УДК 577.112:577.122:579.222
Барладин А.О., молодший науковий ствроб^ник;
Калачнюк Л.Г., к.б.н., старший науковий ствроб^ник;
Сухорська О.П., к.с-г.н., старший науковий ствроб^ник; Сид1р 1.М., астрант, Мароунек М. , д.б.н., професор, Калачнюк Г.1., д.б.н., професор НД1 бютехнолог1чних основ тдвищення продуктивност1 тварин ЛНУВМтаБТ
¡мет. С. З. Гжицького, Email: [email protected] 1нститут ф1зюлогп i генетики тварин Чеськог АН, Прага, Чеська Республта
Д1Я Р1ЗНИХ ДОЗ ЕКЗОГЕННО1 КОН'ЮГОВАНО1 Л1НОЛЕВО1 КИСЛОТИ (CLA) НА ЖИРНОКИСЛОТН1 СПЕКТРИ SFA, MUFA I PUFA ПЕЧ1НКИ ТА ВОМЕР-СПЕЦИФШШСТЬ Б1ОЕФЕКТУ
Добавки CLA до рацюну кролiв тдвищують кыьюсть насичених ЖК (SFA) за рахунок зниження мононенасичених ЖК (MUFA) у ЖК-спектрi лiпiдiв печтки. Вплив CLA на спiввiдношення SFA е вiрогiдним (р<0,05) у печтщ кролiв, як 6 тижтв споживали добавку 5 г/кг CLA-олп. При цьому частка полтенасичених ЖК (PUFA) не збыьшуеться. Концентращя CLA у тканин вiрогiдно (р<0,05) зростаеу зв 'язку i3 тдвищенням вмiсту харчовог CLA (з 5 до 10 г/кг). Спiввiдношення CLA-iзомерiв (цис-9, транс-11 CLA та транс-10, цис-12 CLA) у лШдах печтки вiдрiзняеться вiд спiввiдношення гх у CLA-збагачент дiетi. Вiдносна частка першого iзомеру е меншою, тж у CLA-олп. Бiологiчний ефект CLA е iзомер-специфiчним. Транс-10, цис-12 CLA е, мабуть, головним iзомером кон 'югованог лтолевог кислоти у лШдах печтки, який е, можливо, ефективншим за цис-9, транс-11 CLA у процесах зниження жировог тканини, що узгоджуеться iз даними лтератури.
Ключовi слова: CLA, транс-9, цис-11 CLA, транс-10, цис-12 CLA, SFA, MUFA, PUFA, ЖК-спектр печтки, кролi.
Кон'югована лшолева кислота (CLA) - це загальна назва для позицшних i геометричних кон'югованих iзомерiв октадекадiеновоl кислоти (С 18:2). Бшьше десяти роюв посилено вивчаеться дiя CLA на стан здоров'я та кшьюсно-яюсш показники продуктивной тварин. Наукова шформащя е неоднозначною. Одш дослщники [8, 11] стверджують, що пщ впливом CLA у свиней пщвищуються прирости живо! маси, а iншi [7, 9, 10] не виявили позитивного ефекту. Вiдмiчено вiрогiдне тдвищення частки насичених жирних кислот (SFA) за рахунок зниження частки мононенасичених (MUFA) у внутршньом'язевому i депонованому жирi [4, 5]. На результати суттевий вплив мають доза споживання CLA, вш тварин, дiета та iншi умови й фактори. Враховуючи вищенаведене метою нашо! роботи було вивчити вплив споживання рiзних кшькостей CLA на жирнокислотш спектри лшвдв печшки кролiв.
©Барладин А.О., Калачнюк Л.Г., Сухорська О.П., Сидр 1.М., Мароунек М, Калачнюк Г.1., 2008
12
Матер1али i методи. Дослщження були проведет на 40 кролях-бройлерах велико1 бiлоï породи ("Бший велетень"), якi були вщлучеш вiд MaTepiB у 35-денному вщг Вони були роздiленi на 4 групи (по 10 кролiв у кожнш). Тварин 1-оï групи (контроль) утримували на звичайному рацiонi i без добавок CLA, а три iншi - дослiднi, з яких кролi 2-оï i 3-оï групи одержували CLA по 5 г/кг (з них 2-а протягом 1-42 дшв, а 3-я - протягом 22-42 дшв дослiду), а 4-а - по 10 г/кг CLA протягом 22-42 дшв дослщу. В кшщ дослщу кролiв забивали i вiдбирали зразки тканин для бiохiмiчних дослiджень. CLA-олiя (виробництва Luta-CLA, BASF, Germany) мктила цис-9-, транс-11-CLA, транс-10, цис-12- CLA, iншi CLA-iзомери, олеïнову, пальм^инову i стеаринову кислоти вiдповiдно в кшькостях 319, 304, 16, 243, 64 i 39 мг/г. Жирнокислотний (ЖК-)склад тканини визначали пiсля хлороформ-метанольнох' екстракци загальних лiпiдiв [6]. Лужне транс-метилювання ЖК проводили згiдно вимог ISO 5509 (2001), а газову хроматограф^ метильних ефiрiв - на хроматографi HP 6890 (Agilent Technologies, Inc.). Жирш кислоти iдентифiкували на основi часу ïx отримання вщносно стандартiв. CLA-iзомери в Luta-CLA 60 та у тканиш кролiв визначали, використовуючи HPLC iнструментарiй Shimadzu (VP-сери).
Одержанi данi обробляли статистично з допомогою одноварiантного аналiзу за прописом GLM SAS, версiя 8.2 (SAS Institute, Cary, NC, USA). Рiзницi (р<0,05) визначали за тестом Scheffe.
Результати i обговорення. Одержанi результати дослiджень наведенi у табл.1-3. 1з наведених у таблицях даних видно, що хоча споживання CLA понижувало поïдання ï^i на 1,7-8,1% i вагу приросив на 3,9-6,3%, однак, щ рiзницi не були достовiрними (табл. 2).
Таблиця 1
Компоненти i \1м1чний склад контрольно*! дicти крол1в*
Компоненти г/кг Хiмiчний склад г/кг
Люцернове борошно 300 Суха речовина 906
Висiвки пшеничш 260 Сирий протеïн 166
Ячмiнь 145 Кл^ковина 161
Рiзка цукрового буряка 40 Жир 41
Подрiбнене насiння соняшника 130 Попiл 73
(екстраговане)
Сойове борошно (екстраговане) 20
Ршакова олiя 15
Мiндобавка* * 20
Вгамшна добавка 10
^LA-олда додавали по 5 i 10 г/кг взамш частини рiпаковоï оли ** Крейда, дикальцiю фосфат i сшь
13
Таблиця 2
Рктг 1 споживання корму кролями* на контрольнш 1 дослщнш (з добавками СЬА**)
СЬА-олш Днi споживання СЬА
Групи тварин
1
2,82
1-42
2
624 2357 1733 4785
2,76
23,9а
5 г/кг 22-42
3
Початкова жива маса (г) 643 Юнцева жива маса (г) 2492 Приркт живо! маси (г) 1849 Спожитий корм (г) 5205 Спожитий корм/ Прирют маси CLA-олiя спожита (г) * 10 кролгв у кожнт групг **тривал1сть експерименту 42 дн1 аЬе в1рог1дн1 ргзниц! м1ж групами (р<0,05)
Таблиця 3
Жирнокислотний спектр лтщ1в печшки кролв* при споживанн1 рвних доз СЬА-оли
662 2439 1777 4862
2,74
15,5Ь
10 г/кг 22-42
4
660 2433 1773 5118
2,89
31,5е
Середне квадратичне вiдхилення (РМББ) 76 215 182 526
0,35
2,7
CLA-олiя 0 5 г/кг 10 г/кг Середне
Дш споживання СЬА - 1-42 22-42 22-42 квадратичне
Групи тварин 1 2 3 4 вщхилення (ИМББ)
Насичет ЖК (БРА)
12:0 0,3а 0,2аЬ 0,1ь 0,2аЬ 0,1
14:0 8,3а 4,2Ь 4 4аЬ 3,6Ь 3,1
15:0 3,0 2,5 2,3 2,2 0,6
16:0 222,9а 168,0Ь 182,1ь 171,9Ь 28,6
17:0 7,2а 9,2аЬ 9,7Ь 10,2Ь 1,6
18:0 143,2а 228,1ь 246,8Ье 288,5е 32,3
Iншi БРА 2,7а 8,0Ь 3,6а 4,4а 2,0
Сумарш БРА 387,6а 420,2аЬ 449,0е 481,0е 40,5
Мононенасичеш ЖК (МИРА)
14:1 0,5а 0,2Ь 0,2Ь 0,2Ь 0,2
16:1 13,3а 3,8Ь 4,0Ь 4,4Ь 2,7
18:1 п-9 213,0а 153,9Ь 151,9Ь 146,8Ь 32,2
18:1 п-7 16,2а 10,3Ь 9,6Ь 10,1ь 1,9
20:1 п-9 6,0а 3,7Ь 4,0Ь 3,3Ь 1,1
Iншi МИРА 1,2 1,5 1,5 2,8 1,6
Сумарнi МИРА 250,7а 173,4Ь 171,2Ь 166,6Ь 36,4
Полшенасичеш ЖК (РИРА)
18:2 п-6 262,3 296,2 281,9 269,0 38,9
CLA 0,6а 11,5Ье 9,6Ь 14,4е 3,5
18:3 п-3 19,6а 18,6аЬ 15,1аЬ 13,3Ь 4,2
20:2 п-6 1,5 11,5 12,9 10,2 2,8
20:3 п-6 6,6а 5,0Ь 5,0Ь 3,4е 1,1
20:4 п-6 43,5 43,4 38,9 29,3 12,1
20:5 п-3 0,9аЬ 1,9а 0,6Ь 1,0аь 1,0
22:4 п-6 6,5аЬ 6,6а 5,9аЬ 3,5Ь 1,4
22:5 п-3 4,9 5,9 5,1 4,8 1,0
22:6 п-3 1,8 1,8 1,7 2,4 1,4
Iншi РИРА 3,5 4,0 3,1 1,0 2,9
Сумарнi РИРА 361,7 406,4 379,8 352,4 58,2
* 10 крол1в у кожнш грут **тривал1сть експерименту 42 дн1 аЬе в1рог1дн1 ргзниц! м1ж групами (р<0,05)
14
Одержат результата також свщчать, що добавки до ращону кролiв CLA пщвищують кiлькiсть насичених ЖК за рахунок зниження мононенасичених у ЖК-спектрi лiпiдiв печiнки.
Вплив CLA на стввщношення насичених ЖК е вiрогiдним (р<0,05) у печшщ кролiв, якi 6 тижнiв споживали добавку 5 г/кг CLA-олп. При цьому частка полiненасичених ЖК не збшьшуеться. Концентрацiя CLA у тканиш вiрогiдно (р<0,05) зростае у зв'язку iз пiдвищенням вмiсту харчово! CLA (з 5 до 10 г/кг). Cпiввiдношення CLA-iзомерiв (цис-9, транс-11 CLA та транс-10, цис-12 CLA) у лшщах печiнки вiдрiзняеться вщ спiввiдношення !х у CLA-збагаченiй дiетi. Вiдносна частка першого iзомеру е меншою, нiж у CLA-олп. Бюлопчний ефект CLA е iзомер-специфiчним. Транс-10, цис-12 CLA е, мабуть, головним iзомером кон'юговано! лшолево! кислоти у лшщах печшки, який е, можливо, ефективнiшим за цис-9, транс-11 CLA у процесах зниження жирово! тканини, що узгоджуеться iз даними л^ератури [1-3]. Висновки.
1. Cпоживання CLA-оли дещо понижуе пощання 1ж1 та прироста живо! маси кролiв.
2. Пщ дiею CLA пiдвищуеться вмшт насичених жирних кислот за рахунок зниження MUFA у ЖК-спектрi лшвдв печiнки.
3. Концентрацiя CLA у тканиш вiрогiдно (р<0,05) зростае у зв'язку з тдвищенням вмiсту харчово! CLA (з 5 до 10 г/кг).
4. Cпiввiдношення CLA-iзомерiв (цис-9, транс-11 CLA та транс-10, цис-12 CLA) у лшщах печшки вiдрiзняеться вщ стввщношення !х у CLA-збагаченiй дiетi. Вiдносна частка першого iзомеру е меншою, нiж у CLA-оли.
5. Припускаеться, що бiологiчний ефект CLA е iзомерспецифiчним.
Л1тература
1. Барладин А.О., Калачнюк Л.Г., Сухорська О.П., Мароунек М., Калачнюк Г.1. Змши жирнокислотного спектру лшвдв печшки за умов споживання рiзноI кшькосп кон'юговано! лшолево! кислоти // "Молодь i поступ бюлогп" Збiрник тез IV Мжнародно! науково! конференцп студенев та аспiрантiв 7-10.04.2008 - Львiвський нацiональний унiверситет iменi 1вана Франка, Львiв, 2008. - C.19-20.
2. Барладин А.О., Мароунек М., Калачнюк Л.Г., Сухорська О.П., Калачнюк Г.1. Екзогенна дiя кон'югованих iзомерiв октадекадiеновоI кислоти та селену на жирнокислотний спектр м'язових тканин кроля // Наук. вюник ЛНАВМ iм. C.3. Гжицького, Львiв, 2006. Т.8, №3(30), Ч.3. C.3-10.
3. Belury M.A. Dietary conjugated linoleic acid in health: physiological effects and mechanisms of action // Annual Reviews of Nutrition. 2002. Vol. 22. P.505-531.
4. Corino C., Lo Fiego D.P., Macchioni P. et al. Influence of dietary conjugated linoleic acids and vitamin E on meat quality, and adipose tissue in rabbits. // Meat Science. 2007. Vol.76. P.19-28.
5. Czauderna M.,Kowalczuk J., Wasowska I. et al. The effects of selenium and conjugated linoleic acid (CLA) isomers on fatty acid composition, CLA isomer content in tissues, and growth of rats. // J. of Animal and Feed Sciences. 2003. Vol. 12. P.865-881.
15
6. Folch J.M., Lees M., Sloane-Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues // J. of Biol. Chem. 1957. Vol.226. - P.497-509.
7. Gatlin L.A., See M.T., Larick D.K. et al. Conjugated linoleic acid in combination with supplemental dietary fat alters pork fat quality // J. of Nutrition. 2002. Vol. 132. - P.3105-3112.
8. Lauridsen C., Mu H., Henckel. P. Influence of dietary conjugated linoleic acid (CLA) and age at slaughtering on performance, slaughter- and meet quality, lipoproteins, and tissue deposition of CLA in barrows // Meet Science. 2005. Vol. 69. - P. 393-399.
9. Muller H.L., Kirchgessner M., Roth F.X., Stangl G.I. Effect of conjugated linoleic acid on energy metabolism in growing-finishing pigs // J. of Animal Physiology and Animal Nutrition. 2000. Vol. 83. - P.85-94.
10. Stangl G.I., Muller H.L., Kirchgessner M. Conjugated linoleic acid effects on circulating hormones, metabolites and lipoproteins, and its proportion in fasting serum and erythrocyte membranes of swine // European J. of Nutrition. 1999. Vol. 38. - P.318-324.
11. Thiel-Cooper R.L., Parrish F.C. Jr., Sparks J.C. Conjugated linoleic acid changes swine performance and carcass composition // J. of Animal Science. 2001. Vol. 79. - P.1821-1828.
Summary
A. Barladyn, L. Kalachnyuk, M.. Sukhors'ka, I. Sydir, M. Marounek*,
G. Kalachnyuk
Biotechnology Research Institute of Animal Production S.Z. Gzhytskyi L'viv National University of Veterinary Medicine and Bio-Technologies, Pekarska st. 50,
L'viv 79010, Ukraine; e-mail: [email protected] *Institute of Animal Physiology and Genetics, Czech Academy of Sciences, Prague,
Czech Republic
AFFECT OF DIFFERENT DOZES OF EXOGENOUS CONJUGATED
LINOLEIC ACID (CLA) ON FATTY ACIDS PATTERNS OF SFA, MUFA
AND PUFA IN THE LIVER, AND ITS ISOMER SPECIFIC BIOEFFECT
CLA-supplements to diet of rabbits increase quality of SFA with decreasing MUFA in fatty acids patterns of lipids in the liver. Affect of CLA onto SFA proportion is significant (p<0,05) in the liver in rabbits which eat 5 g/kg CLA oil supplement during 6 weeks. PUFA proportion is not elevated. Concentration of CLA in the tissue rises significantly (p<0,05), it depends on increase of dietary CLA content (5 to 10 g/kg). The CLA isomers (cis-9, trans-11 CLA and trans-10, cis-12 CLA) ratio in lipids in the liver differs from one in CLA reached diet. The relative proportion of former isomer is smaller than in CLA oil. Biological effect of CLA is isomer specific. Trans-10, cis-12 CLA is possibly main isomer of conjugated linoleic acid in lipids in the liver, it's more effective than cis-9, trans-11 CLA in at lowering adipose tissue mass like as in other researches.
Key words: CLA, cis-9, trans-11 CLA and trans-10, cis-12 CLA, hepatic FA patterns, rabbits.
Cmammx nadiumna do pedamii 8.04.2008
16