CC BY
58
геометрическому титров антител после однократной и двукратной вакцинации с интервалом введения 28 сут. (табл. 4).
В соответствии с полученными данными: у добровольцев, после первой вакцинации ПАНДЕФЛЮ, уровень сероконверсии - 60,0%, уровень серопротекции
- 43%, при этом фактор сероконверсии достигал значения 4,4, СГТ - 25,6.
После двукратной вакцинации с интервалом введения 28 суток уровень сероконверсии увеличился до 87,0%, уровень серопротекции - до 68%, фактор сероконверсии - до 7,3, СГТ - 42,3. В результате полученных данных было доказано, что вакцина «ПАНДЕФЛЮ» безопасна и низко реактогенна, обладает высокими им-муногенными свойствами.
После объявления пандемии, мировые производители лекарственных средств приступили к разработке и созданию новых пандемических вакцин. Однако для внедрения их в клиническую практику необходимо было провести полный спектр экспериментально-клинических исследований с получением объективных доказательств безопасности и иммунологической эффективности вакцин. Специалистами ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ, филиал Предприятия в г. Уфа «Иммунопрепарат» разработана пандемическая вакцина «ПАНДЕФЛЮ»
- Вакцина гриппозная инактивированная субъеди-ничная адсорбированная моновалентная, штамм А/ Са1іішпіа/7/2009(НЩ1)у. В рамках клинического иссле-
дования оценена реактогенность и безопасность вакцины «ПАНДЕФЛЮ» на основании регистрации местных и системных реакций, показателей анализов крови и
мочи. Местные и системные реакции сильной и средней степени выражен-ности не отмечались. Все возникающие реакции были слабой степени выраженности, имели транзиторный характер и исчезали в течение первых суток. Показатели клинического и биохимического анализов крови, общего анализа мочи на всех сроках наблюдения находились в пределах нормальных значений, что указывает на безопасность вакцины. Применение вакцины приводило к снижению уровня общего 1§£ в группе привитых с исходно высоким уровнем показателя, что косвенно отражает иммунокорре-гирующее действие препарата.
При изучении иммуногенности препарата показано, что вакцина «ПАНДЕФЛЮ» как после однократного, так и после двукратного введения с интервалом 28 суток, обладает высокими иммуногенными свойствами по критериям уровня сероконверсии, уровню серопро-текции, фактору сероконверсии, которые соответствуют требованиям, предъявляемым к инактивированным гриппозным вакцинам. Таким образом, в результате проведенного исследования доказана хорошая переносимость, ареактогенность, безопасность и высокая им-муногенность вакцины, что позволило рекомендовать вакцину для специфической профилактики пандемического гриппа типа А/НШ1 у лиц 18-60 лет.
Таблица 4
Иммуногенность инактивированной гриппозной вакцины ПАНДЕФЛЮ, приготовленной на основе штамма А/СаШЬгша/7/2009(Н1Ы1)у (реакция РТГА)
Препарат Число добро- вольцев Уровень сероконверсии Уровень серопротекции Фактор сероконверсии СГТ
После V1 После V2 После V1 После V2 После После До После После
абс. % абс. % абс. % абс. % V1 V2 V1 V1 V2
ПАНДЕФЛЮ 99 59 60 86 87 43 43 67 68 4,4 7,3 5,8 25,6 42,3
Плацебо 40 0 0 1 3 3 8 3 8 1,0 1,0 7,7 7,9 7,9
ЛИТЕРАТУРА
1. Белоусов Ю.Б. Планирование и проведение клинических исследований лекарственных средств. - М., 2000.
2. Беляев А.Л., Слепушкин А.Н. Современное состояние проблемы гриппа и острых респираторных заболеваний (ОРЗ). // РЭТ-инфо. - 2004. - №4. - С.29-33.
3. Киселев О.И., Малый В.П., Коваленко А.Л. Грипп А/ НШ1 как типичная эмерджентная инфекция (вирусологические, клинико-эпидемиологические особенности, вопросы терапии и профилактики). - СПб., 2009. - 49 с.
4. Медуницын Н.В. Вакцинология. - М., 2004. - 448 с.
5. Национальный стандарт Российской Федерации «Надлежащая клиническая практика» № 232-ст. от 27.09.2005 г.
6. Приказ Минздрава РФ №266 от 19.06.2003 г. «Правила клинической практики в Российской Федерации».
7. Федеральный закон №122-ФЗ от 22.08.2004 «О лекарственных средствах».
8. www.who.int
9. Swine influenza World Health Organization 27 April 2009.
10. www.epidemiolog.ru
11. www.rospotrebnadzor.ru
Информация об авторах: 115088, г. Москва, ул. Дубровская, д. 15, ФГУП «НПО «Микроген» МЗ РФ, тел - (495) 790-77-73 (доб. 20-98), е-шаИ: d.s.bushmenkov@microgen.ru, Миронов Александр Николаевич - начальник управления, д.м.н.; Романова Анна Александровна - начальник отдела; Купина Наталья Викторовна - начальник отдела; Бушменков Дмитрий Сергеевич - начальник отдела; Цаан Андрей Александрович - главный специалист; Ерофеева Марианна Константиновна -руководитель лаборатории; Костинов Михаил Петрович - заведующий лабораторией.
© ПОНОМАРЕВ Б.Л., ОБУХОВА Л.Е., ВЫСОЦКИЙ Ю.А., БАРСУКОВА Н.И., БОРОДИНА Г.Н., ЧЕРДАНЦЕВА Т.М., БОЛГОВ А.А. - 2011 УДК 616 - 053.2
ЭМБРИО- И ФЕТОГЕНЕЗ СТРОМАЛЬНЫХ И ПАРЕНХИМАТОЗНЫХ ЭЛЕМЕНТОВ ПЕЧЕНИ ЧЕЛОВЕКА
Борис Лаврентьевич Пономарев, Лариса Евстигнеевна Обухова, Юрий Александрович Высоцкий,
Наталья Ивановна Барсукова, Галина Николаевна Бородина, Татьяна Михайловна Черданцева,
Александр Андреевич Болгов
(Алтайский государственный медицинский университет, г. Барнаул, ректор - д.м.н., проф. В.М. Брюханов, кафедра нормальной анатомии человека, зав. - д.м.н., проф. Ю.А. Высоцкий)
Резюме. Проведено изучение клеточного состава печени и пролиферативной активности эндотелиоциов эмбрионов и плодов человека в ранние сроки беременности. В эмбрио- и фетогенезе печени происходит качественное и количественное изменение гепатоцитов разной степени зрелости.
Ключевые слова: эмбрион, плод, гепатоцит, эндотелиоцит.
EMBRYO AND FETOGENESIS OF STROMAL AND PARENCHYMAL LIVER ELEMENTS OF HUMAN
B.L. Ponomarev, L.E. Obuhova, U.A. Vysoski, N.I. Barsukova, G.N. Borodina, T.M. Cherdantseva, A.A. Bolgov
(Altay State Medical University)
Summary. The subjects of the exploration are the content of hepatocytes and proliferation activity of endotheliocytes of human embryos and fetuses in early stages of pregnancy. There are qualitative and quantitative changes of different maturity levels of hepatocytes.
Key words: embryo, fetus, hepatocyte, endotheliocyte.
У эмбриона и плода ведущей является функция развития (рост, детерминация, дифференцировка, формирование органов и их систем) [1]. В клетках печени эмбрионов и плодов человека различают три типа ге-патоцитов: малодифференцированные, переходные и дифференцированные [4,6,8]. Параллельно с дифферен-цировкой гепатоцитов происходят ультраструктурные изменения эндотелиоцитов печени [2]. Эндотелиоциты являются основным компонентом гематоцеллюляр-ных барьеров, во многом определяющим гистогенез и нормального функционирования печени [2]. Научный интерес представляют вопросы эмбрио- и фетогенеза стромальных и паренхиматозных элементов печени, органа, выполняющего на протяжении внутриутробного периода развития многочисленные функции.
Целью настоящего исследования явилось изучение процессов пролиферации, дифференцировки клеток печени в ходе нормального гистогенеза в ранние сроки беременности.
Материалы и методы
ное распределение (тест Колмогорова-Смирнова). Значимость различий сравнивали по ^критерию Стьюдента. Результаты работы представлены в виде значений М (средняя арифметическая) ± ш (стандартная ошибка среднего). Оценку межгрупповых различий проводили при помощи критерия Стьюдента. За статистически значимые различия показателей принималось значение р < 0,05.
Результаты и обсуждение
Печень с 7 по 14 недели эмбриогенеза отличалась наличием в ней гепатоцитов, находящихся на разных стадиях дифференцировки (рис. 1). У эмбрионов 7-8 недель внутриутробного развития преобладали, в основном, малодифференцированные гепатоциты (68,5%), на 9-10-й неделе гистогенеза этого органа возрастало количество переходных гепатоцитов (48,5%). С 11-й недели фетогенеза обнаруживались в большом количестве ге-патоциты, вступившие в заключительную стадию цито-дифференцировки.
80 70 60 зг 50 * 40 Ч 30 20 10 о
7-8 9-10 11-12 13-14
недели
И малодифференцированные гепатоциты □ переходные гепатоциты И дифференцированные гепатоциты Рис. 1. Клеточный состав печени эмбрионов и плодов человека.
Материалом для исследования послужили препараты печени эмбрионов и плодов человека в возрасте от 7 до 14 недель внутриутробного развития, полученные при прерывании физиологически протекающей беременности по социальным показаниям (в соответствии с Постановлениями Правительства РФ от 08.05.1996 года №567 и от 11.08.2003 года №485). Для проведения исследования было получено разрешение локального этического комитета и индивидуальное информированное согласие от каждой женщины на взятие абортивного материала для исследования. В ходе работы были соблюдены этические принципы проведения медицинских исследований согласно Хельсинской декларации - редакция 2000 г. Печень, полученная от 120 эмбрионов и плодов, распределялась по четырем возрастным группам: 7-8 недель, 9-10 недель, 11-12 и 13-14 недель внутриутробного развития.
Для световой микроскопии материал после обезвоживания в спиртах заливали в парафин. С парафиновых блоков на ротационном микротоме готовили срезы толщиной 7-10 мкм. Для электронной микроскопии кусочки органов дофиксировали в 1% растворе осмиевой кислоты. Обезвоживание проводили этанолом, начиная с 30о до абсолютного, затем материал заключали в аралдит. Ультратонкие срезы контрастировали свинцом по Рейнольдсу и изучали в электронном микроскопе УЭМВ-100К.
Изучали клеточный состав печени. Определяли процентное соотношение гепатоцитов разной степени диф-ференцировки. Для подсчета использовали окулярную сетку из 25 квадратов со стороной 9 мкм в десяти полях зрениях (2025 мкм2). Готовили по 7 срезов от каждого объекта исследования. Митотический индекс рассчитывали на 1000 эндотелиальных клеток печени и вычисляли его в промилле.
Все количественные показатели имели нормаль-
Малодифференцированные гепатоциты представляли собой сравнительно мелкие клетки округлой формы с большим эллипсовидным или овальным ядром. При электронной микроскопии они характеризовались слабым развитием внутриклеточных органелл, крупными ядрами с диффузным распределением хроматина. Регистрировались немногочисленные мелкие митохондрии с короткими кристами и прозрачным матриксом. Они тесно примыкали к ядру клетки. Канальцы гранулярного ретикулума были заполнены мелкодисперсным содержимым.
В ядрах переходных гепатоцитов хроматин располагался диффузно. Кариолемма состояла из внутренней и наружной мембран и хорошо контурировалась. В цитоплазме переходных гепатоцитов локализовались мелкие митохондрий с плотным матриксом и часто расположенными листовидными кристами.
В дифференцированных гепатоцитах митохондрии
аэндотелиоциты капилляров печени контрольной группы
Рис. 2. Динамика митотической активности эндотелиальных клеток печени эмбрионов и плодов человека.
имели овальную форму. В них наблюдались кристы с большей протяженностью, и они располагались перпендикулярно к длинной оси органелл. В этих клетках наблюдались хорошо сформированные органеллы цитоплазмы, типичные для эукариотической клетки. Наличие подобных трех типов клеток и последователь-
ное укрупнение специализированных органелл в гепатоцитах говорят о том, что в этот период происходит становление углеводной и белковообразующей функции печени.
По мере развития эмбриона и плода происходила не только дифференцировка клеток паренхимы печени, но и стромы: клеток соединительной ткани, а также эндотелиоцитов. Изменялись не только качественные, но и количественные показатели функциональной активности клеток органа. Установлено, что с 7 по 14 недели гистогенеза печени митотическая активность эндотелиоцитов различна (рис. 2). Наибольшая митотическая активность этих клеток приходилась на 7-8-ю неделю внутриутробного развития (72,2%о). По мере увеличения возраста плода она постепенно снижалась (р>0,05). С завершением цитодифференцировки и началом специфической деятельности органа число делящихся клеток уменьшается [3,5,7].
Таким образом, дифференцировка гепатоцитов эмбрионов и плодов человека в раннем пренатальном онтогенезе протекает в определенной последовательности. Она сопровождается изменением пролиферативной активностью эндотелиоцитов печени. Происходит последовательная смена трех типов клеток, которые отражают различные стадии диффе-ренцировки гепатоцитов: малодифференцированные, переходные и дифференцированные.
ЛИТЕРАТУРА
1. Аршавский И.А. Физиологические механизмы и закономерности индивидуального развития. - М., 1982. - 270 с.
2. Бобрик И.И., Шевченко Е.А., Алимов Г.А. Ультраструктурная организация эндотелиоцитов синусоидов печени человека в пренатальном периоде // Морфология. - 1987. - Т. 92. №6. - С.43-46.
3. Валькович Э.И., Скворцова М.Ю. Дифференцировка эпителиев капсулы капиллярных клубочков почек у крыс в онтогенезе // Морфология. - 1997. - Т. 112. №4. - С.67-72.
4. Внутриутробное развитие человека / Под ред. А.П. Милованова, С.В. Савельева. - М.: МДВ, 2006. - 384 с.
5. Гарсия Родригес РЭ. Сравнительное изучение эпителия и мезенхимы тонкой кишки крысы в процессе эмбриогене-
за. Митотическая активность и объем ядер // Архив АГЭ. -1982. - Т. 82. №2. - С.63-68.
6. Калашникова М.М. Характеристика морфологической дифференцировки гепатоцитов животных разных классов в онтогенезе в зависимости от особенностей питания // Бюл. эксперимент. биологии и медицины. - 1997. - Т. 123. №1. -
С.4-10.
7. Полищук А.М. Особенности пролиферации гепатоци-тов в растущей и регенерирующей печени // Успехи совр. биологии. - 1983. - Т. 96. №3. - С.451-463.
8. Ilieva P., Mushatova Р Hepatocyte ultra structure in human prenatal ontogeny // Ski. Works Higher Med. Inst. Prevent. -1992. - Vol. 14. №1. - P. 17-20.
Информация об авторах: тел. (3852) 26-05-36, е-шаП: lirisse@yandex.ru, Пономарев Борис Лаврентьевич - профессор, д.м.н.; Обухова Лариса Евстигнеевна - доцент, к.м.н.; Высоцкий Юрий Александрович - профессор, заведующий кафедрой, д.м.н.; Барсукова Наталья Ивановна - ассистент, к.м.н.; Бородина Галина Николаевна - доцент, к.м.н.;
Черданцева Татьяна Михайловна -доцент, к.м.н.; Болгов Александр Андреевич - доцент, к.м.н.
© РАХМИЛЕВИЧ А.Б., ЧАНЦЕВ А.В., РАСПОПОВА Е.А. - 2011
РОЛЬ АРТРОФОНОГРАФИИ В ОЦЕНКЕ ЭФФЕКТИВНОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ПОВРЕЖДЕНИЙ И ЗАБОЛЕВАНИЙ КОЛЕННЫХ СУСТАВОВ
Александр Борисович Рахмилевич, Александр Вениаминович Чанцев, Евгения Алексеевна Распопова (Алтайский государственный медицинский университет, ректор - д.м.н. проф. В.М. Брюханов, кафедра травматологии, ортопедии и военно-полевой хирургии, зав. - д.м.н., проф. А.А. Коломиец)
Резюме. Проведены артрофонографические исследования с оценкой функционального состояния коленных суставов у 83 больных с остеоартрозом коленных суставов II ст. и у 40 - с травматическими повреждениями менисков до и после лечения. При сравнительных исследованиях артрофонограмм в динамике лечения выявлено снижение интенсивности суставных шумов у больных остеоартрозом коленных суставов и их исчезновение у больных с повреждениями менисков. Результаты проведенных исследований подтвердили возможность использования методов артрофонографического контроля адекватности и эффективности лечения этих заболеваний.
Ключевые слова: остеоартроз, повреждение менисков, диагностика, эффективность лечения.
ROLE OF ARTROOPHNOGRAPHY IN THE ESTIMATION OF EFFICIENCY OF TREATMENT OF DAMAGES AND DISEASES OF KNEE JOINTS
A.B. Rahmilevich, A.V. Chantsev, E.A. Raspopova (Altay State Medical University, Barnaul)
