CC BY
198
2017, Т. 19, Специальный выпуск 2017, Vol. 19, Special Issue
Иммунология репродукции Immunology of reproduction
Установлено, что уровень мелатонина в сыворотке крови увеличивается к III триместру беременности (концентрация мелатонина, Ме (Q0 25-U0 75), пг/мл: небеременные - 21,37 (18,69; 38,47), Штриместр - 48,59 (42,41; 135,85); p < 0,05). Оценка уровня экспрессии мелатонино-вого рецептора, МТ1, не выявила различий в группах беременных и небеременных женщин, однако показала достоверное снижение процента RORa в ходе беременности (процент CD4+RORa+ клеток: небеременные — 1,03 (0,50; 1,58); I триместр — 0,94 (0,76; 1,35); III триместр — 0,50 (0,44; 0,78), p < 0,05 в сопоставлении с беременными I триместра). Одновременно в ходе гестации изменялось соотношение уровня и активности Th17/Treg, что подтверждалось изменением баланса как самих клеток (CD4+RORyt+/ CD4+FoxP3+), так и их продуктов, IL-17A/TGF-ß в периферической крови. Анализ роли эндогенного мелатонина в контроле дифференцировки Th17 и Treg in vitro в ответ на поликлональную активацию у небеременных женщин выявил позитивное действие гормона на соотношение Th17/ Treg, опосредованное сигналами с мембранных рецепторов для гормона (отношение CD4+RORyt+/CD4+FoxP3+T-клеток: активированная культура — 3,76 (2,50; 4,57); активированная культура на фоне блокады МТ1/МТ2 — 1,84 (1,67; 3,55), p < 0,05). Для беременных показано участие эндогенного мелатонина непосредственно в активации CD4+RORyt+ (процент CD4+RORyt+ клеток в активированной культуре: небеременные — 2,48 (2,10; 2,95); I триместр — 1,68 (1,36; 3,66); III триместр — 2,66 (2,20; 3,10); в активированной культуре на фоне блокады МТ1/МТ2: небеременные — 1,47 (1,16; 1,85), p < 0,05; I триместр — 1,32 (0,92; 1,86), p < 0,05; III триместр — 1,79 (1,31; 2,20), p < 0,05) и CD4+FoxP3+Т-клеток (процент CD4+FoxP3+ клеток в активированной культуре: I триместр — 0,24 (0,21; 0,34); III триместр — 0,45 (0,35; 0,57); в активированной культуре на фоне блокады МТ1/МТ2: I триместр — 0,18 (0,12; 0,25), p < 0,05; III триместр — 0,34 (0,23; 0,42), p < 0,05). В целом такие же закономерности показаны и для цитокинов в культуральных супернатантах.
Полученные данные указывают на эффективную регуляцию эндогенным мелатонином исследуемых Т-клеточных субпопуляций Treg и Th17 с более выраженным влиянием на последние, и на участие в этом процессе мембранных рецепторов для гормона.
АНАЛИЗ СВЯЗИ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА HLA-G У ЖЕНЩИН С РИСКОМ РАННИХ САМОПРОИЗВОЛЬНЫХ ВЫКИДЫШЕЙ
Гордеева Л.А.1, Воронина Е.Н.2, Оскорбина О.С.1, Оленникова Р.В.3, Нерсесян С.Л.3
1ФГБУН «Федеральный исследовательский центр угля и углехимии» РАН (Институт экологии человека СО РАН), Кемерово, Россия
2 ФГБУН «Институт химической биологии
и фундаментальной медицины» СО РАН, Новосибирск, Россия
3 ГАУЗ «Кемеровская областная клиническая больница», Кемерово, Россия
При патологии беременности (невынашивание, пре-эклампсия) наблюдается снижение уровня экспрессии неклассических антигенов Главного комплекса гистосов-местимости человека — HLA-G в плаценте и в материнском кровотоке, это приводит к активации цитотокси-ческих эффектов иммунной системы матери. Полимор-
физм в гене HLA-G оказывает влияние на биологические функции молекул HLA-G, связанные с особенностями продукции их изоформ, взаимодействия с клеточными рецепторами и модуляции иммунного ответа.
Цель. Изучить ассоциации полиморфизма в кодирующей (Thr31Ser, rs41551813; Leu110Ile, rs12722477; 1597 АС, rs41557518) и в З'-нетранслируемой (3'-UTR, 14 bp Ins/ Del, rs66554220) области гена HLA-G у женщин с риском развития ранних самопроизвольных выкидышей.
Материалы и методы. Исследуемые выборки составили женщины с двумя самопроизвольными выкидышами (n = 75, группа I) и тремя и более выкидышами (n = 37, группа II) до 12 недель беременности. Основным условием включения таких женщин в исследование было отсутствие мед. абортов, внематочных беременностей и родов. Средний возраст женщин был 30,0±4,7 (SD) лет. Группу сравнения (контроль) составили образцы ДНК 233 репродуктив-но здоровых женщин, имеющих или вынашивающих ребенка без врожденных аномалий развития и не имеющих самопроизвольных выкидышей в анамнезе. Средний возраст женщин в группе был 28,9±4,3 (SD) лет. Типирование HLA-G Thr31Ser (rs41551813) в экзоне 2, HLA-G Leu110Ile (rs12722477) и HLA-G 1597 АС (rs41557518) в экзоне 3 проводили методом асимметричной ПЦР в режиме реального времени. Полиморфизм гена HLA-G (14 bp Ins/Del, rs66554220) определяли с помощью электрофоретического разделения продуктов амплификации. Статистический анализ полученных результатов проводился с помощью пакета статистических программ GenABEL, Genetics программного обеспечения R-project (www.r-project.org). Соответствие частот генотипов гена HLA-G равновесию Хар-ди-Вайнберга оценивали с помощью критерия х2 Пирсона. Нулевую гипотезу отвергали при P < 0,05. Отношение шансов (OR) и его доверительный интервал (95%CI) оценивали с помощью логистического регрессионного анализа для аддитивной модели наследования признака.
Результаты. Распределение частот генотипов rs41551813, rs12722477, rs41557518 и rs66554220 в контроле и среди женщин групп I и II соответствовало равновесию Харди—Вайнберга (P > 0,05). Выявлена ассоциация полиморфизма Leu110Ile (rs12722477) гена HLA-G у женщин с двумя выкидышами (аллель 110Ile: OR = 3,04 [1,71-5,39]; Рс = 0,001). Аллель Ins (14 bp Ins/Del, rs66554220) в два раза увеличивал у женщин риск трех и более выкидышей (OR = 2,15 [1,28-3,62]; Рс = 0,03). Статистически значимые ассоциации полиморфизмов Thr31Ser (rs41551813) и 1597 АС (rs41557518) гена HLA-G у женщин с самопроизвольными выкидышами отсутствовали.
Заключение. Полученные нами результаты указывают на то, что полиморфные локусы Leu110Ile (rs12722477) и 14 bp Ins/Del (rs66554220) у женщин могут оказывать влияние на риск развития ранних самопроизвольных выкидышей во время беременности.
ДИАГНОСТИКА РЕЗУС-КОНФЛИКТА И ТАКТИКА ВЕДЕНИЯ БЕРЕМЕННОСТИ
Дударева М.В., Авруцкая В.В.
ФГБУ«Ростовский научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии», Ростов-на-Дону, Россия
Резус-конфликт — иммунологическая несовместимость по резус-фактору крови резус-отрицательной матери и резус-положительного плода, характеризующаяся
Медицинская Иммунология Medical Immunology (Russia)/Meditsinskaya Immunologiya
«Дни иммунологии в СПб 2017» Immunology Days in St. Petersburg 2017
сенсибилизацией материнского организма. Целью наблюдения беременных при резус-иммунизации является: обследование для выявления сенсибилизации, проведение профилактики резус иммунизации, ранняя диагностика гемолитической болезни плода и ее коррекция, а также определение наиболее оптимальных сроков для родоразрешения. При наличии любого титра антител беременность считается резус сенсибилизированной. Если антитела обнаружены впервые, то определяют их класс. Вероятность возникновения гемолитической болезни новорожденного зависит от различных факторов: материнской аллоимунизации, трансплацентарного пассажа IgG антител к плоду, деструкции эритроцитов плода.
В настоящее время нами используется метод для выявления принадлежности IgG антител системы Резус к субклассам IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, так как риск развития гемолиза при гемолитической анемии зависит как от количества IgG и /или комплемента, покрывающих эритроциты, так и от субклассов этих IgG. За период 2012-2015 годы было обследовано 78 беременных с сенсибилизацией по резус-фактору. Проведено определение принадлежности ЯЛ-антител к субклассам IgG. По полученным данным нами сформированы 2 клинические группы. Первую группу составили пациенты, у которых ЯЛ-антитела принадлежали к субклассам IgG1 и IgG3 (п = 63). Вторую группу составили пациенты, у которых ЯЛ-антитела принадлежали к субклассам IgG2 и IgG4 (п = 15). Всем женщинам с резус-сенсибилизацией, имеющим риск развития анемии плода, проводилось допплерометрическое исследование пиковой систолической скорости кровотока в средней мозговой артерии (ПСС СМА) с учетом показателей для соответствующего срока беременности. Ретроспективно установлено, что у пациенток второй группы признаков анемизации плода во время беременности не обнаружено. У 21 пациентки первой группы по результатам допплерометрии установлено превышение ПСС СМА более 1,5 МоМ, которое потребовало проведение внутриутробной внутрисосудистой гемотрансфузии. 15 пациенток первой группы родоразрешены в сроке 3435 недель гестации, по состоянию плода. В послеродовом периоде 47 новорожденным от матерей первой группы потребовалось заменное переливание крови.
Таким образом, у пациенток с принадлежностью ЯЛ-антител к субклассам IgG2 и IgG4 не наблюдалось гемолиза эритроцитов, т.к. данные иммуноглобулины не способны активировать комплемент, не вызывают разрушения эритроцитов и не вызывают гемолитическую болезнь новорожденных.
УРОВЕНЬ ПРО- И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ У ЖЕНЩИН С ПРЕЭКЛАМПСИЕЙ
Ешимбетова Г.З., Култаева Р.Ш.
Ташкентский институт усовершенствования врачей Министерства здравоохранения РУз, Такент, Узбекистан
Преэклампсия (ПЭ) является актуальной проблемой современного акушерства и занимает ведущее место в структуре материнской и перинатальной заболеваемости и смертности. По данным различных авторов, частота развития преэклампсии у беременных в нашей стране колеблется от 8 до 20% и не имеет тенденции к снижению. Показано, что патогенез преэклампсии укладывается в синдром системного воспалительного от-
вета с нарушениями в иммунной системе и дисбалансом цитокиновой регуляции. Целью исследования явилось изучение провоспалительных (IL-1ß, IL-8) и противовоспалительных (IL-4) цитокинов у женщин с преэкламп-сией различной степени тяжести. Обследовано 69 беременных женщин с ПЭ в возрасте от 24 до 36 лет. Из них у 47 —легкая степень ПЭ и у 22 женщин- тяжелая степень. 23 женщин с физиологически протекающей беременностью составили контрольную группу. Изучали уровни про- и противовоспалительных цитокинов (IL-1ß, IL-8 и IL-4) в сыворотке крови методом ИФА. У беременных с ПЭ легкой степени при поступлении в стационар в сыворотке крови выявлено повышение уровня IL-1ß в 1,3 раза (244,6±19,7 пкг/мл, против 185,3±18,9 пкг/мл, p < 0,05), IL-8 - в 7 раза (138,4±9,7 пкг/мл, против 19,5± 1,7 пкг/мл, p < 0,001) и снижение уровня IL-4 в 2 раза (67,5±6,8 пкг/мл против 140,6±12,6 пкг/мл, p < 0,01). А у беременных женщин с ПЭ тяжелой степени эти изменения синтеза цитокинов были более выраженными (IL-1ß - 280,5±21,3 пкг/мл, IL-8 - 224,7±17,2 пкг/мл, IL-4 - 33,2±2,3 пкг/мл) (p < 0,01-0,001).
Таким образом, высокий уровень продукции провос-палительных цитокинов при осложненной беременности свидетельствует об активации гуморального фактора иммунной системы, так как высвобождение иммунорегу-ляторных факторов, участвующих в патогенезе развития воспалительных реакций (IL-1ß, IL-8), характеризует прежде всего функциональное состояние мононуклеар-ных фагоцитов. Результаты проведенных исследований позволяют заключить, что сохранение динамического равновесия в системе цитокинов играет важную роль для нормального развития беременности. Процесс изменения уровня цитокинов при неосложненной беременности является важным звеном адаптационной реакции организма беременной женщины. Цитокины Th2-ram способствуют нормальной дифференцировке трофобла-ста и его полноценной инвазии и, следовательно, опосредуют пролонгирование физиологической беременности. Переключение же на синтез цитокинов ТЫ-типа и их усиленная продукция приводят к нарушению дифферен-цировки и инвазии трофобласта с развитием патологии беременности.
КОРРЕКЦИЯ ИММУННЫХ НАРУШЕНИЙ НА СИСТЕМНОМ И ЛОКАЛЬНОМ УРОВНЕ ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ЭНДОМЕТРИТЕ
Конопля А.А., Гавриш С.А., Быстрова Н.А.
Курский государственный медицинский университет, Курск, Россия
Введение. При хронических воспалительных заболеваниях органов женской половой сферы основным пусковым механизмом в развитии иммунного воспаления является микробная инвазия. При этом важное место занимает глубокое изучение состояния функционирования клеточного и гуморального факторов иммунитета, т.к. характер течения и завершения воспалительных заболеваний женских половых органов напрямую зависит от состояния иммуногенеза
Цель и задачи. Установить эффективность фармакологической коррекции иммунных нарушений на системном и местном уровне при хроническом эндометрите (ХЭ).
Материалы и методы. Под наблюдением в гинекологическом отделении Курского городского родильного дома
