CC BY
137
Эпизоотология, эпидемиология и мониторинг паразитарных болезней
УДК 619:616.993.1
ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ АСПЕКТЫ КРИПТОСПОРИДИОЗА РЕПТИЛИЙ В УСЛОВИЯХ НЕВОЛИ
А.О. ШАРОВА аспирант И.Г. ГЛАМАЗДИН доктор ветеринарных наук
Московский государственный университет прикладной биотехнологии 109316, г. Москва, ул. Талалихина, 33 e-mail: [email protected]
Изучено распространение криптоспоридиоза рептилий в условиях неволи. Описаны методы копроло-гических исследований рептилий с целью выявления ооцист. Зараженность рептилий составила 48,8 %. Стационарные очаги криптоспоридиоза чаще встречаются в частном секторе.
Ключевые слова: криптоспоридиоз, ооцисты, диагностика, змеи, ящерицы.
В условиях частного сектора, в местах разведения, передержки и реализации рептилий г. Москвы насчитывают сотни экземпляров и десятки видов рептилий. Паразитарная ситуация в таких коллекциях очень сложная и трудно прогнозируемая.
Криптоспоридиоз - протозойная зоонозная болезнь животных и человека, вызываемая кокцидиями семейства Cryptosporidiidae, рода Cryptosporidium [7], характеризующаяся дисфункцией желудка, тонкого кишечника, органов дыхания и выделением ооцист. Род включает 11 видов и его представители обнаружены у многих хозяев, включая млекопитающих, птиц, пресмы-кающих и рыб.
Криптоспоридиоз описан у 60 видов рептилий, включая 40 видов змей, 16 видов ящериц и 6 видов черепах. К C. serpentis наиболее чувствительны мелкие виды гремучих змей, королевские змеи, маисовые полоза и альбиносы различных видов. К C. saurophilium чувствительны агамы, гекконы, хамелеоны, ядозубы и вараны. У зеленых игуан описан атипичный внекишечный криптоспоридиоз. Черепахи часто являются латентными носителями крип-тоспоридий. Известны случаи инвазии и у змей, причем до 20 лет [5].
Для криптоспоридиоза характерна фекально-оральная передача с конта-минированными кормами и водой. Доказано, что мухи способны механически переносить C. parvum. В условиях неволи факторами передачи служат загрязненные террариумы.
Симптомы криптоспоридиоза проявляются у рептилий потерей массы тела и периодическими отрыгиваниями через 12-48 ч после приема корма. Спустя несколько недель, а иногда и месяцев, у змей развивается характерное вздутие тела в области желудка. У ящериц и черепах симптомы включают анорексию, истощение, летаргию, размягчение стула или «багровую» диарею. У рептилий с сопутствующей ретровирусной инфекцией, амебиазом, бактериальным энтеритом или находящихся под постоянным стрессом, клиника криптоспоридиоза проявляется быстрее, и болезнь протекает более остро и злокачественно [1].
Криптоспоридиоз представляет большую проблему в зоопарках. Около 20 % змей, поступающих в карантин зоопарка Бронкс в Нью-Йорке, позитив-
ны к криптоспоридиозу по тесту ELISA, и большинство из них - латентные носители. По данным ветеринарной лаборатории Людвигсбурга (Германия), криптоспоридий обнаруживают более чем у 15 % рептилий, исследованных с помощью копроантигенного теста (ProSpecT Cryptosporidium Microplate Assay). У некоторых ящериц описан также внекишечный криптоспоридиоз, когда развивающиеся стадии паразитов были обнаружены в слюнных железах, эпителии почек и евстахиевых трубах [4].
Основным методом диагностики криптоспоридиоза остается выявление ооцист в мазках фекалий, обработанных модифицированными кислотоустойчивыми красками (по Цилю-Нильсену, Файту, в модификации PAS и др.), хотя эти методы не слишком чувствительны и не являются видоспецифич-ными. Также разработано несколько тестов на основе ELISA и иммунофлуо-ресценции. В последнее время в США для определения видов криптоспоридий стали применять ПЦР, хотя этот метод пока не унифицирован и не используется в коммерческих лабораториях. Криптоспоридий можно обнаружить и в гистологических срезах, где паразиты обычно легко окрашиваются гематоксилином и эозином [6].
Профилактика криптоспоридиоза достаточно затруднительна, особенно в зоопарках. В случае эпизоотической вспышки нужны строгие карантинные меры. Латентных носителей можно не лечить, если они изолированы. Зараженных рептилий оставляют в карантине, исключая из программ по разведению, или подвергают эвтаназии. Известны случаи длительной ремиссии и даже спонтанного излечения змей и ящериц, имевших клинический криптос-поридиоз с синдромом регургитации или диареи. Ооцисты способны выживать и сохранять инвазивность в воде при температуре 15 °С более 7 мес, в моче человека - более 63 сут. В террариумах они сохраняют жизнеспособность не менее 5 мес. Они, также как ооцисты других кокцидий, весьма устойчивы к различным дезинфектантам, в том числе к активному хлору и йоду. Аммонийные соединения действуют на ооцисты в концентрации не менее 0,15М, т. е. в разведении 1 : 2-1 : 5 по препарату. Ооцисты чувствительны к высушиванию и температурам выше 65 °С. Эффективны горячий пар, формалин, 5-10 % аммиак. Глутаровый альдегид считают одним из наиболее эффективных средств для обработки террариумов [3].
Материалы и методы
Распространение криптоспоридиоза рептилий изучали в Московском зоопарке, крупных оптовых фирмах по продаже и передержке рептилий и в условиях частного сектора г. Москвы.
Методом тотальной диспансеризации обследовали 135 животных. Животных разделили на две экспериментальные группы: 1 - 72 рептилии с неспецифическими клиническими признаками (анорексия, дегидратация, кахексия) и 2 - 63 рептилии с характерными клиническими проявлениями крип-тоспоридиоза.
Всех животных обследовали копроскопическим методом. Свежие образцы фекалий получали с помощью катетера после массажа кишечника. По возможности свежие фекалии собирали в террариумах.
Полученные фекалии и смывы в первую очередь исследовали методом нативного мазка на микроскопе ЛЮМАМ-Р8 с помощью фазово-контрастного устройства. Небольшой объем фекалий смешивали в эквивалентном объеме физиологического раствора и исследовали каплю материала (20 мкл) под покровным стеклом.
Окраску высушенных мазков фекалий проводили кислотоустойчивыми красителями по Циль-Нильсену и PAS (перийодная кислота/реактив Шиффа). Морфологические компоненты ооцист исследовали под микроскопом Micros MC100 с помощью компьютерной программы MVC-3000.
Результаты и обсуждение Наилучшие результаты получены при исследовании проб из крупных порций фекалий. После кормления рептилий концентрация ооцист в содержимом пищеварительного тракта значительно увеличивается [5].
По морфологии ооцисты гладкие, покрытые оболочкой, разного размера, сферические округлые, овальные, с характерным микропиле на верхнем конце. Также встречались спорулированные ооцисты. В мазках, окрашенных по Цилю-Нильсену, ооцисты окрашивались в темно-розовый цвет, а в мазках, окрашенных PAS, - в красный цвет. Ооцисты, выделенные от змей, более крупные и овальные и принадлежат к виду С. serpentis (рис. 1). Ооцисты, полученные от ящериц, меньше по размеру, округлой формы и относятся к виду C. saurophilium (рис. 2).
Рис. 1. Ооцисты от гадюки Рассела (окраска по Циль-Нильсену, ув. в 1000 раз)
Рис. 2. Ооцисты от йеменского хамелеона (окраска по Циль-Нильсену, ув. в 1000 раз)
Криптоспоридиоз отмечали у гигантского сцинка, египетской и щитковой кобр, тайпана Маккоя, новогвинейского колючего сцинка, черепахи Ки-никса и зеленой игуаны, хотя эти виды потенциально устойчивы к заболеванию и в литературе не упоминается о случаях клинического течения крип-тоспоридиоза у этих видов рептилий.
Среди обследованных рептилий в условиях частного зоосектора характерные признаки криптоспоридиоза обнаружены у 58,7 % животных, неспецифические признаки выявлены у 40,2 % всех обследованных животных.
В организациях по разведению и продаже рептилий типичные признаки криптоспоридиоза установлены у 41,3 %, неспецифические признаки - у 59,8 % (табл. 1).
Высокий процент зараженных рептилий отмечен в частном зоосекторе, где у 41,3 % животных обнаружены неспецифические признаки и у 71,8 % рептилий характерные признаки криптоспоридиоза (табл. 2).
По результатам наших исследований установлено, что во многих торговых точках, в местах передержки, продажи рептилий и у частных заводчиков существуют стационарные очаги криптоспоридиоза, о чем свидетельствуют спонтанные инвазии у разведенных в неволе животных.
В настоящее время наметилась опасная тенденция учащения случаев спонтанного криптоспоридиоза среди чувствительных видов рептилий частного сектора. Часто наблюдают клиническое течение криптоспоридиоза у земляных гекконов, обыкновенных удавов, королевских змей, пятнистых эублефаров, маисовых полозов и йеменских хамелеонов в возрасте не более 5 мес. Очевидно, этих животных покупают в зоомагазинах или с рук. В данной ситуации отсутствует надлежащий контроль за состоянием здоровья рептилий и прослеживается халатное отношение к карантинным и санитарным мероприятиям.
1. Экстенсивность инвазии при криптоспоридиозе рептилий в организациях _по разведению и продаже животных_
Организация, вид Криптоспо ридиоз
рептилий с неспецифическими с характерными
признаками признаками
обследовано заражено обследовано заражено
рептилий рептилий
Московский зоопарк
змеи 10 4 5 3
ящерицы 8 2 3 1
ООО «Аквалого»
змеи 5 2 4 3
ящерицы 4 1 5 3
ООО «Бион»
змеи 6 3 3 3
ящерицы 10 2 6 4
Всего: 43 14 26 17
2. Экстенсивность инвазии при криптоспоридиозе рептилий в условиях част_ ного зоосектора г. Москвы_
Вид рептилий Криптоспоридиоз
с неспецифическими с характерными
признаками признаками
обследовано заражено обследовано заражено
рептилий рептилий
Хамелеон йеменский 6 4 9 6
Бородатая агама 3 - 3 2
Пятнистый эублефар 5 2 7 5
Земляной геккон 4 2 5 3
Обыкновенный удав 3 1 4 2
Маисовый полоз 4 2 5 3
Синалойская коро- 2 1 1 1
левская змея
Калифорнийская мо- 2 - 3 1
лочная змея
Всего: 29 12 37 23
В дальнейшем, ожидается рост числа клинических проявлений болезни у разводимых в неволе рептилий и увеличение риска заболеваемости вследствие накопления ооцист паразитических простейших на объектах окружающей среды.
Литература
1. Васильев Д.Б. Паразитарные болезни рептилий в условиях многовидовой ассоциации зоопарка // Матер. XI Моск. Междунар. Вет. конгр. -2003. - С.203-205.
2. CranfieldM.R., Graczyk T., Wright K. et al. // Bull. ARAV. - 1999. - V. 9. - P. 15-21.
3. Frye F.L. Biomedical and surgical aspects of captive reptile husbandry // Krieger Publishing Company. - 1991. - V. 1. - P. 308-312.
4. Frye F.L., Garman R., Graczyk T. et al. Atypical non-alimentary cryptospo-ridiosis in three lizard. // Proc. ARAV. - 1999. - V. 2. - P. 43.
5. Graczyk T. Diagnosis, therapy and genetic diversity of Cryptosporidium in captive reptiles // Proc.7-th Int. Symposium PMRA. - 2004. - P. 55-60.
6. Graczyk T.K., Owens R., CranfieldM.R. Diagnosis of subclinical cryptos-poridiosis in captive snakes based on stomach lavage and cloacal sampling // Vet. Parasitol. - 1996. - V. 6. - P. 143-151.
7. Tyzzer E. An extracelluar coccidium, Cryptosporidium muris (gen. & sp. nov.), of the gastric glands of the common mouse // J. Med. Res. - 1910. - V. 18. -P. 487-509.
Epizootological aspects of cryptosporidiosis of reptiles in captivity A.O. Sharova, I.G. Glamazdin
The distribution of cryptosporidiosis of reptiles in captivity is studied. The methods of coproscopic researches of reptiles for the purpose of oocysts revealing are described. The reptiles are infected at 48,8 %. The stationary centers of cryptosporidiosis is more often meet in a private sector.
Keywords: cryptosporidiosis, oocysts, diagnosis, snakes, lizards.
