Effect of "Olihovit" on the formation of T-and B-cell immunity in cows and their calves Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 612.017:632.2:591.11

1Лешовська Н.М., к.вет.н., н.с., хБрода H.A., к.б.н., с.н.с., хВ1щур O.I., д.вет.н., с.н.с., 1Мудрак Д.1., к.вет.н., м.н.с., 1Рацький M.I., к.вет.н., н.с., 1Смолян1нов К.Б., к.б.н., с.н.с., 2Голубев M.I., к.с.-г.н. © 1Институт бюлогИтваринНААНУ, м. Лъв1в 2Нацюнальнииутверситет 6iopecypcie i природокористування, м. Kuie

АКТИВШСТЬ Т- i В-КЛ1ТИННОГО 1МУН1ТЕТУ У KOPIB IIX ТЕЛЯТ ЗА Д11 ПРЕПАРАТУ "ОЛ1ГОВ1Т"

У cmammi наведено результаты експерименталъних дослгдженъ вгдносного eMicmy Т- i В-л1мфоцит1в та ix субпопуляцт у xpoei Kopie та народжених eid них телят за dii комплексного етамшно-мшералъного препарату "Oлiгoвim". Встановлено, що введения препарату коровам за мсяцъ та за 1-2 доби до передбачуванихрод1в призводитъ до збыъшення кшъкостг ТА-РУЛ у кровi за 1-2 доби до отелення та ТЕ-РУЛ, ЕАС-РУЛ, Th-популяцт лiмфoцumiв на восъму добу теля отелення. Констатовано стимулювалънии вплив ол^оету на тлътстъ T-лiмфoцumiв (загалъних, активних, теофшнрезистентних) i B-лiмфoцumiв та ix функцюналъну актившетъ, що в1дбувалосъ за рахунок перерозподыу рецепторного апарату гмунокомпетентних клтину сторону збтъшення ixnboi aeidnoemi.

Ключов{ слова: iмунолог1я, корови, телята, кров, Т- та В-л1мфоцити, eimaMim, мжроелементи.

Вступ. Вщомо, що останнш мюяць тшьносп у Kopie е одним з критичних ф1зюлопчних nepiofliß, який суттево впливае на стан ¿мунно! системи матер1 i плоду [1]. Порушення формування ¿мунно! вщповда в оргашзм1 тшьних Kopie призводить до отримання приплоду з ознаками вродженого ¿мунодефщиту. Для пщвищення адапцшно! здатносп й ¿мунобюлопчно! реактивност! оргашзму в останш роки з ycnixoM використовуються в1тамши, амшокислоти, мжроелементи, яю володшть ¿мунотропними властивостями [1-3]. Пщвищення потреби у в1тамшах та мшеральних речовинах у перюд ваг1тност1 пов'язано, як з ростом i розвитком плода, так i з особливостями функцюнування ¿мунно! системи оргашзму у даний ф1зюлопчний перюд [1-5].

Функциональною основою ¿мунно! системи е комплекс ¿мунокомпетентних кл1тин (л1мфоцит1в). У функциональному вщношенш л1мфоцити подшяються на регуляторш та ефекторш. Функци регуляторних кл1тин здшенюють, в основному, Т-л1мфоцити i макрофаги. Ефекторними можуть бути pi3Hi кл1тини: цитотоксичш Т-л1мфоцити, В-кл1тини, природш кшери [5]. Активащя л1мфоцит1в представляв собою складний бюх1м1чний

© Лешовська Н.М., Брода H.A., Вщур O.I., Мудрак Д.1., Рацький M.I., Смоляншов К.Б., Голубев M.I., 2013

218

процес, який пов'язаний з розшзнаванням антигену i вщбуваеться безпосередньо за участю наявних на мембранах л1мфоцит1в специф1чних антигенних рецептор1в. Розшзнавання антигену ¿мунокомпетентними кл1тинами е центральним моментом запуску та регуляци ¿мунно! вщповщг Цим пояснюеться актуальшсть подальшого вивчення окремих аспекпв функцюнування кл1тинно! ланки ¿мунно! вщповвд в оргашзм1 кор!в в останнш перюд ваг1тност1 та теля отелення, а також у народжених вщ них телят.

У зв'язку з поширенням ¿мунодефщит1в у господарствах Украши, застосування ¿мунокорегуючих препарат1в на сьогодшшнш день е необхщним. У зв'язку з цим, мета нашо! роботи полягала у з'ясуванш впливу комплексного в1тамшно-мшерального препарату "Ол1гов1т" на показники Т- i В-кл1тинно! ланок ¿муштету, а саме на кшькють Т- i В-л1мфоцит1в та ix функцюнальну актившсть у кор!в в останнш м1сяць тшьност1 та теля отелення, а також у народжених вщ них телят.

Матер1али i методи. Дослщ проведено у ДГДП "Оброшино" Пустомит1вського району Льв1всько! област1 на повновкових коровах та народжених вщ них телятах, яю були роздшеш за принципом аналопв на контрольну та дослщну групи по 5-7 тварин у кожнш. Рацюн кор!в був збалансований за основними поживними речовинами i складався i3 р1знотравного сша, силосу, кормових коренеплод1в та концентрованих корм1в. Коровам дослщно! групи за 30 д1б та за 1-2 доби до передбачуваних род1в внутршньом'язово вводили в1тамшно-мшеральний комплекс "Ол1гов1т" (KELA, Бельгш) дозою 0,5 мл на 10 кг маси тша тварини, коровам контрольно! групи — ф1зрозчин дозою 10 мл на тварину. До складу ол1гов1ту входять в1тамши A, D3, PP, E, Бь B2, B4, B5, B6, B8, B12, мкроелементи Co, Mg, Cu, Zn, Mn, а також незамшна амшокислота метюнш.

Кров для дослщжень брали з яремно! вени у кор!в за мюяць, за 1-2 доби до передбачуваних род1в та на восьму добу теля отелення, а у ix телят - через 3 год. теля згодовування молозива та у 3-, 8- та 30-добовому вщг

Фенотипування л1мфоцит1в проводили за допомогою тесту розеткоутворення з еритроцитами барана у якост1 маркер ¿в (Jondal M. et al., 1972). Актившсть розеткоутворення визначали за щшьшстю рецептор1в: 0 — неактивш, 3-5 — рецептори з малою щшьшстю, 6-10 — рецептори з середньою щшьшстю, бшьше 10 — рецептори з високою щшьшстю.

Одержан! цифров1 даш опрацьовували статистично з використанням програмного пакету Microsoft Excel.

Результата дослщжень. Результата дослщжень вщносно! кшькоси Т- i В-л1мфоцит1в у кров! кор!в наведен! у таблиц! 1. Анал1з результапв дослщжень показав, що введения коровам дослщно! групи препарату "Ол1гов1т" призводить до збшьшення вщносно! кшькоси ТА-РУЛ у кров1 за 1-2 доби до отелення (р<0,01). Щ змши у кров! кор1в дослщно! групи вщбувались за рахунок зменшення кшькост1 нульових кл1тин (р<0,01). При цьому виявлено тенденцш до зростання ТА-РУЛ з низькою i середньою стушнню ашдносп.

219

Таблиця 1

Вщносна кшьккть Т- 1 В-.^мфоцнтчв та Тх субпопуляцш

у кров1 ко|Мв, % (М±ш; п=3)

Л1мфоцити Групи Пер1од досл1джень

30 д1б до отелення 1-2 доби до отелення 8 д1б п1сля отелення

ТА-РУЛ, 0 К 66,67+1,76 71,67+1,20 67,00+1,00

Д 64,67+2,73 62,67+0,67** 63,33+1,45

3-5 к 19,67+1,45 21,67+3,48 21,66+0,88

Д 23,00+2,08 24,33+0,33 20,67+2,60

6-10 к 12,33+2,73 8,33+0,33 11,33+1,76

Д 11,67+0,33 12,00+0,58 15,00+1,73

м к 1,33+0,33 0,67+0,33 -

Д 0,67+0,03 1,00+0,33 1,00+0,33

% к 33,33+1,76 28,33+1,20 33,00+1,00

Д 35,33+2,73 37,33+0,67** 36,67+1,45

ТЕ-РУЛ, 0 к 31,67+0,93 33,00+2,08 35,67+1,85

Д 29,67+1,20 29,00+4,36 33,00+2,00

3-5 к 37,00+2,08 41,67+1,33 37,00+2,52

Д 36,33+0,88 39,67+3,48 37,33+2,03

6-10 к 29,33+0,33 23,67+0,33 26,33+3,93

Д 32,33+2,60 30,33+2,96 28,33+2,33

м к 1,33+0,33 1,67+0,33 1,00+0,33

Д 1,67+0,33 1,00+0,33 1,33+0,33

% к 67,67+3,28 67,00+2,08 60,33+0,85

Д 70,33+1,20 71,00+4,36 67,00+2,00*

ТИ, 0 к 45,33+2,18 45,67+1,45 48,67+2,60

Д 46,67+2,96 43,00+3,21 45,00+2,00

3-5 к 28,33+1,85 31,00+1,53 27,67+3,18

Д 32,00+2,08 33,67+0,33 29,67+1,45

6-10 к 25,00+1,15 21,00+1,53 21,33+1,45

Д 19,33+0,88 26,33+1,76 24,00+1,73

м к 1,33+0,33 2,33+0,88 2,33+0,67

Д 2,00+0,58 1,33+0,33 1,33+0,33

% к 54,67+2,18 54,33+1,45 51,33+2,60

Д 52,33+2,96 57,00+3,21 55,00+2,00*

Т8, % к 13,00+1,53 12,67+2,03 13,00+1,00

Д 13,67+2,73 14,33+1,20 12,00+2,00

ЕАС-РУЛ, 0 к 74,33+1,20 73,33+2,73 72,00+1,73

Д 73,67+1,76 72,00+1,15 68,67+1,45

3-5 к 15,67+0,33 21,33+1,76 18,33+1,76

Д 15,33+0,33 17,00+1,15 17,00+0,58

6-10 к 9,00+0,58 8,67+1,76 8,67+1,45

Д 11,00+2,08 10,33+0,88 10,66+1,20

м к 1,00+0,33 0,67+0,33 -

Д - 1,00+0,33 1,00+0,33

% к 25,67+1,20 26,67+2,73 28,00+0,73

д 26,33+1,76 28,00+1,15 33,30+1,45*

Примтка. У цш та наступит таблиц! в1ропдш р1знищ пор1вняно до контролю: * —

р<0,05; ** — р<0,01; *** — р<0,001.

У кров1 кор1в дослщно! групи на 8-у добу теля отелення кшьюсть загальних I теофшш-резистентних Т-л1мфоцит1в була бшьша (р<0,05), н1ж у контрольн1й. При дослщженш рецепторного апарату ТЕ-РУЛ I ТИ-кл1тин у

220

кров1 кор1в виявлено тенденцш до зростання кшькост1 Т-л1мфоцит1в з низькою I середньою стушнню авщносп I зниження кшькост1 недиференцшовано! популяци ¿мунокомпетентних кл1тин. Ц1 даш свщчать про стимулювальний вплив в1тамшно-мшерального комплексу на кшьккть I функцюнальну актившсть Т-л1мфоцит1в кров1 кор1в.

Дослщження активное^ В-л1мфоцит1в характеризуе р1вень гуморально! ланки ¿муштету, оскшьки вони синтезують специф1чш антитша (шуноглобулши), а також впливають на актившсть деяких популяцш Т-л1мфоцит1в, беручи участь у реакщях кл1тинного ¿муштету. Популящя В-л1мфоцш!в теж неоднорщна I включае субпопуляцп ефекторних та регуляторних кл1тин. На свош поверхш В-л1мфоцити несуть рецептори до ¿муноглобултв р1зних клаав.

Як бачимо з одержаних результат, у кров1 кор1в дослщно! групи, пор1вняно з контрольною, на 8 добу теля отелення зростае вщносна кшьккть В-л1мфоцит1в (р<0,05). Змши рецепторного апарату вказаного пулу кл1тин були под1бними, що при дослщженш Т-л1мфоцит1в. Цд даш свщчать про стимулювальний вплив ол1гов1ту на Т- I В-кл1тинну ланки ¿мунно! вщповда у кров1 кор1в в останнш перюд тшьностг

Раннш перюд росту I розвитку телят е критичним I характеризуемся особливими змшами обмшу речовин в оргашзм^ зумовленими !х адаптащею до умов навколишнього середовища, становлениям захисних систем до постшного антигенного впливу. У цей перюд захисними факторами оргашзму е материнськ1 антитша — специф1чш I неспециф1чш ¿муноглобулши, а також ¿мунокомпетентш кл1тини, що поступають з молозивом I сприяють формуванню пасивного ¿муштету [5].

Як показали результата проведених дослщжень введения коровам дослщно! групи в останнш мкяць тшьност1 дослщжуваного препарату спричиняло збшьшення кшькост1 Т- I В-л1мфоцш1в у кров1 телят дослщно! групи пор1вняно до контрольно! (табл.2.). Зокрема, вщносна кшьккть Т-л1мфоцит1в (загальних, активних, теофшн-резистентних) I В-л1мфоцит1в у кров1 телят дослщно! групи була бшьша, шж у контрольнш у вс1 перюди дослщжень (р<0,05—0,01). Цд змши вщбувались в основному за рахунок перерозподшу авщносп — зростання вщносно! кшькост1 Т- I В-л1мфоцит1в з низькою I середньою щщьшстю рецептор1в та зменшення кщькост1 нульових кл1тин. Процеси активаци Т- I В-л1мфоцит1в тюно пов'язаш м1ж собою, оскшьки, з одного боку, В-л1мфоцити виконують функщю презентаци антигену, а з другого — Т-л1мфоцити, а саме Т-хелпери, необхщш для нормально! активаци В-л1мфоцит1в.

Протягом постнатального розвитку в оргашзм1 телят проходять процеси формування фактор1в неспециф1чного та специф1чного захисту, вщбуваеться становления загально! системи ¿муштету. Особливо характерним при цьому е зростання кшькост1 Т-л!мфоцит1в р1зних субпопуляцш, здатних утворювати "розетки" з гетерогенними еритроцитами. Зростання кшькост1 Т-хелпер1в вщображае посилення утворення власних захисних антитщ. Активащя Т-

221

хелпер1в призводить до продукцп цитокмв. 1мунний супресорний мехашзм у перюд ваптност1 розвиваеться за рахунок шшдаци ¿мунно! вщповвд ТИ, що скеровують ¿мунну реакцш гуморальним шляхом I сприяють синтезу ¿муносупресивного штерлейюну 1Л-10, який, в свою чергу, шпбуе прозапальш цитокши та штерферон [5].

Таблиця 2

Вщносна кшьккть Т- 1 В-.^мфоцнтчв та Тх субпопуляцш

у кров1 телят, % (М±ш; п=3)

Показники Групи Вш телят

3 год. 3 дт 8 дшв 30 дшв

1 2 3 4 5 6

ТА-РУЛ, 0 К 85,33+1,76 84,66+1,76 79,66+1,45 79,33+1,76

Д 74,66+1,20** 74,00+1,15** 74,33+0,88* 72,66+1,20*

3-5 к 9,66+0,88 9,66+1,33 15,33+0,88 11,33+1,33

Д 16,00+1,53** 19,00+1,00** 14,67+0,66 16,33+1,45

6-10 к 5,00+1,00 4,33+0,88 6,33+1,20 9,33+0,66

Д 6,00+1,15 6,66+0,88 11,00+0,58** 8,66+0,66

м к - 1,33+0,33 - -

Д - 1,33+0,33 - 2,33+0,66

% к 14,66+1,76 15,33+1,76 20,33+1,45 2066+1,76

Д 25,33+1,20** 26,00+1,15** 25,66+0,88** 27,33+1,20*

ТЕ-РУЛ, 0 к 77,66+1,45 80,33+2,33 68,33+2,18 68,00+1,53

Д 67,33+3,28* 62,66+0,88** 59,66+2,40 61,00+1,53*

3-5 к 14,66+0,66 17,66+0,33 21,33+2,40 18,33+0,88

Д 20,66+2,60 21,00+0,58** 28,00+1,53 22,66+0,33**

6-10 к 8,66+0,88 12,00+2,64 10,33+0,88 12,33+0,88

Д 12,00+1,15 16,33+1,20 12,33+0,88 1500+1,53

м к - - - 1,33+033

Д - - - 1,33+0,33

% к 23,33+1,45 29,66+2,33 31,66+2,18 32,00+1,53

Д 32,66+3,28 37,33+0,88* 40,33+2,40 39,00+1,53*

ТИ, 0 к 84,00+0,58 84,00+1,53 80,66+0,88 81,00+1,53*

Д 80,33+1,20 77,00+1,15** 73,33+1,20** 74,33+1,76*

3-5 к 10,33+0,33 9,66+0,66 12,00+,58 8,66+0,66

Д 14,33+0,66** 14,33 +0,66* 16,66+1,85 12,33+1,33

6-10 к 5,66+0,88 8,33+1,20 7,33+0,88 10,33+0,88

Д 5,33+0,88 7,33+0,33 10,00+1,54 10,33+0,33

м к - - - -

Д - 1,33+0,33 - 2,00+1,58

% к 16,00+0,58 18,00+0,58 19,33+0,88 19,00+1,53

Д 19,66+1,20 23,00+1,15** 26,66+1,20** 25,66+1,76*

ТЭ, % к 7,33+0,88 10,00+2,64 12,33+1,33 13,00+1,53

Д 13,00+2,08 14,33+1,85 14,00+1,15 13,33+0,33

ЕАС-РУЛ, 0 к 86,33+1,20 88,66+1,45 82,00+1,15 81,00+1,53

Д 82,33+0,88 81,66+0,33** 78,33+1,20 77,66+1,76

3-5 к 8,33+0,88 6,66+0,33 12,33+0,33 9,00+1,53

Д 11,33+1,45 10,00+0,58* 11,66+1,20 12,33+1,20

6-10 к 5,33+0,66 4,66+1,20 5,66+0,88 8,33+0,66

Д 6,33+0,66 6,66+0,33 10,00+1,73 10,00+0,58

м к - - - 1,66+0,66

Д - 1,66+0,33 - -

% к 13,66+1,20 11,33+1,45 18,00+1,15 19,00+1,53

Д 17,66+0,88 18,33+0,33** 21,66+1,20 22,33+1,76

222

Кшькюний склад Т- i В-л1мфоцит1в, як провщних ¿мунокомпетентних кл1тин кров!, вщображае р1вень захисних сил оргашзму тварин та стан специф1чного ¿муштету. Як бачимо з одержаних результат введения коровам в останнш мкяць тшьност! ол1гов1ту иризводить до зростання як кшькост! так i функцюнально! активност! ¿мунокомпетентних кл1тин у кров! кор!в, а також народжених вщ них телят, що свщчить про комплексний стимулювальний вплив складнимв препарату на актившсть Т- i В-кл1тинно! ланок ¿муштету. Процеси активаци Т- i В-л1мфоцит1в т1сно пов'язаш м1ж собою, оскшьки, з одного боку, В-л1мфоцити можуть виконувати роль антигенпрезентуючих кл1тин, а з другого — Т-л1мфоцити-хелпери необхщш для нормально! активаци В-л!мфоцит!в.

Висновок. Введения коровам в останнш мюяць т!льност! препарату "Ол!гов!т" призводить до зб!льшення кшькост! ТА-РУЛ у кров! за 1-2 доби до отелення та ТЕ-РУЛ, ЕАС-РУЛ, Th-популяцш л!мфоцит!в на восьму добу п!сля отелення. У телят, одержаних вщ цих кор!в. встановлено б!льшу к!льк!сть Т-л!мфоцит!в (загальних, активних, теоф!л!н-резистентних) i В-л!мфоцит!в за рахунок перерозпод!лу ав!дност! рецепторного апарату ¿мунокомпетентних кл!тин, що св!дчить про активацш кл!тинних i гуморальних мехашзм!в ¿мунно! в!дпов!д! при формуванн! у них ¿муштету у ранн!й перюд росту.

Л1тература

1. Косенко М. В. 1мунолопчш препарати у ветеринарн!й практищ / М. В. Косенко, Я. М. Любенко // Вет. мед. Укр. — 2001. — №2. — С. 22-24.

2. Клщенко Г. Т. Мшеральне живлення тварин / Г. Т. Клщенко, М. Ф. Кулик, М. В. Косенко // К. — 2001. — 576 с.

3. Лешовська Н. М. Роль селену i в!там!шв A, D3, Е в ¿муннш функц!! людини i тварини / Н. М. Лешовська, О. I. Вщур // Науково-техн!чний бюлетень 1нституту б!олог!! тварин. — 2004. — № 1-2. — Вип. 5. — С. 148153.

4. Куртяк Б. М. Використання жиророзчинних в!тамш!в у ветеринарн!й медицин! i тваринництв! / Б. М. Куртяк, В. Г. Янович. — Л.: Тр!ада плюс, 2004.— 376 с.

5. Маслянко Р. П. Основи ¿мунобюлогп / Р.П. Маслянко. — Л.: Вертикаль, 1999. — 472 с.

Summary

N.M. Leshovska1, N.A. Broda1, O.I. Vishchur1, D.I. Mudrak1, M.I. Ratskiy1, K.B. Smolyaninov1, M.I. Holubev2

1 Institute of Animal Biology UAAS, Lviv 2National university of life and environmental sciences of Ukraine, Kiev EFFECT OF "OLIHOVIT" ON THE FORMATION OF T-AND B-CELL IMMUNITY IN COWS AND THEIR CALVES

The results of experimental studies of the relative content of T- and B-lymphocytes and their subpopulations in the blood of cows and calves born by them for the action of a complex of vitamins and minerals "Olihovit" are presented in the article. It was established that the injection to cows a month before and 1-2 days

223

before birth leads to increase of the amount of T- and (total, active, teofilline-rezystant) and B- lymphocytes and enhances of their functional activity through redistribution of the receptor apparatus of immune cells. The stimulating effect of oligovit on the number and functional activity of T- and B-lymphocytes of new-born calves was shown.

Key words: immunology, cows, calves, blood, T-and B-lymphocytes, vitamins, minerals.

Рецензент - д.вет.н., професор Гуфрш Д.Ф.

224