CC BY
4ОРИГИНАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ф
Новости клинической цитологии России Russian News of Clinical Cytology
2023, т.27, №4, с. 05-09 2023, vol.27, № 4, pp. 05-09
https://doi.org/10.24412/1562-4943-2023-4-0001
ЭНДОЦЕРВИКАЛЬНЫЙ ПОЛИП В ПРАКТИКЕ ПАП-ТЕСТА МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ЦИТОЛОГИИ
Н.В. МЕЛЬНИКОВА^, И.Б. АНТОНОВА, Т.А. МОЦКОБИЛИ, Е.А. КУДИНОВА, Т.М. КУЛИНИЧ, В.К. БОЖЕНКО, О.П. БЛИЗНЮКОВ
ФГБУ«Российский научный центррентгенорадиологии». Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "РНЦРР"Минздрава России),Москва, Российская Федерация
Резюме
Введение. Эндоцервикальный полип (ЭЦП) входит в группу доброкачественных поражений железистого эпителия шейки матки, чаще наблюдается у пациенток старше 40 лет. Наличие выраженных реактивных, репа-ративных изменений в эпителии ЭЦП может привести к ошибочному цитологическому заключению о наличии патологических изменений плоского и железистого эпителия. Цель исследования. По результатам ци-то-гистологического сопоставления проанализировать ошибки цитологической диагностики (Пап-тест методом жидкостной цитологии ТЫпРгер) у пациенток с эн-доцервикальными полипами. Материал и методы. Ретроспективно проанализированы результаты Пап-теста ТЫпРгер 274 пациенток. 8 пациенток с гистологически верифицированным ЭЦП были включены в исследование. Результаты. Информативный цитологический материал получен во всех 274 (100%) случаях Пап-теста ТЫпРгер. В 1 из 8 (12,5%) случаев дано ложноположи-тельное цитологическое заключение о наличии ЬБИ. ДНК ВПЧ-тестирование при этом выявило ВПЧ ВКР 35 и 53 типов, а коэкспрессия онкобелков р16!МК4/К167 не была обнаружена. При гистологическом исследовании отмечалось сочетание ЭЦП с хроническим церви-цитом, цервикальной эктопией, полипами эндометрия, влагалища. Заключение. В практике Пап-теста ТЫпРгер доброкачественный характер процесса при ЭЦП верно распознан в 87,5% случаев. Использование двойного окрашивания белка р16!МК4а и маркера пролиферации К1-67 иммуноцитохимическим методом помогает лучше стратифицировать риски плоскоклеточных интраэпи-телиальных поражений.
Ключевые слова: эндоцервикальный полип, Пап-тест, жидкостная цитология, вирус папилломы человека (ВПЧ).
Информация об авторах:
Мельникова Н.В. - ИНр$://огаС.огд/ 0000-0003-1193-352Х
Антонова И.Б. - https://orcid.org/0000-0003-2668-2110 Моцкобили Т.А. - https://orcid.org/ 0000-0001-7996-714X Кудинова Е.А. - https://orcid.org/0000-0002-5530-0591 Кулинич Т.М. - https://orcid.org/ 0000-0003-2331-5753 Боженко В.К. - https://orcid.org/0000-0001-8351-8152 Близнюков О.П. - https://orcid.org/0000-0003-2401-5007
Автор, ответственный за переписку:
Мельникова Надежда Васильевна - e-mail:
n_melnikova@list.ru
Как цитировать:
Мельникова Н.В., Антонова И.Б., Моцкобили Т.А., Кудинова Е.А., Кулинич Т.М., Боженко В.К., Близнюков О.П. Эндоцервикальный полип в практике Пап-теста методом жидкостной цитологии. Новости клинической цитологии России. 2023;27(4):5-9. https://doi. org/10.24412/1562-4943-2023-4-0001
Введение
Эндоцервикальный полип (ЭЦП) относится к группе доброкачественных поражений железистого эпителия шейки матки и может наблюдаться в любом возрасте, хотя чаще отмечается у пациенток старше 40 лет.
ЭЦП - это экзофитное образование, выстланное эндоцервикальным эпителием, покрывающим фиброваскулярный стержень.
Клиническое течение ЭЦП, как правило, бессимптомное, однако, могут наблюдаться кровянистые выделения из влагалища. Сообщается, что этиология и патогенез формирования ЭЦП неизвестны [1].
При патогистологическом исследовании ЭЦП представлен фиброваскулярной тканью, выстланной эпителием эндоцервикального типа с железами, погруженными в строму; также определяется плоскоклеточная метаплазия и/или микрожелезистые изменения, изредка - поверхностная папиллярная пролиферация. Поверхность полипов мо-
жет быть эрозирована, возможны реактивные или репаративные изменения, а также воспалительная инфильтрация [1]. Данные изменения могут сочетаться с децидуоподобной трансформацией стро-мы полипа или быть самостоятельными.
В эндоцервикальных полипах возможно развитие как плоскоклеточных интраэпителиальных поражений (SIL), так и инвазивного рака [2]. В литературе сообщается, что сочетание ЭЦП с предраковыми или злокачественными поражениями шейки матки, эндометрия или яичников отмечается в 15,9% случаев [3].
Согласно литературным данным, ЭЦП встречаются у 6,9% женщин с вирусами папилломы человека (ВПЧ) высокого канцерогенного риска (ВКР), при этом достоверно чаще у пациенток данной группы выявляется ВПЧ 18. Однако, по мнению авторов, пациенты с эндоцервикальными полипами не характеризуются повышенным риском предраковых заболеваний шейки матки [4].
Цитологическая картина ЭЦП, как правило, характеризуется реактивными или репаративными изменениями эпителия. Однако препараты жидкостной цитологии (ЖЦ) в меньшей степени, в сравнении с традиционными, отражают стратификацию в пластах эпителия с репаративными изменениями.
Известно также, что выраженные реактивные изменения в эпителии полипа могут привести к ошибочному цитологическому заключению о наличии патологических изменений как железистого, так и плоского эпителия [1].
Цель исследования
По результатам цито-гистологического сопоставления проанализировать ошибки цитологической диагностики (Пап-тест методом жидкостной цитологии ThinPrep) у пациенток с эндоцерви-кальными полипами.
Материал и методы
Ретроспективно проанализированы результаты морфологического исследования материала (цито- и гистологического) 274 пациенток в возрасте от 20 до 85 лет, средний возраст 52,26±13,80 года (M±SD, M — среднее, SD — среднеквадратичное отклонение), проходивших лечение в ФГБУ "РНЦРР" Минздрава России в 2022-2023 гг. Гистологический материал получен при радиоволновом удалении полипов цервикального канала и при биопсиях шейки матки. Цитологический материал получен путем соскоба из цервикального канала и с шейки матки. Тонкослойные цитологические препараты изготовлены на аппарате TP 2000 с последующей фиксацией 95% этанолом и окрашиванием на автостейнере Leica XL (Leica Microsystems Nussloch GmbH) комплектом красителей ThinPrep. Результаты цитологических исследований Пап-теста были представлены согласно классификации цервикальной цитологии по системе Бетесда [5].
Гистологические заключения даны в соответствии с классификацией опухолей женской половой системы (ВОЗ, 2020 г.) [1].
Из 274 наблюдений в исследование включено 8 гистологически верифицированных эндоцервикальных полипов. Проведено цито-гистологи-ческое сопоставление результатов 8 наблюдений ЭЦП.
В группе с ЭЦП было выполнено типирование и количественное определение ДНК ВПЧ 3-м из 8 (37,5%) пациентов. Для выявления, типирования и количественного определения вируса папилломы человека низкого (HPV 6, 11, 44) и высокого (HPV 16, 18, 26, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 53, 56, 58, 59, 66, 68, 73, 82) канцерогенного риска методом ПЦР применялся набор реагентов «HPV квант-21» (ООО "НПО ДНК-Технология"). В одном наблюдении из 8-ми было выполнено иммуноцитохи-мическое исследование коэкспрессии онкобелков p16INK4/Ki67: из виалы с консервирующим раствором Пап-теста дополнительно изготавливали стеклопрепарат для иммуноцитохимического исследования - набор CINtec PLUS (Roche, Швейцария), иммуногистостейнер BenchMark XT, протокол ThinPrep.
Статистическая обработка выполнена в программном комплексе Statistica 7.0.
Результаты
В исследование включено 8 пациенток с верифицированным ЭЦП. В таблице 1 отражено распределение пациенток в зависимости от гистологического и цитологического диагноза и возраста.
В 7-ми из 8 наблюдений было дано цитологическое заключение об отсутствии интраэпителиаль-ных плоскоклеточных поражений (NILM). В 1-ом из 8-ми наблюдений дано заключении о наличии интраэпителиального поражения плоского эпителия низкой степени (LSIL). В этом наблюдении гистологическое исследование фрагментов экзо- и эндоцервикса выявило хронический эндоцерви-цит и очаги цервикальной эктопии; а также эндо-цервикальный полип в сочетании с фиброэпители-альным полипом влагалища. Следовательно, в 1 из 8 (12,5%) случаев дано ложноположительное цитологическое заключение о наличии плоскоклеточного интраэпителиального поражения низкой степени.
У 2-х пациенток, 39 и 46 лет, с категориями цитологических заключений NILM (no intraepithelial lesion or malignancy - отсутствие интраэпители-ального поражения или злокачественности) ВПЧ не был выявлен. ВПЧ ВКР 35 и 53 типов обнаружены одновременно у пациентки 40 лет c цитологически установленным LSIL (low-grade squamous intraepithelial lesion - плоскоклеточное интраэпи-телиальное поражение низкой степени) и вирусной нагрузкой соответственно 3,7 и 3,2 (lg геномов ВПЧ на 100 тыс. клеток). В последующем у данной пациентки при иммуноцитохимическом исследовании, коэкспрессия онкобелков p16INK4/Ki67 не
Таблица 1
Эндоцервикальный полип. Распределение пациенток в зависимости от типа гистологических и цитологических заключений и возраста
Гистологический диагноз Цитологический диагноз n - число пациенток; средний возраст (M±SD) * лет
Эндоцервикальный полип NILM n=5. 56,60±15,92
Эндоцервикальный полип; хронический цервицит; железисто-фиброзный полип эндометрия NILM n=1, 46
Эндоцервикальный полип; очаговая плоскоклеточная метаплазия железистого эпителия; железисто-фиброзный полип эндометрия NILM n=1, 38
Эндоцервикальный полип; хронический цервицит; очаги цервикальной эктопии, железисто-фиброзный полип влагалища LSIL n=1, 40
*M - среднее, SD - среднеквадратичное отклонение
обнаружена - реакция отрицательная.
Обсуждение
В настоящем исследовании преобладали случаи отсутствия интраэпителиальных поражений и их правильная идентификация при цитологическом исследовании на светооптическом уровне. В 1-м наблюдении отмечена цитологическая гипердиагностика. На рис. 1., вклейка 1 представлена группа эндоцервикальных клеток с увеличенными ядрами с наличием ядрышек; в то же время полярность расположения реактивных эндоцервикаль-ных клеток не нарушена. Оценить размеры ядер клеток цилиндрического эпителия помогает сравнение с диаметром ядра клетки промежуточного слоя. Отмечаются поглощенные нейтрофильные лейкоциты (вклейка 1, рис.2).
Не удалось избежать ошибок интерпретации: переоценена выраженность увеличения ядерно-цитоплазматического соотношения клеток, что привело к ложноположительному заключению о наличии LSIL.
В литературе сообщается, что ВПЧ-тестирование в сочетании с цитологическим исследованием являются более эффективными при стратификации пациенток для прогнозирования будущего риска как СШ3, так и инвазивного рака. Также отмечается, что женщины с положительным результатом теста на ВПЧ должны регулярно проходить повторное обследование до элиминации инфекции [6]. Методика выявления ко-экспрессии белка р16ШК4а и маркера пролиферации Ю-67 иммуноцитохимическим методом показала свою эффективность в качестве теста медицинской сортировки, что согласуется с нашими данными [7].
ВПЧ традиционно считается одним из ключевых факторов возникновения и развития карциномы шейки матки, однако, значительная часть злокачественных эпителиальных новообразований шейки матки, в частности аденокарцином, не связана с ВПЧ [1]. В литературе сообщается, что доля ЭЦП выше среди ВПЧ-позитивных женщин (6,9%),
а к наиболее распространенным типам ВПЧ ВКР относят ВПЧ 16, 18, 51, 39 типов [4]. В нашем исследовании выявлен единственный случай, когда у пациентки 40 лет подтверждены ВПЧ ВКР 35 и 53 типов.
Наличие фокальной реактивной эпителиальной и стромальной гиперплазии может быть обусловлено как повторяющимися эпизодами воспаления, так и аномальной местной реакцией на повышенный уровень эстрогена [2], что согласуется с нашими наблюдениями. Сочетание ЭЦП с патологическими изменениями шейки матки, эндометрия [3], нашло отражение и в данной работе - идентифицированы 2 пациентки с сочетанием ЭЦП и железисто-фиброзного полипа эндометрия, также у 1 пациентки с ЭЦП обнаружен железисто-фиброзный полип влагалища.
Заключение
Таким образом, в нашем исследовании было показано, что в практике Пап-теста методом жидкостной цитологии информативный цитологический материал получен в 100% случаев. Отмечено сочетание ЭЦП с хроническим цервицитом, цервикальной эктопией, полипами эндометрия, влагалища. В практике Пап-теста ThinPrep доброкачественный характер процесса при ЭЦП верно распознан в 87,5% случаев. Дальнейшего изучения требует оценка распространенности различных типов ВПЧ ВКР при ЭЦП. Использование двойного окрашивания белка p16INK4a и маркера пролиферации Ki-67 иммуноцитохимическим методом помогает лучше стратифицировать риски плоскоклеточных интраэпителиальных поражений.
Участие авторов:
Концепт и дизайн исследования: М.Н.В.
Поиск и анализ литературы: М.Н.В., А.И.Б.,
М.Т.И., Б.В.К., К.Т.М., К. Е.А.
выполнение патогистологических исследований: Б.О.П.,
Написание текста рукописи: М.Н.В.
Редактирование текста рукописи: Б.О.П., А.И.Б., М.Т.И., Б.В.К., К.Т.М., К. Е.А.
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. WHO Classification of Tumours Editorial Board. Femail Genital Tumours: WHO Classification of Tumours, 5th ed.; IACR: Lyon, France, 2020; Volume 4. ISBN-13 978-92-832-4504-9
2. Park, C. K., Kim, Y. W., Koh, H. H., Yoon, N., Bae, G. E., & Kim, H. S. (2020). Clinicopathological Characteristics of Squamous Cell Carcinoma and High-grade Squamous Intraepithelial Lesions Involving Endocervical Polyps. In vivo (Athens, Greece), 34(5), 2613-2621. https://doi.org/10.21873/invivo.12079
3. Park CK, Kim YW, Koh HH, Yoon N, Bae GE, Kim HS. Clinicopathological Characteristics of Squamous Cell Carcinoma and High-grade Squamous Intraepithelial Lesions Involving Endocervical Polyps. In Vivo. 2020;34(5):2613-2621. https://doi.org/10.3390/diagnostics12102339
4. Kucukyildiz I, Karaca M, Akgor U, et al. Endo cervical polyps in high risk human papillomavirus infections. Ginekol Pol. 2022;93(1):7-10. https://doi.org/10.5603/GP.a2021.0207
5. Цервикальная цитология по системе Бетес-да: Терминология, критерии и пояснения. Под ред. Р. Найяр, Д. Уилбура; перевод с англ. под ред. Н.Ю. Полонской. Издательский дом "Практическая медицина". 2017. [Cervical cytology according to the Bethesda system: Terminology, criteria and explanations. Ed. by R. Nayyar, D. Wilbur; translated from English ed. By N.Y. Polonskaya. Moscow: Prakticheskaya meditsina; 2017 (In Russ.).] ISBN 978-5-98811-461-1
6. Gilham C, Sargent A, Crosbie EJ, Peto J. Long-term risks of invasive cervical cancer following HPV infection: follow-up of two screening cohorts in Manchester. Br J Cancer. 2023;128(10):1933-1940. https://doi.org/10.1038/s41416-023-02227-9
7. Mazurec K, Trzeszcz M, Mazurec M, Streb J, Halon A, Jach R. Triage Strategies for Non-16/Non-18 HPV-Positive Women in Primary HPV-Based Cervical Cancer Screening: p16/Ki67 Dual Stain vs. Cytology. Cancers (Basel). 2023;15(20):5095. https://doi.org/10.3390/cancers15205095
ENDOCERVICAL POLYP IN THE PRACTICE OF THE LIQUID-BASED CYTOLOGY PAP TEST
N.V. MELNIKOVA^, I.B. ANTONOVA, T.A. MOTSKOBILI, E.A. KUDINOVA, T.M.KULINICH, V.K. BOZHENKO, О.Р. BLIZNYUKOV
Federal State Budgetary Institution "Russian Scientific Center of Roentgenoradiology" of the Ministry of Healthcare of the Russian Federation (RSCRR), Moscow, Russia
Abstract
Introduction. Endocervical polyp (EP) is a benign lesion of the cervical glandular epithelium more common among patients older than 40 years. The presence of reactive, reparative changes in the EP epithelium may mislead to a cytological conclusion about the presence of pathological changes in the squamous and glandular epithelium. The aim. Based on the results of cyto-histological comparison, analyze pitfalls in cytological diagnosis (Pap test using the ThinPrep liquid-based cytology) in patients with endocervical polyps. Material and methods. The results of the ThinPrep Pap test of 274 patients were retrospectively analyzed. 8 patients with histologically verified EPs were included in the study. Results. Informative cytological material was obtained in all 274 (100%) cases of the ThinPrep Pap test. In 1 of 8 (12.5%) cases, a false-positive cytological conclusion about the presence of LSIL was given. HPV DNA testing revealed HCR HPV types 35 and 53, but co-expression of the p16INK4/Ki67 oncoproteins was not detected. Histological examination revealed a combination of EPs with chronic cervicitis, cervical ectopia, endometrial and vaginal polyps. Conclusion. In the practice of the ThinPrep Pap test, the benign nature of the process with EPs was correctly recognized in 87.5% of cases. The use of double immunocytochemi-cal staining of p16INK4a protein and the proliferation marker Ki-67 helps to better stratify the risks of squamous intraepithe-lial lesions.
Keywords: endocervical polyp, Pap test, liquid cytology, Human papillomavirus (HPV).
Information about the authors:
Melnikova N.V. - https://orcid.org/ 0000-0003-1193-352X Antonova I.B. - https://orcid.org/0000-0003-2668-2110 Motskobili T.A. - https://orcid.org/ 0000-0001-7996-714X Kudinova E.A. - https://orcid.org/0000-0002-5530-0591 Kulinich T.M. - https://orcid.org/ 0000-0003-2331-5753 Bozhenko V.K. - https://orcid.org/0000-0001-8351-8152 Bliznyukov О.Р. - https://orcid.org/0000-0003-2401-5007
Corresponding author:
Melnikova Nadezhda Vasilievna - e-mail: n_melnikova@list.ru To cite this article:
Melnikova N.V., Antonova I.B., Motskobili T.A., Bozhenko V.K., Kudinova E.A., Kulinich T.M., Bliznyukov О.Р. Endocervical polyp in the practice of the liquid-based cytology Pap test. Russian News of Clinical Cytology. 2023;27(4):5-9. https://doi. org/10.24412/1562-4943-2023-4-0001
The authors declare no conflict of interest.
Иллюстрации к статье «ЭНДОЦЕРВИКАЛЬНЫЙ ПОЛИП В ПРАКТИКЕ ПАП-ТЕСТА МЕТОДОМ ЖИДКОСТНОЙ ЦИТОЛОГИИ». Мельникова Н.В., Антонова И.Б., Моцкобили Т.А., Кудинова Е.А., Кулинич Т.М., Боженко В.К., Близнюков О.П., стр. 5
Illustrations for the article «ENDOCERVICAL POLYP IN THE PRACTICE OF THE LIQUID-BASED CYTOLOGY PAP TEST». Melnikova N.V., Antonova I.B., Motskobili T.A., Bozhenko V.K., Kudinova E.A., Kulinich T.M., Bliznyukov О.Р., page 5
m
л
Рис. 1. Пап-тест ThinPrep.
Реактивные изменения клеток цилиндрического эпителия
Окрашивание азур-эозином, х 400.
Fig. 1. ThinPrep Pap test.
Reactive changes in columnar epithelial cells.
Azure-eosin staining, х 400.
Рис. 2. Пап-тест ThinPrep.
Реактивные изменения клеток цилиндрического эпителия. Полиморфизм клеток цилиндрического эпителия, поглощенные нейтрофильные лейкоциты. Окрашивание азур-эозином, х 1000. Fig. 2. ThinPrep Pap test.
Reactive changes in columnar epithelial cells. Polymorphic columnar epithelial cells, engulfed neutrophilic leukocytes. Azure-eosin staining, х 1000.
