CC BY
72
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ■
Пономарев Б.Л., Обухова Л.Е., Высоцкий Ю.А., Барсукова Н.И., Черданцева Т.М.
Алтайский государственный медицинский университет,
г. Барнаул
ЭМБРИО- И ФЕТОГЕНЕЗ ПЕЧЕНИ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ МАТЕРИ АНТРОПОГЕННЫХ ФАКТОРОВ ХИМИЧЕСКОГО ПРОИЗВОДСТВА
Проведено изучение клеточного состава печени и пролиферативной активности эндотелиоцитов эмбрионов и плодов человека в ранние сроки беременности при воздействии на организм матери антропогенных факторов шинного производства. Установлено снижение митотической активности эндотелиоцитов печени, замедление процессов цитодиф-ференцировки гепатоцитов эмбрионов и плодов человека.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: эмбрион; плод; гепатоцит; эндотелиоцит; антропогенные факторы.
Ponomarev B.L., Obuhova L.E., Vysoski U.A., Barsukova N.I., Cherdantseva T.M.
Altay State Medical University, Barnaul
LIVER EMBRYO AND FETOGENESIS AFTER EXPOSING PREGNANT WOMEN TO TIRE MANUFACTURING ANTHROPOGENIC FACTORS
The subjects of the study is liver cellular composition and embryo and fetus proliferative activity of endotheliocytes during the early stages of pregnancy after exposing pregnant women to the tire manufacturing anthropogenic factors. The decrease of endotheliocyte mitotic activity and deceleration of cytodifferention processes are identified.
KEY WORDS: embryo; fetus; hepatocyte; endotheliocyte; anthropogenic factors.
Исследование механизмов взаимосвязи эмбриона и плода с матерью на различных этапах беременности, а также изучение механизмов адаптации матери и плода в физиологических и патологических условиях является важным звеном в профилактике перинатальной смертности [1-3].
У эмбриона и плода ведущей является функция развития (рост, детерминация, дифференцировка, формирование органов и их систем) [4]. В клетках печени эмбрионов и плодов человека различают три типа гепатоцитов: малодифференцированные, переходные и дифференцированные [5-7]. Параллельно с дифференцировкой гепатоцитов происходят ульт-раструктурные изменения эндотелиоцитов печени [8]. Эндотелиоциты являются основным компонентом гис-то-гематических барьеров, во многом определяющим гистогенез и нормальное функционирование печени [8]. Научный интерес представляют вопросы эмбрио-и фетогенеза стромальных и паренхиматозных элементов печени, органа, выполняющего на протяжении внутриутробного периода развития многочисленные функции, как в норме, так и при неблагоприятных условиях.
Цель исследования — изучение структурных изменений печени эмбрионов и плодов человека при воздействии на мать факторов шинного производства.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Объектом исследования служили образцы печени эмбрионов и плодов человека на 7-14 неделе внутриутробного развития, взятые при медицинских абортах по социальным показаниям (в соответствии с Постановлениями Правительства РФ от 8 мая 1996 го-
да № 567 и от 11 августа 2003 года № 485) от матерей, работающих в основных цехах шинного производства (основная группа), и от матерей, не связанных с шинным производством (контрольная группа). Для проведения исследования было получено разрешение локального этического комитета. Печень, взятая у 240 эмбрионов и плодов, распределялась по четырем возрастным группам: 7-8 недель, 9-10 недель, 11-12 и 13-14 недель внутриутробного развития. Для световой микроскопии материал после обезвоживания в спиртах заливали в парафин. С парафиновых блоков на ротационном микротоме готовили срезы толщиной 7-10 мкм. Для электронной микроскопии кусочки органов дофиксировали в 1 % растворе осмиевой кислоты. Обезвоживание проводили этанолом, начиная с 30° до абсолютного, затем материал заключали в аралдит. Ультратонкие срезы контрастировали свинцом по Рейнольдсу и изучали в электронном микроскопе УЭМВ-100К.
Изучали клеточный состав печени. Определяли процентное соотношение гепатоцитов разной степени дифференцировки. Для подсчета использовали окулярную сетку из 25 квадратов со стороной 9 мкм в десяти полях зрениях (2025 мкм2). Готовили по 7 срезов от каждого объекта исследования. Митотический индекс рассчитывали на 1000 эндотелиальных клеток печени и вычисляли его в промилле. Все количественные показатели имели нормальное распределение (тест Колмагорова-Смирнова). Значимость
Корреспонденцию адресовать:
ОБУХОВАЛариса Евстигнеевна, 656038, г. Барнаул, пр. Ленина, 54-57. Тел. 8 (3852) 26-05-36.
E-mail: lirisse@yandex.ru
с/^пъи^1явс>^узбассе №3(42) 2010
■ ЭМБРИО- И ФЕТОГЕНЕЗ ПЕЧЕНИ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ НА ОРГАНИЗМ МАТЕРИ АНТРОПОГЕННЫХ ФАКТОРОВ ХИМИЧЕСКОГО ПРОИЗВОДСТВА
различий сравнивали по 1-критерию Стьюдента. Результаты работы представлены в виде значений М (средняя арифметическая) ± т (стандартная ошибка среднего). Оценку межгрупповых различий проводили при помощи критерия Стьюдента. За статистически значимые различия показателей принималось значение р < 0,05.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Печень с 7 по 14 недели эмбрио- и фетогенеза контрольной группы отличалась наличием в ней гепа-тоцитов, находящихся на разных стадиях дифферен-цировки. У эмбрионов 7-8 недель внутриутробного развития преобладали, в основном, малодифференцированные гепатоциты (68,5 ± 1,4 %), на 910-й неделе гистогенеза этого органа возрастало количество переходных гепатоцитов (48,5 ± 1,4 %). С 11-й недели фетогенеза в большом количестве обнаруживались гепатоциты, вступившие в заключительную стадию цитодифференцировки, в которых наблюдали последовательное укрупнение специализированных органелл, что можно рассматривать как становление углеводной и белковообразующей функции печени.
Изучение эмбрионов человека от матерей, работающих в основных цехах шинного производства, показывает, что на 7-14 неделе внутриутробного раз-
вития клетки, образующие печень, были отечными. При электронно-микроскопическом исследовании в гепатоцитах обнаруживали вакуолизированные митохондрии, расширенные участки гранулярного рети-кулума, разнообразные по размерам вакуоли и миелиноподобные тельца. Ядра этих клеток, в основном, неправильной формы, перинуклеарное пространство расширено. В отдельных отростках гепатоцитов наблюдали резкие булавовидные расширения.
Установлено, что под влиянием антропогенных факторов химической природы происходит изменение клеточного состава печени (рис. 1). Во все сроки исследования регистрировали снижение доли дифференцированных гепатоцитов (р < 0,05), соответственно наблюдали увеличение процента малодифференцированных и переходных клеток печени.
По мере развития эмбриона и плода происходила не только дифференцировка клеток паренхимы печени, но и стромы: клеток соединительной ткани, а также эндотелиоцитов. Изменялись качественные и количественные показатели функциональной активности клеток органа. Установлено, что с 7-й по 14-ю недели гистогенеза печени митотическая активность эндотелиоцитов различна как в контольной, так и в основной группах (рис. 2). Наибольшая митотическая активность этих клеток приходилась на 7-8-ю недели внутриутробного развития в контрольной группе (74,2 ± 2,4 %0). По мере увеличения воз-
Рисунок 1
Клеточный состав печени эмбрионов и плодов человека в контрольной и основной группах
Примечание: М ± 1Г1; * р < 0,05 - статистическая значимость различий показателей с контрольной группой.
%
11-12
13-14
недели
К дифференцированные гепатоциты контрольной группы (1; дифференцированные гепатоциты основной группы
Сведения об авторах:
ПОНОМАРЕВ Борис Лаврентьевич, доктор мед. наук, профессор кафедры гистологии ГОУ ВПО «АГМУ Росздрава», г. Барнаул, Россия. ОБУХОВА Лариса Евстигнеевна, канд. мед. наук, доцент кафедры биологии с экологией ГОУ ВПО «АГМУ Росздрава», г. Барнаул, Россия. ВЫСОЦКИЙ Юрий Александрович, доктор мед. наук, профессор, зав. кафедрой нормальной анатомии человека ГОУ ВПО «АГМУ Росздрава», г. Барнаул, Россия.
БАРСУКОВА Наталья Ивановна, канд. мед. наук, преподаватель кафедры гистологии ГОУ ВПО «АГМУ Росздрава», г. Барнаул, Россия. ЧЕРДАНЦЕВА Татьяна Михайловна, канд. мед. наук, доцент кафедры гистологии, зав. морфологической лабораторией ЦНИЛ ГОУ ВПО «АГ-МУ Росздрава», г. Барнаул, Россия.
№3(42) 2010 су/^гь и^іія вс7Іузбассе
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ■
Рисунок 2
Динамика митотической активности эндотелиальных клеток печени эмбрионов и плодов человека в контрольной и основной группах
Примечание: М ± т; * р < 0,05 - статистическая значимость различий показателей с контрольной группой.
>н
S
11-12
13-14
недели
К эндотелиоциты капилляров печени контрольной группы Г; эндотелиоциты капилляров печени основной группы
раста эмбриона и плода (контрольная группа) она постепенно снижалась. С завершением цитодиффе-ренцировки и началом специфической деятельности органа число делящихся клеток уменьшается [911]. Высокий митотический индекс указывает на то, что в эмбриональный период в печени эмбрионов и плодов человека происходит интенсивное становление структурных элементов. В случае воздействия на мать антропогенных факторов шинного производства выявлено снижение митотического индекса в печени эмбрионов и плодов с 7-й по 14-ю недели онтогенеза по сравнению с контрольной группой ^ < 0,05).
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Таким образом, дифференцировка гепатоцитов эмбрионов и плодов человека в раннем пренатальном онтогенезе протекает в определенной последовательности, как в норме, так и под воздействием антропогенных факторов шинного производства. Снижение митотической активности эндотелиоцитов печени, замедление процессов цитодифференцировки гепатоци-тов эмбрионов и плодов основной группы, по сравнению с контрольной, обусловлено негативным влиянием антропогенных факторов шинного производства на систему мать-плод.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Колейчик, Л.А. К вопросу об оценке суммарного воздействия факторов окружающей среды на организм беременных /Л.А. Колей-чик //Вестн. Амурской обл. больницы № 17. - Благовещенск, 2002. - С. 8-9.
2. Тонкова-Ямпольская, Р.В. Состояние здоровья детей с учетом факторов анте - и постнатального риска /Р.В Тонкова-Ямпольская //Рос. педиатр. журн. - 2002. - № 1. - С. 61-62.
3. Doppler and birth weight Z score: predictors for adverse neonatal outcome in severe fetal compromise /F.C. de Silva, R.A. de Sa, P.R. de Carvalho, L.M. Lopes //Cardiovasc. Ultrasound. - 2007. - V. 20, N 5. - P. 15.
4. Аршавский, И.А. Физиологические механизмы и закономерности индивидуального развития /И.А. Аршавский. - М., 1982. - 270 с.
5. Внутриутробное развитие человека /под ред. А.П. Милованова, С.В. Савельева. - М.: МДВ, 2006. - 384 с.
6. Калашникова, М.М. Характеристика морфологической дифференцировки гепатоцитов животных разных классов в онтогенезе в зависимости от особенностей питания /М.М. Калашникова //Бюл. эксперимент. биологии и медицины. - 1997. - Т. 123, № 1. - С. 4-10.
7. Ilieva, P. Hepatocyte ultra structure in human prenatal ontogeny /Ilieva P., Mushatova Р. //Ski. Works Higher Med. Inst. Prevent. - 1992. -V. 14, N 1. - P. 17-20.
8. Бобрик, И.И. Ультраструктурная организация эндотелиоцитов синусоидов печени человека в пренатальном периоде /И.И. Бобрик, Е.А. Шевченко, Г.А. Алимов //Морфология. - 1987. - Т. 92, № 6. - С. 43-46.
9. Валькович, Э.И. Дифференцировка эпителиев капсулы капиллярных клубочков почек у крыс в онтогенезе /Э.И. Валькович, М.Ю. Скворцова //Морфология. - 1997. - Т. 112, № 4. - С. 67-72.
10. Гарсия Родригес, Р.Э. Сравнительное изучение эпителия и мезенхимы тонкой кишки крысы в процессе эмбриогенеза. Митотическая активность и объем ядер /Р.Э. Гарсия Родригес //Архив АГЭ. - 1982. - Т. 82, № 2. - С. 63-68.
11. Полищук, А.М. Особенности пролиферации гепатоцитов в растущей и регенерирующей печени /А.М. Полищук //Успехи совр. биологии. - 1983. - Т. 96, № 3. - С. 451-463.
с/^пъи^1явс>^узбассе №3(42) 2010
49
