевших СОУГО-19 является повсеместной практикой и, несмотря на имеющиеся рекомендательные позиции о сроках и схемах ее проведения, необходим ответ на ряд вопросов: у всех ли переболевших есть такая необходимость, через какой интервал после болезни вакцинация возможна, достаточно ли одной дозы, каковы прогностические критерии развития эффективного поствакцинального иммунитета на фоне постинфекционного.
Наиболее доступным инструментом оценки самого факта развития иммунного ответа является характеристика количества антител к различным антигенным детерминантам вируса. Несмотря на ведущие позиции клеточных реакций иммунной системы в противовирусном иммунитете, антительный ответ имеет значение в нейтрализации вирусов на внеклеточных этапах распространения, реализации антителоза-висимых реакций эффекторных клеток врожденного и адаптивного иммунитета. Наконец, полноценный гуморальный ответ, являясь результатом последовательных этапов взаимодействия вспомогательных и эффекторных клеток, служит интегральным показателем согласованности регуляторных механизмов иммуногенеза [1, 12]. В силу этого детальная характеристика В-лимфоцитов при вакцинации лиц, перенесших СОУГО-19, представляет несомненный интерес с позиции выявления тех особенностей функциональной палитры В-клеток, которые определяют выраженный повторный гуморальный ответ либо его полное отсутствие.
Цель — оценить отличительные особенности функциональных параметров В-лимфоцитов при оппозитном реагировании на введение вакцины «ЭпиВакКорона» [4] у лиц, перенесших новую коронавирусную инфекцию.
Материалы и методы
Участники исследования
Под наблюдением находился 81 человек, перенесший СОУГО-19 бессимптомно (25 чел.), в легком (41 чел.), среднетяжелом (15 чел.) вариантах течения давностью до 6 мес. (20 чел.), от 6 до 12 мес. (56 чел.), более года (5 чел.), средний возраст составил 44±13 лет, мужчин — 25, женщин — 56. Критериями включения служили данные, подтверждающие СОУГО-19 в анамнезе (медицинская документация), низкий уровень либо отсутствие антител к нуклеокапсидному белку SARS-CoV-2, отрицательный результат ПЦР на
наличие вируса SARS-CoV-2. По результатам оценки поствакцинального иммунитета на 21-й день после введения первой дозы пациенты разделены на 2 группы: не ответившие и сформировавшие иммунный ответ.
Исследование выполнялось с соблюдением требований Хельсинкской декларации Всемирной медицинской ассоциации «Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека» с поправками 2000 г., WMA Declaration of Helsinki — Ethical Principles for Medical Research Involving Human Subjects (2013), «Правилами клинической практики в Российской Федерации», утвержденными Приказом Минздрава России от 19.06.2003 № 266. Все пациенты в соответствии с протоколом, одобренным Локальным этическим комитетом при ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» (протокол № 10/21 от 20.05.2021) подписывали добровольное информированное согласие на участие в исследовании. Забор венозной крови для исследования производился в день вакцинации, до введения вакцинного препарата и через три недели после. Введение первой дозы вакцины «ЭпиВакКорона» против COVID-19 [4], разработанной ФБУН «Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии «Вектор» Роспотребнадзора», проводилось в соответствии с инструкцией к препарату.
Лабораторные исследования
Исследование постинфекционного иммунитета осуществляли методом иммуноферментно-го анализа (ИФА) с определением количества IgG антител к нуклеокапсидному белку SARS-CoV-2, выраженном в условных единицах в мл буферного раствора (у. е./мл) (ИФА тест-система производства ФБУН НИИЭМ им. Пастера). В соответствии с условиями производителей, низкими признаны значения, не превышающие 700 у. е./мл. Поствакцинальный иммунитет оценивали с применением ИФА тест-систем SARS-CoV-2-IgG-Вектор (ФБУН ГНЦ ВБ «Вектор» Ро-спотребнадзора) и определением коэффициента позитивности (КП). Положительным считался результат КП более 1,2. Уровень поствакцинальных антител определяли через 21 день после введения первой дозы вакцины (V1). Непосредственно перед вакцинацией и на 21-й день после осуществлялось исследование биологического материала, полученного из верхних дыхательных путей (мазок из зева и носа) с использованием набора реагентов для выявления РНК коронави-руса SARS-CoV-2 методом полимеразной цепной реакции в реальном времени C0VID-2019 Amp.
Методом проточной цитофлюориметрии (Cytomks FC 500, США) определяли количество, субпопуляционный состав и активационный по-
тенциал В-лимфоцитов периферической крови, использовали соответствующие моноклональ-ные антитела с различным набором цветных меток: CD19-PE/CD5-FITC/CD45-PC; CD19-FITC/CD25-PE/ CD45-PC; CD19-PE/CD27-FITC/CD45-PC; CD19-FITC/CD40-PE/CD45-PC; CD19-FITC/CD86-PE/CD45-PC; CD19-PE/ CD5-FITC/CD1d-PC/CD45-ECD (Весктап Coulter, США). Общий уровень сывороточных иммуноглобулинов оценивали методом радиальной иммунодиффузии в геле.
Статистическую обработку полученных результатов проводили при помощи программы STATISTICA 10.0 (США). Описание полученных результатов осуществляли с помощью подсчета медианы (Ме) и интерквантильного размаха значений в виде 25 и 75 перцентилей, что в тексте представлено как Ме (Q0 25-Qo,75). Анализируемые показатели не имели нормального распределения (применяли критерий Шапиро—Уилка). Сравнительный анализ групп оценивали по критерию Вилкоксона. Достоверно значимыми считали различия при р < 0,05.
Результаты
Анализ иммунологической эффективности вакцинации показал, что не сформировали иммунный ответ на первую дозу «ЭпиВакКороны» 11 человек (13,6%), о чем свидетельствуют значения КП соответствующей тест-системы: 0,08 (0,06-0,12). Средний возраст группы, оцененной как нон-респондеры, составил 42±11 лет, мужчин — 3, женщин — 8; 8 человек перенесли COVID-19 бессимптомно, 2 — в легкой форме, 1 — среднетяжелой, 1 человек перенес инфекцию более года назад, 3 — менее полугода, 7 — в интервале 6-12 месяцев. Полученные результаты отсутствия гуморального ответа на компоненты пептидной вакцины послужили основанием для оценки параметров клеток, обеспечивающих ан-тителогенез, при сопоставлении результатов двух контрольных точек обследования — в день вакцинации, до введения вакцины и через три недели после (табл. 1).
Полученные данные свидетельствует, что значимым отличительным критерием, изменившимся в процессе реализации иммунного ответа на первую дозу пептидной вакцины, является количество циркулирующих клеток В памяти. Число лимфоцитов с фенотипом СD19+CD27+ в сравнении с данными до вакцинации увеличилось вдвое в относительном исчислении и в три раза при пересчете на общее количество клеток, циркулирующих в кровотоке. Кроме того, зарегистрировано увеличение относительного и абсолютного числа В-клеток, экспрессирующих рецептор к IL-2. Ни один из других оцениваемых
показателей в течение трех недель не изменился, в том числе стабильными оказались уровни сывороточных иммуноглобулинов, так же как и экспрессия рецепторов, ответственных за процессы межклеточной кооперации
Безусловный интерес представил анализ динамики аналогичных показателей у тех испытуемых, кто сформировал выраженный ответ уже на первую дозу. Так, на 21-й день после VI «ЭпиВакКороны» у 70 человек (86,4%) детектирован уровень поствакцинальных специфических антител при медиане значений КП = 17,76 (13,4918,2) у. е. Изменения в параметрах функционирования В-звена иммунной системы этой группы наблюдения показаны в таблице 2.
Представленные параметры демонстрируют, что у ответивших на введение одной дозы вакцины в сравнении с данными до вакцинации изменились показатели, отражающие процессы иммунорегуляции в виде увеличения количества В-клеток, экспрессирующих рецепторы к ^-2 и снижения доли В-регуляторных лимфоцитов, обеспечивающих иммуносупрессию. При этом нет динамики параметров, характеризующих дифференцировку других фенотипических вариантов В-лимфоцитов. Также нет различий в показателях сывороточного состава иммуноглобулинов трех классов и количестве клеток.
Полученные результаты стали основанием для сравнительной характеристики изучаемых показателей обеих групп, оппозитных по способности к развитию иммунного ответа на пептидные антигены SARS-CoV-2 (табл. 3).
Данные таблицы 3 показывают, что до введения первой дозы вакцины статистически значимые отличия отразились на соотношении В1- и В2-лимфоцитов периферического кровотока: у лиц, не ответивших, значение показателя ниже, чем в группе сравнения. Еще одним значимым критерием особенностей реагирования В-звена у нон-респондеров, в сравнении с ответившими, стало меньшее число циркулирующих В памяти как в процентом, так и абсолютном исчислении.
Сопоставление результатов тестирования переболевших СОУГО-19 через 21 день после введения первой дозы, когда был зафиксирован оппозитный вариант антительного ответа на У1, представлено в таблице 4.
Данные сравнительного анализа таблицы 4 иллюстрируют, что у не ответивших на первую дозу вакцины через три недели после ее инокуляции, в сравнении с ответившими, снижено относительное и абсолютное содержание циркулирующих клеток минорной субпопуляции В1-лимфоцитов. Это обстоятельство нашло свое отражение в статистически значимых отличиях показателя, отражающего соотношение В1- и
ТАБЛИЦА 1. ДИНАМИКА ПАРАМЕТРОВ В-ЗВЕНА ИММУННОГО ОТВЕТА У ЛИЦ, ПЕРЕБОЛЕВШИХ ЗДУЮ-19 И НЕ ОТВЕТИВШИХ ЧЕРЕЗ 21 ДЕНЬ НА V1 ПЕПТИДНОЙ ВАКЦИНЫ («ЭпиВакКорона»)
TABLE 1. DYNAMICS OF THE PARAMETERS OF THE B LINK OF THE IMMUNE RESPONSE IN PERSONS WHO HAVE RECOVERED FROM COVID-19 AND DID NOT RESPOND AFTER 21 DAYS TO THE V1 PEPTIDE VACCINE (EpiVacCorona)
Показатель Indicator До вакцинации Before vaccination 21 день после V1 21 days after V1 р
В1-лимфоциты CD19+CD5+ B1 lymphocytes CD19+CD5+ % 0,6 (0,35-0,80) 0,4 (0,3-0,5) р > 0,05
109/л 109/L 0,007 (0,004-0,015) 0,007 (0,004-0,009) р > 0,05
В2-лимфоциты CD19+CD5- B2 lymphocytes CD19+CD5- % 7,6 (4,95-8,80) 7,6 (5,80-8,35) р > 0,05
109/л 109/L 0,077 (0,058-0,180) 0,144 (0,108-0,150) р > 0,05
В1:В2 1:13 (1:10-1:19) 1:19 (1:13-1:26) р > 0,05
Активированные В-лимфоциты CD19+CD25+ Activated B lymphocytes CD19+CD25+ % 0,3 (0,1-0,4) 0,4 (0,3-0,5) р < 0,05
109/л 109/L 0,004 (0,002-0,008) 0,007(0,004-0,011) р < 0,05
Breg CD19+CD5+CD1d+ % 0,34 (0,20-0,55) 0,23 (0,16-0,36) р > 0,05
109/л 109/L 0,005 (0,002-0,010) 0,004 (0,002-0,006) р > 0,05
Зрелые В-лимфоциты ^19+CD27- Mature B lymphocytes CD19+CD27- % 4,9 (3,7-8,8) 5,6(5-7) р > 0,05
109/л 109/L 0,08 (0,04-0,17) 0,12 (0,09-0,13) р > 0,05
В памяти ^19+CD27+ B memory CD19+CD27+ % 0,8 (0,75-1,20) 1,4 (1,35-2,05) р < 0,01
109/л 109/L 0,01 (0,013-0,024) 0,028 (0,023-0,035) р < 0,01
Т-В кооперация CD19+CD40+ T-B cooperation CD19+CD40+ % 6,5 (4,25-8,15) 5 (4,5-7,0) р > 0,05
109/л 109/L 0,09 (0,05-0,16) 0,119 (0,07-0,13) р > 0,05
АПК-В кооперация CD19+CD86+ APK-B cooperation CD19+CD86+ % 0,5 (0,35-0,65) 0,5 (0,20-0,85) р > 0,05
109/л 109/L 0,009 (0,005-0,011) 0,008 (0,004-0,016) р > 0,05
IgA, г/л IgA, g/l 2,05 (1,80-2,17) 1,94 (1,74-2,11) р > 0,05
IgM, г/л IgM, g/l 1,16 (1,11-1,28) 1,27 (1,13-1,41) р > 0,05
IgG г/л IgG, g/l 12,01 (11,30-12,87) 12,79 (11,36-13,75) р > 0,05
ТАБЛИЦА 2. ДИНАМИКА ПАРАМЕТРОВ В-ЗВЕНА ИММУННОГО ОТВЕТА У ЛИЦ, ПЕРЕБОЛЕВШИХ ЗДУЮ-19 И ОТВЕТИВШИХ ЧЕРЕЗ 21 ДЕНЬ НА V1 ПЕПТИДНОЙ ВАКЦИНЫ («ЭпиВакКорона»)
TABLE 2. DYNAMICS OF THE PARAMETERS OF THE B LINK OF THE IMMUNE RESPONSE IN PERSONS WHO HAVE RECOVERED FROM COVID-19 AND RESPONDED 21 DAYS LATER TO THE V1 PEPTIDE VACCINE (EpiVacCorona)
Показатель Indicator До вакцинации Before vaccination 21 день после V1 21 days after V1 р
В1-лимфоциты CD19+CD5+ B1 lymphocytes CD19+CD5+ % 0,65 (0,6-0,78) 0,8 (0,5-1,8) p > 0,05
109/л 109/L 0,013 (0,01-0,017) 0,015 (0,009-0,032) p > 0,05
В2-лимфоциты CD19+CD5- B2 lymphocytes CD19+CD5- % 6,3 (5,25-9,32) 6,6 (4,2-9,2) p > 0,05
109/л 109/L 0,115 (0,09-0,13) 0,1(0,08-0,17) p > 0,05
В1:В2 1:8 (1:6-1:15) 1:5 (1:5-1:11) p > 0,05
Активированные В-лимфоциты CD19+CD25+ Activated B lymphocytes CD19+CD25+ % 0,4 (0,1-0,6) 0,6 (0,40-0,95) p < 0,05
109/л 109/L 0,006 (0,002-0,010) 0,011(0,007-0,020) p < 0,05
% 0,48 (0,29-0,53) 0,64 (0,40-0,95) p < 0,05
Breg CD19+CD5+CD1d+ 109/л 109/L 0,008 (0,006-0,010) 0,011 (0,0072-0,0200) p < 0,05
Зрелые В-лимфоциты ^19+CD27- Mature B lymphocytes CD19+CD27- % 5,7 (4,6-6,9) 5 (4,0-6,9) p > 0,05
109/л 109/L 0,1 (0,09-0,11) 0,95 (0,07-0,13) p > 0,05
В памяти ^19+CD27+ B memory CD19+CD27+ % 2,2 (1,6-2,9) 1,7 (1,1-4,0) p > 0,05
109/л 109/L 0,03 (0,03-0,05) 0,03 (0,020-0,075) p > 0,05
Т-В кооперация CD19+CD40+ T-B cooperation CD19+CD40+ % 7,5 (5,25-8,90) 8,5 (6,35-9,65) p > 0,05
1109/л 109/L 0,119 (0,10-0,14) 0,182 (0,12-0,22) p > 0,05
АПК-В кооперация CD19+CD86+ APK-B cooperation CD19+CD86+ % 0,5 (0,4-0,6) 0,6 (0,40-0,65) p > 0,05
109/л 109/L 0,009 (0,0056-0,0106) 0,01 (0,007-0,013) p > 0,05
IgA, г/л IgA, g/l 1,95 (1,06-1,23) 1,69 (1,44-1,81) p > 0,05
IgM, г/л IgM, g/l 1,16 (1,07-1,23) 1,04 (1,02-1,26) p > 0,05
IgG г/л IgG, g/l 12,36 (11,73-13,00) 12,94 (11,35-13,5) p > 0,05
ТАБЛИЦА 3. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАРАМЕТРОВ В-ЗВЕНА ИММУННОГО ОТВЕТА ДО ВАКЦИНАЦИИ У ЛИЦ, ПЕРЕБОЛЕВШИХ ЗДУЮ-19, ОППОЗИТНО ОТВЕТИВШИХ НА V1 ПЕПТИДНОЙ ВАКЦИНЫ («ЭпиВакКорона»)
TABLE 3. COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF THE PARAMETERS OF THE B LINK OF THE IMMUNE RESPONSE BEFORE VACCINATION IN PERSONS WHO HAVE HAD COVID-19 WHO OPPOSED THE V1 PEPTIDE VACCINE (EpiVacCorona)
Показатель Indicator Ответили Responders Не ответили Non-responders p
В1-лимфоциты CD19+CD5+ B1 lymphocytes CD19+CD5+ % 0,65 (0,60-0,78) 0,6 (0,35-0,80) р > 0,05
109/л 109/L 0,013 (0,010-0,017) 0,007 (0,004-0,015) р > 0,05
В2-лимфоциты CD19+CD5- B2 lymphocytes CD19+CD5- % 6,3 (5,25-9,32) 7,6 (4,95-8,80) р > 0,05
109/л 109/L 0,115 (0,09-0,13) 0,077 (0,058-0,180) р > 0,05
В1:В2 1:8 (1:6-1:15) 1:13 (1:10-1:19) р < 0,05
Активированные В-лимфоциты CD19+CD25+ Activated B lymphocytes CD19+CD25+ % 0,4 (0,1-0,6) 0,3 (0,1-0,4) р > 0,05
109/л 109/L 0,006 (0,002-0,010) 0,004 (0,002-0,008) р > 0,05
Breg CD19+CD5+CD1d+ % 0,48 (0,29-0,53) 0,34 (0,20-0,55) р > 0,05
109/л 109/L 0,008 (0,006-0,010) 0,005 (0,002-0,010) р > 0,05
Зрелые В-лимфоциты ^19+CD27- Mature B lymphocytes CD19+CD27- % 5,7 (4,6-6,9) 4,9 (3,7-8,8) р > 0,05
109/л 109/L 0,1 (0,09-0,11) 0,08 (0,04-0,17) р > 0,05
В памяти ^19+CD27+ B memory CD19+CD27+ % 2,2 (1,6-2,9) 0,8 (0,75-1,20) р < 0,05
109/л 109/L 0,03 (0,03-0,05) 0,01 (0,013-0,024) р < 0,05
Т-В кооперация CD19+CD40+ T-B cooperation CD19+CD40+ % 7,5 (5,25-8,90) 6,5 (4,25-8,15) р > 0,05
109/л 109/L 0,119 (0,10-0,14) 0,09 (0,05-0,16) р > 0,05
АПК-В кооперация CD19+CD86+ APK-B cooperation CD19+CD86+ % 0,5 (0,4-0,6) 0,5 (0,35-0,65) р > 0,05
109/л 109/L 0,009 (0,0056-0,0106) 0,009 (0,005-0,011) р > 0,05
IgA, г/л IgA, g/l 1,95 (1,06-1,23) 2,05 (1,80-2,17) р > 0,05
IgM, г/л IgM, g/l 1,16 (1,07-1,23) 1,16 (1,11-1,28) р > 0,05
IgG г/л IgG, g/l 12,36 (11,73-13,00) 12,01 (11,30-12,87) р > 0,05
ТАБЛИЦА 4. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПАРАМЕТРОВ В-ЗВЕНА ИММУННОГО ОТВЕТА ЧЕРЕЗ 21 ДЕНЬ ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ У ЛИЦ, ПЕРЕБОЛЕВШИХ ЗДУЮ-19, ОППОЗИТНО ОТВЕТИВШИХ НА V1 ПЕПТИДНОЙ ВАКЦИНЫ («ЭпиВакКорона»)
TABLE 4. COMPARATIVE CHARACTERISTICS OF THE PARAMETERS OF THE B LINK OF THE IMMUNE RESPONSE 21 DAYS AFTER VACCINATION IN PERSONS WHO HAVE HAD COVID-19 WHO OPPOSED THE V1 PEPTIDE VACCINE (EpiVacCorona)
Показатель Indicator Ответили Responders Не ответили Non-responders p
В1-лимфоциты CD19+CD5+ B1 lymphocytes CD19+CD5+ % 0,8 (0,5-1,8) 0,4 (0,3-0,5) p < 0,01
109/л 109/L 0,015 (0,009-0,032) 0,007 (0,004-0,009) p < 0,01
В2-лимфоциты CD19+CD5- B2 lymphocytes CD19+CD5- % 6,6 (4,2-9,2) 7,6 (5,8-8,4) p > 0,05
109/л 109/L 0,10 (0,08-0,17) 0,14 (0,11-0,15) p > 0,05
В1:В2 1:5 (1:50-1:11) 1:19 (1:13-1:26) p < 0,01
Активированные В-лимфоциты CD19+CD25+ Activated B lymphocytes CD19+CD25+ % 0,6 (0,40-0,95) 0,4 (0,3-0,5) p > 0,05
109/л 109/L 0,011 (0,007-0,020) 0,007 (0,004-0,011) p > 0,05
% 0,64 (0,40-0,95) 0,23 (0,16-0,36) p < 0,01
Breg CD19+CD5+CD1d+ 109/л 109/L 0,011 (0,00720,0200) 0,004 (0,002-0,006) p < 0,01
Зрелые В-лимфоциты œ19+CD27- Mature B lymphocytes CD19+CD27- % 5 (4,0-6,9) 5,6(5-7) p > 0,05
109/л 109/L 0,95 (0,07-0,13) 0,12 (0,09-0,13) p > 0,05
В памяти СD19+CD27+ B memory CD19+CD27+ % 1,7 (1,1-4,0) 1,4 (1,35-2,05) p > 0,05
109/л 109/L 0,03 (0,020-0,075) 0,028 (0,023-0,035) p > 0,05
Т-В кооперация CD19+CD40+ T-B cooperation CD19+CD40+ % 8,5 (6,35-9,65) 5 (4,5-7,0) p > 0,05
109/л 109/L 0,182 (0,12-0,22) 0,119 (0,07-0,13) p > 0,05
АПК-В кооперация CD19+CD86+ APK-B cooperation CD19+CD86+ % 0,6 (0,40-0,65) 0,5 (0,2-0,85) p > 0,05
109/л 109/L 0,01 (0,007-0,013) 0,008 (0,004-0,016) p > 0,05
IgA, г/л IgA, g/l 1,69 (1,44-1,81) 1,94 (1,74-2,11) p > 0,05
IgM, г/л IgM, g/l 1,04 (1,02-1,26) 1,27 (1,13-1,41) p < 0,05
IgG г/л IgG, g/l 12,94 (11,35-13,50) 12,79 (11,36-13,75) p > 0,05
В2-лимфоцитов: у нон-респондеров его значение существенно ниже аналогичного параметра в группе переболевших, показавших высокий уровень поствакцинальных антител. Помимо этого, у нон-респондеров по отношению к группе сравнения снижено количество Breg, ответственных за процессы негативной иммунорегуляции, статистически значимо выше уровень сывороточных иммуноглобулинов класса М.
Обсуждение
Создание надежной иммунологической прослойки — основополагающий фактор воздействия на неуклонное развитие пандемии СОУТО-19, где иммунопрофилактике принадлежат главенствующие позиции [8, 16]. Ввиду отсутствия четких данных о напряженности иммунитета после новой коронавирусной инфекции, для исключения возможности повторного вовлечения в эпидемический процесс переболевших, актуальной становится задача закрепления иммунологической памяти посредством вакцинации [10]. Проведенные нами исследования отчетливо доказали, что в 86,4% случаев введение перенесшим СОУТО-19 одной дозы рекомбинантной вакцины на основе пептидных антигенов SASRS-CoV-2 уже через три недели формирует высокий антительный ответ. Данные результаты подтверждают факт формирования клеток иммунологической памяти после COVID-19, способных отреагировать на фрагменты S и N структурных белков вируса. Между тем, в 13,6% случаев подобной реакции иммунной системы отмечено не было. Это обстоятельство послужило основанием выяснить те отличительные особенности реагирования В-звена иммунной системы, которые могут определять отсутствие эффекта при повторном контакте с антигенами SASRS-CoV-2. Так, нами показано, что у нон-респондеров через 21 день в ответ на антигенное воздействие компонентами пептидной вакцины повысился активационный ресурс В-клеток в виде усиления потенции к восприятию ^-2, так же как и число эффекторных В памяти. Перечисленные изменения отражают факт реакции на вакцину, не приведшей к значимому эффекту в виде продукции специфических антител, в отличие от ответивших на V! участников исследования. Так, динамика ответа В-звена у респондеров состояла в сопряженном увеличении как активационных потенций В-клеток, так и количества Breg. Очевидно предположить, что согласованное воздействие стимулирующих и супрессорных сигналов отражает адекватность регуляции иммуногенеза в данном случае. Важный аргумент, определяющий отсутствие иммунного ответа у нон-респондеров, был выявлен при
сопоставлении параметров В-звена иммунного ответа оппозитно ответивших участников исследования в день вакцинации. У не ответивших на V1 в периферическом кровотоке было зафиксировано практически трехкратно снижение количества В памяти в сравнении с теми участниками исследования, которые сформировали гуморальный ответ на одну вакцинную дозу. В настоящее время нет сомнений, что инфекция SARS-CoV-2 вызывает канонический Т-клеточно-зависимый В-клеточный ответ с формированием клеток памяти [11, 17]. После повторного воздействия антигена В-клетки памяти дифференцируются в плазмобласты, секретирующие антитела, неотъемлемую часть стратегии защиты, лежащей в основе успеха вакцинации [16], в том числе при новой коронавирусной инфекции [15]. Тот факт, что общее число эффекторных В-клеток памяти в наших исследованиях выше в группе пациентов с высоким уровнем поствакцинального ответа, подтверждает описанные тенденции и может стать основанием для разработки критериев прогноза его эффективности. Еще один отличительный признак реагирования связан с перераспределением В1- и В2-субпопуляций в сравниваемых группах. Так, до вакцинации значение соотношения В1:В2 у нон-респондеров было статистически значимо ниже. Более того, через три недели формирования вторичного иммунного ответа на пептидные антигены SARS-CoV-2 у не ответивших участников исследования не только меньше показатель соотношения В1:В2, но и количество В-лимфоцитов минорной субпопуляции вдвое ниже, чем в группе сравнения. В1 представляют собой уникальную субпопуляцию, отличную от В2 по происхождению, играющую существенную роль в продукции естественных антител, регуляции антителогенеза [6]. Выявленные в наших исследованиях зависимости требуют дальнейшего наблюдения. Отличительная особенность оппо-зитного ответа переболевших СОУТО-19 через три недели после вакцинации состоит в разнице количества циркулирующих Breg. В группе нон-респондеров супрессорная функция В-клеток слабее, нежели у ответивших на вакцинацию. Возможно, этот факт является следствием закономерного вовлечения супрессорных механизмов при адекватном вторичном ответе, в то время как отсутствие такового у нон-респондеров не требует подобного механизма регуляции. Следует обратить внимание, что в наших исследованиях все параметры, отражающие возможность межклеточного взаимодействия В-лимфоцитов с Т-клетками либо с антигенпрезентирующими, не имели отличий между сравниваемыми группами.
Заключение
У переболевших СОУГО-19 формируется иммунологическая память, что подтверждается эффективным гуморальным иммунным ответом через три недели после введения одной дозы пептидной вакцины у 86,4% участников исследова-
ния. Отсутствие вторичного иммунного ответа на антигены SARS-CoV-2 пептидной вакцины сопряжено с изменениями дифференцировки В1- и В2-субпопуляций, В-регуляторных лимфоцитов, В-клеток памяти, но не связано с процессами межклеточной кооперации.
Список литературы / References
1. Козлов В.А., Савченко А.А., Кудрявцев И.В., Козлов И.Г., Кудлай Д.А., Продеус А.П., Борисов А.Г. Клиническая иммунология. Красноярск: Поликор, 2020. 386 с. [Kozlov V.A., Savchenko A.A., Kudryavtsev I.V., Kozlov I.G., Kudlai D.A., Prodeus A.P., Borisov A.G. Clinical immunology]. Krasnoyarsk: Polikor, 2020. 386 p.
2. Попова А.Ю., Андреева Е.Е., Бабура Е.А., Балахонов С.В., Башкетова Н.С., Буланов М.В., Валеул-лина Н.Н., Горяев Д.В., Детковская Н.Н., Ежлова Е.Б., Зайцева Н.Н., Историк О.А., Ковальчук И.В., Козловских Д.Н., Комбарова С.В., Курганова О.П., Кутырев В.В., Ломовцев А.Э., Лукичева Л.А., Лялина Л.В., Мельникова А.А., Микаилова О.М., Носков А.К., Носкова Л.Н., Оглезнева Е.Е., Осмоловская Т.П., Патя-шина М.А., Пеньковская Н.А., Самойлова Л.В., Смирнов В.С., Степанова Т.Ф., Троценко О.Е., Тотолян А.А. Особенности формирования серопревалентности населения Российской Федерации к нуклеокапсиду SARS-CoV-2 в первую волну эпидемии COVID-19 // Инфекция и иммунитет, 2021. Т. 11, № 2. С. 297-323. [Popova A.Yu., Andreeva E.E., Babura E.A., Balakhonov S.V., Bashketova N.S., Bulanov M.V., Valeullina N.N., Goryaev D.V., Detkovskaya N.N., Ezhlova E.B., Zaitseva N.N., Istorik O.A., Kovalchuk I.V., Kozlovskikh D.N., Kombarova S.V., Kurganova O.P., Kutyrev V.V., Lomovtsev A.E., Lukicheva L.A., Lyalina L.V., Melnikova A.A., Mikailova O.M., Noskov A.K., Noskova L.N., Oglezneva E.E., Osmolovskay T.P., Patyashina M.A., Penkovskaya N.A., Samoilova L.V., Smirnov V.S., Stepanova T.F., Trotsenko O.E., Totolyan A.A. Features of developing SARS-CoV-2 nucleocapsid protein population-based seroprevalence during the first wave of the COVID-19 epidemic in the Russian Federation. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2021, Vol. 11, no. 2, pp. 297-323. (In Russ.)] doi: 10.15789/2220-7619-FOD-1684.
3. Попова А.Ю., Тотолян А.А. Методология оценки популяционного иммунитета к вирусу SARS-CoV-2 в условиях пандемии COVID-19 // Инфекция и иммунитет, 2021. Т. 11, № 4. С. 609-616. [Popova A.Yu., Totolian A.A. Methodology for assessing herd immunity to the SARS-CoV-2 virus in the context of the COVID-19 pandemic. Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2021, Vol. 11, no. 4, pp. 609-616. (In Russ.)] doi: 10.15789/2220-7619-MFA-1770.
4. Рыжиков А.Б., Рыжиков Е.А., Богрянцева М.П., Усова С.В., Даниленко Е.Д., Нечаева Е.А., Пьян-ков О.В., Пьянкова О.Г., Гудымо А.С., Боднев С.А., Онхонова Г.С., Слепцова Е.С., Кузубов В.И., Рыд-нюк Н.Н., Гинько З.И., Петров В.Н., Моисеева А.А., Торжкова П.Ю., Пьянков С.А., Трегубчак Т.В., Анто-нец Д.В., Гаврилова Е.В., Максютов Р.А. Простое слепое плацебо-контролируемое рандомизированное исследование безопасности, реактогенности и иммуногенности вакцины «ЭпиВакКорона» для профилактики COVID-19 на добровольцах в возрасте 18-60 лет (фаза I-II) // Инфекция и иммунитет, 2021. Т. 11, № 2. С. 283-296. [Ryzhikov A.B., Ryzhikov Е.А., Bogryantseva M.P., Usova S.V., Danilenko E.D., Nechaeva E.A., Pyankov O.V., Pyankova O.G., Gudymo A.S., Bodnev S.A., Onkhonova G.S., Sleptsova E.S., Kuzubov V.I., Ryndyuk N.N., Ginko Z.I., Petrov V.N., Moiseeva A.A., Torzhkova P.Yu., Pyankov S.A., Tregubchak T.V., Antonec D.V., Gavrilova E.V., Maksyutov R.A. A single blind, placebo-controlled randomized study of the safety, reactogenicity and immunogenicity of the "EpiVacCorona" Vaccine for the prevention of COVID-19, in volunteers aged 18-60 years (phase I-II). Infektsiya i immunitet = Russian Journal of Infection and Immunity, 2021, Vol. 11, no. 2, pp. 283-296. (In Russ.)] doi: 10.15789/2220-7619-ASB-1699.
5. COVID-19: научно-практические аспекты борьбы с пандемией в Российской Федерации / Под ред. А.Ю. Поповой. Саратов: Амирит, 2021. 608 с. [COVID-19: Scientific and practical aspects of combating the pandemic in the Russian Federation / Ed. A.Yu. Popova]. Saratov: Amirit, 2021. 608 p.
6. Baumgart N.A. Hard(y) look at B-1 cell development and function. J. Immunol., 2017, Vol. 199,pp. 3387-3394.
7. Chinazzi M., Davis J.T., Ajelli M., Gioannini C., Litvinova M., Merler S., Pastore Y., Piontti A., Mu K., Rossi L., Sun K., Viboud C., Xiong X., Yu H., Halloran M.E., Longini I.M. Jr, Vespignani A. The effect of travel restrictions on the spread of the 2019 novel coronavirus (COVID-19) outbreak. Science, 2020, Vol. 368, no. 6489, pp. 395-400.
8. Cromer D., Juno J.A., Khoury D., Reynaldi A., Wheatley A.K., Kent S.J., Davenport M.P. Prospects for durable immune control of SARS-CoV-2 and prevention of reinfection. Nat. Rev. Immunol., 2021, Vol. 21, no. 6, pp. 395-404.
9. Ellebedy A.H., Jackson K.J., Kissick H.T., Nakaya H.I., Davis C.W., Roskin K.M., McElroy A.K., Oshansky C.M., Elbein R., Thomas S., Lyon G.M., Spiropoulou C.F., Mehta A.K., Thomas P.G., Boyd S.D., Ahmed R. Defining antigen-specific plasmablast and memory B cell subsets in human blood after viral infection or vaccination. Nat. Immunol., 2016, Vol. 17, no. 10, pp. 1226-1234.
10. Gaebler C., Wang Z., Lorenzi J.C.C., Muecksch F., Finkin S., Tokuyama M., Cho A., Jankovic M., Schaefer-Babajew D., Oliveira T.Y., Cipolla M., Viant C., Barnes C.O., Bram Y., Breton G., Hägglöf T., Mendoza P., Hurley A., Turroja M., Gordon K., Millard K.G., Ramos V., Schmidt F., Weisblum Y., Jha D., Tankelevich M., Martinez-Delgado G., Yee J., Patel R., Dizon J., Unson-O'Brien C., Shimeliovich .I, Robbiani D.F., Zhao Z., Gazumyan A., Schwartz R.E., Hatziioannou T., Bjorkman P.J., Mehandru S., Bieniasz P.D., Caskey M., Nussenzweig M.C. Evolution of antibody immunity to SARS-CoV-2. Nature, 2021, Vol. 591, no. 7851, pp. 639-644.
11. Kudryavtsev I.V., Arsentieva N.A., Batsunov O.K., Korobova Z.R., Khamitova I.V., Isakov D.V., Kuznetsova R.N., Rubinstein A.A., Stanevich, O.V., Lebedeva A.A., Vorobyov E.A., Vorobyova S.V., Kulikov A.N., Sharapova M.A. Patients with acute COVID-19 and COVID-19 convalescents. Curr. Issues Mol. Biol., 2022, Vol. 44, pp. 194-205.
12. Lam J.H., Smith F.L., Baumgarth N. B Cell activation and response regulation during viral infections. Viral Immunol., 2020, Vol. 33, no. 4, pp. 294-306.
13. Li Q., Wang J., Tang Y., Lu H. Next-generation COVID-19 vaccines: Opportunities for vaccine development and challenges in tackling COVID-19. Drug. Discov. Ther., 2021, Vol. 15, no. 3, pp.118-123.
14. Popova A.Y., Smirnov V.S., Andreeva E.E., Babura E.A., Balakhonov S.V., Bashketova N.S., Bugorkova S.A., Bulanov M.V., Valeullina N.N., Vetrov V.V., Goryaev D.V., Detkovskaya T.N., Ezhlova E.B., Zaitseva N.N., Istorik O.A., Kovalchuk I.V., Kozlovskikh D.N., Kombarova S.Y., Kurganova O.P., Lomovtsev A.E., Lukicheva L.A., Lyalina L.V., Melnikova A.A., Mikailova O.M., Noskov A.K., Noskova L.N., Oglezneva E.E., Osmolovskaya T.P., Patyashina, M.A., Penkovskaya N.A., Samoilova L.V., Stepanova T.F., Trotsenko O.E., Totolian A.A. SARS-CoV-2 seroprevalence structure of the russian population during the COVID-19 pandemic. Viruses, 2021, Vol. 13, 1648. doi: 10.3390/v13081648.
15. Quast I., Tarlinton D. B cell memory: understand.ng COVID-19. Immunity, 2021, Vol. 54, no. 2, pp. 205-210.
16. Sette A., Crotty Sh. Adaptive immunity to SARS-CoV-2 and COVID-19. Cell, 2021, Vol. 184, no. 4, pp. 861-880.
17. Turner J.S., Kim W., Kalaidina E., Goss C., Rauseo A.M., Schmit A.J., Hansen L., Kleber M.K., Pusic I., O'Halloran J.A., Presti R.M., Ellebedy A.H. SARS-CoV-2 infection induces long-lived bone marrow plasma cells in humans. Nature, 2021, Vol. 595, pp. 421-425.
Авторы:
Сизякина Л.П. — д.м.н., профессор, заведующая кафедрой клинической иммунологии и аллергологии, директор НИИ клинической иммунологии ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Ростов-на-Дону, Россия
Андреева И.И. — д.м.н., профессор кафедры клинической иммунологии и аллергологии ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Ростов-на-Дону, Россия
Харитонова М.В. — к.м.н., заведующая лабораторией клинической иммунологии и аллергологии ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Ростов-на-Дону, Россия
Authors:
Sizyakina L.P., PhD, MD (Medicine), Professor, Head, Department of Clinical Immunology and Allergology, Director, Research Institute of Clinical Immunology, Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
Andreeva I.I., PhD, MD (Medicine), Professor, Department of Clinical Immunology and Allergology, Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
Kharitonova M.V., PhD (Medicine), Head, Laboratory of Clinical Immunology and Allergology, Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
Зайцева Н.С. — к.м.н., доцент кафедры клинической иммунологии и аллергологии ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Ростов-на-Дону, Россия
Любимов Д.С. — к.м.н., доцент кафедры клинической иммунологии и аллергологии ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Ростов-на-Дону, Россия
Закурская В.Я. — ассистент кафедры клинической иммунологии и аллергологии ФГБОУ ВО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения РФ, г. Ростов-на-Дону, Россия
Тотолян Арег А. — д.м.н., профессор, академик РАН, директор ФБУН«Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Пастера»; заведующий кафедрой иммунологии ФГБОУ ВО «Первый Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова» Министерства здравоохранения РФ, Санкт-Петербург, Россия
Поступила 21.12.2021 Принята к печати 16.02.2022
Zaitseva N.S., PhD (Medicine), Associate Professor, Department of Clinical Immunology and Allergology, Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
Lyubimov D.S., PhD (Medicine), Associate Professor, Department of Clinical Immunology and Allergology, Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
Zakurskaya V.Ya., Assistant Professor, Department of Clinical Immunology and Allergology, Rostov State Medical University, Rostov-on-Don, Russian Federation
Totolian Areg A., PhD, MD (Medicine), Professor, Full Member, Russian Academy of Sciences, Director, St. Petersburg Pasteur Research Institute of Epidemiology and Microbiology; Head, Department of Immunology, First St. Petersburg State I. Pavlov Medical University, St. Petersburg, Russian Federation
Received 21.12.2021 Accepted 16.02.2022
