CC BY
14
Критик холатларда анестезиология, реанимация ва интенсив терапия масалалари
ры клеточного взаимодействия) - вещества белковой природы, продуцируются различными типами клеток организма и являются своеобразным языком общения клеток друг с другом. Действуя подобно гормонам, цитокины координируют дифференцировку клеток и поддерживают или восстанавливают нормальный го-меостаз. Они обеспечивают не только внутрипеченоч-ные межклеточные взаимодействия, но и связь печени с другими органами. Цитокины участвуют в регуляции обмена аминокислот, белков, углеводов, липидов и минеральных веществ. Работы по изучению роли ци-токинов в повреждении, поддержании активности воспалительного процесса и регенерации измененной печени немногочисленны. Каких-либо данных о роли цитокинов в условиях клинического применения метода трансплантации клеток, особенно эмбрионального происхождения, не существует. Кроме того, проводимое исследование актуально в связи с созданием рекомбинантных цитокинов и разработкой в будущем методов цитокиновой и антицитокиновой терапии в клинике у больных с острой печеночной недостаточности (ОПН).
Цель. Исследование уровня спонтанных про- и противовоспалительных цитокинов при экспериментальной модели ОПН.
Материал и методы. Эксперименты проведены на 75 белых беспородных крысах-самцах массой 250-300 г. Эксперименты проводились в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных целей (Страсбург, 1986), и с одобрения Национального этического комитета РУз (Ташкент, 2011) в экспериментальной лаборатории РНЦЭМП. Животных содержали в условиях вивария при свободном доступе к пище и воде. Перед проведением эксперимента крыс выдерживали в карантине 20 дней. Все болезненные манипуляции проводили под тиопенталовым наркозом, животных выводили из опыта методом декапитации. В процессе эксперимента состояние печени оценивали по макроскопическим признакам (выпадение волос, гиподинамия, желтушность кожных покровов, изменение массы, визуальный осмотр печени при оперативных
вмешательствах), биохимическим показателям сыворотки крови и данным световой микроскопии.
Как показали исследования, в сыворотке крови здоровых животных содержание: провоспалительных ИЛ-10 составляло 6,29±0,3 пг/мл, ИЛ-6 - 1,23±0,012 пг/мл, ФНОа - 0,69±0,03 пг/мл, противовоспалительного ИЛ-10 - 0,56±0,04 пг/мл. У животных с экспериментальной ОПН, индуцированной введением СС14, на третьи сутки уровень всех цитокинов повышался и значительно отличался от контроля (р<0,05). В дальнейшем, на 7 сутки эксперимента содержание провоспалительных ИЛ-1Р составляло 12,7±0,43 пг/мл, ИЛ-6-8,73±0,01пг/мл, ФНОа - 4,02±1,15 пг/мл, т.е. в 2, в 7 и
6 раз выше контроля. Концентрация противовоспалительного цитокина ИЛ-10 была намного ниже и равнялась 1,56±0,06 пг/мл, т.е. в 2,8 раза выше контроля. Концентрация как про-, так и противовоспалительного ИЛ-10 и на 28 сутки эксперимента оставалась выше контроля в 2-10 раз, что определяет наличие воспалительного процесса у животных с ОПН. Из полученных данных становится очевидным, что содержание ИЛ-1Ь на 14 сутки эксперимента возрастает вместе с ИЛ-6 и ИЛ-10 с последующим уменьшением на 21сут-ки, когда увеличивается ФНОа. Но на 28 сутки увеличение концентрации ИЛ-1Ь сопровождается снижением ИЛ-6 и ФНОа. Такие небольшие изменения происходят на фоне увеличения ИЛ-10 до 1,78±0,05пг/мл, т.е. в 3 раза выше контроля. Такое изменение раскрывает особенности их возрастания и изменения в процессе развития ОПН. Так, если на протяжении эксперимента концентрация ИЛ-1Ь увеличивается в 2 раза, а ИЛ-6 - в
7 раз, то ФНОа на 7сутки наблюдения - в 6,8 раза, а на 21 сутки в 12 раз, несколько понижаясь на 28 сутки (10,6 раза). При резком возрастании уровня провоспалительных цитокинов наблюдается повышение противовоспалительного ИЛ-10 только в три раза.
Таким образом, повышение активности изучаемых цитокинов у экспериментальных животных с ОПН отражает не только цитокиновый дисбаланс, но и нарушение иммунорегуляции. При этом в печени цитокины кроме гибели клеток, воспаления и локальных иммунных реакций регулируют и регенерацию гепатоцитов.
ЭФФЕКТИВНОСТЬ ТРАНСПЛАНТАЦИИ РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ФЕТАЛЬНЫХ ГЕПАТОЦИТОВ В ЛЕЧЕНИИ ОСТРОЙ ПЕЧЕНОЧНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ У КРЫС
Уразметова М.Д., Хаджибаев А.М., Мадаминов А.А, Ахмедова Р.К. Республиканский научный центр экстренной медицинской помощи
Смертность от хронической печеночной недостаточности по данным ВОЗ занимает пятое место среди других заболеваний, а от острой печеночной недостаточности (ОПН) достигает 70-90% (Вегпа1 W. et а1., 2010). Печеночная недостаточность может осложнять течение заболеваний не только гепато-панкреа-тодуоденальной зоны, но и других органов и систем организма. Описаны случаи молниеносной печеночной недостаточности при миллиарном туберкулезе, раке легкого, болезни Альцгеймера и другой патологии ^а!етап W. et а1., 2011). Лечение печеночной недостаточности с помощью трансплантации зрелых соматических и фетальных гепатоцитов является но-
вым этапом развития практической гепатологии (Хаджибаев А.М. и др., 2011; Touboul T. et al., 2011; Zhou P. et al., 2011). Трансплантация гепатоцитов направлена на восстановление утраченных функций печени пациента и активацию регенерации неповрежденной паренхимы печени. Такой подход объясняется тем, что даже в очень сильно поврежденной печени часть паренхиматозных клеток, окружающих зоны некроза, является жизнеспособной и при определённых условиях, может регенерировать (Teng Y. et al., 2010).
Цель. Изучение терапевтического эффекта различных видов фетальных гепатоцитов при лечении ОПН.
Материал и методы. Эксперименты проведены на
Shoshilinch tibbiyot axborotnomasi, 2013, № 3
153
Вопросы анестезиологии, реанимации и интенсивной терапии при критических состояниях
половозрелых беспородных крысах-самцах весом 170220 г, которых разделили на две группы. 1-ю группу которая служила контролем, составили 20 крыс с моделью ОПН. Во 2-ю группу - сравнения включены 20 животных, которых лечили с помощью фетальных гепатоцитов человека (ФГЧ) без дополнительного введения иммуносупрессоров. 3-ю группу - также сравнения - составили 20 животных, которых лечили с помощью фетальных гепатоцитов крыс (ФГК). Животным групп сравнения внутриселезеночно трансплантировали свежевыделенные фетальные гепатоциты на вторые сутки после индуцирования ОПН в дозе 15-20 млн клеток в объеме 0,15-0,20 мл в питательном растворе RPMI 1640 лапаротомическим доступом в нижний и средний полюс паренхимы селезёнки в 2-3 точки путем медленной и осторожной инъекции 1-мл туберкулиновым шприцем в течение 1,0-1,5 мин. Эксперименты над животными проводились в соответствии с правилами, принятыми Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных целей (Страсбург, 1986) и с одобрения Национального этического комитета РУз (Ташкент, 2011). Все болезненные манипуляции производили под тиопенталовым наркозом, животных выводили из опыта методом декапитации. В процессе эксперимента состояние печени оценивали на основании макроскопических признаков (выпадение волос, гиподинамия, желтушность кожных покровов, изменение массы, визуальный осмотр печени при оперативных вмешательствах), изменения биохимических показателей сыворотки крови и данных световой микроскопии.
После введения четыреххлористого углерода у крыс наблюдалось токсическое поражение печени с картиной ОПН. В крови животных происходили достоверные нарушения всех биохимических параметров, напрямую связанных с поражением ткани печени. Лабораторным признаком печеночно-клеточной недостаточности явилось нарастание концентрации билирубина.
Несмотря на различие в видовых характеристиках клеточного материала (ФГК, ФГЧ) в эксперименте нами установлена высокая эффективность их использования при лечении ОПН. Одной из главных причин этого является иммунологическая незрелость донорских фетальных клеток плодов человека ввиду неполноценности набора его антигенов. Благодаря этому иммунная система крыс-реципиентов, которым вводят изолированные фетальные гепатоциты, не в состоянии их распознать, а значит — и отторгнуть. Во-вторых, фе-
тальные клетки еще сами недостаточно зрелы, чтобы атаковать нового хозяина. В-третьих, пересаженные фетальные клетки мобилизуют и стимулируют собственные защитные силы организма, являясь, таким образом, мощным фактором, стимулирующим рост клеток. Это характеризуется выраженными антиокси-дантными и противовоспалительными свойствами. Несмотря на то, что имплантация фетальных клеток не является «генной терапией», вполне возможно, что содержащиеся в них биологически активные вещества способствуют экспрессии «молчащих» генов.
Анализ Каплана-Мейера в течение 504 ч наблюдения выявил значительное и раннее улучшение выживаемости, связанное с использованием ФГК. В контрольной группе из 20 крыс в течение 504 ч погибли 16 (80%), а в группе сравнения с ФГК - только 9 (45%), с ФГЧ - 10 (50%). Первый случай гибели в контрольной группе зафиксирован через 12 часов, в группах сравнения с ФГК и ФГЧ - через 48 ч. Таким образом, животные групп сравнения с ФГК и ФГЧ имели достоверно более высокую продолжительность жизни, чем животные без пересадки (Logrank test р = 0,0195 и 0,0236 соответственно). При этом показатель относительного риска составил соответственно 0,4287 (95% ДИ 0,19430,9457) и 0,4421 (95% ДИ 0,2312-0,9854).
Таким образом, развитие токсического гепатита, вызванного однократным введением четыреххлористого углерода, сопровождается жировой инфильтрацией паренхимы печени, которая характеризуется постепенным снижением интенсивности поражения печеночных долек от перипортальной зоны к центру. Внутриселезеночное введение ФГК и ФГЧ при CCI4 индуцированном ОПН способствует регенерации печени и создании условий для пролиферации гепатоцитов реципиента. Морфологически это выражается в полиплоидии печеночных клеток, увеличении размеров ядер гепатоцитов и их гипертрофии, а также восстановлении микротопографических взаимоотношений в ацинусе. Видовое различие клеточного материала не было достоверно значимым по анализу выживаемости Каплана-Мейера и морфологическим параметрам. Положительное воздействие ксенотрансплантации ФГЧ на поврежденную печень совпадает с эффектами регенерации печени крыс, что обосновывает целесообразность трансплантации клеток, содержащих выделенные фетальные изолированные гепатоциты, указывает на возможность для использования их в клинических условиях при ОПН.
ЛЕЧЕНИЕ ТУННЕЛЬНОГО СИНДРОМА ВЕРХНИХ КОНЕЧНОСТЕЙ
Усманов Б.С., Исмаилов Ж.Т., Махмудов Н.И. Ферганский филиал РНЦЭМП
Туннельный синдром характеризуется как клинический симптомокомплекс, обусловленный сдавлением сосудов и нервов в анатомических каналах или туннелях в результате повышения внутрифасциального футлярного давления (Яхно Н.Н., Штульман Д.Р., Мельни-чук П.В., 1995).
Сообщения о туннельном синдроме в периодической печати встречаются редко. Отдельные наблюде-
ния, встречающиеся в практике сосудистых хирургов и травматологов, распознаются в относительно поздние сроки, точная диагностика этой патологии представляется практически важной, поскольку вовремя начатое лечение позволит сохранить конечность.
В отделении сосудистой хирургии и микрохирургии ФФРНЦЭМП в 2000 -2013 гг. на лечении находились 46 больных с повышением внутрифасциального давле-
154
Вестник экстренной медицины, 2013, № 3
