CC BY
48
20
15
I
I
9. Попкова, С.М. Микроэкология человека и здоровье семьи / С.М. Попкова, М.Ф. Савченков // Международный журнал экспериментального образования.^ 2010.П №12.-1 С. 28-30.
10. Тец, В.В. Роль внеклеточной ДНК и липидов матрикса во взаимодействии бактерий биопленок с антибиотиками: Автореф. дис. ... канд. мед. Наук / В.В. Тец.П СПб., 2007.П 22 с.
11. Sirghi, L. Probing elasticity and adhesion of live cells by atomic force microscopy indentation / L. Sirghi, J. Ponti, F. Broggi // Eur. Biophys. J.D 2008.П Vol. 37.П P. 935-945.
MORPHOLOGICAL COMPOSITION OF VAGINA BIOTOPE BIOFILM AT INFLAMMATORY DISEASES OF WOMEN REPRODUCTIVE TRACT
A.V. MYASNIKOVA, N.I. POTATURKINA-NESTEROVA, I.S. NEMOVA, YU.S. NAGORNOV
Ulyanovsk State University
П Staphylococcus spp.
□ Enterooccus spp.
□ Streptococcus spp.
□ Candida spp.
□ Ecsherichia
Рис. 6. Структура биопленки при воспалительных заболеваниях
Выводы:
1. Среди воспалительных заболеваний репродуктивного тракта у обследованных женщин наиболее часто встречались вагинит (36%), вульвит (25,7%) и сальпингоофорит (20%).
2. Воспалительные заболевания репродуктивного тракта сопровождались изменением морфологии биопленки вагинального биотопа, проявлявшимся в снижении степени колонизации и частоты встречаемости индигенной микрофлоры (лактобацилл), а также повышении данных показателей транзиторных симбионтов с расширением видового спектра за счет абсолютного патогена (Staphylococcus aureus).
3. Наиболее частыми ассоциантами биопленки вагинального
биотопа у женщин с воспалительными заболеваниями репродуктивных органов являлись представители рода
Staphylococcus spp. и Candida spp. Показатели частоты встречаемости этих компонентов биопленки составили 48,6% и 40,7%, плотности колонизации □ 104 □ 106 КОЕ/мл и 109 КОЕ/мл соответственно.
Литература
1. Анкирская, А.С. Опыт микробиологической диагностики оппортунистических инфекций влагалища / А.С. Анкирская, В.В. Муравьева // Клиническая Микробиология и Антимикробная Химиотерапия.- 2001.- Т. 3.- № 2.- С. 190-194.
2. Микроэкология и показатели гуморального иммунитета влагалища женщин с неспецифическими воспалительными заболеваниями гениталий / Е. А. Воропаева [и др.] // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. □ 2005. □ № 3.- С. 65-69.
3. Дмитриев, А.Г. Лабораторная диагностика
бактериальных урогенитальных инфекций / А.Г. Дмитриев.- М.: Медицинская книга, 2003.- 336 с.
4. Дробкова, В.А. Биологические особенности грибов рода Candida, изолируемых из вагинальнгого биотопа женщин репродуктивного возраста: Автореф. дис. ... канд. мед. Наук / В.А. Дробкова.- Пермь, 2010.- 22 с.
5. Лабинская, А.С. Микробиология с техникой микробиологических исследований / А.С. лабинская.- М.: -Медицина-J изд. 4-е, перераб. и доп., 1978.- 394 с.
6. Мошкевич, И.Р. Микробные биопленки при смешанных инфекциях: Автореф. дис. ... канд. мед. Наук / И.Р. Мошкевич.-СПб., 2007.- 21 с.
7. Мясоедова, С.С. Этиология и патогенез воспалительных заболеваний репродуктивного тракта женщин / С.С. Мясоедова, Л.А. Леванова, Н.М. Подонина // Медицина в Кузбасе.-2010.-№1.- С. 17-20.
8. Орлова, В.С. Микробиоценоз влагалища современных практически здоровых женщин молодого репродуктивного возраста / В.С. Орлова, Ю.И. Набережнев, И.В. Будник // Научные ведомости.- 2008.- № 6 (46).- С. 27-35.
The morphological composition of biotope biofilm of reproductive age women vagina at inflammatory diseases has been studied. The nuclear-powered microscopic evaluation has been used to examine the morphology of vagina biotope biofilm. The differences in the structure of vaginal biotope biofilm have been determined. These differences occur in the reduction of colonization level, the frequency of indigene microflora and the decrease of pathogenic microflora in comparison with indices of healthy persons.
Key words: vaginal biotope, inflammatory disease, biofilm, atomic force microscopy.
УДК 616.72-002
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ВНУТРИСУСТАВНОЙ ОЗОНОТЕРАПИИ ПРИ ТРАВМАТИЧЕСКИХ ПОВРЕЖДЕНИЯХ КОЛЕННОГО СУСТАВА
А.Н. ЗАХВАТОВ, А.Н. БЕЛЯЕВ, С.А. КОЗЛОВ, С.И. КУЗНЕЦОВ, М.И. ШУТОВА, И. Л. АНЮШИН, В.Ю. САФОНОВ*
В эксперименте на 125 белых нелинейных крысах изучено содержание фракций оксипролина в плазме крови и произведена морфологическая оценка хряща, синовии и субхондральной кости при моделировании посттравматического артрита коленного сустава и на фоне пероральной нестероидной противовоспалительной терапии, внутрисуставной озонотерапии и их комбинированного применения. Ключевые слова: посттравматический артрит, оксипролин, ниме-сулид, внутрисуставная озонотерапия.
Травмы коленного сустава занимают ведущее положение в структуре повреждений суставов всех локализаций и являются актуальной проблемой современной травматологии в связи с высокой частотой инвалидизации пострадавших [2]. Повреждение коленного сустава сопровождается комплексом структурнофункциональных расстройств, протекающих в хрящевой ткани и приводящих в дальнейшем к развитию посттравматического артрита. Воспалительный процесс сопровождается тканевой гипоксией, активацией перекисного окисления липидов и истощением антиоксидантной системы организма [3]. Морфологически данные изменения проявляются в виде деструкции основных клеточных элементов хряща, хондроцитов, а также усиленным распадом коллагеновых волокон и протеогликанов, входящих в состав межклеточного матрикса [1,8]. В связи с этим актуальными являются вопросы, связанные с повышением эффективности лечения травматических повреждений коленного сустава, путем разработки новых методов, позволяющих воздействовать на патологический процесс. Перспективным является метод озонотерапии, так как озон обладает широким спектром воздействия, оказывая выраженное анальгетическое, противовоспалительное, иммуномодулирующее действие, улучшает микроциркуляцию, оптимизирует про- и антиоксидантные системы, потенцирует действие других лекарственных препаратов. Учитывая патогенетические механизмы развития острого асептического посттравматического артрита, наиболее целесообразным в комплексном лечении данной патологии, является применение локальной внутрисуставной озонотерапии [6,7,9].
Цель исследования □ изучить некоторые показатели обмена коллагена и морфологические изменения тканей сустава при
ГОУ ВПО Мордовский государственный университет им. Н.П. Огарева, 430005, Республика Мордовия, г. Саранск, ул. Большевистская, д. 68
25
0
5
0
экспериментальном посттравматическом артрите коленного сустава на фоне применения нестероидной противовоспалительной терапии и внутрисуставного введения озона.
Материалы и методы исследования. Работа проведена на І25 белых нелинейных крысах обоего пола массой І80-200 г., содержавшихся в стандартных условиях вивария ГОУ BПO «МГУ им. ЫП. Oгapeвa□ Животные были разделены на 5 серий. Первую серию составили интактные животные в количестве 25 особей. Во второй (n=20), третьей (n=25), четвертой (n=25) и пятой (n=25) производилось моделирование травмы коленного сустава механическим путем по методике O.é. Ломницкого [4]. Под ингаляционным наркозом в асептических условиях рассекалась кожа, фасция и капсула коленного сустава, после чего в полость сустава вводили иглу Дюфо, обточенную под углом 90D и ориентированную на хрящ внутреннего мыщелка бедренной кости. Ввинчивающими движениями перфорировали суставной хрящ до упора в субхонд-ральную кость, затем иглу удаляли. Получение фрагмента суставного хряща контролировали мандреном. Швы на рану накладывали через все слои. Во второй (контрольной) серии лечение не проводилось. Животные третьей серии получали нимесулид перорально через зонд в среднетерапевтической дозе 2 мг/кг ежедневно в течение І0 дней. В четвертой серии производилось внутрисуставное введение озоно-кислородной смеси в объеме 0,5 мл в концентрации озона на выходе из аппарата 5 мг/л через день. Продолжительность курса лечения составляла 5 инъекций. Hí животных пятой экспериментальной серии изучалась эффективность комбинированной пероральной терапии нимесулидом в дозе 2 мг/кг и внутрисуставной озонотерапии по вышеуказанной схеме введения. Для получения озоно-кислородной смеси использовался озонатор ^OT-H-01-Арз^
Животных выводили из эксперимента на 3 и 28 сутки после предварительного внутрибрюшинного введения раствора тиопен-тала натрия в дозе І00 мг/кг.
Функциональное состояние хрящевой ткани оценивали по содержанию ceo6odôoço (CO), nenmuдocвязaннoгo ^CO) и 6e¿¡o-вocвязaннoгo o¡cunpo¿uHa ^CO) в сыворотке крови по методу П.К Шараева [5]. Также исследовалась макроскопическая и микроскопическая картина суставного хряща, синовиальной оболочки и субхондрального слоя костной ткани. Гистологические препараты окрашивали гематоксилином и эозином, и исследовали с помощью светового микроскопа СМИКМЕД-5П ^ати-стическая обработка полученных результатов проводилась методом параллельных рядов вариационной статистики с использованием табличного процессора Microsoft^ Office Excel 2007. Вычислялась средняя арифметичесая (M) и ошибка средней арифметической (m) на основании которых рассчитывался критерий достоверности Огьюдента (t). Различия считались достоверными при значении p менее 0,05; 0,0І; 0,00І.
Результаты и их обсуждение. При исследовании сыворотки крови животных контрольной серии на 3 сутки после моделирования травмы коленного сустава происходило увеличение содержания CO и ПТО на І28,5% (p<0,00i) и 96,5% (p<0,00i) соответственно по сравнению с данными интактной серии. Достоверных изменений уровня БCO не наблюдалось (p>0,05).
Hí фоне нестероидной противовоспалительной терапии нимесулидом выявлено повышение в сыворотке крови уровня ПCO на 23,2% (р<0,00І), содержание свободной и белковосвязанной фракции оксипролина достоверно не изменялось (рис. І).
При внутрисуставном введении озоно-кислородной смеси в сыворотке крови содержание СО было меньше показателя контрольной серии на 7,0% (рз<0,05), уровень ПСО, напротив, возрос на 14,1% (рз<0,05). Уровень БСО достоверно не отличался от показателя контрольной серии (рз>0,05).
При комбинированном применении нестероидной противовоспалительной терапии нимесулидом и внутрисуставной озонотерапии содержание СО в сыворотке крови было ниже показателя контрольной серии на 16,7% (рз<0,001), уровень ПСО достоверно не отличался от контрольного. Концентрация БСО на фоне проводимого лечения превышала показатель контрольной серии на 13,6% (рз<0,01).
К 28 суткам от начала эксперимента у животных контрольной серии обнаружено снижение СО на 9,6% (р2>0,05) по сравнению с его уровнем на з сутки. Содержание ПСО выросло на 170,4% (р2<0,001), а уровень БСО □ на 1з5,1% (р2<0,001) относительно данных з суток, свидетельствуя о продолжающейся пролиферации соединительной ткани в области дефекта хряща, а также о возможном развитии субхондрального остеосклероза пораженного сустава.
При пероральном введении нимесулида содержание СО в сыворотке крови было ниже соответствующих данных контрольной серии на 20,5% (рз<0,001). Также произошло снижение ПСО на 47,8% (рз<0,001) по сравнению с показателем контрольной серии. Содержание БСО несколько возросло, но было меньше контрольного на 26,8% (рз<0,001), что свидетельствовало об уменьшении интенсивности пролиферации соединительной ткани в поврежденном суставе.
На фоне внутрисуставной озонотерапии наблюдалось снижение фракций оксипролина, служащих маркерами деструкции коллагеновых волокон. Так, уровень СО сыворотки крови снизился на 25,0% (рз<0,001), уровень ПСО □ на 59,0% (рз<0,01) относительно данных контрольной серии. Сравнительно с серией не получавшей лечения, белковосвязанный оксипролин уменьшился на з9,4% (рз<0,001), то есть при внутрисуставной озоноте-рапии не происходило дальнейшего увеличения содержания БСО.
При комбинированной терапии фракции оксипролина в сыворотке крови по сравнению с данными контрольной серии изменились следующим образом: СО снизился на з5,1%
(рз<0,001), ПСО □ на 66,4% (рз<0,001). Важно отметить, что в динамике лишь на фоне комбинированной терапии произошло уменьшение белковосвязанного оксипролина на 47,8% (рз<0,001), что свидетельствовало об ограничении формирующегося склероза тканей сустава (рис. 2).
Puc. 1. Удержание фракций оксипролина в плазме крови лабораторных животных на 3 сутки эксперимента.
Рис. 2. Содержание фракций оксипролина в плазме крови лабораторных животных на 28 сутки эксперимента.
Микроскопическое исследование гиалинового хряща коленного сустава интактного животного выявило структурные зоны аналогичные гиалиновому хрящу коленного сустава человека: поверхностную, среднюю и глубокую. У животных контрольной серии на з сутки после моделирования посттравматиче-ского артрита при артротомии в полости сустава определялась синовиально-геморрагическая жидкость в количестве около 0,5 мл. В области медиального мыщелка бедренной кости имелся дефект округлой формы. Макроскопически суставная поверхность препарата вне зоны повреждения существенно не отличалась от таковой интактного сустава □ суставной хрящ был полупрозрачным, розоватым, с гладкой блестящей поверхностью. При гистологическом исследовании установлено, что экспериментально созданный дефект распространялся на всю толщу хряща и проникал в субхондральную кость. Дно дефекта было заполнено тканевым детритом с массивным скоплением клеточных элемен-
тов. Вне зоны повреждения обнаруживались признаки отека хряща в виде его утолщения и участков разволокнения поверхностной зоны. Отмечался отек синовиальной оболочки и резко выраженная диффузная инфильтрация ее полиморфно-ядерными нейтрофилами и лимфоцитами. Определялось полнокровие сосудов и увеличение их просвета, эндоваскулиты и тромбообразова-ние. У животных, получавших нимесулид, состояние тканевых структур сустава существенно не отличалось от таковых в контрольной серии, т.е. наблюдалось воспаление синовиальной оболочки, пикноз и некроз хондроцитов в зоне поражения.
Сустав животных на фоне введения озоно-кислородной смеси и комбинированного лечения был увеличен в объеме, поверхность хряща вне зоны поражения имела здоровый вид. Микроскопически цитоархетиктоника вне зоны повреждения не была нарушена. В области дефекта обнаруживалось скопление тканевого детрита и хондроцитов, находящихся на различных стадиях некроза. В субхондральной кости деструктивно-дистрофических изменений не выявлялось. В синовиальной оболочке наблюдалась умеренная нейтрофильная и лимфоцитарная инфильтрация и отек интерстиция, кровеносные сосуды были незначительно расширены, а в просвете обнаруживались единичные тромбы.
К концу эксперимента у животных контрольной серии поверхность хряща имела дефект в виде углубления с неровными границами бело-желтого цвета. Хрящ, окружающий дефект, был тусклый, желтоватого цвета. Морфологическое исследование в перифокальной области выявило стертость зональности хрящевой ткани, глубокие узуры, доходящие до середины глубокой зоны. В промежуточной зоне определялись лакуны, содержащие 1-з хондроцита и скопления из 4-6 клеток. Половина хондроци-тов как в лакунах, так и в скоплениях имела пикнотичные ядра. Матрикс промежуточной зоны был слабо эозинофильным, волокнистым. Глубокая зона представлена небольшими участками, в которых наряду с колончатым расположением хондроцитов встречались клоны из 4-6 клеток. В поверхностном и среднем слое происходила фибрилляция с дезорганизацией и уплотнением коллагеновых волокон, появлением горизонтальных и вертикальных трещин, формированием фиброзного хряща на поверхности. В субхондральной кости, граничащей с дефектом, обнаружены очаги резорбции костных трабекул, явления остеосклероза. При исследовании синовиальной оболочки выявлялась картина хронического посттравматического синовита в виде атрофии синовиального покрова, склероза стенок сосудов, фиброза стромы синовиальных складок, мелкоочаговой инфильтрации из лимфоцитов (рис. з).
Рис. 3. Микрофотограмма суставного хряща животного контрольной серии, 28 сутки. Ув. 10х40. Окраска гематоксилином и эозином.
В серии с использованием нестероидной противовоспалительной терапии суставной хрящ был тусклый, желтоватый с углубленной организованной зоной дефекта. При гистологическом исследовании обнаружено заполнение области дефекта фиброзной тканью. В покровном хряще выявлялись дегенеративные изменения в виде очаговой узурации поверхностной зоны,
наличия бесклеточных участков и уменьшения количества хондроцитов с дистрофией части из них. Зональное деление просматривалось нечетко. В промежуточном и глубоком слоях имелось расслоение матрикса, появление скоплений хондроцитов, у большинства из которых были разрушающиеся ядра. Структура субхондральных костных трабекул была нарушена в области дефекта хрящевого покрытия. В синовиальной оболочке обнаружена картина хронического посттравматического синовита □ фиброз, умеренная лимфоклеточная инфильтрация стромы синовиальных складок и реактивные изменения синовиальных клеток.
Внешний вид сустава животных, получивших курсовое лечение озоном, мало отличался от здорового. Суставной хрящ имел свойственные ему цвет и блеск, область дефекта была покрыта соединительнотканным регенератом. Деструктивные изменения хряща ограничивались незначительным числом трещин поверхностной зоны в смежных с дефектом областях. На остальных участках нарушения цитоархетиктоники не наблюдалось. Склеротические изменения субхондральной кости затрагивали отдельные трабекулы в зоне повреждения. Морфологическая структура синовиальной оболочки характеризовалась незначительной степенью воспаления в виде периваскулярной инфильтрации нейтрофилами, лимфоцитами и плазмоцитами. Расширения сосудов микроциркуляторного русла и внутрисосудистого тромбообразования не обнаружено.
На фоне комбинированного использования нимесулида и внутрисуставной озонотерапии участок хряща, соответствующий экспериментальной травме, визуально отличался от интактного лишь отсутствием типичного блеска. При гистологическом исследовании выявлено, что сам дефект заполнен зрелой соединительной тканью, в которой определяется большое количество хондроцитов. В пограничных областях обнаруживались отдельные пикнотичные клетки и скопления молодых хондроцитов. Зональность структуры хрящевой ткани вне очага повреждения четко прослеживалась. Фибрилляции поверхностной и промежуточной зоны не наблюдалось. В среднем и глубоком слоях хрящевой ткани определялись клеточные скопления хондроцитов и хондробластов из 2-4 и 3-6 клеток. Деструкции и склероза суб-хондральных костных балок обнаружено не было. В синовиальной оболочке при морфологическом изучении редкой находкой были периваскулярные инфильтраты (рис. 4).
Рис. 4. Микрофотограмма суставного хряща на фоне комбинированной нестероидной противовоспалительной и внутрисуставной озонотерапии, 28 сутки. Ув. І0х40. Окраска гематоксилином и эозином.
При травматических повреждениях коленного сустава наблюдается нарушение метаболического оборота коллагена с преобладанием его синтеза на фоне продолжающейся деструкции, приводя к развитию дегенеративно-дистрофических изменений. Оценка обмена коллагена на фоне НПВС □ терапии к концу лечения хотя и происходит достоверное уменьшение деструктивных явлений в соединительной ткани, но при этом сохраняются нарушения динамического равновесия между синтезом и распадом коллагена в сторону усиления биосинтеза коллагена (БСО, ПСО). Подобное изменение метаболитов коллагена свидетельствует о фибриллогенезе, интенсивность которого не коррелирует
со степенью распада коллагеновых волокон. Это, возможно, связано с тем, что после повреждения хондроциты меняют свой фенотип и начинают синтезировать неполноценный, не образующий фибрилл, коллаген, накопление которого приводит к изменению упруго-эластических свойств хряща. В этих условиях для сустава даже физиологические механические нагрузки являются деструктивным фактором и будут способствовать прогрессированию патологического процесса с исходом в деформирующий артроз. Введение озоно-кислородной смеси непосредственно в пораженный сустав в комбинации с нимесулидом приводит к более значительному сокращению распада коллагена и ограничению избыточного накопления коллагеновых волокон, что способствует раннему восстановлению внутренней среды сустава и замедлению процессов склерозирования в поврежденном суставе. Данный факт можно объяснить лечебным эффектом озона, который достигается восстановлением трофики хрящевой ткани, а также противовоспалительным действием, что предупреждает патологическое накопление соединительной ткани в очаге поражения.
Выводы. Посттравматический артрит в эксперименте приводит к нарушению обмена коллагена в виде гиперпродукции свободной, пептидосвязанной и белковосвязанной фракции окси-пролина, что обусловлено недостаточно эффективной репарацией на фоне продолжающейся деструкции, формированием фиброзного хряща и склерозированием синовиальной оболочки.
Комбинированное применение нимесулида и внутрисуставной озонотерапии корригируют обменные процессы соединительной ткани, более эффективно способствует купированию воспалительного процесса в пораженном суставе, препятствуя развитию деструктивно-дистрофических процессов.
Литература
1. Асамидинов, А.Н. Остеоартроз коленного сустава: современные представления / А.Н. Асамидинов // Врач-аспирант.-2007. □ №6.- С. 436-441.
2. Основные задачи международной Декады (The Bone and
Joint Decade 2000 □ 2010) в совершенствовании борьбы с наиболее распространенными заболеваниями опорно-двигательного
аппарата в России / Вялков А.Н. [и др.] // Научно-практическая ревматология.- 2001.-№ 2.-С. 4-8.
3. Ибадова, Г. Д. Восстановительное лечение больных остеоартрозом из числа «ликвидаторов □ и лиц, проживающих на территории брянской области / Г.Д. Нбадова, Л.С. Ходасевич // Экология человека.- 2006.-№4.-С. 46-51.
4. Ломницкт, О.Я. Экспериментальное изучение деформирующего остеоартроза / О.Я. Ломницкий // Ревматология. - 1986. -№ 4.-С.65-67.
5. Шараев, П.Н. Метод определения свободного и связанного оксипролина в сыворотке крови / П.Н. Шараев // Лаб. дело.-1981.- №5.- С. 284-285.
6. Chitnavis, J. End-stage coxarthrosis and gonarthrosis. Aetiology, clinical patterns and radiological feateres of idiopathic osteoarthritis / J. Chitnavis, J.S. Sinsheimer, M.A. Suchard, K. Clipsham, A. J. Carr // Rheumatology.- 2000.- Vol. 39.- N 6.- P. 612.
7. Hilbert, N. Cartilage degradation by stimulated human neutrophils: elastase is mainly responsible for cartilage damage / N. Hilbert, J. Schiller, J. Arnhold, K. Arnold // Bioorganic Chemistry.- 2002.- Vol. 30.- N 2.- P. 119Q32.
8. Jansen, E.J. Development of Partial-thickness Articular Cartilage Injury in a Rabbit Model / E. J. Jansen, P.J. Emans, L.W. Van Rhijn, S.K. Bulstra, R. Kuijer // Clinical Orthopaedics and Related Research.- 2008.- Vol. 466.- N 2.- P. 487-494.
9. Smith, J.O. Changes in the antiangiologenic properties of articular cartilage in osteoarthritis / J.O. Smith, R. Oreffo, N. Clarke, H. Roach // Journal of Orthopaedic Science.- 2003.- Vol. 8.- N 6.-P. 849-857.
THE EFFECTIVENESS OF INTRAARTICULAR OZONE THERAPY AT TRAUMATIC INJURIES OF THE KNEE
A.N. ZAKHVATOV, A.N. BELYAEV, S.A. KOZLOV, S.I. KUZNETSOV, M.I. SHUTOVA, I.L. ANYUSHIN, V.Y. SAFONOV
Mordovian State University after N.P. Ogarev
and morphological assessment of cartilage, synovitis, and subchondral bone in the simulation of post-traumatic arthritis of knee and on the background of peroral non-steroidal anti-inflammatory therapy, intra-articular ozone therapy and their combined application were studied.
Key words: post-traumatic arthritis, hydroxyproline, nimesu-lide, intraarticular ozone therapy.
УДК 577.1:616-006.6-018.54-074
СТРУКТУРНЫЕ И БИОХИМИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ ПЛАЗМЫ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА ПРИ ЭПИТЕЛИАЛЬНЫХ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ОПУХОЛЯХ
Л.М. ОБУХОВА, А.В. АЛЯСОВА, К.Н. КОНТОРЩИКОВА,
И.Г. ТЕРЕНТЬЕВ, Т.Н. ГОРШКОВА, О.Н. НИКИФОРОВА*
При эпителиальных злокачественных новообразованиях на начальной стадии отмечены нарушения белкового и минерального гомеостаза плазмы крови. При исследовании плазмы крови методом клиновидной дегидратации обнаружены морфологические маркеры канцерогенеза и метастазирования, связанные с нарушениями биохимических параметров. Показана возможность использования метода клиновидной дегидратации для выявления онкологических заболеваний.
Ключевые слова: клиновидная дегидратация, онкология, плазма крови, белковый обмен, минеральный обмен.
Для решения одной из основных проблем в онкологии- выявления заболевания на ранних стадиях [7] представляется целесообразным использование методов, позволяющих оценить изменения структуры биологических жидкостей, в частности, метода клиновидной дегидратации [14]. При дегидратации биологических жидкостей в открытой системе возникает нелинейный процесс формирования наноструктур составляющих ее белков. Образуется фация, которая состоит из несколько зон и характеризуется такими параметрами как микротрещины, конкреции и кристаллы.
Цель исследования □ предварительная оценка возможности использования метода клиновидной дегидратации плазмы крови для диагностики эпителиальных злокачественных опухолей на начальной стадии заболевания.
Материалы и методы исследования. Исследованы образцы плазмы крови 62 онкологических больных в возрасте 3864 лет, которые впервые поступили в стационар и ранее не подвергались противоопухолевому лечению. После оперативного вмешательства проводилось гистологическое исследование опухолевого материала. В соответствии с Международной классификацией опухолей TNM [1] больные были подразделены на три группы: с железистым (аденокарциномы □ рак молочной железы (6), рак простаты (4)), переходноклеточным (рак мочевого пузыря или мочевыводящих путей (14), рак почки (12)) и плоскоклеточным раком (рак гортани (25) рак трахеи (1)). Контролем служила плазма крови 11 практически здоровых лиц, сопоставимых с больными по возрасту и полу.
В плазме крови определяли: общий белок и белковые фракции, мочевину, креатинин, общий холестерин, ХсЛПВП, ХсЛПНП, билирубин, глюкозу, К+’ Na+’ Cl-. Оценку перечисленных показателей проводили на биохимическом анализаторе "Ко-неЛаб 20/20i" (Финляндия). Структурные характеристики плазмы крови определяли методом клиновидной дегидратации. Структуру фации оценивали с помощью бинокулярного микроскопа МБС-10 в отраженном свете при увеличении 4D8 и 7D8. Видеоизображения получали с помощью аналоговой видеокамеры ПТУ, сопряженной с компьютером (микроскоп Axioplane). Для количественного описания структурного макропортрета дегидратированной капли плазмы крови использовали таблицу [4].
Статистическая обработка полученных результатов осуществлялась с применением пакета программ Microsoft Excel и Biostat. Использовался коэффициент корреляции Пирсона (r>0,4, уровень значимости p<0,05).
Результаты и их обсуждение. Изучение белкового спектра плазмы крови онкологических больных выявило увеличение уровня общего белка, статистически достоверное для групп пациентов с переходноклеточным и плоскоклеточным раком (табл.1).
The article highlights the experiment on 125 white non-linear rats, in which the content of hydroxyproline fractions in blood plasma
* ГОУ ВПО Нижегородская государственная медицинская академия Минздравсоцразвития РФ (г.Нижний Новгород), 60з005, Нижний
Новгород, пл. Минина, 10/1
