CC BY
19
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2018-99-98-8-897-902
Original article
© ЕРОФЕЕВА В . В . , МАСЛЕННИКОВА О . В. , 2019
Ерофеева В.В.1,2, Масленникова О.В.3
ЭКОЛОГО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА РОЛИ ДОЖДЕВЫХ ЧЕРВЕЙ В ПРОФИЛАКТИКЕ ТОКСОКАРОЗА
'Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Российский университет дружбы народов», 117198, Москва;
2Ордена трудового красного знамени федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский технический университет связи и информатики», 111024, Москва;
'Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Вятская государственная сельскохозяйственная академия», 610017, Киров
Введение. Заболеваемость населения токсокарозом, вторым по распространённости геогельминтозом в России, это серьёзная проблема в последние годы, особенно в мегаполисах. Участие дождевых червей в жизненном цикле токсокароза остаётся мало изученным. Установлена роль дождевых червей Еisеniа fеtidа (па-ратенических хозяев) в циркуляции и профилактике токсокароза.
Материал и методы. Нематоды получены в результате дегельминтизации животных. Впервые в Российской Федерации проведены опыты по заражению дождевых червей вида Е. fеtidа инвазионными яйцами Тохосага ccmis и Тохосага mystax.
Результаты. Максимальное число паразитарных личинок Т. саnis у Е. fеtidа фиксировалось первые две недели эксперимента и составило 4,01 ± 0,63, начиная с третьей недели отмечалось стабильное снижение до 1 ± 0,3. С 38-го дня эксперимента личинок токсокару Е. fеtidа не регистрировалось. Личинки Тохосага mystax, попав в пищеварительный тракт дождевого червя Е. fеtidа, способны более 92 дней оставаться активными, слабо проникая в кожно-мускульный мешок. В течение эксперимента среднее количество личинок Т. mystax в навозных червях равно 10,1 ± 2,8.
В проведённых опытах доказана возможность заражения дождевых червей E. fétida инвазионными яйцами Т. canis и Т. mystax через почву, обсеменённую 10 000 инвазионных яиц.
Заключение. Впервые установлена миграция личинок аскаридат из кишечника в кожно-мускульный мешок дождевых червей и проведено исследование с целью установления периода нахождения личинок Т. canis и Т. mystax в кишечнике и мускулатуре дождевых червей.
Ключевые слова: токсокароз; Tоxоcаrа сатз; Tоxоcаrа mystax; инвазионные яйца; личинки; дождевые черви; Eisenia fétida; меры профилактики; паратенический хозяин.
Для цитирования: Ерофеева В . В . , Масленникова О . В . Эколого-гигиеническая оценка роли дождевых червей в профилактике токсокароза. Гигиена и санитария. 2019; 98(8): 897-902. DOI: http://dx.doi. org/10.18821/0016-9900-2019-98-8-897-902
Для корреспонденции: Ерофеева Виктория Вячеславовна, кандидат биол. наук, доцент кафедры экологии, безопасности жизнедеятельности и электропитания ФГБОУ ВО «МТУСИ», 111024, Москва; ассистент кафедры судебной экологии с курсом экологии человека экологического факультета ФГАУ ВО «РУДН», 117198, Москва. E-mail: erofeeva-viktori@mail . ru
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки . Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Участие авторов: концепция и дизайн исследования - Ерофеева В. В . , Масленникова О. В . ; сбор и обработка материала - Масленникова О . В . ; статистическая обработка - Ерофеева В . В. ; написание текста - Ерофеева В . В . ; редактирование - Масленникова О . В. ; утверждение окончательного варианта статьи, ответственность за целостность всех частей статьи - все соавторы .
Поступила 06 . 05 . 2018 Принята к печати 27. 05. 19 Опубликована 09. 2019
Erofeeva V.V.12, Maslennikova O.V.3
EARTHWORMS ECOLOGICAL AND EPIDEMIOLOGIC CONTRIBUTION TO PREVENTION OF TOXOCARIASIS
'Peoples'Friendship University, Moscow, 117198, Russian Federation;
Moscow Technical University of Communication and Informatics, Moscow, 111024, Russian Federation; 3Vyatka State Agricultural Academy, Kirov, 610017, Russoian Federation
Introduction. Morbidity toxocariasis, second in prevalence geohelminthiasis in Russia, is a serious problem in recent years, especially in metropolitan areas. The involvement of earthworms in the life cycle of toxocarias remains poorly understood. The role of earthworms (paratenic hosts) in the circulation and prevention of toxocariasis is established. The work is aimed at a contribution finding out of earthworms Eisenia fetida (paratenic hosts) in toxocariasis circulation and prevention.
Material and methods. Nematodes dehelminthization derived from animals. For the first time in Russian Federation, experiments have been conducted on infestation of earthworms E. fetida with infective eggs Toxocara canis and Toxocara mystax.
Results. In the conducted experiments, possibility is proved of infestation of earthworms E. fetida with infective eggs T. canis and T. mystax via earth bacterized with 10000 infective eggs. For the first time migration was proved of as-caridate larvae from intestines to skin-muscular sac of the earthworms.
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2019-98-8-897-902 Оригинальная статья
Conclusion. Besides, investigation was conducted aimed at finding out of the period duration of Т. canis and Т. mystax larvae staying in earthworms' intestines and sinews.
Keywords: Toxocarosis; Toxocara canis; Toxocara mystax, invasive eggs; larvae; earthworms; Eisenia fetida; preventive measures; paratenic host.
For citation: Erofeeva V. V. , Maslennikova O . V. Earthworms ecological and epidemiologic contribution to prevention of toxocariasis . Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2019; 98(8): 897-902. DOI: http://dx. doi. org/10.18821/0016-9900-2019-98-8-897-902 For correspondence: Viktoria V. Erofeeva, MD, Peoples' Friendship University, Moscow, 117198, Russian Federation; Moscow Technical University of Communication and Informatics, Moscow, 111024, Russian Federation . E-mail: erofeeva-viktori@mail . ru Information about authors:
Erofeeva V. V. https://orcid. org/0000-0002-0236-1876; Maslennikova O . V. https://orcid. org/0000-0003-1859-4655 Conflict of interest . The authors declare no conflict of interest. Acknowledgment . The study had no sponsorship .
Contribution: The concept and design of the study - Erofeeva V. V. , Maslennikova O . V. ; Collection and processing of material - Maslennikova
O . V. ; Statistical processing - Erofeeva V. V. ; Writing a text - Erofeeva V. V. ; Editing - Maslennikova O . V. ; Approval of the final version of the
article, responsibility for the integrity of all parts of the article - all co-authors .
Received: 06 May 2018
Accepted: 27 May 2019
Published: September 2019
Введение
В последние десятилетия на территории мегаполисов большой экологической проблемой становится биологическое загрязнение окружающей среды яйцами гельминтов домашних животных, живущих рядом с человеком. Особенно опасны для человека инвазионные яйца токсокар, выделяемые нашими питомцами (кошками и собаками) и вызывающие заболевание токсокароз .
Токсокароз - это зоонозное паразитарное заболевание, принадлежащее к группе нематодозов, которое характеризуется миграцией личинок токсокар в организме человека, с поражением внутренних органов или систем, и сопровождающееся такими тяжёлыми проявлениями, как лихорадка, бронхит, пневмония, эозинофилия и др . [1, 2].
Человек заражается токсокарозом при употреблении загрязнённых продуктов и воды либо при непосредственном контакте с инвазированными собаками, в том числе при контакте с шерстью, где находятся инвазионные яйца [3, 4] . Факторы передачи -грязные руки, немытые фрукты, овощи, ягоды, недостаточно термически обработанное мясо так называемого паратениче-ского или резервуарного хозяина токсокар (свиней, кур, ягнят) Появившиеся из яиц личинки, мигрируя по крови, попадают из кишечника в органы и ткани Там они инкапсулируются и на долгое время сохраняют свою биологическую активность, вызывая заболевание токсокароз При этом чаще всего заболевают дети от 1 года до 4 лет
Протекает заболевание с аллергическими симптомами (зудящие высыпания, лихорадка, гепатоспленомегалия, бронхопневмония, приступы мучительного кашля, удушье, одутловатость лица, образование в органах гранулем, которые содержат личинки токсокар) Встречается токсокарозный офтальмит, при котором поражается задний сегмент глаза (хориоретинит), а также кератит. Глазной токсокароз опасен необратимыми поврежде-
0-1-,-,-,-,-,-,-,-,-,-,
2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 2015 2016
Год
♦ Дети —•—Всего
Рис . 1. Заболеваемость человека токсокарозом в России (на 100 тыс . населения) .
ниями глаз (абсцессы, мигрирующие личинки в стекловидном теле, потеря зрения) [1, 2, 5] .
Учитывая различные факторы, оказывающие влияние на иммунную систему человека, личинки снова могут начать миграцию, что вызывает рецидив токсокароза . Таким образом, возбудитель в организме человека может выживать вплоть до 10 лет Причём частично осевшие в органах личинки инкапсулируются, где постепенно и разрушаются . Важно то, что в человеке токсо-кары паразитируют именно на стадии личинки, поэтому люди не являются заразными для окружающих
Актуальность проблемы профилактики токсокароза связана с тем, что в наше время в связи с экономическими и политическими кризисами в разных странах планеты снижается уровень жизни людей, ухудшаются бытовые условия существования, не соблюдаются санитарно-гигиенические нормы. Кроме того, распространение заболевания связано с волнами миграции, с беженцами . Токсокароз широко распространён в ряде регионов и стран: в Африке, Юго-Восточной Азии, России, США, в Европе .
Заболеваемость населения токсокарозом в России - это серьёзная проблема в последние годы, особенно в мегаполисах [6, 7]. Токсокароз является вторым по распространённости геогельминтозом . Всего в 2016 г. зарегистрировано около 2,5 тыс . случаев заражения токсокарозом (1,7 на 100 тыс . населения), по сравнению с 2015 г. отмечается небольшое снижение заболеваемости - на 1,2% (в 2015 г. - 2507 случаев; 1,7 на 100 тыс . населения), а в сравнении с 2014 г. - на 22,4% (в 2014 г. - 3189 случаев; 2,2 на 100 тыс . населения). В 2016 г. зарегистрированы 909 случаев заболеваний токсокарозом среди детей до 17 лет (3,2 на 100 тыс . населения) [8] . По сравнению с 2015 г. заболеваемость токсокарозом у детей данного возраста уменьшилась на 11,7% (рис . 1) .
Половозрелые токсокары обитают в тонком отделе кишечника у молодых собак, кошек и их диких собратьев . Гельминты живут примерно от 4 до 6 мес . Половозрелые самки всего за одни сутки могут откладывать до 200 000 яиц [9, 10]. В 1 г фекалий больных животных может насчитываться от 12 до 15 тыс яиц Попав в почву, при определённых условиях температуры и влажности они созревают за срок от 5 до 30 дней, и созревшие яйца способны сохранять жизнеспособность от нескольких месяцев до нескольких лет [3, 10] . Показатель средней инфицированно-сти среди собак и кошек - около 16%, но в ряде случаев может достигать 90% [3] .
Заражение нематодами псовых происходит оральным, трансплацентарным и трансмаммарным путем. Жизненный цикл развития Toxocara canis проходит по основной схеме «псовые - почва - псовые» или по вспомогательной схеме «псовые -почва - паратенический хозяин - псовые» [11, 12]. Паратени-ческими хозяевами при токсокарозе могут выступать грызуны, дождевые черви, насекомые, свиньи, овцы, куры и человек [1] Во второй схеме человек в роли паратенического хозяина не принимает участия в передаче инвазии и служит «биологическим тупиком»
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2019-98-8-897-902
Original article
На сегодняшний день в патологии человека научно обоснована роль мигрирующих личинок Toxocara canis, при этом влияние личинок Toxocara mystax так и остаётся полностью не изученным. Имеются лишь некоторые данные, что инвазионные яйца T. mystax могут наносить вред человеческому организму и опасны для здоровья . Ученые из Англии обосновали и подтвердили факт участия личинок T. mystax в висцеральном и глазном токсокарозе у человека [1, 13, 14, 15, 16] .
Главным источником инвазии для людей являются кошки, которые выделяют яйца Toxocara mystax вместе с фекалиями, в результате чего происходит дальнейшее загрязнение окружающей среды [11, 17]. Однако из-за того, что яйца токсокар очень стойки к воздействию неблагоприятных условий среды, в природе происходит накопление инвазионного материала
Поражённость кошек токсокарами и их роль в распространении инвазии среди людей мало изучены Процент заражения кошек Toxocara mystax может быть очень высокий Например, в Дании 79% бродячих кошек были заражены токсокарами, в Великобритании 91% бездомных кошек инфицированы [2, 14, 18]. Бездомные кошки представляют собой опасный источник яиц токсокар, так как они закапывают экскременты в почву, создавая благоприятные условия для развития яиц, и тем самым инвази-руют окружающую среду (песочницы, клумбы) .
К группам риска заражения токсокарозом относятся дети-дошкольники (особенно от 3 до 5 лет), которые активно играют с песком, землёй или с собаками и кошками [19, 13]; люди из профессиональных групп (представители ветеринаров, собаководов, кинологов, работников коммунальных учреждений, шофёров, работников питомников для разведения собак [17], продавцов овощных магазинов, лиц, имеющих контакты с почвой; владеющие дачами, приусадебными участками, земельными наделами, огородами; любители охоты с участием собак [7, 18].
Профилактические меры прежде всего заключаются в санитарно-гигиеническом воспитании детей и просвещении взрослых, в обучении основным гигиеническим навыкам людей разных возрастных групп, образования, профессий И одним из направлений профилактики являются меры по своевременному обследованию собак и кошек, их дегельминтизации, защита детских площадок и песочниц и других мест скопления детей от посещений животных, включая хорошую инсоляцию . Только своевременные, грамотные меры могут препятствовать распространению токсокароза
Из этого следует, что инфицирование человеческого организма возможно при попадании паразитарных яиц с пищей в пищеварительную систему Возможно заражение токсокарозом при употреблении мяса паратенических хозяев (свинина, баранина, птица) [14, 20] . Не меньшую группу риска представляют и люди с низким уровнем гигиены, особенно дети, которые не всегда следят за чистотой рук [2]. Не стоит исключать здесь и детскую любознательность, которая может стать причиной употребления внутрь дождевого червя [21] .
Для предотвращения вспышек заражения Toxocara mystax и Toxocara canis требуется более детальное изучение паразитов, включая их жизненные циклы, для того чтобы была возможность контролировать эпидемиологическую обстановку
Анализируя данные, полученные в мировой практике, становится понятным, что в настоящее время роль почвенных беспозвоночных недостаточно изучена в цикле развития паразитов Есть лишь несколько лабораторных исследований по изучению дождевых червей в качестве паратенических хозяев личинок Toxocara spp., проведенные в Японии и Индии [22-24].
Материал и методы
Нематоды Т. canis и Т. mystax были получены в результате дегельминтизации животных (взрослых кошек и месячных щенков) Отобрали самок и путем вскрытия маток получили неинвазионные яйца нематод рода Toxocara. Эксперименты были проведены на кафедре экологии и зоологии Вятской государственной сельскохозяйственной академии в 2014-2015 гг.
Дождевых червей (Eisenia fetida) поместили в пластиковые колбы, предварительно наполненные природным почвенным гумусом, высота почвы составила 10 см . Случайно отобранных
дождевых червей (10 штук) перед началом эксперимента предварительно подвергали компрессорному анализу на предмет содержания личинок токсокар, которые они могли приобрести в условиях естественной среды обитания . Концентрация инвазионных яиц для обсеменения почвы (10 000 экз ) была рассчитана методом Оshimа (1961), впоследствии чистая почва была обработана данной суспензией и перемешана [25, 26] .
Экспериментальные группы дождевых червей разделили следующим образом: первая группа (320 червей) была помещена в инвазированную почву (10 000 инвазионных яиц Т. mystax и Т. cаnis). Вторая группа (100 червей) выступила в качестве контрольной Каждая группа червей находилась в одинаковых условиях и содержалась так 4 дня при комнатной температуре (колбы из пластика, наполненные 1000 г почвы) .
Через 4 дня естественно заражённых дождевых червей поместили в природный гумус, не содержащий инвазионных яиц Перед этим каждый червь был обмыт во избежание дальнейшего заражения и контакта с паразитарными яйцами Через 40 дней проведено вторичное заражение дождевых червей яйцами Т. cаnis. Для этого из первой группы отобрали дождевых червей в количестве 20 экз и поместили в почву, обсеменённую инвазионными яйцами паразитов
Отслеживать распространение и движение личинок в тканях тела червей стали начиная с 5-го дня эксперимента. Миграция изучалась путём вскрытия тела червей из обеих групп Для этого извлекалось 2-3 дождевых червя, затем они фиксировались в слабом растворе формалина (1%) . Вскрытие проводилось с брюшной стороны с отделением желудочно-кишечного тракта от кожно-мускульного мешка . Содержимое кишечника и кож-но-мускульный мешок исследовались отдельно компрессорным методом с помощью микроскопов Микромед 3 вар 3-20 при увеличении 20 х 10 .
Проведён эксперимент по пероральному заражению дождевых червей инвазионными яйцами Т. mystax и Т. cаnis в количестве 10 экз . на одного навозного червя Е. fеtidа авторской методикой [27].
Результаты
Tоxоcаrа cаnis. На наличие паразитарных личинок были проверены обе группы навозных червей (контрольная и подвергшаяся эксперименту) Контрольная группа не показала наличие Т. cаnis ни в мускулатуре дождевого червя, ни в желудочно-кишечном тракте . В экспериментальной группе личинки Т. саnis обнаруживались во всех отделах дождевого червя (кожно-му-скульный мешок) и в среднем и заднем отделах кишечника Наблюдения показали, что все личинки, обнаруженные у дождевых червей, покинули оболочки своих яиц В почве из содержимого кишечника встречались лишь пустые оболочки от яиц . Также наблюдения показали, что некоторая часть паразитарных личинок через отдел кишечника попадала в мускулатуру червя (кож-но-мускульный мешок), где были выявлены длительная жизнеспособность и подвижность личинок Паразитарные личинки Т. саnis фиксировались в мускулатуре и желудочно-кишечном тракте дождевого червя
Необходимо отметить, что интенсивность заражения личинками Т. саnis была незначительной. Личинки обнаруживались в основном в переднем и среднем отделах кожно-му-скульного мешка у дождевых червей, подвергшихся вскрытию в первые дни эксперимента . Самая высокая интенсивность инвазии была зарегистрирована в первые 7 дней исследований Более всего личинок Т. саnis (7) обнаружено в среднем отделе кожно-мускульного мешка (рис 2) В основном они локализовались в среднем отделе кожно-мускульного мешка, менее в переднем . Начиная с 13-го дня эксперимента паразитарные личинки перестали фиксироваться в переднем отделе кожно-мускульного мешка Чаще в этом отделе мы регистрировали 1 личинку, реже 2 (1,17 ± 0,17) .
Паразитарные личинки наиболее часто локализовались в средней части мускулатуры (кожно-мускульного мешка), в среднем - 2,44 ± 0,58 (1-7 личинок) . Живые личинки фиксировались в первые 14 дней опыта, по истечении этого времени регистрировались в основном погибшие, но встречались и живые . Две личинки, лишённые подвижности, были зафиксированы в среднем
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2019-98-8-897-902 Оригинальная статья
4,5-| 43,532,52 1,510,50-
5 7 8 9 12 13 15 21 28 29 31 37 39 41 ' День опыта
Кожно-мускульный отдел: Ш передний ^ средний 0 задний
Рис . 2 . Личинки Toxocara canis в кожно-мускульном отделе дождевых червей Eisenia fétida, их распространение в зависимости от отдела и времени
18161412108 6 4 2 0
Ж
5 7 11 15 16 18 20 23 30 32 40 47 51 71 80 92 День опыта
Кожно-мускульный отдел: Щ передний ^средний 0 задний
Рис . 5. Распределение инвазионных личинок Т. mystax в пищеварительном тракте дождевых червей Е. fеtidа.
отделе кожно-мускульного мешка на 37-й день . В заднем отделе кожно-мускульного мешка личинки начали регистрироваться с 7-го дня опыта по 29-й, причём на 29-й день эксперимента была обнаружена живая личинка T. cmis .
Паразитарные личинки обнаруживались и в желудочно-кишечном тракте червей Передний отдел кишечника не содержал инвазионных личинок T. canis .
Наиболее часто и в большем количестве паразитарные личинки встречались в среднем отделе кишечного тракта -2,6 ± 0,6 (1-6) . Задний отдел кишечника содержал, как правило, меньшее количество T. canis, но в этой части кишечника личинки регистрировались наиболее длительное время На 31-й день исследований живые паразитарные личинки T. canis обнаружены в заднем отделе кишечного тракта
На 38-й день эксперимента личинки T. canis у дождевых червей Eisenia fétida больше не фиксировались . Сокращение количества паразитарных личинок было прямо пропорционально времени эксперимента, таким образом, среднее количество обнаруженных с 1-го по 15-й день личинок составило 4,01 ± 0,63, а среднее количество, начиная с 16-го по 39-й день, составило 1 ± 0,3 . Начиная с 16-го дня зафиксировано резкое снижение количества обнаруживаемых паразитарных личинок Половина (50%) регистрируемых в этот период личинок были подвижными и фиксировались преимущественно в кожно-мускульном мешке . Среднее количество паразитарных личинок T. canis отражено на рис 3
При вторичном заражении Е. fétida инвазионными яйцами T. canis установлено значительное уменьшение проникновения паразитарных личинок в мускулатуру червей (рис. 4, см. на 3-й стр . обложки) . Длительность эксперимента составила 48 дней . За этот период времени только у 3 исследуемых дождевых червей было зафиксировано по одной паразитарной личинке в мышечных волокнах. Личинки, которые попадали в организм дождевого червя вместе с почвой, локализовались в кишечнике . В последний день эксперимента в кишечном тракте регистрировалось до 24 паразитарных личинок Toxocara canis, сохранивших подвижность . В течение опыта в пищеварительной трубке дождевых червей Е. fétida регистрировалось от 6 до 24 живых личинок токсокар, в среднем 10,2 ± 1,9, то есть среднее количество фиксируемых личинок при вторичном заражении значительно выше, чем их количество при первичном инфицировании
Toxocara mystax. Длительность эксперимента составила 92 дня В течение этого периода было проведено вскрытие дождевых червей из контрольной и экспериментальной групп Контрольная группа не дала положительных результатов регистрации личинок на протяжении всех 92 дней В экспериментальной группе личинки T. mystax регистрировались в кишечном отделе и в мускулатуре Е. fétida. За время эксперимента паразитарные личинки обнаруживались постоянно, исключение составили 2 особи Е. fétida, где личинки токсокар зафиксированы не были
* 5
1 3
8 9 12 13 15 28 День опыта
29 31 37
Рис . 3. Среднее Е. fétida.
количество личинок T. cmis в дождевом черве
20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0
15 18 23 30 32 40 47 51 День опыта
71 80
Рис . 6 . Среднее количество личинок T. mystax в дождевых червях Е. fеtida.
7
6
4
2
0
5
7
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2019-98-8-897-902
Original article
Кожно-мускульный мешок не у всех дождевых червей содержал личинки T. mystax, а лишь у половины особей Е. fetida из экспериментальной группы . Большинство выявленных личинок были неподвижны и регистрировались в средней или задней части мускулатуры дождевого червя . Передний отдел содержал личинки всего у двух особей (от 1 до 3) в первые дни эксперимента. Средний отдел кожно-мускульного мешка содержал личинки гораздо чаще, примерно в половине случаев (от 1 до 4) . Задний отдел кожно-мускульного мешка содержал паразитарные личинки в 38% случаев (от 1 до 4 штук) . Примерно 50% паразитарных личинок T. mystax не двигались . При этом в мышечных волокнах дождевого червя зарегистрировано в среднем 1,9 ± 0,35 личинки .
Основная часть паразитарных личинок T. mystax была зафиксирована в кишечном отделе Е. fetida (рис . 5), особенно много в его средней части За время эксперимента в пищеварительном тракте фиксировалось от 1 до 30 личинок T. mystax, среднее значение составило 7 ± 1,6 [28].
В среднем за всё время эксперимента у одного дождевого червя Е. fetida зарегистрировано 10,1 ± 2,8 паразитарные личинки T. mystax. В конце 3-го месяца нашего эксперимента установлено снижение количества инвазионных личинок T. mystax в дождевых червях (рис . 6). При вскрытии на 71-й день опыта два червя Е. fetida содержали 2 и 31 подвижные личинки соответственно .
Проведённые эксперименты по естественному заражению дождевых червей Еisenia fetida инвазионными яйцами Т. canis и T. mystax были подтверждены опытами по пероральному заражению Е. fetida инвазионными яйцами токсокар по авторской методике (Ерофеева, Хрусталев, Пухлянко, 2015) [27].
Обсуждение
В мировой науке описаны эксперименты, проводимые с дождевыми червями S. Ofoshi и М . Usui в 1968 г. в Японии, Т К . Pаhаri, N . K . Sаsmаl в 1991 г. в Индии [22-24, 26]. Otoshi и Usui (1968) ранее ставили эксперимент с дождевыми червями (Е. fetida) для того, чтобы доказать, что заражение домашних птиц и грызунов паразитарными личинками токсокар возможно от червя Е. fetida. Они работали с двумя видами токсокар: Toxocara canis и Toxocara mystax. Проведённые ими эксперименты дали положительные результаты . Черви действительно заражались инвазионными личинками собачьих и кошачьих токсокар Они доказали, что дождевые черви являются парате-ническими хозяевами токсокар, так как инвазионные личинки не претерпевали особых изменений и служили источниками заражения кур и лабораторных мышей. Наши эксперименты подтвердили данные японских учёных об участии дождевых червей в жизненном цикле токсокар . S. Ofoshi и М. Usui также утверждали, что интенсивное заражение дождевых червей инвазионными личинками токсокар не влияет отрицательно на жизнедеятельность навозных червей . Данный факт мы, к сожалению, проверить не смогли . Это является недостатком нашего эксперимента
Данных по распределению личинок Toxocara spp. в дождевых червях Е. fetida и сроках их жизнеспособности у паратениче-ского хозяина оставалось неизвестным . Т К . Ра^ип и N . K . Sаsmаl (1991) заражали личинками T. canis другой вид дождевого червя - Phеrеtimа pоsthumа. Они исследовали лишь время пребывания личинок токсокар в дождевом черве P. pоsthumа [24] . Данные эксперименты длились в среднем 15-20 дней, затем опыт прекращался, поскольку при вскрытии червя дождевого личинки не регистрировались
Полученные нами данные по заражению дождевых червей личинками T. canis в основном схожи с данными подобных экспериментов в мировой науке Совершенно точно подтверждено, что дождевые черви подвержены заражению инвазионными яйцами T. canis, но длительность жизни паразитарных личинок зависит от многих факторов, в том числе и от видовой принадлежности червя дождевого При эксперименте с инвазионными яйцами T. canis мы регистрировали в кожно-мускульном мешке Е. fetida паразитарных личинок на 37-й день опыта, но при этом контрольная группа не давала
положительных показателей по содержанию личинок T. canis ни в одном из отделов тела червя
Можно предположить, что после попадания паразитарной личинки в кожно-мускульный мешок она гибнет, что и является причиной уменьшения общего числа личинок к 48-му дню эксперимента Кроме того, неподвижные (погибшие) личинки обнаруживались при первом эксперименте в мускулатуре Е. fetida, что объясняет их отсутствие в этом отделе к концу эксперимента [29]
При повторном заражении навозных червей, освободившихся от личинок T. canis, мы практически не регистрировали (кроме 3 случаев) их внедрения в кожно-мускульный мешок По-видимому, при вторичном инфицировании дождевого червя отмечается иммунная реакция, которая препятствует движению инвазионных личинок паразитов Т. canis в мышечные волокна червя (кожно-мускульный мешок) При проникновении в мускулатуру мы регистрировали гибель тех немногих личинок токсокар, которые туда проникали В кишечном отделе личинки Т. canis более длительное время сохраняли жизнеспособность . Следовательно, навозные черви Еisenia fetida могут являться источником заражения токсокарами - T. canis в период, пока паразитарные личинки сохраняют свою жизнеспособность в организме червей (в нашем эксперименте - 48 дней)
Учитывая свойство кишечного отдела дождевого червя освобождаться от переваренной пищи за 3 дня, остаётся неясной причина задержки в кишечном отделе паразитарных личинок Вероятно, что личинки Toxocara mystax питаются содержимым кишечного тракта, поскольку их величина становится несколько больше исходной Впервые увеличение личинок в размерах установили в опыте S . Ofoshi и M . Usui (1968) (Япония), данный факт подтверждён и нами [22-23, 28-30].
Как правило, в качестве резервуарного хозяина Toxocara mystax выбирает животных с постоянной температурой организма (теплокровные) Такой хозяин позволяет им сохранять свою активность на протяжении 6-10 лет, а условия проживания являются настолько благоприятными, что позволяют не покрываться капсулой Дождевые черви не относятся к теплокровным животным, но при этом позволяют Toxocara mystax сохранять подвижные функции до 3 мес при отсутствии яйцевой оболочки
Заключение
В ходе экспериментов получены данные, подтверждающие способность дождевых червей Еisenia fetida к инфицированию инвазионными яйцами паразитических нематод Т. canis и T. mystax, вызывающих у человека заболевание токсокароз Заражение происходит путём попадания обсеменённой почвы (10 000 паразитарных яиц) в пищеварительный тракт навозного червя Е. fetida Максимальное число паразитарных личинок Т. canis у Е. fetida фиксировалось первые две недели эксперимента и составило 4,01 ± 0,63, начиная с третьей недели отмечалось стабильное снижение до 1 ± 0,3 С 38-го дня эксперимента личинок токсокар у Е. fetida не регистрировалось . Вторичное инфицирование навозных червей яйцами Т. canis показало, что личинки не проникают в мышечные волокна дождевого червя, а обитают в кишечном тракте . Личинки Toxocara mystax, попав в пищеварительный тракт дождевого червя Е. fetida, способны более 92 дней оставаться активными, слабо проникая в кожно-мускульный мешок В течение эксперимента среднее количество личинок T. mystax в навозных червях равно 10,1 ± 2,8
Дождевые черви Е . 1еШа способны аккумулировать в себе инвазионные личинки токсокар, выполняя при этом санитарную роль по очистке почвы Личинки Т. canis более активно проникают в кожно-мускульный мешок дождевого червя, а личинки T. mystax локализуются чаще в кишечнике дождевого червя, оставаясь жизнеспособными более 3 мес Дождевые черви Е. fetida выступают в качестве паратенических хозяев и могут являться альтернативными источниками заражения человека и других восприимчивых животных токсокарозом
DOI: http://dx.doi.org/10.18821/0016-9900-2019-98-8-897-902 Оригинальная статья
Литер ату р а
(пп. 3-5, 9, 10, 12, 14-18, 20-26, 30 см . References)
I. Лысенко А.Я . , Константинова Т H. , Авдюхина Т И. Токсокароз: учебное пособие. М . : РМАПО, 2004. 40 с .
2 . Тумольская Н. И. , Сергиев В. П. , Лебедева М. Н. и соавт. Токсокароз. Клиника. Диагностика. Лечение. Профилактика. М . , 2004. 48 с .
6 . О заболеваемости геогельминтозами в Российской Федерации в
2013 году: Письмо Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 29 сентября 2014 г. № 01/11370-14-27. http//www. consultant, ru от 09.04.2015.
7 . Шишканова Л . В . , Васерин Ю . И . , Хроменкова Е . П . , Димидова Л . Л . ,
Упырев А. В. , Твердохлебова Т И. , Пригодин А. В. Обсемененность почвы яйцами гельминтов в Ростовской области . Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями: матер. докл. науч. конф. М . , 2009. Вып. 10: 439-41.
8 . О состоянии санитарно-эпидемиологического благополучия населе-
ния в Российской Федерации в 2016 году: Государственный доклад . М : Федеральная служба по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека; 2017 206 с
II. Малышева Н. С. , Самофалова Н. А. , Плехова Н. А. , Борзосеков А. Н. Паразитологическая оценка качества среды обитания на урбанизированных территориях Курской области Теория и практика борьбы с паразитарными болезнями. Матер. докл. науч. конф. М . ; 2009; Вып. 10: 255-7.
13 Сергиев В П , Успенский А В , Романенко Н А и соавт Новые и возвращающиеся гельминтозы как потенциальный фактор социально-эпидемических осложнений в России . Медицинская паразитология. 2005; 4: 6-8
19 Постнова В Ф , Шендо Г Л , Джаркенов А Ф , Базельцева Л И , Постнов А Б , Окунская Е И Оценка эпидемиологической значимости почвы при токсокарозе Теория и практика борьбы с паразит. болез.: матер. докл. науч. конф. М. ; 2009; 10: 304-6.
27. Ерофеева В. В. , Хрусталёв А. В. , Пухлянко В. П. Способ подготовки дождевых червей для исследования заражения их яйцами гельминтов . Патент РФ № 2578511: 2016.
28. Масленникова О. В. , Ерофеева В . В. , Береснева А. И. , Аскарова А. Р. Роль дождевых червей в распространении токсокароза Медицина и здравоохранение: материалы III Междунар. науч. конф. Казань, май 2015 г. Казань: Бук; 2015: 15-7 .
29 Масленникова О В , Ерофеева В В , Аскарова А Р , Береснева А И Дождевые черви Eisenia fetida в жизненном цикле Toxocara cati. Молодой ученый. 2016; 11: 549-52 .
References
1. Lysenko A. Ja. , Konstantinova T H. , Avdjuhina T I. Toxocariasis: Textbook. Moscow: Russian Medical Academy of Postgraduate Education; 2004; 40 p
2 . Tumol'skaja N . I . , Sergiev V. P. , Lebedeva M . N . et al . Toxocarosis. Clinic.
Diagnostics. Treatment. Prevention. Moscow; 2004. 48 p . (in Russian) 3. Fisher M . Toxocara cati: an underestimated Zoonotic agent. JParasitol. 2003; 19: 167-70.
4 . Sarles M . P. and Stoll N . R . On the resistance of the cat to superimposed infection with the ascarid, Toxocara cati. J Parasitol. 1935; 21: 277-91. 5. Tomimura Т. , Yokota M . , Takiguchi H . Experimental visceral larva mi-grans in monkeys Clinical, haematological, biochemical and gross pathological observations on monkeys inoculated with embryonated eggs of the dog ascarid, Toxocara canis. Jpn J Vet Sci. 1976; 38: 533-48 .
6 . O zabolevaemosti geogel'mintozami v Rossijskoj Federacii v 2013 godu:
Pis'mo Federal'noj sluzhby po nadzoru v sfere zashhity prav potrebitelej i blagopoluchija cheloveka ot 29 sentjabrja 2014 N 01/11370-14-27. http//www consultant ru ot 09 04 2015
7 Shishkanova L V , Vaserin I , Hromenkova E P , Dimidova L L , Upyrev A V , Tverdohlebova T I , Prigodin A V Soil contamination with helminth eggs in the Rostov region . Theory and practice of combating para-
sitic diseases: mater. dokl. nauch. konf. Moscow; 2009; 10: 439-441. (in Russian)
8 . O sostojanii sanitarno-jepidemiologicheskogo blagopoluchija naselenija
v Rossijskoj Federacii v 2016 godu: Gosudarstvennyj doklad. Moscow: Federal'naja sluzhba po nadzoru v sfere zashhity prav potrebitelej i blagopoluchija cheloveka; 2017. 206 p . (in Russian)
9 . Beaver P. C . Larvamigrans . Exp Parasitol, 1956; 5: 587-621.
10 . Sprent J. F. A. On the invasion of the central nervous system by nematodes
II . Invasion of the nervous system in Ascariasis. Parasitology. 1955; 45: 41-55.
11. Malysheva N. S. , Samofalova N. A. , Plehova N. A. , Borzosekov A. N. Parasitological assessment of habitat quality in urban areas of the Kursk region. Theory and practice of fighting parasitic diseases: Mater dokl. nauch. konf. Moscow; 2009; 10: 255-7. (in Russian)
12 . Unruh D . H . A. , King J. E . , Eaton R . D . P. , Allen J. R . Parasites of dogs from Indian settlements in northwestern Canada: A survey with public health implications . Can J Comp Med. 1973; 37: 25-32.
13. Sergiev V. P. , Uspenskij A. V. , Romanenko N . A. et al . New and returning helminthiases as a potential factor of social and epidemic complications in Russia Medical Parasitology 2005; 4: 6-8 (in Russian)
14 . Done J. T , Richardson M . D . , Gibson T E . Experimental visceral larva migrans in the pig. Res Vet Sci. 1960; 1: 133-51.
15. Won K. Y. , Kruszon-Moran D. , Schantz P. M. , Jones J. L. National se-roprevalence and risk factors for zoonotic Toxocara spp Infection Am J TropMedHyg. 2008; 79: 552-7.
16 Yamaguchi N , Macdonald D W , Passanisi W C, Harbour D A , Hopper C . D . Parasite prevalence in free-ranging farm cats, Fells silvestris catus . Epidemiol Infect. 1996; 116: 217-23.
17 Sprent J F A Observations on the development of Toxocara canis (Werner, 1782) in the dog . J Parasitol. 1958; 48; 3: 184-209.
18 Eng K et al A survey of helminths in stray cats from Copenhagen with ecological aspects . ZParasitenkd. 1984; 70: 87-94.
19 Postnova V F , Shendo G L , Dzharkenov A F , Bazel'ceva L I , Postnov A . B . Assessment of the epidemiological significance of soil under toxocarosis . Theory and practice of struggle bor 'by s parazit. bolez.: mater. dokl. nauch. konf M . , 2009; 10: 304-306. (in Russian)
20 Okoshi S , Usui M Experimental studies on Toxascaris leonina IV Development of eggs of three ascarids, T.leonine, Toxocara canis and Toxocara cati, in dogs and cats . Jpn J Vet Sci. 1968; 30: 29-38.
21 Okoshi S , Usui M Experimental studies on Toxascaris leonina Experimental infection of mice, chickens and earthworms with Toxascaris leonina, Toxocara canis and Toxocara cati. Jpn J Vet Sci. 1968; 30: 151-66.
22 Okoshi S , Usui M Experimental studies on Toxascaris leonina IV Development of eggs of three ascarids, T. leonine, Toxocara canis and Toxocara cati, in dogs and cats . Jpn J Vet Sci. 1968; 30: 29-38.
23 Okoshi S , Usui M Experimental studies on Toxascaris leonina Experimental infection of mice, chickens and earthworms with Toxascaris leonina, Toxocara canis and Toxocara cati. Jpn J Vet Sci. 1968; 30: 151-66.
24. Pahari T K and Sasmal N. K . Experimental infection of Japanese quail with Toxocara canis larvae through earthworms . Vet Parasitol. 1991; 99: 337-40.
25 . Nichols R. L. The etiology of visceral larva migrans . I. Diagnostic morpholo-
gy of infective second-stage Toxocara larvae. J Parasitol. 1956; 42: 349-62.
26 . Oshima T Standardization of techniques for infecting mice with
Toxocara canis and observations on the normal migration routes of the larvae . J Parasitol. 1961; 47: 652-6.
27 Erofeeva V V , Hrustaljov A V , Puhljanko V P The method of preparing earthworms for the study of their infection with helminth eggs Patent RF № 2578511: 2016. (in Russian)
28 Maslennikova O V , Erofeeva V V , Askarova A R , Beresneva A I Earthworms Eisenia fetida in the Toxocara cati life cycle . Young scientist. 2016; 11: 549-52. (in Russian)
29 Maslennikova O V , Erofeeva V V , Beresneva A I , Askarova A R The role of earthworms in the spread of toxocarias Medicine and Public Health: materialy III Mezhdunar. nauch. konf. (Kazan, may 2015). Kazan: Buk; 2015: 15-7. (in Russian)
30 Galvin T J Experimental Toxocara canis infections in chickens and pigeons . J Parasitol. 1964; 50: 124-7.
