ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СУБСТАНЦИИ И 1% ИНЪЕКЦИОННОГО РАСТВОРА АВЕССТИМА Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Таблица 2

Результаты оценки повторяемости разработанной методики количественного определения суммы флавоноидов

в 70%-ном извлечении травы манжетки твердой

Номер пробы 1 2 3 4 5 6

Аналитический сигнал 0,467 0,476 0,461 0,468 0,460 0,465

Содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, % 1,27 1,30 1,26 1,28 1,26 1,27

n Х, % S2 RSD, % Р, % tp, t ДХ £, %

6 1,27 0,0002 0,0119 0,0061 95 2,57 0,0158 ±1,24

Таким образом, для разработанной методики подтверждены валидационные характеристики (специфичность, линейность и повторяемость), что свидетельствует о её валидности и возможности включения в фармакопейную статью на траву манжетки твердой.

Список литературы 1. Андреева, В.Ю. Разработка методики количественного определения флавоноидов в манжетке обыкновенной Alchemilla vulgaris L.S.L. / В.Ю. Андреева, Г.И. Калинкина // Химия растительного сырья. -2000. - №1. - С. 85-88.

2. Арзамасцев, А.П. «Проект ОФС «Валидация фармакопейных методов»/ А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчи-кова, Ю.Я.Харитонов// Ведомости научного центра экспертизы и гос. контроля лек. средств. - 2002. -№1. - С. 28 - 30.

3. Северцева, О.В. Валидация аналитических методов контроля качества таблеток экстракта из листьев боярышника/ О.В. Северцева//Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения: Материалы 6 Между-нар. съезда. - СПб, 2002. - С. 294 - 299.

ФАРМАКОКИНЕТИЧЕСКОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ СУБСТАНЦИИ И 1% ИНЪЕКЦИОННОГО

РАСТВОРА АВЕССТИМА

Бушуева Инна Владимировна

кандидат фарм. наук, доцент Кныш Евгений Григорьевич доктор фарм. наук, профессор Панасенко Александр Иванович

доктор фарм. наук, профессор, Запорожский государственный медицинский университет, г. Запорожье

PHARMACOKINETIC STUDY OF SUBSTANCES AND 1% INJECTION SOLUTION AVESSTIM

Bushueva Inna, Candidate of Science, associate professor, Knish Evgeny, Dr. Pharm. Sciences, professor

Panasenko Alexander, Dr. Pharm. Sciences, professor, Zaporozhye state medical University, Zaporozhye

АННОТАЦИЯ

В результате фармакокинетических исследований нового органического соединения из группы 1,2,4-триазола - морфолиний 2-(5-(пиридин-4-ил)-1,2,4-триазол-3-илтио)ацетата, установлено существование прямой статистически достоверной корреляционной зависимости между результатами его высвобождения из субстанции и 1% инъекционного раствора, всасыванием лекарственного вещества из данной лекарственной формы и поступлением его в кровь. С помощью моделирования фармакокинетики соединения после перорального и инъекционного внутривенного введения установлены константы скорости всасывания, элиминации, плазматический клиренс и другие параметры.

Ключевые слова: субстанция; инъекционный раствор; фармакокинетика; стерилизация; срок годности; Авес-

стим.

ABSTRACT

As a result of pharmacokinetic studies of new organic compounds from the group of 1,2,4-triazole - morpholine 2-(5-(pyridin-4-yl)-1,2,4-triazole-3-ylthio)acetate, the existence of a direct statistically significant correlation between the results of the release of substances and 1% injection solution, the absorption of medicinal substance from a given dosage form and supplied to the blood. Through simulation of the pharmacokinetics of the compound after oral and intravenous injection set of the rate constant of absorption, elimination, plasma clearance, and other parameters.

Keywords: active pharmaceutical ingredient; injection solution; pharmacokinetics; sterilization; shelf life; Avеsstim.

Целью данного исследования была разработка научно-обоснованного состава, технологии, анализа инъекционного раствора с Авесстимом, проведения биофармацевтического изучения указанной лекарственной

формы. Авесстим - желтого цвета порошок, со слабым своеобразным запахом. Легко раствор в воде (1:10), трудно растворим в органических растворителях [1,с.277].

Проведение качественного анализа в 1% инъекционном растворе. 0,5-1 мл раствора Авесстима помещают в пробирку и нагревают над пламенем газовой горелки до кипения. Влажная красная лакмусовая бумага, поднесенная к отверстию пробирки, синеет (морфолин).

Около 1 мл раствора Авесстима помещают в пробирку, добавляют около 0,1 г диметиламинобензальде-гида, 2 мл смеси уксусного ангидрида - уксусная кислота (1:1) и нагревают при слабом кипении на пламени горелки 1-2 мин, жидкость окрашивается в оранжево-коричневый цвет (5-(4-пиридий)-1,2,4-триазолил-3-тиюацетатная кислота). Аликвотную часть (0,45-0,65 мг) исследуемого раствора Авесстима помещают в мерную колбу емкостью 25,00 мл и доводят дистиллированной водой до метки. Оптическую плотность измеряют на фоне дистиллированной воды при длине волны 226 нм. Параллельно 1,00 мл

А

1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 0.4 0.2 0.0

0,055% раствора сравнения Авесстима помещают в мерную колбу емкостью 25,00 мл, доводят дистиллированной водой до метки и измеряют оптическую плотность при то же длине волны.

При анализе инъекционного раствора 3,00 мл 1,0% раствора Авесстима помещают в мерную колбу емкостью 50,00 мл и доводят водой до метки, перемешивают. Полученный раствор (1,00 мл) переносят в мерную колбу емкостью 25,00 мл и анализируют по общей методике количественного определения Авесстима. Параллельно проводят реакцию с 1,00 мл раствора сравнения Авесстима. Спектр поглощения Авесстима приведен на рис. 1.

Линейная зависимость между концентрацией Авесстима и оптической плотностью наблюдалась в пределах 1,80-2,60 мг/100 мл. Параметры линейной зависимости приведены в табл. 1 и на рис. 2.

150

200

250

300

350

400

450

Рисунок 1. Спектр поглощения Авесстима в воде (0,0022% раствор) _Параметры линейной зависимости_

Таблица 1

Параметры Значения

Лтах, нм 226

Подчиненность закону Бера (мг/100 мл) 1,80-2,60

Уравнение регрессии у=Ь-х+а

Угловой коеффициент Ь 0,3802

Свободный показатель а -0,001800

бЬ 0,003700

БЭ 0,008100

Коеффициент корреляции г (п=5) 0,9999

sх,0 (%) 0,2750

А

Результаты количественного определения Авесстима в 1% инъекционном растворе приведены в табл. 2.

Таблица 2

Результаты количественного определения Авесстима в 1% инъекционном растворе

Лекарственный препарат Навеска, мл Найдено,г Метрологические характеристики

1,00 1,00 1,00 0,00999 0,00992 0,00990 Х = 0,00993 S =3,78-10-5 Sx =1,54-10-5 Ax = 0,971-10-4 A x = 3,96-10-5 ё = 0,399 %%

Раствор Авесстима 1,0% для инъекций 1,00 1,00 1,00 0,00989 0,00994 0,00996

Определение изотонической концентрации Авесстима в 1% инъекционном растворе проводили на основании измерения депрессии температуры кристаллизации криоскопическим методом. Готовили 1% раствор Авесстима и 0,9% раствор натрия хлорида. Депрессию точек замерзания указанных растворов по сравнению с темпе-

Температура кристаллизации воды, 1% раств

ратурой замерзания воды определяли с помощью термометра Бекмана, что позволяет фиксировать незначительные изменения температуры с помощью условной шкалы. Результаты определения температуры замерзания воды, 1% раствора Авесстима и 0,9% раствора натрия хлорида представлены в табл. 3.

Таблица 3

а Авесстима и 0,9% раствора натрия хлорида

Температура замерзания (данные по термометру Бекмана), оС

вода 0,9% раствор натрия хлорида 1 % раствор Авесстима

4,35 3,70 4,10

4,27 3,68 4,09

4,25 3,71 4,12

4,36 3,69 4,11

4,20 3,70 4,08

4,30 3,72 4,14

4,40 3,70 4,11

4,30 3,66 4,13

4,30 3,70 4,07

4,30 3,74 4,15

4,30 3,70 4,11

Депрессия температуры кристаллизации 1% раствора Авесстима составляет 0,19°С, 0,9% раствора натрия хлорида - 0,6°С. Изотоническая концентрация раствора Авесстима равна (0,6 - 1,0): 0,19 = 3,158 г. Таким образом, 3,158 г Авесстима создают в 100 мл раствора изотоническую концентрацию.

Количество натрия хлорида, необходимое для изо-тонирования 1% раствора Авесстима, рассчитывали следующим образом: 3,158 г Авесстима соответствует 0,9 г натрия хлорида (в 100 мл раствора) 1,0 г Авесстима - х г натрий хлорида. Тогда количество натрия хлорида, необходимое для изотонирования 1% раствора Авесстима, составляет: 0,9 - (1,0 • 0,9: 3,158) = 0,615 г натрия хлорида на 100 мл 1% раствора Авесстима.

Предыдущие исследования показали, что для приготовления инъекционного раствора необходимо использовать Авесстим после 2-х кратной перекристаллизации из этанола. Были приготовлены 3 серии 1% изотонического раствора Авесстима. Приготовленные растворы профильтровали, заполнили ампулы вместимостью 2 мл из стекла марки НС-3. Измеряли рН инъекционных растворов и воды до стерилизации. Часть ампул с инъекционным раствором, а также ампулы с водой простерелизо-вали текущим паром в течение 30 мин. Остальные ампул в автоклаве при 120°С в течение 15 мин. Температуру контролировали с помощью термометра.

После стерилизации и охлаждения ампулы вскрыли, установили рН растворов, что изучаются и воды, определили количественное содержание Авесстима в каждой серии ампул. Проведенные исследования показали, что режим стерилизации существенно не влияет на количественное содержание Авесстима в инъекционном растворе. Раствор Авесстима, как соли, образованной слабым основанием и слабой кислотой, проявляет буферные свойства и компенсирует сдвиг рН воды в щелочную сторону после стерилизации. Для приготовления инъекционного раствора Авесстима необходимо использовать све-жепрокипяченную воду [2,с.57; 3].

Определение срока годности инъекционного раствора Авесстима, согласно «Временной инструкции по проведению работ с целью определения сроков годности лекарственных средств на основе метода «ускоренного старения» при повышенной температуре». Суть метода заключается в выдержке в исследуемой лекарственной формы при повышенной температуре, превышающей среднюю температуру хранения (20°С). «Ускоренное старение» проводили при температуре 60°С. Ампулы с инъекционным раствором (3 серии) помещали в термошкаф, контролируя в процессе хранения количественное содержание действующего вещества. Периодичность контроля показателей качества составляла 23 суток. Экспериментальное хранения проводили до того момента, когда потеря действующего вещества составила 3%. Установили,

что после окончания срока экспериментального хранения (при 60°С), он соответствует двухлетнему сроку годности. При хранении раствора Авесстима 1% для инъекций в ампулах при комнатной температуре срок годности составляет не менее 2 лет. Хранить препарат необходимо в защищенном от света месте, так как в состав входит двухвалентная сера.

Срок годности С при температуре хранения (Г=20°С) связан с экспериментальным сроком годности Сэ при повышенной температуре экспериментального хранения (Г=60°С) следующей приближенной зависимостью: С= К • Сэ. Коэффициент соответствия К при (Гэксп. -Гсохр.) = 40°С составляет 16.

Количественный анализ Авесстима в инъекционном растворе показал, что потеря действующего вещества на 3% в процессе «ускоренного старения» при 60°С произошло через 46 суток, наблюдался также равномерный рост рН исследуемых растворов всех серий на 0,15-0,2. Определение срока годности: С = 46 • 16 = 736 суток = 2 года. Следовательно, срок годности 1% инъекционного раствора Авесстима при номинальной температуре (20°С) - не менее 2 лет.

На основании результатов исследований для дальнейшего изучения предложен следующий состав инъекционного раствора [4,с.385, с.422]:

Авесстима 10,0

Натрия хлорида 5,6 г (ГФУ, п. 5. № 2, 1.1, С. 422) Воды для инъекций до 1 л (ГФУ п. 5. № 2, 1.4, С. 385)

Список литературы

1. Панасенко О. I. Синтез, перетворення, фiзико-хiмiчнi та бюлопчш властивост похщних 1,2,4-три-азолу: дис.... д-а фар мац. наук. - К., 2005. -396 с.

2. Сравнительное фармакокинетическое исследование лекарственных форм с морфолиний 2-[5-(пири-дил-4-ил)1,2,4-триазол-3-илтио] ацетатом / И. В. Бушуева, В. В. Гладышев, А. И. Панасенко, Е. Г. Кныш // Актуальш питання фармац. i мед. науки та практики. - 2014. - № 3 (16). - С. 56-59.

3. Пат. на корисну модель 90228 УкраТна, МПК (2014.01) А61К/31/4196 (2006.01) А61К 9/08 (2006.01) А61Р 29/00 А61Р 31/12 (2006.01). Протиза-пальний та противiрусний ш'екцшний розчин / Бушуева I. В., Книш £. Г., Панасенко О. I., Парченко В. В.; заявник i патентовласники I. В. Бушуева, £. Г. Книш, О. I. Панасенко, В. В. Парченко. - № и 2014 02013; заявл. 27.02.14; опубл. 12.05.14, Бюл. № 9.

4. Государственная фармакопея Украины, дополнение 1. - Харьков.- 2010.

ИССЛЕДОВАНИЕ ХАРАКТЕРИСТИК ГИДРОКСИПРОПИЛ-0ЦИКЛОДЕКСТРИНА И ЕГО КОМПЛЕКСА ВКЛЮЧЕНИЯ С ДИСУЛЬФИРАМОМ МЕТОДОМ 1Н ЯМР

Тюкова Виктория Сергеевна

Аспирантка, Московский государственный университет тонких химических технологий им. М.В. Ломоносова,

г. Москва

Кедик Станислав Анатольевич

Профессор, Доктор технических наук, Московский государственный университет тонких химических технологий

имени М.В. Ломоносова, г. Москва Панов Алексей Валерьевич

Кандидат химических наук, Московский государственный университет тонких химических технологий имени М.В.

Ломоносова, г. Москва Новикова О.О.

Студентка, Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева, г. Москва

INVESTIGATING CHARACTERISTICS OF HYDROXYPROPYL- в-CYCLODEXTRIN AND ITS INCLUSION COMPLEX WITH DISULFIRAM BY NMR 1H

Tyukova V.S., Postgraduate student, Lomonosov Moscow State University of Fine Chemical Technologies, Moscow Kedik S.A, Doctor of Technical Sciences, Professor Lomonosov Moscow State University of Fine Chemical Technologies, Moscow,

Panov A.V, PhD in chemistry, Lomonosov Moscow State University of Fine Chemical Technologies, Moscow Novikova O.O, Student, D. Mendeleyev University of Chemical Technology of Russia, Moscow АННОТАЦИЯ

Циклодекстрины (ЦД) - это олигосахариды циклического строения, способные к образованию комплексов включения с гидрофобными лекарственными веществами и используемые для увеличения растворимости субстанции в воде. Различные производные ЦД, отличающиеся не только заместителями, но и степенью замещения, получили распространение в фармацевтической практике. В данной работе описываются характеристики гидрокси-пропил-в. циклодекстрина (ГПвЦД) и его комплекса включения с дисульфирамом (ДСФ) методом ЯМР 1Н, описано понятие «степень замещения» ГПвЦД и «степень молярного замещения» ГПвЦД. ABSTRACT

Cyclodextrines (CD) are cyclic oligosaccharides capable of complex formation with hydrophobic drug molecules. Various CD derivatives, characterized not only by substituting group but also substitution degree, are well-known in the pharmaceutical