CC BY
41
ДИНАМИКА КОЛИЧЕСТВА Т- И В-ЛИМФОЦИТОВ У ПЕСЦОВ, ИММУНИЗИРОВАННЫХ РАЗНЫМИ ВАКЦИНАМИ ПРОТИВ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА.
Ю.А. Березина, И.А.Домский
ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт охотничьего хозяйства и звероводства им. проф. Б.М.Житкова, г. Киров е-mail: vniioz@mail.ru
Одной из главных задач иммунологии является изучение механизмов формирования гуморального и клеточного иммунитета, определяющего резистентность к инфекции (Гурвич А.Е., Егоров И.К., 1978). Однако многие стороны реализации противоинфекцион-ного иммунитета исследованы с позиций современной иммунологии недостаточно. Мало сведений о роли Т- и В-лимфоцитов в системе клеточного иммунитета при инфекциях различной этиологии у сельскохозяйственных животных (Коляков Я.Е., 1986), у пушных зверей имеются только единичные сведения (Есепенок В.А., 1998; Хитрова Д.А., 2003).
Основную роль в профилактике заболеваний играет вакцинация. Оценка иммунитета при помощи специфических клеточных реакций имеет научное и практическое значение. Эти реакции способны в достаточно короткие сроки и без больших затрат дать сведения о формировании иммунитета у иммунизированных животных.
Изучение клеточного специфического иммунитета предлагается рассмотреть на примере реакции розет-кообразования, она является начальным этапом любого иммунологического исследования. Подсчет количества розеткообразующих клеток (Т- и В- лимфоциты) в крови является одним из показателей специфического клеточного иммунитета. Полученные в результате постановки реакции данные характеризуют динамику поствакцинально-го иммунного ответа у пушных зверей, иммунизированных разными бактериальными (живыми, инактивированными) вакцинными антигенами.
Целью настоящей работы явилось изучение показателей клеточного им-
мунитета у пушных зверей, иммунизированных разными вакцинами и определить перспективы их использования для профилактики инфекционных заболеваний пушных зверей.
Исследования проводились на песцах, так как они более восприимчивы к возбудителю сальмонеллеза (Чижов,1984).
В целях иммунизации животных против сальмонеллеза использовались следующие вакцинные препараты:
Инактивированная ассоциированная вакцина против колибактериоза, сальмонеллеза, клебсиеллеза и протейной инфекции молодняка сельскохозяйственных животных и пушных зверей (вакцина ОКЗ) ТУ 9384-047-00008064-99 серия №18, контроль №18, изготовлена 12.2004. ФГУП Покровский завод биопрепаратов и ООО «Агровет».
Опытные и опытно-промышленные серии вакцин против сальмонеллеза пушных зверей для парентерального введения (ТУ № 9384-105-00494189-2003).
Вакцины применяли согласно наставлениям по их применению.
Исследования проводили с помощью следующих методов:
Выделение лимфоцитов в градиенте плотности (Груздев К.Н., 1984).
Определение количества Т-лимфоцитов методом спонтанного розеткооб-разования с эритроцитами барана (Jondall M. et al.,1972).
Определение количества В-лимфоцитов методом розеткообразования с эритроцитами барана, обработанными антителами и комплементом (Bianco C. et al., 1970).
Подсчет лейкоцитов в счетной камере и лейкограммы проводили согласно общепринятым методикам, описанным в соответствующих руководствах (Берестов В.А., 1981). Для морфологического исследования периферической крови использовали окраску препаратов по Романовскому-Гимзе.
Кровь у опытных зверей брали из вены бедра (v. saphena) через 7, 14, 21, 28 дней после иммунизации.
Исходные значения гематологических параметров были в пределах физиологической нормы.
Исследования крови животных позволяют судить как о физиологических, так и специфических процессах, происходящих в организме в ответ на введение биологических препаратов, в данном случае - иммуногенных.
Результаты исследований показывают (рис. 1 и 2), что количество Т- и В-лимфоцитов в крови вакцинированных пушных зверей увеличивается уже на 7-й день во всех опытных группах после введения препаратов, рост показателей продолжается до 14-го дня. Такое увеличение можно объяснить трансформацией Т-клеток под действием антигена, так как именно эти клетки с макрофагами в первую очередь распознают и связывают антиген. В остальные сроки - 21 и 28 дней после вакцинации наблюдают постепенное снижение данных показателей. Таким образом, в опытных группах зверей отмечается схожая тенденция иммунного ответа. Однако следует отметить, что количество Т- и В-лимфоцитов в группе зверей, иммунизированных живой вакциной, выше, чем в случае применения инактивированного препарата. Это отмечает-
%
7 дней
14 дней
21 день
28 дней
Іживая Ш инактивированная В контроль
Рис. 1. Изменение количества Т-лимфоцитов у песцов, иммунизированных разными вакцинами против сальмонеллеза
Международная научно-практическая конференция
Современные проблемы природопользования, охотоведения и звероводства
■ живая Ш инактивированная В контроль
Рис. 2. Изменение количества В-лимфоцитов у песцов, иммунизированных разными вакцинами против сальмонеллеза
ся во все сроки исследования - на 7-й день показатели Т-лимфоцитов при применении живой вакцины выше на 6,06%, чем у животных, вакцинированных инактивированной вакциной.Через 14 дней на 8,2% (Р<0,05), а в 21 день на - 2,4%. К последнему сроку исследования количество Т- лимфоцитов выравнивается. Та же картина наблюдается и при изменении количества В-лимфоцитов. Через 7 дней на 4,63%, через 14 дней на 4% (Р<0,05), через 21 день - на 3,4%, через 28 дней - на 2,6% количество В-лимфоцитов у песцов, иммунизированных живой вакциной выше, чем у песцов, иммунизированных инактивированной вакциной против сальмонеллеза. Максимальных значений количество Т-лимфоцитов достигает уже к 7-му дню после вакцинации, а пик количества В-лимфоци-тов, являющихся предшественниками плазматических клеток, которые продуцируют антитела, происходит только к 14-му дню. Это свидетельствует о том, что вначале происходит активация клеточного звена иммунитета функцию ко-
торых в нашем случае выполняют Т-лимфоциты, а затем вступают в работу гуморальные факторы, определяемые функционированием В-клеток.
В результате проведенных исследований можно заключить, что вакцинный препарат на основе живых аттенуированных штаммов сальмонелл у иммунизированных им пушных зверей вызывает более выраженный клеточный иммунитет, чем инактивированные его аналоги, предлагаемые сегодня для профилактики сальмонеллеза.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Груздев К.Н. 1984. Выделение лимфоцитов их крови животных //Ветеринария.. № 10. 67 с.
Есепенок В.А. Стрептококкоз нутрий: диагностика, меры борьбы и специфическая профилактика //Автореф. дисс....докт. вет. наук. - Москва, 1998.
Гурвич А.Е., Егоров И.К., Лурия Е.А. с соавт. 1978. Иммуногенез и клеточная дифференцировка.- М.: «Наука».- 220 с.
Шустер Б.Ю., Малахов Ю.А., Кириллова В.В., Лебедев О.А., Ленев С.В. 1994. Специфическая профилактика сальмонеллеза сельскохозяйственных животных //Ветеринария.. № 2. С. 11.
Чижов В.А. 1984. Сальмонеллез //Болезни пушных зверей. 3-е изд. пере-раб. и дополн. под ред. Е.П.Данилова. - М.: Колос, С. 137-143.
Jondall M., Holm J., Wogzell H. 1972. Surface markers of human B- and T-lymphocytes. I. A large population of lymphocytes forming nonimmunerosettes with sheep red blood cells // J. Exp. Med. vol. 136. № 2. Р 207-215.
Bianco C., Prilrick R., Nussenzweig V. A. 1970. Population of lymphocytes bearing a membrane receptor for antigen-antibody complex // J. Exp. Med. Vol. 134. № 4. Р.702-720.
