здравоохранения, экологов, географов и других специалистов, занимающихся проблемами устойчивого развития России и ее отдельных регионов. Он может быть рекомендован как вспомогательный инструмент при планировании санитарно профилактических мероприятий на территории Российской Федерации по социально-экологичес-
кой защите населения. Главная и конечная цель создания атласа - способствовать осуществлению объективной оценки медико-географической ситуации по комплексу природно-очаговых болезней, ее контролю и научно обоснованной реакции органов здравоохранения в случае возникновения чрезвычайных ситуаций.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Вершинский Б.В. Картографирование природно-очаговых болезней в связи с изучением их географии в СССР// Медицинская география. Итоги. Перспективы.- Иркутск, 1964. - С. 62-98.
2. Котова Т.В., Малхазова С.М., Орлов Д.С., Шар-това Н.В. Атлас природноочаговых болезней. Картографическое исследование для территории России // Известия РГО. - 2012. - Т. 144, вып. 1. - С. 16-26.
3. Малхазова С.М. Медико-географическое картографирование: современное состояние и перспективы
развития// Вопросы географии. - Сб. 134: Актуальная биогеография. - М.: Издательский дом «Кодекс». 2012.
- С. 110-132.
4. Малхазова С.М., Котова Т.В., Миронова В.А., Шартова Н.В, Рябова Н.В. Медико-географический атлас России «Природноочаговые болезни»: концепция и первые результаты // Вестник Московского ун-та. Серия 5. География. - 2011. - № 4. - С. 16-23.
5. Тикунов В.С. Моделирование в картографии.
- М.: Изд-во Моск. ун-та, 1997. - 405 с.
Малхазова Светлана Михайловна - д-р геогр. наук, профессор, зав. кафедрой биогеографии географического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова.
Миронова Варвара Андреевна - канд. геогр. наук, старший научный сотрудник кафедры биогеографии географического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова.
Котова татьяна Викторовна - канд. геогр. наук, ведущий научный сотрудник лаборатории комплексного картографирования географического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова.
Шартова наталья Витальевна - канд. геогр. наук, научный сотрудник кафедры геохимии ландшафтов и географии почв географического факультета МГУ имени М.В. Ломоносова.
орлов дмитрий Сергеевич - научный сотрудник кафедры биогеографии географического факультета МГУ имени М.В.Ломоносова.
© Коллектив авторов, 2014 Статья поступила в редакцию 26 сентября 2014 г.
УДК 616.993-07 (574)
ДИАГНОСТИКА РИККЕТСИОЗОВ В КАЗАХСТАНЕ
Г.М. Омашева
Комитет Республики Казахстан по защите прав потребителей Научно-практический центр санитарно-эпидемиологической экспертизы и мониторинга Республика Казахстан, г. Алматы, ул. Айтеке би, 67. Тел. +77272788148
Проведенные научные исследования подтверждают существование природного очага риккетсио-зов в окружающей среде. Дальнейшее изучение биохимических, генетических и иммунобиологических характеристик этого возбудителя даст возможность для Казахстана выявить патогенные виды риккетсий для человека.
Ключевые слова: риккетсиозы, Казахстан, диагностика.
Эпидемиология, экология, специфическая диагностика, профилактика
т
RIKKETSIAL DECEASES DIAGNOSTICS IN KAZAKHSTAN Omasheva G.M.
Committee of the Republic of Kazakhstan on Consumer Protection Scientific and Practical Center of Epidemiological Inspection and monitoring
Research has confirmed the existence of a natural focus of rickettsial diseases in the environment. Further study of biochemical, genetic and immunobiological characteristics of this agent will allow Kazakhstan to identify species of rickettsiae pathogenic to humans. Keywords: rickettsial diseases, Kazakhstan, diagnostics.
В инфекционной патологии основное значение имеют риккетсии группы сыпного тифа (R. prowazekii - возбудитель сыпного тифа и R. typhi - возбудитель крысиного сыпного тифа) и группы клещевых пятнистых лихорадок (КПЛ)
- R. rickettsii - возбудитель пятнистой лихорадки Скалистых гор (в Америке), R. conorii - возбудитель марсельской лихорадки (преимущественно в Средиземноморском регионе, а также в бассейнах Черного и Каспийского морей), R. sibirica
- возбудитель клещевого риккетсиоза или клещевого сыпного тифа (Северная и Центральная Азия, включая регионы юга Сибири и Дальнего Востока), R. akari - возбудитель осповидного (вези-кулезного) риккетсиоза, R. australis - возбудитель австралийского риккетсиоза, R. japonica - возбудитель японской клещевой пятнистой лихорадки.
Согласно исследованиям по изучению видов риккетсий на территориях Казахстана в иксодо-вых клещах российскими учеными выявлены: «классические» патогены человека R. sibirica и возбудитель астраханской пятнистой лихорадки R. conorii subsp. caspiensis; R. slovaca, R. aeschlimannii, отнесенные к «новым» патогенам человека, и риккетсии с неизученной па-тогенностью для человека, к которым относятся: Rickettsia raoultii (генотипы RpA4, DnS14 и DnS28), «Candidatus Rickettsia tarasevichiae».
Методы лабораторных исследований. Применение «золотого стандарта» идентификации причины инфекционного заболевания, а именно выделение чистой культуры возбудителя, в риккетсиологии является сложным и не всегда достижимым. Другие способы установления этиологического диагноза в риккетсиологии также не всегда достоверны. Серологический метод не является достаточно точным, поскольку для риккетсий характерны множественные и выраженные перекрестные серологические реакции, как между собой, так и с совершенно неродственными микроорганизмами. Клинико-лабораторная картина заболевания зачастую вариабельна и не имеет выраженных опознавательных критериев для каждого конкретного риккетсиоза. Таким образом, амплификация генов риккетсий в материалах из различных тка-
ней и сред организма человека с последующим секвенированием ампликонов для видовой идентификации оказалась ценным методом установления диагноза в риккетсиологии. Доказательство этиологической причины риккетсиозов всегда вызывало значительные трудности, прежде всего из-за сложностей в выделении чистой культуры возбудителя и перекрестных серологических реакций. В последние десятилетия развитие новых методов выделения микроорганизмов, а также молекулярно-биологических методов, привело к описанию многих новых заболеваний, вызываемых риккетсиями.
Как известно, морфологически риккетсии практически не отличаются друг от друга, а исследование человеческих сывороток с растворимым антигеном имеют выраженный перекрест. Поэтому исследование сывороток больных клещевым риккетсиозом людей с антигеном любой риккетсии потенциально способно дать положительный результат. Следовательно, серологические реакции являются группоспецифическими, с их помощью очень сложно провести идентификацию до вида риккетсии, вызвавшей заболевание. А методика ПЦР может обладать различной специфичностью. Во многих случаях для разработки реакции используются маловариабельные гены, которые могут присутствовать у многих микроорганизмов. В таких случаях для полной идентификации полученного ампликона прибегают к определению его нуклеотидной последовательности путем его секвенирования.
В практической жизни диагностика рикке-тсиозов в Казахстане производится на определенные только виды. Используя серологический метод, для выявления антител в крови проводят, РПГА на сыпной тиф, РСК - для определения клещевого сыпного тифа (Сибирика), эпидемического сыпного тифа и болезни Брилля (Про-вачека). Методом иммуноферментного анализа выявляются иммуноглобулины класса М и G к возбудителям иксодовых клещевых боррелио-зов. Методом ПЦР выявляют возбудителей лихорадки Ку и клещевого боррелиоза.
В 2013 году на риккетсиозы (лихорадка Ку, клещевой сыпной тиф, крысиный сыпной тиф,
эпидемический сыпной тиф) серологическим методом по республике были исследованы 4818 проб сывороток крови от людей, антитела выявлены в 38 образцах или 0,8 %. Обнаружены антитела у подозрительных на риккетсиозы лиц в Жамбыл-ской - 0,1 %, Кызылординской - 3,5 %, Павлодарской - 28,1 % и Северо-Казахстанской - 5,7 % областях и в г.Астане - 0,5 %.
Из объектов внешней среды на риккетсиозы исследовано 8822 проб, из них 72 пробы с положительным результатом или 0,8 %. Инфицирован-ность клещей составила - 0,4 %, грызунов - 1,1 %. При исследовании клещей положительные находки были отмечены в Восточно-Казахстанской - 0,1 %, Жамбылской - 2,7 %, Северо-Казахстанской - 0,9 % областях. В Алматинской области инфицированность риккетсиями грызунов составила 4 %.
Генетическим методом исследованы образцы клещей (177) в г. Астана без положительных результатов.
Используемая программа. В 2012-2013 годы специалисты нашего учреждения участвовали в научном проекте по изучению трансмиссивных инфекций, переносимых клещами. Казахстанские специалисты референс-лабора-тории особо опасных и вновь возникающих инфекций получили направление и большой опыт работы совместно с американскими и английскими коллабораторами, участвовали во многих международных тренингах. Цель этого проекта было исследование в области эпидемиологии и эпизоотологии вирусных заболеваний и риккет-сиозов в Казахстане. Для исследования использовались как российские, так и американские реагенты. Изучались источник и механизм передачи возбудителя инфекции, циркулирующей в Республике Казахстан.
Цель. Одна из основных целей научного проекта была направлена по исследованию метода ПЦР для определения родовой принадлежности
иксодовых клещей и носительство на риккетсии. Используя генетические методы провести идентификацию клещей для определения разновидности риккетсий в окружающей среде.
Методы. В рамках совместных биологических исследований участники проекта получили обмен опыта по молекулярной биологии, изучая генотипирование по идентификации риккетсиозных заболеваний методом мульти-локусного секвенирования. Изучались генные фрагменты от клещей и риккетсий для определения их идентичности. Протоколы секвениро-вания включали в себя проведение качественной и количественной ПЦР, получение ПЦР продукта (ампликонов), секвенирование ДНК от этих ампликонов, анализ данных, используя программу BLAST - поиск и сравнение. На основании полученных результатов делались выводы и заключения по идентичности видов риккетсий и клещей.
Данный проект дал только начало совместному исследованию по изучению циркуляции возбудителей вирусных инфекций, риккетсий в окружающей среде.
Результаты. Более 2 тысяч клещей исследовались на инфицированность риккетси-ями методом полимеразной цепной реакцией в режиме реального времени. Всего было исследовано 221 проб суспензий иксодовых клещей (D. marginatus, D. pictus, D. daghestanicus, I. persulcatus), которые были собраны в Восточно-Казахстанской, Жамбылской и Павлодарской областях Казахстана. Удельный вес положительных анализов составил 45,2 %.
Обсуждение. В научных исследованиях при изучении риккетсий в окружающей среде были использованы зарубежные реагенты. Проведенные анализы доказали, что инфицирован-ность иксодовых клещей на территории Казахстана высокая и предстоит дальнейшее изучение по определению разновидности риккетсий.
Омашева Гульнар Магалияевна - заведующая референс-лабораторией особо опасных и вновь возникающих инфекций РГКП «Научно-практический центр санитарно-эпидемиологической экспертизы и мониторинга» Агентства Республики Казахстан по защите прав потребителей
© Г.М. Омашева, 2014 Статья поступила в редакцию 14 сентября 2014 г.