Эффекты системной фотодинамической терапии при лечении пациентов со злокачественными новообразованиями кожи Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

73

Заключение. В ходе проведенных работ разработана готовая лекарственная форма Оливамида, обладающая хорошей растворимостью, высокой стабильностью и противоопухолевой активностью. Готовая лекарственная форма «оливамид, лиофилизат для приготовления инъекций» передана на дальнейшие доклинические исследования.

Н.П. Ткаченко, М.А. Каплан, И.А. Замулаева, В.Н. Капинус, Е.В. Ярославцева-Исаева, Е.И. Селиванова, И.С. Спиченкова

эффекты системной фотодинамической терапии при лечении пациентов со злокачественными новообразованиями кожи

МРНЦим. А.Ф. Цыба — филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, Обнинск, Калужская область, Россия

введение. Известно, что циркулирующие опухолевые клетки (ЦОК) оказывают влияние на течение опухолевого процесса и эффективность лечения. Опухолевые стволовые клетки являются фракцией, резистентной к действию ионизирующего излучения и ряда химиопрепаратов.

Цель исследования. Анализ динамики количества ЦОК после локальной и системной фотодинамической терапии (ФДТ) у пациентов со злокачественными новообразованиями кожи, а также изучение механизмов системной ФДТ

материалы и методы. Обследовано 39 пациентов. Среди них у 11 больных базально-клеточным раком кожи (БКРК) сТ1—2^М0 проведена локальная ФДТ; у 9 пациентов с БКРК сТ1—2^М0 — локальная ФДТ в сочетании с системной; 19 пациентов с меланомой получили сеанс системной ФДТ Методика сеанса системной ФДТ заключается в одновременном внутривенном введении фотосенсибилизатора хлоринового ряда фотолона (1,0—1,2 мг/кг) и проведении лазерного облучения крови пациента на аппарате «Латус 0,4» (X = 662 нм, мощность 20 мВт) при помощи световода, вводимого в кубитальную вену противоположной руки. Продолжительность сеанса — 50 мин. Сеанс локальной ФДТ проводился через 2 ч: световая доза 200—300 Дж/см2, плотность мощности — 300—400 мВт/см2. При помощи проточной цитометрии проводили идентификацию ЦОК по иммунофенотипу Ер-САМ (CD326)+CD45-. Среди ЦОК определяли опухолевые клетки, экспрессиру-ющие маркер СD44, который применяется для выявления стволовых (стволовоподобных) клеток опухолей.

результаты. Через 3 сут после лечения в подгруппе пациентов с БКРК, получавших локальную ФДТ в сочетании с системной, отмечено снижение частоты ЦОК более чем в 2 раза от исходной величины (р <0,05). Наблюдалась тенденция (р = 0,145) к снижению частоты ЦОК в группе больных меланомой, получивших только сеанс системной ФДТ Не было изменений частоты ЦОК в подгруппе пациентов с БКРК, получавших только локальную ФДТ. Подобным образом после лечения изменялось количество стволовых CD44+ клеток. Уменьшение частоты ЦОК сопровождалось повышением уровня их апоптотической гибели.

Заключение. Наши данные указывают на эффективность системной ФДТ у пациентов со злокачественными

новообразованиями кожи, отмечена элиминация ЦОК, включая стволовоподобные опухолевые клетки. Причиной уменьшения частоты ЦОК, предположительно, является гибель этих клеток, в том числе путем апоптоза. Системная ФДТ является эффективным дополнением к традиционным методам лечения опухолевых новообразований кожи.

Д. С. Третьякова, С.В. Хайдуков, Е.Л. Водовозова

влияние липофильного пролекарства метотрексата в мембране липосом на взаимодействия с субпопуляциями лейкоцитов крови человека

ФГБУН ИБХ РАН, Москва, Россия

введение. Ранее нами показано, что липосомы размером 100 нм на основе природных фосфолипидов, несущие в липидном бислое метотрексат в виде липофильного пролекарства — диолеоилглицеридного сложного эфира (MTXDG), менее токсичны и эффективнее ингибируют рост опухоли по сравнению с интактным метотрексатом на модели Т-клеточной лимфомы мышей.

Цель исследования. Изучение влияния введения MTXDG в состав липосом на их взаимодействия с субпопуляциями лейкоцитов крови человека ex vivo с помощью ци-тофлуориметрии, а также установление вклада ганглиозида GM1 в экранирование липосом от захвата клетками моно-цитарно-макрофагальной защитной системы. Известно, что ганглиозид GM1 стабилизирует липосомы в циркуляции.

материалы и методы. Методом экструзии через поры размером 100 нм получали липосомы на основе яичного фос-фатидилхолина (ePC) следующего состава: L1 — чистый ePC, L2 - ePC-MTXDG, 9 : 1 (мол.), L3 - ePC-MTXDG-ганглио-зид GM1, 8 : 1 : 1 (мол.). Все препараты липосом содержали 1 мол. % флуоресцентно-меченного фосфатидилхолина. Свежую кровь здоровых доноров, собранную над гепарином, инкубировали с липосомами (10 : 1, об.) при 37 °С от 30 мин до 3 ч, затем образцы промывали на холоде, высаживали клетки центрифугированием и обрабатывали гипотоническим буфером, содержащим хлорид аммония, для лизиса эритроцитов. Чтобы исключить сигнал флуоресценции непоглощенных липосом, адсорбированных на поверхности клеток, использовали тушитель флуоресценции - кристаллический фиолетовый. Измерения проведены на проточном цитофлуориметре FC500 (Beckman Coulter, США) и проанализированы с помощью программного пакета CXPanalysis (Beckman Coulter, США).

результаты. Гистограммы FACS-анализа свидетельствуют о принципиальной разнице в связывании с лейкоцитами липосом с MTXDG (L2 и L3) и липосом без пролекар-ства (L1). Уже через 30 мин инкубации 85 % нейтрофилов содержали липосомы L1, а через 2 ч - все 100 %. Моноциты более медленно поглощали липосомы L1, но к 2 ч инкубации практически вся популяция их захватывала. Напротив, липосомы L2 и L3 в течение 30 мин ассоциировали лишь с 15 и 11 % нейтрофилов соответственно. Затем пул отреагировавших нейтрофилов постепенно увеличивался - к 3 ч инкубации он достигал 61,5 и 70 % для липосом L2 и L3 соответственно; в ходе всей инкубации степень фагоцитоза этих липосом продолжала

Спецвыпуск / том 17 / 2018

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ