CC BY
33studies showed that the associated disease withescherichiosis and salmonellosis in hens develops chronically because carrying bacteria doesnot have any specific clinical symptoms and pathological changes. During the autopsy pneumonia, catarrhal enteritis, anemia (sometimes with hyperplasia) of spleen, dystrophy of liver and kidney were registered. Presence of shapeless yellow-grey spots of different dimensions under liver capsule is more specific feature. Histological methods showed that these are sites of liver wet necrosis at intrahepatic cholestasis.Detected during autopsy single or plural interflowing shapeless sports under capsule of liver and in its parenchyma are the signs of necrosis. At associated escherichiosis and salmonellosis laying hens developed both dry and wet liver necrosis. At sites of dry necrosis no walls of capillaries, fibres or core of connecting tissue cells remained, also no proliferating tissue cells were detected in peripheral area.
KEYWORDS: escherichiosis, salmonellosis, histological study, chicken, liver, necrosis.
References
1. Kozhemyaka, N.G. Esherihioz broylerov [Broiler chicken escherichiosis of broilers] / N.G. Kozhemyaka // Zhivotnovodstvo Rossii. - 2008. - Vol. 11. - P. 15-16.
2. Lenchenko, E.M. Gistohimicheskie issledovaniya pri zarazhenii ptits toksigennymi esherihiyami [Histochemical studies at avian infection with toxigenic escherichia] / E.M.Lenchenko, E.A.Mansurova // Agrarnaya nauka. - 2012. -Vol. 4. - P. 29-30.
3. Bakulin, V.A. Bolezni ptits [Avian diseases]/ V.A.Bakulin. - St. Petersburg: St. Petersburg state academy of Veretinary Medicine, 2006. - 686 p.
4. Shestakov, V.A. Gistostruktura follikulov selezenki, bursy Fabritsiusa, slepyh kishok broylerov pri esherihioze [Histological structure of spleen follicles, Bursa Fabricius, blind guts in broilers having escherichiosis]/V. A.Shestakov, S. B. Lysko// The Bulletin of Omsk state agricultural university. - 2014. - Vol. 1. - P. 64-67.
5. Shestakov, V.A. Patologogistologicheskaya harakteristika pecheni i pochek indushat pri esherikhioze [Pathological histological characterization of liver and kidney in turkey chicken with escherichiosis] / V.A.Shestakov, S.B.Lysko, O.A.Suntsova // innovatsionnoye obespecheniye yaichnogo I myasnogo ptitsevodstva Rossii - Innovation-based egg and meat poultry farming in Russia: proceedings from the scientific and practical conference. - Sergiyev Posad, 2015.
- P. 495-497.
6. Shestakov, V.A. Gistostruktura pecheni I pochek indushat pri esherikhioze [Pathological histological structure of liver and kidney in turkey chicken having escherichiosis] / V.A.Shestakov, S.B.Lysko // Vestnik veerinarii. - 2015. - Vol. 2 (73). - P. 19-22.
7. Shestakov, V.A. Gistostruktura ochagov nekroza v pecheni broylerov pri esherikhioze [histological structure of necrosis foci in liver of broilers having escherichiosis] / V.A.Shestakov // Innovatsionniye puti razvitiya zhivotnovodstva XXI veka - Innovative ways of animal husbandry development in the XXI century: proceedings from the scientific and practical conference with participation of the International scientists, Stavropol, May 27-29, 2009 -Stavropol, 2009. - P. 137-142.
8. Shestakov, V. A. Gistostruktura slepyh kishok broylerov v norme I pri experimentalnom esherikhioze [histological structure of blind guts in healthy and challenged with escherichiosis broiler chicken] / V.A.Shestakov // Poultry farming.
- 2015. -Vol. 3. - P. 25-29.
9. Shestakov, V. A. Gistostrukturniye izmeneniya v pecheni I pochkah broylerov pri esherikhioze [histological changes in liver and kidneys of broilers having escherichiosis] / V.A.Shestakov // Veterinariyaikormleniye. - 2016. - Vol. 1. - P. 17-19.
10. Merkulov, G.A. Kurs patologogistologicheskoy tehniki [A course of pathohistological techniques] / G.A.Merkulov.
- Leningrad: Meditsina, 1969. - 432 p.
УДК 619:616.98:579.841.935.07
ЭКСПРЕСС-МЕТОД ВЫЯВЛЕНИЯ ПРОТИВОБРУЦЕЛЛЕЗНЫХ АНТИТЕЛ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И МОЛОКЕ
Э.А.Яникова - научный сотрудник; О.Ю.Юсупов - доктор ветеринарных наук, профессор, зав. лабораторией; П.М.Кабахова - научный сотрудник; Г.М.Шехилалиева - мл. научный сотрудник; М.М.Микаилов - кандидат ветеринарных наук, ст. научный сотрудник;
А.Т.Гулиева - мл. научный сотрудник.
ФГБНУ«Прикаспийский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт», г.Махачкала (367000, Дагестан, Махачкала, ул.Дахаева,88; тел. +7(722) 68-27-01, e-mail: pznivi@bk.ru).
Описана эффективность использования реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) для выявления бруцеллезных гемагглютининов в сыворотке крови и молоке животных с применением «Набора для серологической
16
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ
№ 5/2016
диагностики бруцеллеза крупного и мелкого рогатого скота в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)». Для выявления специфических бруцеллезных гемагглютининов в РНГА исследовали сыворотки крови и молоко от коров, принадлежащих хозяйствам с различным эпизоотическим состоянием по бруцеллезу. Одновременно молоко, для сравнивания результатов, исследовали в кольцевой реакции (КР с молоком), а сыворотки крови - в РА и РСК. Исследованию подвергали молоко и сыворотки крови от 1280 коров, в том числе 400 проб от коров из благополучных и 880 - неблагополучных по бруцеллезу хозяйств. Исследования показали, что РНГА с молоком по чувствительности не уступает РНГА с сывороткой крови и превосходит КР с молоком и РА и РСК с сывороткой крови. В частности, в неблагополучных по бруцеллезу стадах положительная РНГА с молоком получена у 247 (28,0%) коров, которые положительно реагировали и в РНГА с сывороткой крови, тогда как с помощью КР с молоком бруцеллез был установлен у 122 (13,8%), а с применением комплекса РА и РСК - у 154 (17,5%) коров. Высокая чувствительность РНГА с молоком и пригодность ее для выявления больных животных в ранние сроки после инфицирования была установлена и при исследовании коров, абортировавших на почве бруцеллеза. В результате исследований установлена специфичность, высокая чувствительность и пригодность РНГА с эри-троцитарным антигеном, разработанным Прикаспийским зональным НИВИ, ВГНКИ и ВНИИБТЖ для выявления бруцеллезных гемагглютининов в молоке и сыворотке крови коров. Применение этой реакции позволяет своевременно ставить диагноз у больных бруцеллезом животных.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: крупный рогатый скот, бруцеллез, диагностика, молоко, реакция непрямой гемагглютинации.
В последнее время все больше расширяется арсенал простых и доступных для широкой практики высокоспецифичных и чувствительных методов диагностики бруцеллеза, позволяющих в короткие сроки выявить в сыворотке крови специфические антитела и пригодных для массовых исследований животных. Одним из таких методов является реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с разработанным Прикаспийским ЗНИВИ, ВГНКИ и ВНИИБТЖ эритро-цитарным антигеном. Данный антиген выпускается в виде «Набора для серологической диагностики бруцеллеза крупного и мелкого рогатого скота в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)», зарегистрирован в нашей стране с утверждением нормативной документации (инструкция по применению, ТУ и др.) и применяется в качестве самостоятельного метода диагностики для исследования сыворотки крови крупного рогатого скота и овец на бруцеллез. На способ его изготовления получен патент на изобретение.
Основными преимуществами антигена являются его специфичность, высокая активность, стандартность и стабильность.
На большом фактическом материале при исследовании сывороток крови крупного рогатого скота и овец, принадлежащих хозяйствам с различным эпизоотическим состоянием по бруцеллезу, а также искусственно зараженных бруцеллезом, установлено, что РНГА с новым антигеном по диагностической эффективности превосходит применяемые в практике официально принятые серологические методы (РА, РСК и др.), вместе взятые и выявляет больных животных в более ранние сроки после заражения бруцеллезом.
В связи с тем, что использование РНГА с эритро-цитарным антигеном, разработанным Прикаспийским ЗНИВИ, ВГНКИ и ВНИИБТЖ, значительно повышает эффективность диагностики и мер борьбы с бруцеллезом, эта реакция заслуживает широкого практического применения для выявления в сыворотке крови
бруцеллезных гемагглютининов, свидетельствующих об инфицировании животного бруцеллезом. В то же время известно, что при заболевании бруцеллезом специфические антитела могут содержаться не только в крови животных, но и в молоке.
Молоко, как объект исследования для диагностики бруцеллеза, представляет интерес, главным образом, не только потому, что в нем циркулируют, так же как и в сыворотке крови, специфические антитела, синтезированные иммунокомпетентными клетками организма инфицированных бруцеллезом животных, но и образованные в молочной железе вследствие локального бруцеллезного процесса, сопровождаемого местной продукцией антител, которые могут отсутствовать в крови. Для обнаружения антител в молоке предложен целый ряд реакций. Из них наиболее демонстративной и простой по выполнению является кольцевая реакция (КР).
В РФ кольцевую реакцию (КР) с молоком применяют в качестве официального метода для диагностики бруцеллеза у не привитого противобруцеллезными вакцинами крупного рогатого скота.
Отечественные и зарубежные исследователи, испытавшие кольцевую реакцию с молоком, дают высокую оценку диагностическому значению этой реакции [1, 2, 3, 4, 6]. Так, по данным Л.В.Дегтяренко и О.Д.Склярова [1], из числа коров с бактериологически подтвержденным бруцеллоносительством у 40% животных отсутствовали агглютинины и комплементсвя-зывающие антитела в сыворотке крови, тогда как эти животные имели позитивные результаты в кольцевой реакции (КР) и пластинчатой РА с молоком, что наглядно демонстрирует целесообразность исследования не только сыворотки крови от коров, но и молока при оценке их эпизоотического статуса по бруцеллезу и особенно при оздоровлении неблагополучных по бруцеллезу стад с целью выявления коров с локализацией возбудителя бруцеллеза в молочной железе.
Высокую чувствительность и специфичность КР с молоком установили П.Н.Жованик, Н.П.Лазарев, О.И. Морякова, П.А.Триленко [2, 3, 4, 5], которые, учитывая простоту и доступность этой реакции, рекомендуют широко применять ее в комплексе с РА и РСК в неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах для диагностики бруцеллеза у лактирующих коров и для исследования рыночного молока, а также для контроля благополучия хозяйств по этой болезни. В то же время некоторые авторы [3, 4] наблюдали нестабильность показаний КР с молоком при исследовании коров на бруцеллез, так как специфические антитела у больных животных в молоке могут находиться в одних долях вымени и отсутствовать в других. Отмечались случаи, когда у отдельных животных в отдаленные сроки после болезни КР выпадала и появлялась вновь или реагирующие по КР с молоком коровы, утратившие РА и РСК, не представляли опасность в эпизоотическом отношении [3]. Недостатком данного теста является также возможность получения в отдельных случаях неспецифических реакций [3, 4]. Указанные недостатки КР с молоком и недостаточная чувствительность этой реакции в качестве диагностического теста ограничивают широкое применение ее в практике.
В связи с этим, применение более чувствительного и эффективного экспресс-метода выявления бруцеллезных антител в молоке крупного рогатого скота, лишенного указанных выше недостатков и доступного для массового применения, имеет большое практическое значение для своевременного установления диагноза и осуществления эпизоотического контроля за благополучием хозяйств по бруцеллезу.
Одним из таких методов является реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) с эритроцитарным бруцеллезным антигеном, разработанным Прикаспийским ЗНИВИ, ВГНКИ и ВНИИБТЖ, которая наиболее полно и в более ранний период после заражения животных выявляет в сыворотке крови специфические антитела.
Цель исследования заключалась в изучении диагностической ценности РНГА с новым бруцеллезным
антигеном для исследования молока, в сравнении с кольцевой пробой (КР) с молоком и РА, рСк и РНГА с сывороткой крови.
Материалы и методы. Для выяснения возможности выявления бруцеллезных гемагглютининов в молоке в РНГА, в сравнении с кольцевой реакцией (КР), исследовали пробы молока от 1280 коров, в том числе 400 проб от коров из благополучных и 880 - неблагополучных по бруцеллезу хозяйств. Параллельно в РНГА, РА, РСК исследовали также сыворотки крови животных. РНГА с молоком ставили в разведениях 1:25, 1:50, 1:100, 1:200, 1:400 и так далее в удваивающихся разведениях до предельного титра. Для разведения молока, т.е. для его раститровки, использовали 0,9% физиологический раствор.
В отдельных случаях, для подтверждения результатов исследования коров, реагирующих только в РНГА с молоком, при отрицательных результатах кольцевой реакции или РНГА, РА и РСК с сывороткой крови, биологический материал животных (сыворотка крови, молоко и др.) исследовали в ПЦР и РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом и бактериологическим методом.
Исследование животных в РА, РСК, КР, РИД с О-ПС антигеном, ПЦР и бактериологическим методом проводили согласно утвержденному «Наставлению по диагностике бруцеллеза животных», РНГА - в соответствии с «Инструкцией по применению «Набора для серологической диагностики бруцеллеза крупного и мелкого рогатого скота в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА)», утвержденной Россельхознадзором (2006 г.).
Результаты исследований. При исследовании в РНГА молока от коров благополучных по бруцеллезу хозяйств и сыворотки крови этих же коров в РНГА, РА и РСК во всех случаях получены отрицательные реакции, что свидетельствует о специфичности РНГА с молоком, тогда как КР было выявлено 4 положительно реагирующих коровы, которые оказались больными маститом (табл. 1).
Таблица 1
Результаты исследования в РНГА молока и сывороток крови от животных благополучного по бруцеллезу хозяйства
Исследовано коров КР с молоком РНГА с молоком Результат исследования сыворотки крови
РА РСК РНГА
полож. отриц. полож. отриц. полож. отриц. полож. отриц. полож. отриц.
400 4 396 - 400 - 400 - 400 - 400
В неблагополучных по бруцеллезу хозяйствах исследованию подвергали молоко и сыворотки крови от 880 коров (табл. 2).
Как видно из приведенных в таблице 2 данных, РНГА с молоком по чувствительности не уступает РНГА с сывороткой крови и превосходит КР с молоком и РА, РСК с сывороткой крови. В частности, положительная РНГА с молоком получена у 247 (28,0%) коров, кото-
рые положительно реагировали и в РНГА с сывороткой крови, тогда как с помощью КР с молоком бруцеллез был установлен у 122 (13,8%) коров. В РА и РСК (вместе взятых) реагировало 154 (17,5%) головы.
Дополнительно к КР с молоком РНГА с молоком выявила 115(13%), а дополнительно к РА и РСК - 93 больных бруцеллезом коров, что составляет 10,5%.
При исследовании биоматериала в РНГА с разра-
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫМ ЖУРНАЛ
№ 5/2016
18
Таблица 2
Результаты испытания РНГА с молоком, в сравнении с КР с молоком и РА, РСК и РНГА с сывороткой крови, для исследования коров неблагополучных по бруцеллезу хозяйств
Исследовано коров Молоко Сыворотка крови
РНГА КР комплекс РА + РСК РНГА
полож. % полож. % полож. % полож. %
880 247 28,0 122 13,8 154 17,5 247 28,0
ботанным нами антительным бруцеллезным эритро-цитарным диагностикумом и пЦр, у коров, реагировавших только в РНГА с молоком при отрицательных результатах других реакций, во всех случаях получены положительные результаты, что свидетельствует о наличии бруцеллезного антигена в молоке или сыворотке крови и экстракте гомогенизированных лимфатических узлов или органов.
Более высокая чувствительность РНГА с молоком, по сравнению с КР с молоком, а также РНГА, РА и РСК с сывороткой крови, установлена и при исследовании на бруцеллез 4-х абортировавших на почве бруцеллеза коров. При этом показания РНГА со всеми четырьмя пробами молока были четко положительные в титрах 1:128-1:512, тогда как при исследовании молока в КР только у 3-х коров из 4-х получена слабоположительная реакция с оценкой в 2 креста. С одной пробой молока КР была отрицательной.
В РНГА с сывороткой крови в титрах 1:100-1:200 и в РСК реагировали только 2 коровы, а при исследовании в Ра со всеми сыворотками крови получены отрицательные результаты. У всех 4 коров, положительно реагировавших в РНГА с молоком, диагноз на бруцеллез был подтвержден с помощью РНГА с сывороткой крови с применением антительного эритроцитарного антигена для РНГА и ПЦР.
О высокой чувствительности РНГА с молоком для выявления инфицированных животных в ранние сроки после заболевания свидетельствуют также результаты исследования на бруцеллез 10 абортировавших коров, содержащихся на другой ферме с остро протекающим бруцеллезом. При исследовании в РА и РСК вскоре после аборта в сыворотке крови животных не были обнаружены агглютинины и комплементсвязывающие антитела, тогда как РНГА с эритроцитарным антигеном выявила в молоке у всех 10 коров бруцеллезные гемагглютинины в титрах 1:200-1:400. Достоверность
Литература
результатов РНГА с молоком во всех случаях была подтверждена ПЦР и положительными результатами РНГА с антительным эритроцитарным диагностикумом. У коров, положительно реагировавших в РНГА с молоком, бруцеллез был подтвержден и бактериологическими исследованиями выделением культуры бруцелл.
Таким образом, при исследовании на бруцеллез коров неблагополучной по бруцеллезу фермы с остро протекающей инфекцией установлено, что РНГА с молоком, по сравнению с КР с молоком, является более чувствительной реакцией, не уступающей по диагностическому значению РНГА с сывороткой крови и комплексу РА+РСК. Высокая чувствительность РНГА с молоком, по сравнению с РНГА, РА и РСК с сывороткой крови и КР с молоком, видимо, связана с тем, что инфекционный бруцеллезный процесс у дополнительно выявленных с помощью этой реакции коров развивался в паренхиме молочной железы, которая относится к органам иммунной системы, продуцирующей специфические бруцеллезные антитела, а также тем, что антиген для РНГА выявляет более широкий спектр изотипов иммуноглобулинов, синтезированных молочной железой.
Заключение. Проведенными исследованиями установлены специфичность, высокая чувствительность и пригодность РНГА с эритроцитарным антигеном, разработанным Прикаспийским зональным НИВИ, ВГНКИ и ВНИИБТЖ, для выявления бруцеллезных гемагглютининов в молоке и сыворотке крови коров. Применение этой реакции позволяет своевременно установить диагноз на бруцеллез и выявить источник возбудителя болезни для людей и животных.
Результаты исследований дают основание рекомендовать РНГА с указанным антигеном для широкого применения в практике с целью своевременной диагностики бруцеллеза у коров и осуществления эпизоотического контроля за благополучием дойного стада по бруцеллезу.
1. Дегтяренко, Л.В. Эффективность экспресс-метода выявления бруцеллезных антител / Л.В.Дегтяренко, О.Д.Скляров // Вестник ветеринарии. - 2014. - № 3. - С. 20-22.
2. Жованик, П.Н. Бруцеллез: монография / П.Н.Жованик. - Киев: Урожай, 1975. - 221 с.
3. Лазарев, Н.П. Кольцевая реакция с молоком и с сывороткой крови для диагностики бруцеллеза / Н.П. Лазарев // Ветеринария. - 1968. - № 4. - С. 98-99.
4. Морякова, О.И. Кольцевая реакция с молоком для диагностики бруцеллеза у коров / О.И.Морякова // Труды. ВИЭВ. - 1961. -Вып. 24. - С. 124-129.
5. Триленко, П.А. Испытание кольцевой реакции для диагностики бруцеллеза / П.А.Триленко // Ветеринария. - 1951. - № 8. - С. 59-61.
6. Тихомирова, Е.А. Экспресс-метод обнаружения противобруцеллезных антител в сыворотке крови и молоке / Е.А.Тихомирова, В.П.Урбан, В.В.Сочнев // Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза: тез.докл. Всес. науч. конф. - Новосибирск, 1989. - С. 127-128.
RAPID METHOD OF DETECTING ANTIBRUCCELLAR ANTIBODIES IN COW SERUM AND MILK
Yanikova E.A. - Research Officer; Yusupov O.Yu. - Doctor of Veterinary Medicine, professor;
Kabahova P.M. - Research Officer; Shehilalieva G.M. - Research Assistant; Mikailov M.M. - Candidate of
Veterinary Sciences; Gulieva A.T. - Research Assistant.
Caspian Zonal Research Veterinary Institute, Makhachkala (e-mail: pznivi@bk.ru).
The article describes the efficacy of detecting Brucella species in animal blood and milk using indirect hemagglutination test based on the "Set for the serological diagnosis of brucellosis in cattle and small ruminants in the indirect hemagglutination test (IHT)" developed by Caspian Zonal Research Veterinary Institute, The All-Russian State Center for Quality and Standardization of Veterinary Drugs and Feed (VGNKI) and All-Russian Institute for Animal Brucellosis and Tuberculosis Research. To identify the brucellosis specific hemagglutinin serum and milk from farm cows with various brucellosis statuses was tested using IHT. At the same time cow milk was examined using ring test while serum was tested using agglutination test and compliment fixation test. Milk and blood serum from1280cows including 400 samples from infection-free farms and 880 samples from brucellosis-infected farms were studied. The studies showed that milk IHTis as sensitive as blood serum IHT and more sensitive than milk ring test and serum complement fixation test. Particularly, of samples from brucellosis-positive herds milk IHT detected 247 samples (28.0%) cows that also responded to serum IHA whereas milk ring test revealed brucellosis in 122 samples (13.8%), and associated use of agglutination test and compliment fixation test registered 154 (17.5%) samples. The high sensitivity of milk IHA and its reliability for identifying infected animals in the early stages after infection was also proved with cows that had abortions caused by brucellosis. The studies proved specificity, high sensitivity and suitability of IHT with erythrocyte antigen developed byCaspian Zonal Research Veterinary Institute, The All-Russian State Center for Quality and Standardization of Veterinary Drugs and Feed (VGNKI) and All-Russian Institute for Animal Brucellosis and Tuberculosis Research to detect brucellosis hemagglutinin in cow milk and blood serum. The use of this reaction allows early diagnosis in brucellosis-infected animals.
KEYWORDS: cattle, brucellosis, diagnostics, milk, indirect hemagglutination test.
References
1. Degtyarenko, L.V. Effektivnost ekspress-metoda vyyavleniya brutselleznykh antitel [Efficiency of rapid method detecting brucellosis antibodies] / L.V.Degtyarenko, O.D.Sklyarov // Vestnik veterinarii. - 2014. - Vol. 3. - P. 20-22.
2. Zhovanik, P.N. Brutsellez: monografya [Brucellosis: manuscript] / P.N.Zhovanik. - Kiev: Urozhay, 1975. - 221p.
3. Lazarev, N.P. Koltsevaya reaktsiya s molokom i s syvorotkoy krovi dlya diagnostiki brutselleza [Using ring tests with milk and blood serum to detect brucellosis] / N.P.Lazarev // Veterinariya. - 1968. - Vol. 4. - P. 98-99.
4. Moryakova, O.I. Koltsevaya reaktsiya s molokom dlya diagnostiki brutselleza u korov [Using ring test with milk to detect brucellosis in cows]/O.I. Moryakova// Scientific works. VIEV. - 1961. - Issue 24. - P. 124-129.
5. Trilenko, P.A. Ispytaniye koltsevoy reaktsii dlya diagnostiki brutselleza [Using ring test to detect brucellosis] // P.A.Trilenko // Veterinariya. - 1951. - Vol.8. - P. 59-61.
6. Tikhomirova, E.A. Ekspress-metod obnaruzheniya protivobrutselleznykh antitel v syvorotke krovi I moloke [Using rapid methodsto detect brucellosis antibodies in blood serum and milk] / E.A.Tikhomirova, V.P.Urban, V.V.Sochnev // Aktualniye voprosy profilaktiki brutselleza - urgent issues of brucellosis prevention: abstracts from the USSR scientific conference. - Novosibirsk, 1989. - P. 127-128.
20
НАУЧНО-ПРОИЗВОДСТВЕННЫЙ ЖУРНАЛ
№ 5/2016
