CC BY
5
f
Литература
1. Беленький M. Jl. Элементы количественной оценки фармакологического эффекта.— Л., 1963.
2. Корбакова А. И. // Гиг. труда,— 1990,— № 5.— С. 56—57.
3. Draize J.. Woodard G., Calvery H. // J. Pharmacol, exp. Ther.— 1944.— Vol. 82,— P. 377—390.
4. Green W.. Sallivan J.; Hehir R. A Systematic Comparison
of Chemically Induced Eye Injury in the Albino Rabbit and Rhesus Monkey. The Soap and Detergent Association.— New York, 1978.
5. Marzulli F., Ruggles D. // J. Ass. off. analyt. Chem.— 1973.- Vol. 56,- P. 905-914.
6. Marzulli F., Simon M. // Amer. J. Opton.— 1971.— Vol. 48 — P. 61.
Поступила 02.08.91
© С. В. BAPEHOBA, 1992 УДК 614.485-036.8-078
С. В. Варенова
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ МОДЕЛЬ ИЗУЧЕНИЯ БАКТЕРИЦИДНОГО ДЕЙСТВИЯ УФ-ИЗЛУЧЕНИЯ
Московский НИИ гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
В качестве физического агента для обеззараживания объектов воздушной среды стационаров, фармацевтических учреждений, микробиологических и вирусологических лабораторий широко применяется коротковолновое (бактерицидное) УФ-из-л.'чение [1, 3, 4]. Оно используется для обеззараживания воздуха закрытых помещений лечебных учреждений и, в частности, операционного блока и перевязочных.
Вместе с тем вопрос о влиянии УФ-излучения на микрофлору на поверхностях изучен недостаточно. В предыдущих исследованиях показано, что бактерицидное воздействие на потенциальные возбудители внутрибольничных инфекций достигается при облучении микроорганизмов в жидкой среде и на увлажненной поверхности (поверхность питательной среды); выявлены определенные различия в чувствительности отдельных видов микроорганизмов к УФ-лучам. Эти данные позволили высказать предположение о возможности использования коротковолнового УФ-излучения для уничтожения возбудителей внутрибольничных инфекций на поверхностях в стационарах.
В настоящем исследовании была предпринята попытка научить возможность обеззараживания сухих поверхностей при их искусственной контаминации индикаторными и условно-патогенными микроорганизмами.
В связи с тем что, как показали исследования последних лет. руки медицинского персонала являются основным источ-■яи|ом передачи возбудителей многих внутрибольничных инфекций, в частности грамотрицательных бактерий [2, 6, 8), была/разработана специальная методика контаминации поверхностей, имитирующая возможный путь передачи инфекционного агента в условиях стационара.
Суспензия клеток суточной культуры исследуемых микроорганизмов вносилась в сосуд объемом 3 л, содержащий 2 Л прокипяченной и предварительно охлажденной воды. В этот соф опускались руки испытуемого приблизительно на 1,5— 2'Мин. После стекания жидкости с рук делались их отпечатки на поверхности покрытого пластиком лабораторного стола. Последняя вместе с отпечатками рук облучалась бактерицидной лампой с интенсивностью коротковолнового излучения 0.4 Вт/м2 при времени экспозиции 15, 30, 45 с и 1, 3. 5 и 10 мин.
Облучение проводилось газоразрядной ртутной лампой низкого давления ДБ-30; поверхность находилась на расстоянии 130 см от источника излучения. В эксперименте использовалась суспензия суточных культур кишечной и синегнойной палочек в стерильной водопроводной воде. После 10 мин работы бактерицидной лампы ДБ-30 (время, необходимое для вхождения в стандартный ритм работы) проводился эксперимент.
После облучения с каждого отпечатка производился смыв ватным тампоном, смоченным перед отбором пробы стерильной водопроводной водой. Из каждой пробы делались 10-кратные разведения. Посевы разведений в количестве 0,2 мл осуществлялись на чашки с плотной средой Эндо. Посев производился таким образом, чтобы на контрольных чашках (без облучения) вырастало не более 300—500 колоний.
Чашки с посевами помещались в термостат и выдерживались при 37 °С в течение 24 ч. Затем подсчитывалось число выросших колоний и определялся процент гибели микроорганизмов под действием различных экспозиций (доз) УФ-излучения.
В настоящем исследовании изучалось бактерицидное действие УФ-излучения на грамотрицательные микроорганизмы: кишечную и синегноиную палочки. Оба микроорганизма являются частыми возбудителями внутрибольничных инфекций в хирургических и урологических клиниках, в родовспомогательных учреждениях (5, 7, 9| и, как правило, передаются контактным путем.
Как показали проведенные исследования, кишечная палочка оказалась в высокой степени чувствительной к действию УФ-излучения. Уже при экспозиции 15 с четко проявляется бактерицидный эффект, который выражается в гибели 57 % клеток бактерий. При увеличении экспозиции облучения до 1 мин происходит отмирание сохранивших жизнеспособность клеток вплоть до полной их гибели.
Довольно близкие результаты были получены также в экспериментах с синегнойной палочкой. Отмечается более медленное нарастание бактерицидного эффекта при увеличении дозы облучения. При экспозиции 1 мин погибает 99,3 % клеток. Динамика гибели микроорганизмов представлена на рисунке.
В результате проведенных сравнительных исследований была установлена высокая чувствительность обоих изученных микроорганизмов к бактерицидному действию УФ-излучения. Хотя чувствительность изученных микроорганизмов к коротковолновому бактерицидному действию УФ-излучения близкая, имеются некоторые различия в характере кривой отмирания. При различных экспозициях УФ-излучения для синегнойной палочки кривая отмирания имеет более пологий характер.
Полученные данные свидетельствуют о возможности обеззараживания не только воздуха, но и поверхностей в условиях стационаров. Высокая чувствительность грамотррнательных бактерий к УФ-излучению позволяет расширить область его применения при проведении профилактических мероприятий по предупреждению внутрибольничных инфекций.
Таким образом, разработанная экспериментальная модель контаминации поверхностей оказалась эффективной. Предложенная методика может найти применение при изучении действия физических и химических факторов на многие микроорганизмы — возбудители внутрибольничных инфекций, в первую очередь для определения эффективности дезинфекционных мероприятий в стационарах.
Бактерицидный эффект действия УФ-излучения на кишечную и синегнойную палочки.
По оси абсцисс — »кспозииия действия УФ лучей (о *ин|; по оси ординат — гибель клеток (в %>; /— синсгмойная пялочка; II — кишечная палом««
Литература
1. Вашков В. И. Средства и методы стерилизации, применяемые в медицине.— М., 1973.
2. Влодавец В. В. // Гиг. и сан,— 1984,—№ 10,—С. 17—20.
3. Галанин Н. Ф. // Руководство по коммунальной гигиене.— М„ 1961.— С. 78—82.
4. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. 14 Ультрафиолетовое излучение.— М., 1984.—С. 10—26; 93-100.
5. Исхакова X. И., Влодавец В. В., Колкер И. И. Микро-
биологические аспекты внутрибольничных инфекций в хирургических стационарах.— Ташкент, 1987.
6. Трухина Г. М., Смирнова М. Н. 11 Госпитальная эпидемиология.—Л., 1989,—С. 79—83.
7. Яффаев P. X., Зуева Л. П. Госпитальная эпидемиология.— Л., 1989.
8. Adans В. G., Marrie Т. J. // J. Hyg.— 1982,—Vol. 82,— P. 33—46.
9. Wenzel R. P. Prevention and Control of Nosocomial Infection.— Baltimore, 1987.
Поступила 16.07.91
© А. Г. НАЗАРОВ. 1992 УДК 616.33-008.831 -02:6M.7|-07
А. Г. Назаров
ИЗУЧЕНИЕ ПОВЕДЕНИЯ КСЕНОБИОТИКОВ В ВОДНЫХ РАСТВОРАХ ПРИ ВОЗДЕЙСТВИИ ФЕРМЕНТОВ ЖЕЛУДОЧНОГО СОКА ПОЛЯРОГРАФИЧЕСКИМ
МЕТОДОМ IN VIVO
НИИ общей и коммунальной гигиены им. А. Н. Сысина АМН СССР, Москва
Одним из направлений исследований в гигиене окружающей среды являются изучение механизмов и закономерностей действия на организм человека химических, биологических и физических факторов, а также контроль санитарного состояния среды и его совершенствование [4].
При разработке гигиенических нормативов необходимо учитывать процессы метаболизма биотрансформации ксенобиотиков. Для изучения процессов метаболизма применяются прежде всего такие методы исследования, как хромато-масс-спектрометрия, высокоэффективная жидкостная хроматография, однако до скх пор мало использовались возможности метода полярографии, позволяющего получать кинетические кривые и моделировать процессы метаболизма, протекающие в организме.
С целью моделирования влияния желудочного сока на скорость протекания метаболических реакций исследовано влияние добавок пепсидила, являющегося продуктом ферментного гидролиза ткани слизистой оболочки желудка здоровых свиней, богатого пепсином и пептонами и содержащего все составные части натурального секрета желудочных желез.
Получены кинетические кривые разложения органических веществ: диметилкетазина, фурфурола, меркаптоэтанола, оро-тата калия в присутствии пепсидила. Все эти вещества являются электрохимически активными соединениями, т. е. могут окисляться или восстанавливаться на поверхности ртутного электрода в водных растворах.
В связи с этим кинетику их разложения в водных растворах исследовали полярографическим методом, который обладает высокой разрешающей способностью, селективностью и чувствительностью, а также прост в исполнении (1—3].
Подпрограммы окисления или восстановления ксенобиотика регистрировали с помощью отечественного универсального полярографа ПУ-1 в переменно-токовом режиме в полярогра-
100
Биотрансформация ксенобиотиков под действием ферментов желудочного сока.
По оси абсцисс — время (в мин); по оси ордиият — концентрации ксенобиотика (в % от исходной); /— фурфурол; 2 — оротат калня; 3 — меркли-тоэтанол; 4 ■— диметилкетазнн. Начальная концентрация ксенобиотика 0,1 мМ/л.
фической ячейке в трехэлектродном режиме относительно хлор-серебряного электрода, в которую заливали физиологический раствор с рН 2,0, содержащий определенную концентрацию ксенобиотика и пепсидила.
Изучено влияние концентрации пепсидила, рН, а также состава фона на скорость разложения диметилкетазина, фурфурола, меркаптоэтанола и оротата калия. О скорости биотрансформации под влиянием пепсидила судили по уменьшению высоты пика каждого из изученных веществ на поля-рограмме при увеличении времени взаимодействия пепсидила и соответствующего ксенобиотика в растворе во времени.
На рисунке представлена серия кинетических кривых биотрансформации указанных веществ на фоне хлорида натрия и соляной кислоты рН 2,0 в присутствии 10 % желудочного сока, который можно рассматривать как физиологический раствор.
Кинетические кривые разложения фурфурола, меркаптоэтанола представляют собой плавные линии, отражающие уменьшение концентрации ксенобиотика при увеличении времени взаимодействия по экспоненте. Для диметилкетазина кинетическая кривая характеризуется резким спадом, что указывает высокую скорость разложения в указанных условиях.
На рисунке пунктирной линией представлена кинетичес* кривая разложения диметилкетазина, полученная в отсутсть пепсидила. ♦ |
На кинетической кривой оротата калня в интервале 15 мин наблюдается некоторое увеличение площади пг после чего он вновь уменьшается и асимптотически приб^ жается к пределу.
Установлено, что в нейтральных и щелочных средах I значениях рН больше 5,0 диметилкетазнн устойчив в раствс В кислых средах с уменьшением рН увеличивается велич! константы скорости разложения вещества. При увеличе концентрации пепсидила в исследуемом растворе также наб. I далось возрастание константы распада диметилкетазина.
Можно предположить, что вредное действие диметилкетазина при пероральном поступлении будет проявляться значительно сильнее, чем при ингаляционном поступлении, так как диметилкетазнн быстро разлагается под действием ферментов желудочного сока и соляной кислоты с образованием более токсичного и канцерогенного химического соединения гидразина.
Показано, что скорость разложения,- изученных веществ под действием пепсидила в кислых средах уменьшается в ряду: диметилкетазнн, оротат калия, меркалтоэтанол, фурсЬу-рол. Определены константы скорости разложения изученных ществ.
Нами также разработаны полярографические мето/ . >пределения представленных веществ в воде и биологиче< кидкостях.
" I
Литература
1. Бонда М. Полярографические методы в аналитическоГ I мин: Пер. с англ.— М., 1983.
