CC BY
31
Актуальт проблеми сучасно! медицини
Установлено, что спонтанная артериальная гипертензия у крыс является адекватной экспериментальной моделью для исследования влияния антигипертензивных препаратов на уровень артериального давления у ненаркотизованых животных при дли -тельном использовании препаратов. Исследованные препараты (бипролол. корвазан, липрил) сопоставимо понижают артериальное давление при введении крысам на протяжении 90 дней.
Summary
SPONTANEOUS ARTERIAL HYPERTENSION - AN EXPERIMENTAL MODEL FOR INVESTIGATIONS OF ANTIHYPERTENSIVE DRUGS IN CHRONIC EXPERIMENT
Chekman I.S., Gorchakova N.O., Nebesna T.Yu., Zagorodniy M.I., Dovgan R.S. Key words: spontaneous arterial hypertension, biprolol, corvasan, lipril.
It has been shown that spontaneous arterial hypertension in rats is an adequate experimental model for investigation of influence of antihypertensive drugs on the level of rats arterial pressure without narcosis in chronic experiment. Studied drugs (biprolol, corvasan, lipril) comparably decrease arterial pressure in rats after 90 days of their administration.
УДК 547.756:615.214.31
Д0КЛ1Н1ЧНЕ ВИВЧЕННЯ Н00ТР0ПН01 АКТИВН0СТ1 ТА СУПУТН1Х ПСИХОТРОПНИХ ВЛАСТИВОСТЕЙ П0Х1ДНИХ 2-0КС01НД0Л1НУ
Шатшов О.В., Штриголь С.Ю., Колгсник С.В., Болотов В.В.
Нацюнальний фармацевтичний уыверситет, м. XapKiB
Фармаколог{чний скринтг 18 noxidwux 2-оксотдолту продемонстрував, ix ноотропну дю за тестом скonoламiнoвoi амнезп. Найбшъший антиамнестичний ефект чинятъ чотири сполуки з лабораторними шифрами F, N, D, Q. Сполукалдер F виявляе антиамнестичну дЮ в дгапазот доз 0,6-24 мг/кг, покращуе вЫ фази nамятi, особливо увiд i первинну обробку тформаци, консо-лiдацiю памятного слiду, дещо менше - репродукщю. Дана сполука значно перевершуе траце-там та е бшъш активною за глщин, у-амтомасляну кислоту, фетбут. Сполука F чинитъ та-кож анксюлтичну дю на рiвнi дiазеnаму за тестом тднесеного xрестonoдiбнoгo лабiринту, тобто вiявляe транквшоноотропт властивoстi. АнкЫолтична дiя сполуки F, на вiдмiну вiд дi-азепаму, е анк&оселективною, оскшъки не noгiршуeтъся пам'ятъ, дoслiдницъка поведтка та ко-ординащя руxiв.
Ключов1 слова: noxiflHi 2-оксо1ндол1ну, скополамЫова амнез1я,
Вступ
Стани, що супроводжуються порушенням ког-штивних функцш (уваги, пам'ят1, мовлення, зда-тносп до анал1зу ситуацп та прийняття р1шення, ор1ентацп у простор!, праксису), поширюються у сучасному свт [7,9]. Вони суттево знижують як1сть життя та зб1льшують витрати на л1куван-ня. Корекц1я таких порушень е складним завдан-ням. Тому створення нових ноотропних препарате е одним ¡з прюритетних напрямк1в сучасноТ медицини та фармаци. У цьому аспект! можна вважати перспективними пох1дн1 2-оксо1ндол1ну. Окрем1 сполуки даного ряду виявляють антиг1по-ксичы, антиоксидантн1, антидепресивн1, стресп-ротективн1, мнемотропш, церебропротекторн1 властивост1 [1, 2, 4-6].
Мета роботи - провести скриншг зазначених сполук р1зно1 будови на ноотропну активнють, виявити л1дера, з'ясувати дозозалежн1сть його дй', вплив на фази пам'ят1 та супутн1 психотропш властивост1.
Матер1али та методи
Дослщи виконано на 205 безпородних бтих мишах-самцях масою 15-20 г вщповщно до «За-гальних етичних принцитв експеримент1в на
ноотропна д1я, анксюл1тична д1я
тваринах» (2001). Мишей утримували у стандар-тних умовах в1варш. Пох1дн1 2-оксо1ндол1ну вводили внутр1шньошлунково протягом 3 д1б у ви-гляд1 суспенз1| у персиков1й оли у доз1 12 мг/кг, яка забезпечуе вищезазначен1 види активност1.
Ноотропну (мнемотропну) д1ю досл1джуваних речовин вивчали за тестом умовного рефлексу пасивного уникнення (УРПУ) на модел1 антерог-радноТ амнезй', що викликана скополамшом (1,5 мг/кг) за 30 хв до вироблення УРПУ [3]. Дана модель амнезп зумовлена порушенням холшер-г1чних механ1зм1в пам'ят1. Тварин розмщували на осв1тлен1й платформ! приладу та рееструва-ли латентний пер1од входу до темнот камери, де IX пщдавали електробольовому подразненню через електродну пщлогу. Збереження УРПУ перев1ряли через 24 год за латентним пер1одом входу до темноТ камери. Тварин, як1 не вщвщу-вали протягом 180 с, вважали такими, що до-сягли критер1ю навченост1. Скриншг ноотропноТ' активност1 виконували за впливом на першу фазу формування пам'ятного сл1ду - ув1д та первинну обробку ¡нформацй, вводячи досл1джуван1 сполуки перед процедурою навчання. Виявляли сполуку-л1дера, яку п1ддавали поглибленому до-сл1дженню (залежн1сть мнемотропного ефекту
* Публжуеться eiänoeiäHO до планово!' НДР НФаУ „XiMi4Huü синтез i анализ бюлоячно активних речовин, створення лжар-ських засоб/в синтетичного походження" (номер держреестрацп 0103U000475)
вщ дози, вплив на другу й третю фази пам'ятО. Останне завдання розв'язували, змшюючи час введения дослщжуваних сполук вщносно проце-дури навчання: вщразу пюля не!' (вплив на утри-мання ¡нформаци, тобто консолщацш пам'ятного слщу) та перед вщтворенням УРПУ через 24 год (вплив на репродукцш засвоеноТ' ¡нформаци).
Антиамнестичну активнють сполук оцшювали за модифкованою формулою Butler [5]: АА = [(ЛПд-ЛПск) / ( ЛПк-ЛПск)] х 100%, де АА - антиамнестична активнють, ЛПск i ЛПд - середнш латентний nepiofl тварин, яким уводили в1дпов1дно ттьки скополамш i скопола-MiH на тл1 дослщжуваноТ сполуки, ЛПк - латентний nepiofl ¡нтактного контролю.
Як препарати пор1вняння на модел1 УРПУ ви-користано трацетам («Дарниця») у дозах 200 мг/кг та 400 мг/кг [6,8], а також субстанци глщину (3,5 мг/кг), у-амшомасляноТ' кислоти (4,3 мг/кг) i фешбуту (6 мг/кг). Останж три субстанци обрано на п1дстав1 того, що деяк1 дослщжуваш noxiflHi 2-оксошдолшу мютять ixHi залишки у СВ01Й структур!; наведен! дози е ешмолярними.
Спектр супутньоТ нейро- та психотропно'1 активное^ субстанци-лщера оцшювали за стандарт-ними тестами: вщкритого поля (вплив на локо-моторну та дослщницьку активнють, вегетатив-ний cynpoßifl емоцшних реакцш); стрижня, що обертаеться 3i швидкютю 10 об/хв (вплив на м'язовий тонус i координацш pyxiB, препарат пор1вняння д1азепам - «Реланиум» виробництва «Polfa», Польща, 10 мг/кг), пщнесеного хресто-под1бного лаб1ринту (анксюл1тична д1я, препарат пор1вняння д1азепам, 10 мг/кг), та за ¡мобт1за-цшним тестом поведшкового вщчаю - пщв1шу-вання мишей за хв1ст (вплив на депресивнють, препарат пор1вняння ¡мтрамш - «Мелтрамш», «Egis», Угорщина, 25 мг/кг) [3,10].
Результати обробляли статистично за критерн ями t Ст'юдента та кутовим перетворенням Oi-шера.
Результати та üx обговорення У попередньому дослщ1 на ¡нтактних мишах встановлено, що у них добре формуеться УРПУ: латентний nepiofl входу до темно!' камери 3pic ¡з 17,2±5,0 с до 148±21,1 с (p<0,001), тобто вони пам'ятали про небезпеку темнот камери; крите-рш навченосп досягли 5 тварин ¡з 7 (71,4%). Контроль формування скополамшовоТ амнези CBi-дчив про и гарну вщтворюванють - латентний nepiofl входу не змшився (вихщний 7,3±2,7 с, через 24 год 7,0±0,7 с), жодна тварина не досягла критерш навченостк
Фармаколопчний скриншг 18 похщних 2-оксошдолшу показав, що ва вони виявляють но-отропну дш в доз1 12 мг/кг. Найбтьшу антиамнестичну активнють (>100%, тобто вище за активнють трацетаму в доз1 400 мг/кг та ¡нших субстанцш пор1вняння в ешмолярних дозах) чинять 4 з них: Р > N > й > О. Вони мютять залишки амшокислот та Тх естер1в (табл.1). Лще-ром е глщинвмюна сполука з лабораторним шифром Р. У цшому найвищу ноотропну дш виявляють саме сполуки, що мютять амшокислотш залишки.
Таблиця 1.
Пор1вняльний вплив пох1дних 2-оксошдолму у доз112 мг/кг на пам'ять в умовах модел/' антероградно)'скополамшовоТ
амнези у мишей
Сполуки, Антиамнес- Сполуки, Антиам-
що мютять залишок амЫокислоти тична активнють, % що не мютять зали- HIKiB нестична активнють, %
ЭМ1НОКИС-
лот
E 96 P 54
S 87 A 74
F 120 B 76
С 20 O 47
D 104 K 53
Н 94 L 69
U 14 M 76
Q 100 J 71
N 111 G 66
Препарати
ПОР1ВНЯННЯ
ГПрацетам 200 мг/кг 59 99
400 мг/кг
ГлЩин 3,5 мг/кг 84
Y-
ам1номасляна 22
кислота
4,3 мг/кг
Фежбут 6 мг/кг 94
Для виявлення дозозалежност1 ноотропноТ дм сполуки-лщера F дослщжено дози 0,6 мг/кг, 12 мг/кг i 24 мг/кг (табл.2). Розрахунок антиамнес-тично! активност1 евщчить, що вона становить 110%, 120% та 121% в1дпов1дно, тобто майже не змшюеться у широкому д1апазонк Висока активнють глщинвмюноТ сполуки у доз1 0,6 мг/кг до-зволяе зробити припущення про можливу пеп-тидерпчну ланку мехаызму ноотропноТ дм, адже саме пептидерпчш мехаызми чутлив1 до малих ктькостей регуляторних речовин.
Актуальн проблеми сучасно! медицини
Таблиця 2.
Дозозалежшсть антиамнестичноТ дП'сполуки Р та П вплив на фази пам'ят/' пор1вняно /з п1рацетамом на модел/' скополамшо-
воГамнезп
Показники Контроль амнезп (п=7) Увщ та первинна обробка ¡нформаци Консолщацт Репродукц1я
ГПрацетам Сполука Р Шраце-там Сполука Р
ГПрацетам Сполука Р
200 мг/кг (п=6) 400 мг/кг (п=6) 0,6 мг/кг (п=7) 12 мг/кг (п=7) 24 мг/кг (п=6) 400 мг/кг (п=6) 12 мг/кг (п=6) 400 мг/кг (п=6) 12 мг/кг (п=7)
Латентний перь од входу до темно!' камери, с: - вихщний - через 24 годи-ни 7,3±2,7 7,0±0,7 17,8±5,5 89,0± 30,0* 9,6±3,2 145±31,0* 24,4±4,9 159±22,4 21,3±5,0 172±8,9* # 33,0±7,4 174±4,6* # 10,2±3,7 98,0±27,5* 11,8±0,8 172±8,9*л 17,1±5,2 127±33,1 28,1±6,2 134±28,0
Ктькють мишей, що досягли кри-тер1ю навченост1 через 24 години 0 1 4 6 6 4 2 5 2 3
0% 16,7% 66,7%*# 85,7%*## 85,7% 66,7% 33,3% 83,3%л 33,3% 42,9%
Примака. Статистично значущ1 вщмЫностк * - р<0,01 поршняно ¡з групою контролю, # - р<0,05 ¡з групою трацетаму (200 мг/кг), ## - р<0,01 ¡з групою пфацетаму (200 мг/кг), л - р<0,05 ¡з групою трацетаму (400 мг/кг). У числщнику - абсолютна ктькють мишей, що досягли критер1ю навченост1, у знаменнику - %.
Для дослщження впливу сполуки Р на фази пам'ял використано дозу 12 мг/кг (референс-препарат трацетам у найбтьш ефективнш доз1 400 мг/кг, тобто у 33 рази вищш за дозу сполуки Р). Похщне 2-оксошдолшу чинило найбтьший вплив на дв1 перш1 фази пам'я"п - увщ \ первинну обробку ¡нформацп та консолщацш пам'ятного слщу (табл.2): ктькють тварин, що досягли кри-терш навченосп, склала 85,7% та 83,3% вщпо-вщно. При дослщжеш вщтворення ¡нформаци цей показник становив 42,6%. За впливом на увщ та первинну обробку ¡нформацп, а також на и репродукцю сполука Р не поступалася п1раце-таму, а за впливом на консолщацш пам'ят1 в1ро-гщно перевершувала його (р<0,05).
У пщнесеному хрестопод1бному лаб1ринт1 сполука Р (12 мг/кг) проявила анксюл1тичний ефект (табл.3). Значно збтьшувався латентний перюд входу до темного вщаку та загальний час пере-бування у осв1тлених вщаках (р<0,01), зменшу-валася тривалють перебування у темних вща-ках (р<0,01), на 73% зменшувалася ктькють фе-кальних болюав та уринацш. Аналопчний вплив у даному тесп чинив бензод1азепшовий транквн л1затор д1азепам. На вщмшу вщ д1азепаму, д1я сполуки Р е анксюселективною, адже вона не супроводжувалась мюрелаксац1ею та порушен-ням координаци рух1в у тесп стрижня, що обер-таеться. Навпаки, ц1 показники дещо покращу-вались (табл.4).
Таблиця 4.
Пор1вняльний вплив сполуки Р (12 мг/кг) та д^азепаму (10 мг/кг) на тонус скелетноТ мускулатури та координащю рух!в за
тестом стрижня, що обертаеться (швидк/'сть 10 об/хв)
Час утримання Сполука Р Д1азепам (10 мг/кг)
на стрижн! Вихщний контроль Дослщ Вих1дний контроль Досл1д
(п=7) (п=7) (п=7) (п=7)
До 30 с 3/43% 0 # 1/14% 5/71 %*
До 1 хв 5/71% 0*# 2/28% 5/71%
До 5 хв 5/71% 2/28% # 3/43% 7/100%*
До 10 хв 5/71% 2/28% # 4/57% 7/100%*
Примака. Статистично значущ1 вщмЫностИ * - р<0,01 поршняно азепаму.
У тесп пщв1шування мишей за хвют сумарний час ¡ммобт1заци тварин пщ впливом сполуки Р (12 мг/кг) суттево не змшювався, тобто вона не редукувала поведшку вщчаю. Мелтрамш змен-шував час ¡ммобт1заци до 63% вщ р1вня ¡нтакт-ного контролю (р<0,05), що пщтверджуе придат-нють даного тесту до виявлення антидепресив-но1 активносл. Отже, антидепресивних власти-востей сполука Р за тестом поведшкового вщ-чаю в мишей не виявляе.
У тесп „Вщкрите поле" сполука Р (12 мг/кг) знижувала горизонтальний компонент локомо-торноТ' активносл тварин (ктькють перетнутих квадрат1в зменшилась у 1,5 рази, р<0,05), але не порушувала п вертикальний компонент (ктькють
¡з групою вихщного контролю, # - р<0,05 пороняно ¡3 групою дь
стшок) та дослщницьку активнють (ктькють об-стежених отвор1в). Показники емоцшносп та вегетативного супроводу (ктькють акт1в грумшгу, фекальних болюав, уринацш) практично не змн нювались.
Таким чином, фармаколопчний скриншг ноот-ропноТ' активносл похщних 2-оксошдолшу свщ-чить, що ва дослщжуваш речовини чинять пози-тивний вплив на пам'ять. Д1апазон вщомих мне-мотропних доз сполуки-лщера (лабораторний шифр Р) становить 0,6-24 мг/кг, вона добре впливае на ва три фази пам'ятк За сукупнютю встановлених фармакололчних властивостей сполуку Р можна вважати анксюселективним транквтоноотропом, що е цшним \ перспектив-
ним поеднанням вид1в активность Можлив1 ме-хаызми ноотропноТ ди пов'язаы з1 стимулюваль-ним впливом на холшерпчш процеси в головному мозку, адже скополамш моделюе саме холн нерпчний дефщит. Неможна виключити також вплив на пептидерпчш рецептори, на користь чого свщчить ноотропна активнють сполуки на-в1ть у дуже низький доз1 0,6 мг/кг \ наявнють амн нокислотного залишку в и структур!.
Висновки
1. 18 похщних 2-оксошдолшу чинять антиамнестичну дш на модел1 скополамшовоТ амнези за тестом УРПУ. Активнють 4 сполук, що мютять залишки амшокислот або IX естер1в, е найвищою. Лщером е сполука з лабораторним шифром Р, мнемотропний ефект яко1 виявляеться у д1апазоы доз 0,6-24 г/кг \ стосуеться вах трьох фаз пам'ятк За ноотропною активнютю сполука Р перевершуе трацетам, феыбут, глщин, у-амшомасляну кислоту.
2. Сполука Р чинить анксюл1тичну дш на р1в-ш д1азепаму за тестом пщнесеного хрес-топод1бного лаб1ринту. Даний ефект е анк-сюселективним, осктьки не попршуеться пам'ять, дослщницька поведшка та коор-динац1я рух1в. За сукупнютю психотропних властивостей сполуку Р можна вважати транквтоноотропом.
10.
Л1тература
Луценко Р.В. Пошук бюлопчно активних речовин 3i стре-спротективною активнютю в ряду нових похщних 2-оксо1ндол1н-3-глюксиловоТ кислоти / Р.В.Луценко, Т.О.Дев'яткина, О.М.Важнича [та ¡н.] // Вюник фармацй'. -
2007. - №3 (51). - С.67-69.
Луценко Р.В. Дослщження антидепресивноТ активное^ похщних 2-оксо1ндолш-3-глюксиловоТ кислоти в TecTi По-рсолта / Р.В.Луценко, Т.О. Дев'яткша, А.Г.Сидоренко [та ¡н.] // КлУчна фармац1я. - 2009. - №1. - С.47-49. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: ИИА «Ремедиум», 2000. - 398 с.
Шевцов 1.1. Зв'язок «структура-дт-активнють» в ряду похщних 2-оксо1ндол1н-3-глюксиловш кислоти / 1.1.Шевцов, В.I.Березняков, Е.Л.Торяник [та ¡н.] // Медична xiMifl. -2006. - Т.8, №1. - С.67-71.
Штриголь С.Ю. Ноотропн1 властивост1 нових похщних 2-оксо1ндол1н-3-гл1оксилов1й кислоти / С.Ю.Штриголь, О.О.Спхарний, С.В. Кол1сник [та ¡н.] // В1сник фармацй'. -
2008. - №4 (56). - С.75-77.
Штриголь С.Ю. Церебропротекторн1 властивост1 похщних 2-оксо1ндолш-3-глюксилов1й кислоти / С.Ю.Штриголь, О.О.Ст1харний, С.В. Кол1сник [та ¡н.] // В1сник фармацй'. -2008. - №3 (55). - С.60-63.
American Psychiatric Association. Diagnostic and Statistical Manual of Mental Disorders.- 4th Ed.-Washington: DC, Amer. Psychiatric Association.-1994. Flicker L. Piracetam / Evidence-based Dementia Practice // Ed. by N.Qizilbash et al. - Oxford: Blackwell Publishing. -2002. - P.546-548.
Forette F., Seux M.L., Staessen J.A. et al. Prevention of dementia with antihypertensive treatment: new evidence from the Systolic Hypertension in Europe (SystEur) study // Arch. Intern. Med. — 2002. — 162(18). — 204-652. Porsolt R.D. Behavioral models of depression / R.D.Porsolt, A.Lenegre, J.M.Elliot, D.J.Heal [et al.] // Experimental Approaches to anxiety and depression. - Chichester New York, 1992. - P.73-85.
Реферат
ДОКЛИНИЧЕСКОЕ ИЗУЧЕНИЕ НООТРОПНОГО ДЕЙСТВИЯ И СОПУТСТВУЮЩИХ ПСИХОТРОПНИХ свойств
ПРОИЗВОДНЫХ 2-ОКСОИНДОЛИНА
Шатилов А.В., Штрыголь С.Ю., Колесник С.В., БолотовВ.В.
Ключевые слова: производные 2-оксоиндолина, скополаминовая амнезия, ноотропное действие, анксиолитическое действие
Фармакологический скрининг 18 производных 2-оксоиндолина продемонстрировал их ноотропное действие в тесте скополами-новой амнезии. Наибольший антиамнестический еффект оказывают четыре соединения с лабораторными шифрами F, N, D, Q. Соединение-лидер F проявляет антиамнестическое действие в диапазоне доз 0,6-24 мг/кг, улучшает все фазы памяти, особенно ввод и первичную обработку информации, консолидацию памятного следа, несколько меньше - репродукцию. Данное соединение значительно превосходит пирацетам и более активно, чем глицин, у-аминомасляная кислота, фенибут. Соединение F оказывает также анксиолитическое действие на уровне диазепама по тесту возвышенного крестообразного лабиринта, т.е. проявляет транквилоноотропные свойства. Анксиолитическое действие соединения F, в отличие от диазепама, анксиоселекти-вно, поскольку не ухудшается память, исследовательское поведение и координация движений.
Summary
PRECLINICAL STUDY OF NOOTROPIC ACTION AND CONCOMITANT PSYCHOTROPIC PROPERTIES OF 2-OXOINDOLINE DERIVATIVES
Shatilov O.V., Shtrygol' S.Yu., Kolesnik S.V., Bolotov V.V.
Key words: 2-oxoindoline derivatives, scopolamine-induced amnesia, nootropic action, anxiolytic action
Pharmacological screening of 18 of 2-oxoindoline derivatives has displayed their nootropic action according to the test of scopolamine-induced amnesia. The most antiamnesic action has been shown by 4 compounds (laboratory cyphered as N, F, Q, D). The leading compound F has shown antiamnetic action in 0,6-24 mg/kg dosage range, improved all phases of memorization, information input and information pre-processing along with memorization track consolidation. Less can be said as to the reproduction. Given compound considerably excels pyracetam being more active than gamma aminobutyric acid, glycine and phenybut. Compound F has shown anxiolytic action at diazepam level (according to the elevated plus maze test) as well, i.e. has shown tranquilonootropic properties. Compound F has demonstrated anxioselective action as far as memory impairment, exploratory behavior, and coordination of movements are not seen as opposed to diazepam.
