CC BY
20
УДК 619:616.98:579.86:636.932.3
ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКАЯ РЕАКТИВНОСТЬ НУТРИЙ, ПРИВИТЫХ АССОЦИИРОВАННОЙ ВАКЦИНОЙ ПРОТИВ КОЛИБАКТЕРИОЗА, САЛЬМОНЕЛЛЕЗА И
СТРЕПТОКОККОЗА
© 2008 г. Л.В. Шевченко, О.Ю. Черньх, А.А. Шевченко
The information about of the immunological reaction of the coypus which are inoculate of the association vaccine against of the colibacteriosis, the salmonellosis and the streptococcosis which realization with the support of the Russian fond of the fundamental investigation, are produce. The revealational in the reactions the regulars of the cell reaction of the phagocytes and the synthesis dynamic of the T- and B-limfositos are conformity for the level change of the antibody for the colibacteriosis, the salmonellosis and the streptococcosis by immunizational animals.
Нутриеводство - новое перспективное направление пушного звероводства России, но его становлению препятствует ряд инфекционных болезней, таких как колибактериоз, сальмонеллез, стрептококкоз и пастереллез, наносящих значительный экономический ущерб отрасли [1-3].
Самой надежной защитой нутрий от инфекционных болезней является специфическая профилактика. Применение ассоциированных вакцин в звероводстве, включающих несколько антигенов, позволяет снизить стрессовые ситуации у прививаемых животных, уменьшить трудозатраты и создать напряженный иммунитет в сжатые сроки [4, 5]. Учитывая данное обстоятельство, а также тот факт, что биопрепараты из местных штаммов возбудителей болезней обладают более высокими антигенными и иммуногенными свойствами и способствуют созданию иммунитета достаточной напряженности [6-8], нами в период эпизоотии в 2001 г. в племзверосовхозе «Северин-ский» Тбилисского района Краснодарского края от павших нутрий были выделены возбудители колибак-териоза (E. coli О1), сальмонеллеза (Sа1. typhimurium O4 Bi), стрептококкоза (Str. рпвитотав), изучены их основные свойства и разработана ассоциированная вакцина [9, 10].
Задачей наших исследований было изучить иммунологическую реактивность нутрий, привитых ассоциированной вакциной против колибактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза.
Материалы и методы исследований
Эксперименты проводили на базе ГУ «Кропоткинская зональная ветеринарная лаборатория». В опытах использовали опытные серии ассоциированной гид-роокисьалюминиевой формолвакцины против коли-бактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза нутрий, изготовленные по разработанной нами технологии.
Безвредность и реактогенность вакцины изучали путем введения 3-5-кратной прививочной дозы нутриям в возрасте 40-50 дней и наблюдения за клиническим состоянием животных в течение 10 дней.
Иммуногенность вакцины проверяли на нутриях в возрасте 40 - 50 дней. Десять нутрий иммунизировали ассоциированной формолвакциной против колибакте-риоза, сальмонеллеза и стрептококкоза двукратно: первая доза - 1,0 см3, вторая - 1,5 см3 с интервалом 10 сут.
Контролем служили интактные животные. Через 7, 14, 21, 28 дней после вакцинации у нутрий отбирали кровь для гематологических и серологических исследований. Уровень специфических антител в сыворотке крови определяли общепринятым методом: к колибактериозу и сальмонеллезу - в реакции агглютинации (РА), к стрептококкозу - в реакции преципитации (РП). Оценку гематологических показателей (количество эритроцитов, уровень гемоглобина, количество лейкоцитов) проводили по общепринятым методикам, описанным в соответствующих руководствах [11].
Для определения факторов неспецифической резистентности использовали тест бактериального фагоцитоза нейтрофилов с учетом степени его завершенности по отношению к бактериям Staphylococcus aureus (№ 209 Р) по И.В. Нестеровой и соавт. [12].
Количество Т-, В-, NK-лимфоцитов крови определяли по методу Пирса (1962) в модификации Н.Н. Гугушвили и соавт. [13].
Результаты исследований
В результате проведенных исследований установлено, что после двукратного внутримышечного введения 10 нутриям в область бедра ассоциированной гид-роокисьалюминиевой формолвакцины против коли-бактериоза, сальмонеллеза и стрептококкоза в дозе: первая - 1,0 см3, вторая с интервалом 10 дней - 1,5 см3, отклонений от физиологической нормы не выявлено. Количество гемоглобина и эритроцитов во все сроки исследования у подопытных животных существенно не отличалось от показателей контрольных и составляло 120,00-127,10 г/л (контроль 119,10-125,90 г/л); 3,79-3,95-1012/л (контроль 3,50-4,01-1012/л) соответственно. Уровень лейкоцитов до иммунизации находился в пределах от 7,39±0,43 до (8,00±0,39)-109/л, после 1-й и 2-й прививок достоверно повышался в 1,5 раза, к 28-м сут после вакцинации вновь снижался до исходного числа.
Принимая во внимание, что оценка основной функции нейтрофилов - фагоцитарной с определением степени завершенности фагоцитарного акта (ки-линг, переваривание) позволяет судить о состоятельности неспецифического звена иммунной системы, и, в частности, системы нейтрофильных гранулоцитов (НГ) при различного рода антигенных воздействиях (бактерии, вирусы, токсины и т.д.), была проведена оценка бактериального фагоцитоза у зверей.
Установлено, что после 1 -й прививки у иммунизированных нутрий достоверно повышался процент фагоцитарной активности нейтрофилов (ФАН) в 1,4 раза, поглотительная способность НГ - в 1,6, переваривающая способность - в 1,3 раза относительно периода до вакцинации, составив 46,44±0,19; 4,13±0,12; 75,56±0,29 % соответственно. После второй прививки все 3 показателя, характеризующие фагоцитарную реакцию, возросли. В дальнейшем наметилась тенденция к их снижению (рис. 1).
Рис. 1. Изменение показателей ФАН у нутрий после вакцинации (в % от контроля - до вакцинации). ФЧ - фагоцитарное число
Исследование особенностей клеточного и гуморального звеньев иммунитета у нутрий показало, что у иммунизированных зверей на 7-21-е сут после вакцинации количество Т-лимфоцитов (Т-ЛФ) достоверно снижалось на 4-12 % по сравнению с контрольными животными (до вакцинации). На 28-е сут наблюдалось повышение их концентрации до исходного уровня -59,40±0,54 %. Уровень В-лимфоцитов (В-ЛФ) достоверно повышался с 7 по 28-е сут наблюдения на 2237 % по отношению к контролю и составил 28,9032,50 %. Содержание КК-лимфоцитов (ЫК-ЛФ) возросло после 1 -й вакцинации на 10 % к уровню контрольных животных и составило 18,50±0,73 %. В дальнейшем наблюдалась отчетливая тенденция к снижению ]МК-ЛФ (рис. 2).
При изучении гуморального звена иммунитета у нутрий на ассоциированную гидроокисьалюминие-вую формолвакцину против колибактериоза, сальмо-неллеза и стрептококкоза в серологических реакциях установлено, что после двукратной вакцинации средний титр антител в сыворотке крови вакцинированных нутрий повышался против 3 возбудителей, достигнув максимальных значений на 14-е сут после прививки против колибактериоза, сальмонеллёза (640,00±116,85 и 720,00±133,33), против стрептокок-коза - 42,40±7,55 на 21-е сут, а затем закономерно снижался (рис. 3).
Рис. 3. Динамика титров антител у нутрий,
Рис. 2. Изменение показателей клеточного иммунитета у нутрий после вакцинации (в % от контроля - до вакцинации)
иммунизированных двукратно против колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза
Результаты исследований свидетельствуют, что опытные серии ассоциированной гидроокисьалюми-ниевой формолвакцины против колибактериоза, саль-монеллёза и стрептококкоза нутрий безвредны для сальмонеллёза и стрептококкоза нутрий безвредны для нутрий и обладают одновременно антигенностью и иммуногенностью.
Выраженный лейкоцитоз и фагоцитарная реакция нейтрофилов крови свидетельствуют о сравнительно ранней иммунобиологической перестройке организма нутрий, развивающейся на фоне почти не снижающихся процессов анаболизма, а следовательно, и большой способности захватывать и переваривать колибактери-озные, сальмонеллёзные, стрептококковые антигены.
Выявленные в реакциях закономерности клеточной реакции фагоцитов полностью соответствуют изменению уровня гуморальных антител к колибакте-риозу, сальмонеллёзу и стрептококкозу у иммунизированных зверей и существенно дополняют характеристику иммунного ответа.
Ассоциированная гидроокисьалюминиевая фор-молвакцина против колибактериоза, сальмонеллёза и стрептококкоза нутрий после двукратной прививки вызывает перестройку иммунной системы организма нутрий, о чем свидетельствуют поствакцинальные количественные изменения Т- и В-ЛФ.
Литература
1. Миронова Л.П., Коссе В.Ф., Миронова А.А.
// Диагностика, профилактика и лечение при инфекционных болезнях с.-х. животных. п. Персиановский, 2000. С. 31-33.
2. Есепенок В.А., Панин А.Н., Горбатова Х.С. // Актуал.
пробл. ветеринар.-санитар. Контроля с.-х. продукции: Материалы 2-й междунар. науч. конф. М., 1997. Ч. 2. С. 125.
3. Панин А.Н. // Там же. С. 7.
4. Уласов В.И. и др. // Сб. науч. тр. ВГНКИ. 1996. № 59.
С. 45-49.
5. Домский И.А. // Докл. РАСХН. 2002. № 2. С. 51-53.
6. Кадымов Р.А. и др. // Ветеринария. 1990. № 5. С. 34-
36.
7. МаннаповаР.Т// Ветеринария. 1998. № 1. С. 34-36.
8. Шульга Н.Н., Яковлева Н.В. // Ветеринария. 2006. № 7.
С. 21-23.
9. Пат. № 2301070 Способ изготовления вакцины, ассо-
циированной против колибактериоза, сальмонеллеза, стрептоккоза у нутрий. Зарегистрирован 20 июня 2007 г.
10. Пат. № 2301681 Вакцина, ассоциированная против
колибактериоза, сальмонеллеза и стрептоккоза у нутрий. Зарегистрирован 27 июня 2007 г.
11. Берестов В.А. Звероводство: Учеб. пособие. СПб.,
2002. С. 401-407.
12. Нестерова И.В. и др. Комплексное трехуровневое ис-
следование системы нейтрофильных гранулоцитов с возможной диагностикой ИДС при различной патологии: Метод. рекомендации. Краснодар, 1996.
13. Гугушвили Н.Н. // Сб. науч. тр. 2000. Вып. 379 (407).
С. 270-274.
Кубанский государственный аграрный университет,
Кропоткинская зональная ветеринарная лаборатория_11 июля 2007 г.
