CC BY
66
Экспериментальная медицина и клиническая диагностика
Профессор В. Е. Новиков, С. О. Лосенкова, профессор Л. Д. Смирнов
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ
ГАСТРОПРОТЕКТОРНЫХ СВОЙСТВ МЕКСИДОЛА
Смоленская государственная медицинская академия
Стресс - явление физиологическое, составляет важную часть повседневной жизни человека, повышая устойчивость к постоянно меняющимся факторам окружающей среды. Однако сверхсильный или
слишком продолжительный стресс становится потенциально опасным для психического и физического здоровья. Так, эмоционально-болевой стресс приводит к усилению активности свободно-радикального окисления в желудочной стенке, что проявляется существенным увеличением перекисеобра-зования и появлением в слизистой желудка кровоизлияний, острых эрозий и язв [6]. В ряде исследований установлено защитное действие антиоксидантов при острых язвах желудка и гастропатиях [4, 6]
Целью нашего исследования явилось изучение гастропрогекторных свойств мексидола в условиях стрессорного поражения слизистой оболочки желудка (СОЖ). Мексидол - оригинальный отечественный антиоксидант, обладающий антигипоксически-ми, анксиолитическими, стресс-протекторными свойствами, повышает резистентность организма к воздействию экстремальных факторов [1, 2, 5].
Материалы и методы исследования
Эксперименты проведены на белых беспородных крысах-самцах массой 150-220 грамм. Животные были разделены на 4 группы: И - интактная группа; К - контрольная группа, подвергшаяся воздействию стресса; МП - группа животных, получавшая мексидол профилактически в дозе 20 мг/кг/сут внутри-желудочно в течение 5 дней до воздействия стресса; МО - группа животных, получавшая мексидол однократно 20 мг/кг/сут внутрижелудочно непосредственно перед иммобилизацией. Количество животных в каждой группе составляло 8-10 особей. Использовали классическую модель стресс-индуциро-ванного поражения СОЖ - 18-часовую иммобилизацию [3[. Предварительно крысы голодали в течение 24 часов без ограничения потребления воды. Затем животных фиксировали ремнями за конечности на иммобилизационные платформы, расположенные под углом 45°, в положении на спине. По истечении 18 часов животных взвешивали, фиксируя степень снижения массы тела по сравнению с исходным уровнем, декапитировали, извлекали желудок, надпочечники, селезенку, тимус, забирали кровь. Все болезненные манипуляции проводили под эфирным наркозом.
На аналитических весах определяли вес органов и вычисляли коэффициент их массы по формуле: Коэффициент массы = масса органа / масса тела х 1000. Желудок разрезали по малой кривизне и промывали изотоническим раствором натрия хлорида. На СОЖ с помощью увеличительного стекла регистрировали количество эрозий и геморрагий в расчете на одно животное, общую площадь поражения слизистой в см2.
Для проведения гистологического исследования срезов желудков крыс фрагменты биоптатов фиксировали в 10% растворе нейтрализованного формалина и подвергали стандартной гистологической проводке с последующим изготовлением парафиновых блоков толщиной 5-7 мкм, которые окрашивали гематоксилином и эозином, а также по ван Гнзону,
Вятский медицинский вестник, 2004, № 2-4
просматривали в микроскопах «Биолам» и «Люмам И2».
В сыворотке крови определяли активность процессов ПОЛ хемилюминесцентным методом с подсчетом величины светосуммы. Регистрацию хеми-люминесценции проводили на приборе ХЛ-3603 программой «CL 3603». Результаты обрабатывали с помощью пакетов StatGraphics v 5.0 и Maple. Гипотезы о средних значениях проверяли с помощью t-критерия Стьюдента.
Результаты и их обсуждение
В ходе исследования установлено, что масса тела животных контрольной группы после воздействия иммобилизации снижалась на 7% от исходного уровня. В подопытных группах животных под влиянием мексидо-ла не отмечено достоверных изменений массы тела по сравнению с контрольной группой (табл. 1).
В контрольной группе животных на фоне иммо-билизационного стресса отмечалось увеличение коэффициента массы надпочечников в 1,37 раза по сравнению с интактными животными (р<0,05). В подопытных группах на фоне введения мексидола коэффициент массы надпочечников оставался достоверно выше интактной группы, но уменьшался в сравнении с контролем (табл. 2). Так, в группе МО степень гипертрофии надпочечников уменьшилась на 9,7%, а в группе МП - на 10,7% по отношению к контролю. Однако достоверные различия средних групп МО и МП с контролем и между собой отсутствуют (р>0,05).
Степень инволюции тимуса в результате стрес-сорного воздействия у контрольных животных составила 56,5% по отношению к интактной группе (табл. 3). Коэффициент массы тимуса контрольной группы в 2,3 раза меньше интактной (р<0,05). Применение мексидола в двух опытных группах способствовало уменьшению выраженности инволюционных изменений тимуса. Так, в группе МО коэффициент массы тимуса менее интактной группы на 43,6% (р<0,05), но более контрольной группы на 29,4% (р<0,05). В группе МП наблюдали снижение коэффициента массы тимуса на 33,9% к интактной группе (р<0,05), по отношению к контрольной группе наблюдалось увеличение коэффициента массы тимуса на 51,8% (р<0,05). Достоверные различия между опытными группами отсутствуют (р>0,05).
Острый иммобилизационный стресс вызывал уменьшение коэффициента массы селезенки контрольной группы в 2,2 раза, что на 54,5% менее значения интактных животных (р< 0,05). На фоне введения мексидола снижение коэффициента массы селезенки уменьшалось, а по сравнению с контрольной группой отмечалось достоверное увеличение. Например, в группе МО наблюдали увеличение коэффициента массы селезенки на 33% (р<0,05), а в группе МП на 61% (р<0,05) по отношению к контролю (табл. 3).
Анализ результатов по изучению влияния мексидола на коэффициенты массы надпочечников, тимуса и селезенки в условиях стрессорного воздействия свидетельствует об определенном стресс-про-
Таблица 1
Изменение массы тела животных под воздействием иммобилизации (М+т)
Группа Вес до иммобилизации Вес после иммобилизации % снижения веса
Контроль 180,15± 25,84 168,07±28,30 6,73+3,61
МО 170,53±31,19 154,38+25,30 7,77±1,65
МП 182,3±13,11 164,61+9,36 10,21±1,02
Таблица 2
Влияние иммобилизационного стресса и мексидола на массу надпочечников (М+т)
Группа К массы надпочечников % к интакту
Интактная 0,075±0,004 100%
Контроль 0,103±0,012 * 137,8%
МО 0,093±0.004 * 124,0%
МП 0,092±0,005 * 123,0%
Примечание. * — Р<0,05 - по отношению к интактной группе.
Таблица 3
Влияние иммобилизационного стресса и мексидола на органы иммунной системы (М+т)
Группа Тимус Тимус Селезенка Селезенка
Коэффициент массы % к интакту Коэффициент массы % к интакту
Интактная 1,343+0,459 100% 3.968±0.666 100%
Контроль 0,585+0,252 * 43,5% 1,806+0,431 * 45,5%
МО 0,757±0,105 * 56,4% 2,402±0.303 * * 60,5%
МП 0,888±0,206 * * 66,1% 2,908±0,541 * # 73,3%
Примечание. * - Р<0,05 - по сравнению с интактной группой; # - Р<0,05 - по сравнению с контрольной группой.
Экспериментальная медицина и клиническая диагностика
тективном действии препарата, что полностью согласуется с данными литературы, характеризующими фармакологические свойства мексидола [1,2, 5].
В наших опытах острый иммобилизационный стресс у животных контрольной группы в 100% случаев сопровождался выраженными эрозивными и множественными (точечными и сливными) геморрагическими поражениями СОЖ. Аналогичные изменения в СОЖ при стрессорном воздействии наблюдали и другие авторы [3]. Гистологическое исследование гастробиоптатов контрольной группы животных подтвердило наличие острых эрозий и гемо-рагий в СОЖ. Гистологическая картина таких био-птатов выглядела следующим образом. Поверхностный слой СОЖ очагово некротизирован и в участках некроза видны массы бурого пигмента. Наблюдается отек собственной пластинки слизистой, стазы в капиллярах, скудная инфильтрация полиморфноя-дерными лейкоцитами. Сохранены только глубокие отделы желез, признаки регенерации эпителия СОЖ выражены слабо. В подслизистый слой эрозии не проникают.
На фоне стресс-индуцированного повреждения СОЖ мексидол оказывал защитное действие (табл. 4). Под воздействием пятидневного профилактического введения препарата в дозе 20 мг/кг/сут (группа МП) наблюдалось уменьшение не только количества острых эрозий и геморрагии в 3,2 раза (р<0,05), но и общей площади поражения на 87,2% по сравнению с контролем (р< 0,05). Однократное внутрижелудоч-ное введение мексидола в дозе 20 мг/кг/сут (группа МО) не уменьшало количества эрозий и геморрагий в расчете на одного животного, но снижало общую площадь поражения на 72,5% (р<0,05) по сравнению с контролем. При этом отмечаются статистически достоверные различия показателей между группами МО и МП (р<0,05).
Иммобилизация животных контрольной группы сопровождается увеличением флюоресцирующих продуктов перекисного окисления липидов (ПОЛ) в крови в 2,6 раза по сравнению с интактными животными (р<0,05), что свидетельствует об усилении сво-
Эрознвное поражение СОЖ I профилактического воз;
боднорадикального окисления липидов (табл. 5). На фоне применения мексидола наблюдается тенденция к уменьшению активности ПОЛ. В группе МО показатель светосуммы снизился на 12,7%, а в группе МП - на 14,2% по сравнению с контролем.
Заключение
В ходе проведенного исследования установлено, что острый иммобилизационный стресс у животных вызывает повреждение СОЖ с развитием эрозий и геморрагий, изменение коэффициентов массы надпочечников, тимуса и селезенки, активирует ПОЛ. Применение мексидола оказывает гастропротектив-ное действие при стресс-индуцированном поражении слизистой оболочки желудка. Наибольший гаст-ропротекторный эффект наблюдается при профилактическом курсовом приеме мексидола в дозе 20 мг/кг/сут в течение 5 дней, что проявляется уменьшением количества дефектов и общей площади эрозивного повреждения СОЖ, снижением инволюции тимуса и селезенки, уменьшением активности ПОЛ по показателю светосуммы хемилюминесценции сыворотки крови по сравнению с контролем. Однократное применение препарата непосредственно перед иммобилизацией менее эффективно и выражается снижением общей площади поражения СОЖ и уменьшением инволюции селезенки.
Список литературы:
Дюмаев K.M., Воронина Т.А., Смирнов Л.Д. Анти-оксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС. -М.: Изд. Института биомедицинской химии РАМН, 1995.
- 272 с.
2. Зорькина A.B.. Костин Я.В., Инчина В.И и соавт. Антиокислительные и гиполипидемические свойства мексидола и эмоксипина при длительном иммобилизацион-ном стрессе // Химико-фармацевтический журнал. - 1998.
- №5. - С. 3-5.
3. Карпова Е.Л. Сравнительная стресс-протекторная эффективность растительных адаптогенов и синтетических пептидов: Автореф. дисс... канд. мед. наук. - Смоленск, 2002. - 24 с.
4. Кулькова Г.П. Экспериментально-клиническое исследование протекторной активности препаратов метабо-
Таблица 4
:ле иммобилизации и на фоне icTßiiH мексидола (М+ш)
Группа Количество эрозий на 1 животное, шт. Общая площадь поражения, см 2.
Контроль 6,714±2,371 0,149±0,102
МО 6,667±1,331 0,041 ±0,018 *
МП 2,111 ±0.976" 0.019+0,009 #
Примечание. # - р<0,05 - по отношению к контролю.
Таблица 5
Влияние иммобилизации и мексидола на активность ПОЛ в сыворотке крови (М+т)
Группа Показатель светосуммы % кинтакту
Интактная 30983,3+24395.8 100%
Контроль 81912,6+16241,3 * 264,3%
МО 72337,3±9040.4* 233,5%
МП 70274.0+4695,2* 226,8%
Примечание. * - Р<0,05 - по отношению к интактной группе.
Вятский медицинский вестник, 2004, № 2-4
лического типа действия при гастропатиях, индуцированных приемом НПВС у детей: Автореф. дис... канд. мед. наук. - Саранск, 2004. - 14 с.
5. Новиков В.Е., Ковалева Л.А., Лосенкова СО., Кпимкипа Е.И. Фармакология антиоксидантов на основе 3-оксипиридина // Математическая морфология и систе-мология: \у\у\у//8то1еп5к.ги/и5ег/80МА. - 2004.
6. Сухомлин А.К. Применение антиоксидантов и анти-гипоксантов для комплексной терапии острых язв желудка и двенадцатиперстной кишки: Автореф. дисс... канд. мед. наук. - СПб., - 1998. - 25 с.
