CC BY
17опухоли мочеполовой системы
(непростатический рак): комбинированное/ комплексное лечение
Доклинические исследования пептидного ингибитора СРК 4/6-ММ-Р37К в качестве противоопухолевого средства
при раке мочевого пузыря
Авторы
Кулинияч Татьяна Михайловна, sobral@mail.ru, ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, Москва
Кудинова Елена Адександровна, dockudinova@mail.ru, ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадио-логии» Минздрава России, Москва
Большакова Оксана Борисовна, oksana.bolshakova.rncr@mail.ru, ФГБУ «Российский научный центр рент-генорадиологии» Минздрава России, Москва
Плотникова Екатерина Александровна, МНИОИ им. П.А. Герцена, филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, Москва
Воронцова Мария Сергеевна, vapireshouse@mail.ru, МНИОИ им. П.А. Герцена, филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, Москва
Панкратов Андрей Александрович, МНИОИ им. П.А. Герцена, филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, Москва
Морозова Наталья Борисовна, МНИОИ им. П. А. Герцена, филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России, Москва
Боженко Владимир Константинович, vbojenko@mail.ru, ФГБУ «Российский научный центр рентгенора-диологии» Минздрава России, Москва
Солодкий Владимир Алексеевич, mailbox@rncrr.ru, ФГБУ «Российский научный центр рентгенорадиологии» Минздрава России, Москва
Ключевые слова:
рак мочевого пузыря, таргетный пептидный ингибитор циклиновых киназ CDK4/6, лечение
Актуальность
Рак мочевого пузыря (РМП) — одна из наиболее часто встречающихся злокачественных опухолей. РМП характеризует высокий риск рецидива — 40-80% после трансуретральной резекции (ТУР) в течение 6-12 месяцев, а также отсутствие эффективных методов адъювантной химиотерапии. В связи с этим поиск новых лекарственных препаратов, направленных на лечение РМП, является важной практической задачей. В данной работе проведено исследование MM-D37K, являющегося таргетным пептидным ингибитором циклиновых киназ CDK4/6.
Цель
Оценка эффективности и местной токсичности MM-D37K в отношении клеток рака мочевого пузыря.
Материалы и методы
Противоопухолевая активность in vitro, изучалась клетках линий EJ и 5637 (карциномы мочевого пузыря человека любезно предоставлены МНИОИ им. П.А. Герцена). Исследовались концентрации от 2 до 20 мкМ. Изучались активность пролиферации
и апоптоза с помощью методов проточной цитоф-луориметрии (окраска AnnexinV-PI) и метод RTCA гсеПе^евде. Исследование токсичности проведено на 12 самках мышей линии BALB/c nu/nu(nude). Животные были распределены на 2 группы. Подопытным 1-й группы в течение 40 минут в полость мочевого пузыря проводили инстилляцию препарата в концентрации 5 мкМ, растворенного в 100 мкл физраствора. Гистологические изменения тканей мочевого пузыря оценивали через 6, 24 72 часа после инфузий, проводя сравнение со слизистой мочевого пузыря контрольных мышей (2-я группа), которым проводились инфузии физраствора в объеме 100 мк .[1].
Результаты
Был показан эффект остановки пролиферации в G1-фазе клеточного цикла: при концентрации 10 мкМ наблюдается снижение пролиферативной активности в 1,75 и 2,4 раза для линий EJ и 5637 соответственно, а при увеличении концентрации до 20 мкМ — полная остановка пролиферативных процессов для обеих культур. Исследование местной токсичности показало, что введение в полость мочевого пузыря ММ-D37K приводит к истончению эпителиального слоя,
частичной утрате эпителия, снижению количества зонтичных клеток. Данные изменения были отмечены через 6-24 часа после воздействия исследуемого препарата. Однако через 3 суток слизистые мочевого пузыря мышей экспериментальной и контрольной групп отличий не имели, что свидетельствовало о незначительности и обратимости токсических эффектов, оказываемых исследуемым пептидом.
Выводы
Проведенные исследования показали высокую антипролиферативную активность, а исследования безопасности ММ^37К, позволяют прогнозировать низкую токсичность при внутрипузырном способе введения. Полученные результаты позволяют высказаться о перспективности использования данного пептидного ингибитора для лечения РМП.
Список литературы
1. Исследование цитостатических и цитотоксических свойств модифицированных пептидных ингибиторов CDK4/6, функциональных аналогов р16^К4а (90-97) / В . К . Боженко, Т М . Кулинич, Е . А . Кудинова и др . // Успехи молекулярной онкологии . 2020 . Т 7 . № 4. С . 37-45 . DO:I 10 .17650/2313-805Х-2020-7-4-37-45 . EDN CDJLKI .
Бета-Ш тубулин как молекулярный маркер вовлеченности в процесс малигнизации визуально нормальной слизистой при уротелиальном раке мочевого пузыря
Авторы
Башарина Анна Александровна, basharina@inbox.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Сафаров Зухал Манучехрович, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Мизаева Иман Эдалбековна, imaanii@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Гришанина Анна Николаевна, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Богуш Елена Александровна, ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Москва
Гриднева Яна Владимировна, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Волкова Мария Игоревна, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Богуш Татьяна Анатольевна, tatbogush@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России, Москва
Ключевые слова:
рак мочевого пузыря, бета-Ш тубулин, проточная цитометрия, слизистая мочевого пузыря
Актуальность
Уникальная особенность белка бета-Ш тубулина (ТОВВЗ) состоит в том, что его экспрессия ассоциирована с опухолевой трансформацией, а в нормальной эпителиальной ткани ТОВВЗ выявляется в незначительных количествах лишь в нейронах, эндо-телиоцитах и макрофагах [1]. Этот факт лег в основу нашего предположения о возможности использования ТОВВЗ для молекулярного выявления опухолевых клеток в визуально нормальной («нормальной») ткани, окружающей опухолевый очаг.
Цель
Сравнительная количественная иммунофлуорес-центная оценка уровня экспрессии ТОВВЗ в ткани уротелиального рака мочевого пузыря и окружающей «нормальной» слизистой органа.
Материалы и методы
У каждого пациента (п = 18) исследованы хирургические образцы уротелиального рака моче-
вого пузыря и визуально нормальной слизистой вблизи и вдали от опухоли (на расстоянии около 1 см и более 3 см). Общее число исследованных образцов тканей — 56. Экспрессия TUBB3 исследована иммунофлуоресцентным методом и проточной цитометрией [2]. Использованы первичные моноклональные антитела к TUBB3 (ab7751) и вторичные — конъюгированные с флуоресцентным красителем DyLight650 (ab98729). Оценен уровень экспрессии TUBB3 (%) — количество специфически флуоресцирующих клеток относительно контроля (инкубация клеток только с вторичными антителами). Для попарного сравнения уровня экспрессии TUBB3 в разных группах использован Тьюки-тест (GraphPad Prism 7.0).
Результаты
1. Экспрессия маркера выявлена в 100% случаев при значительной гетерогенности уровня экспрессии TUBB3 как в опухоли, так и в «нормальной» слизистой. Уровень TUBB3 в «нормаль-
