CC BY
18
Обзор литературы
Экологический гомеорез в механизме формирования гетерогенотипического и гетеросубтипического иммунитета при вирусных инфекциях
А. В. Дубов
НИИ медицинских проблем Севера, Красноярск, Россия
Проанализированы особенности формирования иммунитета антигенами различных генотипов и субтипов вирусов. Рассмотрены подходы к тактике вакцинопрофилактики при развитии гетерогенотипического и гетеросубтипического иммунитета при антропогенных (корь), природноочаговых (заболевания комплекса клещевого энцефалита) и антропогенно-зоонозных (грипп) инфекциях. Ключевые слова: экологический гомеорез, гетерогенотипический и гетеросубтипический иммунитет
Ecological Homeorhesis in the Mechanism of the Formation of Heterogenotypic and Heterosubtypic Immunity under Virus Infections
А. V Dubov
Scientific Research Institute of Medical Problems of the North, Krasnoyarsk, Russian Federation
We analyzed the features of immunity formation from antibodies of different genotypes and subtypes of the viruses. We e x amined several approaches to the tactics of vaccination and prophyla x is under the development of heterogenotypic heterosubtypic immunity in anthropogenic (measles), naturally occurring hotbed (diseases of tick-borne encephalitis virus comple x ) and antropogenic zoogenous (influenza) infections. Keywords: ecological homeorhesis, hetorogenotypic and heterosubtypic immunity
Контактная информация: Дубов Александр Владимирович — д.м.н., профессор, академик РАЕ, главный научный сотрудник ФГБНУ «Научно-исследовательский институт медицинских проблем Севера»; 6601 35, г. Красноярск, ул. Взлетная, 7-д, кв. 77; e-mail: [email protected] Dubov Ale x andr Vladimirovich — Full Professor (medicine), Head Scientist of Federal State Budgetary Institution «Scientific Research Institute for Medical Problems of the North». Postal address: Vzlyotnaya 7-D app. 77, Krasnoyarsk 6601 35, Russia. E-mail: [email protected]
УДК 616.98:578.828
Пусковым механизмом эволюции системы макроорганизм-микроорганизм, путей распространения микроорганизма и проникновения в макроорганизм, формирования тропных органов и систем, клинического проявления инфекционного заболевания [1—2] является экологический стресс [3—4]. Причем, экстремальные факторы воздействуют как отдельно на макроорганизм и микроорганизм, так и биологическую систему в целом [5—6]. Функционирование любого организма обеспечивается динамичным постоянством его внутренней среды (гомеос-тазом), который эволюционирует при хроническом стрессе в чреде поколений с формированием новой ступени, т.е. гомеореза. Под экологическим гомеорезом мы понимаем вступление в соответствие с экологическими факторами систем гомеостаза на популяционном, видовом и межвидовом уровнях в чреде поколений. При этом, в результате адаптации экстремальные факторы воздействуют на биосистему как жизнеобеспечивающие.
Постоянная эволюция вирусов в процессе формирования экологического гомеореза на межвидовом уровне в системе макроорганизм-микроорганизм выявила необходимость исследования специфического иммунитета и разработку тактики вакцинопрофилактики детей, инфицированных возбудителями различных генотипов (гетерогено-типический иммунитет — ГГТИ), а также субтипов вирусов в пределах одного генотипа (гетеросубтипический иммунитет — ГСТИ).
Генотипирование возбудителей антропонозов (на примере коревой вакцины) проведено в 90-е годы ХХ века. Установлена циркуляция большого количества генотипов вируса кори в различных климато-географических зонах.
Классификация генотипов, предложенная генетиками-вирусологами не совсем четкая, что можно объяснить достаточно кратким периодом генотипирования. Выделены генотипы А, В, С, D, J, Н, однако, внутри этих генотипов выделяются еще генотипы, например, В1, В2, В3 и др. Для России характерен генотип А (А20, А22—А23). Установлена также циркуляция генотипов D4, D6 и Н1 [7].
Серологически корь является монолитным вирусом. Практика вакцинопрофилактики кори живыми вакцинами свидетельствует о развитии защитного иммунитета вируса одного генотипа против всех известных генотипов вируса кори. Так, широко используемые в России препараты генотипа А предотвращают эпидемии кори при заносе возбудителей других генотипов, что указывает на формирование в результате вакцинации ГГТИ. Однако, пока недостаточно изучено в какой степени развивается ГГТИ при вакцинации инактивированными противокоревыми вакцинами.
При природноочаговых инфекциях, на примере возбудителя клещевого энцефалита (КЭ) формирование субтипов (восточный, западный, сибирский) и его комплекса — генотипы омская геморрагическая лихорадка (ОГЛ), ки-асанурская лесная болезнь (КЛБ), шотландский энцефаломиелит (ШЭО), Негиши, Лангат осуществляется в процессе эволюции экологического гомеореза при включении в циркуляцию вирусов различных видов иксодовых клещей и их прокормителей (домашние животные в ареале циркуляции вирусов и аборигенные или интродуцированные в ареал циркуляции возбудителей новые виды диких животных) [8]. Специальных сравнительных эпидемических строго контролируемых исследований с применением одной из убитых вакцин из восточного или западного субти-
Таблица 1. Защитный эффект адаптивного переноса иммунных спленоцитов мышами ВАLB / С при подкожном заражении 1 000 ZD50 вирусов ККЭ
Тест-штаммы Генотип, субтипы Количество выживших животных после адаптивной защиты спленоцитами мышей, иммунизированных указанными клонами живого вируса штамм Еланцев
15-20/3 Е-30 Е-37 Плацебо
Софьин Восточного КЭ 63 65 59 1
Абсеттаров Западного КЭ 60 67 62 0
TII - 3 Сибирского КЭ 66 64 61 0
Никитина Омской геморрагической лихорадки 58 60 55 0
И- 40 Шотландского энцефаломиелита 55 59 57 2
q- 11138 Киаскурской лесной болезни 50 58 51 0
Негиши Негиши 61 59 64 0
пов генотипа вируса КЭ в ареале циркуляции других субтипов вируса КЭ и известных генотипов его комплекса проведено не было.
До настоящего времени не потеряли своей актуальности исследования о формировании клеточного иммунитета методом адаптивного переноса спленоцитов сингенных мышей однократно иммунизированных атенуированным штаммом ТР-21 вируса комплекса КЭ Лангат. Выявлен защитный эффект против 1000 1^50 западного субтипа вируса КЭ, штамм Абсеттаров, который достигал 100% у мышей СВАх С51 В,. Через 8—12 дней после однократной иммунизации мышей-доноров живой вакциной из вируса Лангат (штамм ТР-21) индекс их резистентности достигал 106 1^50. В параллельных опытах адаптивного переноса спленоцитов от мышей, подготовленных иммунизацией убитой вакциной из западного субтипа вируса КЭ (штамм Абсеттаров) выявилась очень слабая защитная эффективность: наблюдалась гибель 80% мышей в контроле и 65% в опыте (разница статистически не достоверна). В представленных опытах адаптивного переноса защитная роль Т и В спленотипов сравнивалась в условиях иммунизации животных цельными вирионами, содержащими различные антигены, не дифференцированные по Т- и В-зависимости. Чтобы устранить этот недостаток спленоциты от мышей, повторно иммунизированных штаммом ТР-21 Лангат, обрабатывали смесью комплемента и кроличьих иммунных сывороток против Т (АТС) и В (АВС) лимфоцитов мышей той же линии. Оказалось, что перенос Т-клеток индуцировал защиту у 80% сингенных мышей-реципиентов, перенос В клеток — у 40% животных, тогда как одновременное введение Т- и В-клеток защищало 100% реципиентов от 1000 1^50 западного субтипа вируса КЭ (штамм Абсттаров). Эти исследования свидетельствуют также о ведущей роли клеточного иммунитета в предохранении развития заболевания от западного субтипа КЭ [9].
Используя метод адаптивного переноса спленоцитов линейных мышей ВА1_В/с, однократно иммунизированных вариантами естественно ослабленного штамма Еланцев вируса Лангат (клоны 15-20/3, Е-30, Е-37) выявлен защитный эффект не только штаммов восточного субтипа вируса Софьин, западного Абсеттаров, сибирского Т11-3, но и возбудителей комплекса КЭ генотипов ОГЛ, штамм Никитина, КЛБ, штамм q-1 1138, Негиши (штамм Негиши).
В контрольной группе с плацебо получен отрицательный результат (табл.1).
В экспериментах на линейных мышах BALB/C проведено испытание эффективности и антигенной активности живой вакцины из штамма Еланцев (клон 15-20/3) вируса Лангат и инактивированной культуральной вакцины Томского института вакцин и сывороток из штамма Софьина восточного субтипа вируса КЭ. При иммунизации живой вакциной получен одинаково высокий защитный эффект не только против восточного, западного и сибирского субтипов вируса КЭ, но и других представителей комплекса КЭ.
Линейные мыши BALB/C, привитые инактивированной вакциной из восточного субтипа вируса КЭ штамм Софьин существенно меньше, но в одинаковой степени были защищены против вирулентных вирусов КЭ восточного, западного и сибирского субтипов, но эта вакцина не предохраняла против представителей комплекса КЭ генотипов ОГЛ, КЛБ, ШЭО, Негиши (табл. 2).
На основании комплексных вирусологических, клинических и морфологических исследований в опытах на 40 обезъянах Macacus rhesus, привитых в головной мозг вакцинным штаммом Еланцев вируса комплекса КЭ Лангат, выявлена существенная резистентность животных к интра-церебральному заражению не только к высоко вирулентными возбудителями восточного, западного и сибирского субтипов вируса КЭ, но и ОГЛ, КЛБ, ШЭО, Негиши. В этих же опытах установлена выраженная антигенная активность в реакции нейтрализации сывороток крови животных с тест-штаммами вируса КЭ и ОГЛ. Средние геометрические индексы нейтрализации в опытах с тест-штаммами вируса КЛБ были ниже, чем с тест штаммами вирусов КЭ и ОГЛ [11].
Полученные результаты свидетельствуют о целесообразности использования одной убитой вакцины из восточного, западного или сибирского субтипов вируса против всех возбудителей КЭ. Однако, против других вирусов комплекса КЭ возможно применение инактивированных вакцин, сконструированных только на основе гомологичных вирусов. В связи с высокой защитной эффективностью живой вакцины одного генотипа вируса комплекса КЭ против восточного, западного, сибирского субтипов в пределах генотипа КЭ и всех возбудителей комплекса КЭ целесообразно в настоящее время вернуться к созданию безопасной живой вакцины.
Таблица 2. Результаты испытаний иммуногенных свойств живой вакцины из штамма Еланцев (клон 15-20/3) и инактивированной культуральной вакцины восточного субтипа штамм Софьин на мышах ВАZB/C
Наименование тест-штамма Субтип Средний геометрический логарифм индекса резистентности на мышах привитых
живой вакциной инактивированной вакциной
Хаб — 17 Субтип восточный 7,1 ± 0,25 4,3 ± 0,13
Абсеттарев Субтип западный 5,7 ± 0,1 3,8 ± 0,01
Т11 — 3 Субтип сибирский 6,8 ± 0,17 4,5 ± 0,14
Никитина Генотип Омской геморрагической лихорадки 6,6 ± 0,02 1,9 ± 0,16
И- 40 Генотип Шотландского энцефаломиелита 6,2 ± 0,19 0,6 ± 0,09
q— 11138 Генотип Киасанурской лесной болезни 5,5 ± 0,23 0
Негиши Генотип Негиши 5,9 ± 0,18 0
При антропургенно-полигостальных вирусах (на примере вируса гриппа генотипа А) показано, что инфицирование мышей возбудителями одного субтипа в значительной степени защищает от других субтипов, но не действует против вирусов генотипа В [12]. Что касается вирусов гриппа генотипа В, то по данным молекулярно-генетиче-ских исследований установлен весьма низкий процент гомологии (30%) его генома с геномом вируса А. В отличие от последнего у вирусов гриппа В снизилась способность заражать животных, а следовательно, вирус в процессе эволюции экологического гомеореза потерял источник по-лигостальных шифтов, сохранив способность к дрейфу антигенов. Этим, вероятно, объясняется более умеренное его распространение и отсутствие пандемий, вызванных данным вирусом. О происхождении вируса гриппа генотипа С что известно, тем более, что дискутируется вопрос о принадлежности его к ортамиксавирусам, к которым относятся вирусы гриппа А и В [1 3].
В связи с распространением среди людей птичьего вируса генотипа А субтипа и вступления в циркуляцию пандемического вируса А Н^ с тройной рекомбинацией генома (фрагменты свиного, птичьего и человеческого вируса) в настоящее время резко активизировались экспериментальные исследования по созданию различных типов новых гетеросубтипических вакцин, способных защитить от широкого спектра возбудителей гриппа генотипов А, а также генотипа В. Испытаны на мышах ДНК вакцины с аденовирусным вектором, экспрессирующие М2 и N + N2 [14—15]. Эти препараты стимулировали накопление СД8+Т клеток и антител, специфичным к данным вирусным белкам. Кроме того, они защищали от летального че-ленджа пандемическим вирусом А (^N1) и птичьим возбудителем А (Н5^). Другую ДНК-вакцину, экспрессирую-щую теми же белками, вводили мышам после иммунизации сезонной живой гриппозной вакциной [1 6]. Такая схема значительно усиливала накопление в легких перекрестно реагирующих 1дА и защищала от летального челенджа пандемическим вирусом А (Н5^). Создан вариант ДНК вакцины, экспрессирующий иммунодоминантные эпитопы вируса лимфоцитарного хориоменингита, комплиментарные перекрестнореагирующим СД8+Т-клеткам. Предварительная иммунизация мышей вирусом А с последующим введением этой вакцины приводила к узнаванию СД8+Т-клетками НА и NA вирусов А (Н^), А (Н^2 и А (Н5^), а также перекрестной вакцины от их летальной до-
зы [17]. Изучен ГСТИ при введении мышам липосомальной вакцины, включающей эпитонный участок М1, который узнается специфическими СД8+Т-клетками [18]. Препарат индуцировал кроссреактивную популяцию данных клеток, проявивших специфичность к вирусам А (^N1) и А (^N2)
В экспериментах на животных апробированы адъювант-ные вакцины [1 9]. Так, у мышей, иммунизированных наружным доменом М2 (М2е) в сочетании с алюминием, выявлены высокие титры IgG к этому домену, что способствовало повышению уровня защиты от летального челенджа вирусами А (Н^) и А (Н-^2) даже при слабом накоплении специфических к N СД8+Т-клеток. Выраженность ГСТИ зависела от способа инактивации вирусов гриппа А [22].
Таким образом, основными факторами развития ГСТИ при интродукции различных субтипов вируса гриппа генотипа А являются перекрестно-активные вируснейтрали-зующие антитела. Доказано, что в ГСТИ задействованы цитотоксические лимфоциты и антитела, проявляющие специфичность к вирусным белкам вириона N и М2. Возможно, к этому причастны и другие популяции Т-лимфоци-тов. Установлена стимуляция кроссреактивных Т-клеток и антител при заражении животных субтипами вируса А, эволюционирующих в коллективах людей, популяциях свиней и птиц.
Накопленные данные свидетельствуют о влиянии ГСТИ на эпидемический процесс в виде снижения тяжести клинических проявлений гриппа при пандемическом распространении новых субтипов вируса гриппа у людей, контактировавших с ранее циркулирующими вирусами [23].
Так же показано наличие четко выраженной схожести повозрастной структуры заболеваемости при развитии всех фиксированных пандемических циклов: грипп поражал всегда прежде всего детей, а среди взрослых наблюдалось снижение заболеваемости по мере возрастания количества встреч с предшествующими субтипами вируса гриппа А, т.е. увеличение количественных показателей кроссреактивной иммунологической памяти [24—25]. При этом происхождение вируса в биосфере среди популяции людей или животных не имеет значения.
Заключение
В настоящее время интенсивно разрабатываются различные виды универсальных противогриппозных вакцин, но и это чаще носит экспериментальный характер. Результаты экспериментальных исследований и клиниче-
ских наблюдений свидетельствуют как при гриппе, так и при КЭ о более высокой способности живых вакцин в сравнении с инактивированным препаратом индуцировать особенно клеточный ГГТИ и ГСТИ. Это открывает перспективу усовершенствования и применения живой гриппозной вакцины в качестве профилактического препарата «первого» эшелона при угрозе пандемического распространения новых субтипов вируса гриппа генотипа А и вновь выдвигает проблему разработки универсальной специфически безопасной живой вакцины против заболеваний комплекса КЭ, особенно из естественноаттенуированных штаммов, утративших свою нейровирулентность для человека.
Литература/References:
1. Учайкин В.Ф. Эволюция патогенеза инфекционных болезней // Детские инфекции. - 2012. - Т.11. - № 4. - С. 4-8. Uchajkin V.F. [The evolution of the pathogenesis of infectious diseases] // Detskie Infekcii. - 2012. - T.11. - № 4. - S. 4-8.(In Russ)
2. Учайкин В.Ф. Современная концепция патогенеза инфекционного заболевания // Детские инфекции. - 2013. - Т. 12. -№ 4. - С. 4-7.
Uchajkin V.F. [The Modern Concept of the Pathogenesis of Infectious Disease] // Detskie Infekcii. - 2013. - T. 12. - № 4. - S. 4-7. (In Russ)
3. Дубов А.В. Экологический гомеорез как основа эволюции // Фундаментальные исследования. - 2005. - № 10. - С.77-78.
Dubov A.V. [The ecological homeorhesis as a basis of the evolutionary change] // Fundamenlal'nye Issledovanija. - 2005. - № 10. -S.77-78. (In Russ)
4. Dubov A.V Ecological homeoresis as the stage of microevolution // European Journal of national history. - 2007. - № 2. - Р. 142— 145.
5. Дубов А.В. Экологический гомеорез в механизме формирования вирулентности возбудителей антропонозов // Детские инфекции. - 2013. - Т.12. - № 2. - С. 31 -34.
Dubov A.V. [Ecological Homeorhesis in the Mechanism of Formation of Anthroponoses Virulence] // Detskie Infekcii. - 2013. -T.12. - № 2. - S. 31 -34. (In Russ)
6. Вотяков В.И. Клещевые энцефалиты Евразии / В.И. Вотяков, В.И. Злобин, Н.П. Мишаева. - Новосибирск: Наука, 2002. -438 с.
Votjakov V.I. Kleshhevye jencefality Evrazii [Tick-borne encephalitis of Eurasia] / V.I. Votjakov, V.I. Zlobin, N.P. Mishaeva. - Novosibirsk: Nauka, 2002. - 438 s. (In Russ)
7. Корь. Современное представление о возбудителе: клиника, диагностика, профилактика / А.П. Агафонов, С.А. Пьянков, Е.А. Нечаева, А.А. Неверов и др. - Новосибирск, 2006. - 39 с. Measles. Sovremennoe predstavlenie o vozbuditele: klinika, diag-nostika, profilaktika[Modern thinking of infectious agent: clinics, diagnostics, preventive measures] / A.P. Agafonov, S.A. P'jankov, E.A. Nechaeva, A.A. Neverov i dr. - Novosibirsk, 2006. - 39 s. (In Russ)
8. Дубов А.В. Экологический гомеорез в механизме эволюции вирулентности и путей проникновения в организм человека возбудителей природно-очаговых инфекций // Детские инфекции. -2014. - Т.13. - №3. - С.36-39.
Dubov A.V. [Ecological Homeorhesis in the Mechanisms of Virulence Evolution and Penetration of Agents of Feral Herd Infetions into Humans] // Detskie Infekcii. - 2014. - T.13. - №3. - S.36-39. (In Russ)
9. Буковская С.Н. Клеточный иммунитет у мышей, вакцинированных против клещевого энцефалита (в системе адаптивного переноса) / С.Н. Буковская Л.Г. Карпович, М.С. Воробъева // Этиология, эпидемиология и меры профилактики клещевого энцефалита на Дальнем Востоке. - Хабаровск, 1978. - С. 10— 12.
Bukovskaja S.N. [Cellular immunity in mice, vaccinated against tick-
borne encephalitis (within the system of adaptive transfer) ]/ S.N. Bukovskaja L.G. Karpovich, M.S. Vorobjeva // Jetiologija, jepidemiologija i mery profilaktiki kleshhevogo jencefalita na Dal'nem Vostoke. - Habarovsk, 1978. - S. 10-12. (In Russ)
10. Смородинцев А.А. Клещевой энцефалит и его вакцинопрофи-лактика / А.А. Смородинцев, А.В. Дубов. - Л., 1986. - 231 с. Smorodincev A.A. Kleshhevoj jencefalit i ego vakcinoprofilaktika [Tick-borne encephalitis and its vaccine prophylaxis]/ A.A. Smorodin-tsev, A.V Dubov. - L., 1986. - 231 s. (In Russ)
11. Дубов А.Я. Экспериментальные обоснования возможности применения живой вакцины против клещевого энцефалита из штамма Еланцев для профилактики омской геморрагической лихорадки и киазанурской лесной болезни: Автореф. дис. ... к.м.н. - Томск, 1973. - 13 с.
Dubov AJa. Jeksperimental'nye obosnovanija vozmozhnosti primenenija zhivoj vakciny protiv kleshhevogo jencefalita iz shtam-ma Elancev dlja profilaktiki omskoj gemorragicheskoj lihoradki i ki-azanurskoj lesnoj bolezni [Experimental grounds for possibilities of implementing a live vaccine against tick-borne encephalitis of Elantzev strain for prophylaxis against Omsk Hemorrhagic Fever and Kyasanur Forest Disease]: avtoref. dis. - Tomsk, 1973. - 13 s. (In Russ)
12. Schulman LJ. Induction of partial specific heterotypic immunity in mice by a single infection with influenza A virus / L.J. Schulman,
E.D. Kilbowhe // J.Bacteriol. - 1965. - V.89. - P. 170-174.
1 3. Жданов В.М. Эволюция вирусов. - М.: Медицина, 1990. -372 c.
Zhdanov V.M. [Jevoljucija virusov]. - M.: Medicina, 1990. - 372 c. (In Russ)
14. Chang H. A singl dose of DNA vaccine based on consowed H5N1 subtype proteins provides protection against lethal H5N1 challenge in mice pre-e x posed to H1N1 influenza virus / H. Chang, C. Iluang, J.Wu // VirolJ. - 2010. - V.7. - P. 197.
15.Thueng-in K. Heterosubtipic immunity in influenza mediated by li-posonic adjunanted H5N1 recombinant protein vacdnes / K. Thueng-in, J. Maneewatch, P.Scimanote // Vaccine. - 2010. -V.28. - N 41. - .6765-6777.
16. Price J.E. Vaccination focusing immunity on conserved antigens protects mice and ferrets against virulent H1N1 and H5N1 influenza virus / J.E.Price, M.R. Soboleski, C.F. Zo // Vaccine. - 2009. -N47. - P.6512 - 6521.
17. Zandley W.A. The effects of pree x isting immunity to influenza on responses in influenza victors in mice / W.A. Zangley, K.C. Bradley, K. Ji // Vaccine. - 2010. - V.28. - N 38. - P.6305- 6313.
18. Matsut M. A CTZ-baset liposomal vaccine capable of inducing protection against heterosubtypic influenza viruses in HZA-A x 0201 transgenic mice / M. Matsut, S. Kohyana, T. Sudo // Biochem. Bi-ophis. Res.commun. - 2010. - V.391. - N 3. - P. 1494-1499.
19. Wang B.Z. Incorporation of membrane-anchored flagelin into influenza virus-like povticles the breadth of immune responses / B. Z. Wang,
F.S. Quan, S.M. Kang // J.Virol. - 2008. - V.82. - N 23. -P. 1 1813-1 1823.
20. Carragher D.M. A movel role for non-neutralizing antibodes against nucleoprotein in facilitating resistance to influenza virus / D.M. Carragher, D.A. Kaminski, A. Moguin // J. Immunol. -2008. - V. 181. - N 6. - P. 4168-4176.
21. Zhao I. An H5N1 M2e-based multiple antigenis peptide vaccine confers heterosubtypic protection from letal infection with pandemic 2009 H1N1 virus / I. Zhao, S. Sun, L.Du // VirolJ. - 2010. - V7. -N 151. P.6308-6313.
22. Furuya F. Effect of inactivation method on the cross-protective immunity induced by whole «killed» influenza A viruses and commercial vaccine preparation / F. Furuya, M. Regner, M. Lobigs // J. Ien.Vi-rol. - 2010. - V.91. - N 6. - P. 1450-1460.
23. Найхин А.Н. Гетеросубтипический иммунитет к вирусам гриппа А: эпидемиологические данные, вовлеченность разных иммунопатологических факторов, вакцинация // Вопр. вирусол. -2012. - Т.57. - № 3. - С.4-9.
Najhin A.N. Geterosubtipicheskij immunitet k virusam grippa A: jep-idemiologicheskie dannye, vovlechennost' raznyh immunopatolog-icheskih faktorov, vakcinacija // Vopr. Virusol. - 2012. - T.57. -№ 3. - S.4-9. (In Russ)
