CC BY
3
-дефицита, которое выражалось в сохранении изу-нных показателей к концу наблюдения по сравнению анными, полученными до начала периода УФ-дефицита. ойкость капилляров кожи у детей 5 и 9 лет статисти-скн значимо (Р<0,05) повышалась уже к середине фиода и оставалась на этом уровне к концу периода Ф-дефицита, фагоцитарная активность лейкоцитов крови хранялась на одном уровне от начала к середине и нцу периода УФ-дефицита, пластический тонус дву-авой мышцы правого плеча сохранялся к середине повышался (Я<0,001) к концу периода УФ-дефицита сравнению с данными до начала этого периода.-Следовательно, дети 2, 5 и 9 лет одинаково поло-ительно реагируют на дополнительные и, по-видимому, екватные их реактивности дозы облучения от искус-венных источников УФ-радиации при систематическом рнменении их в течение всего периода УФ-дефицита. Сравнивая изменения показателей защитно-приспо-5нтельных реакций у детей 2, 5 и 9 лет основной и онтрольной групп за первую половину периода УФ-де-
фицита, можно отметить статистически значимые (Р< <0,001) различия у детей разного возраста (см. таблицу). Приведенные данные свидетельствуют о том, что если в основной группе у детей 2, 5 и 9 лет под влиянием малых доз УФ-облучения в первую половину периода УФ-дефицита защитно-приспособительные реакции сохраняются на более высоком уровне, то у детей контрольной группы на данном этапе периода они повышались. Меж-групповые различия изученных показателей защитно-приспособительных реакций к концу периода УФ-дефицита еще больше возросли.
Выводы. 1. Профилактическое облучение детей 2, 5 и 9 лет УФ-радиацией в дозе 70 мэр/ч на 1 ма, проведенное непрерывно в течение всего периода УФ-дефицита, оказало весьма выраженное биологическое действие на организм и сохранило показатели защитно-приспособительных реакций в этот период на уровне оптимальных, имевшихся до начала периода УФ-дефи-цнта.
Поступил» 4/ХП 1979 г.
ДК 576.862.215.095.18:832.95
Канд. мед. наук В. Г. Кузнецов
ДЕЙСТВИЕ НЕКОТОРЫХ ПЕСТИЦИДОВ НА ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗНЫЕ МИКРОБЫ (YERSINIA PSEUD3TUBERCULOSIS)
Широкое применение в сельском хозяйстве различных естицидов (гербицидов, инсектицидов, зооцидов и дру-их ядохимикатов) в настоящее время выросло в серьез-ую и актуальную экологическую проблему. Она вклю-ает охрану как окружающей среды, так и внутренней реды организма человека. Перед нами была поставлена адача изучить действие пестицидов на псевдотуберкулез-1ые микробы. Эти микроорганизмы обитают в почве В. Г. Кузнецов и соавт.; Barre и соавт.), на овощах В. А. Знаменский; В. Г. Кузнецов и соавт.; В. Г. Кузнецов; Л. П. Рожкова), в естественных водоемах (О. П. Лазарев и соавт.; Н. С. Гайдукова и Н. Г. Суч-кова). Поэтому имеются все основания полагать, что Y. psendotuberculosis уже испытали и продолжают испытывать на себе воздействие различных пестицидов еще невыясненного характера.
Выборочно изучено действие 15 различных пестицидов (гранозана, цинеба, цирама, тиазона, карбофоса, хлорофоса, дихлорофоса, тнурама, линурона, ДДТ, ГХЦГ, дилдрина, севина, ратиндана, 2,4-Д натриевой соли) на культуры 16 местных штаммов псевдотуберкулезных микробов I, II, III и IV сероваров (по Талю), выделенных из различных источников. Пестициды вводили в питательный бульон в конечных концентрациях 10, 25, 50, 100, 200 и 400 мкг на 1 мл среды. Затем с соблюдением стерильности разливали среду по 5 мл по пробиркам. Водоне-растворимые вещества предварительно растворяли в спирте или в хлороформе, эфире, пиридине, а затем в спирте. В опытах и контроле (культур и растворителей) в каждую пробирку с заданной концентрацией пестицидов (растворителей) вносили по 50—100 млн. микробных клеток суточных агаровых культур, выращенных при 20— 22 °С. Эти субкультуры выдерживали в течение 2 сут при той же температуре и проводили первый высев на тонкослойный питательный агар. Затем их оставляли еще на 5—6 дней при 22 °С (или 4 С) и повторно высевали на такой же агар. Эта методика позволяла одновременно учитывать действие пестицидов как на выживаемость и рост псевдотуберкулезных микробов, так и на клеточный состав опытных и контрольных культур по особенностям свечения колоний в косопроходящем свете (по Т. Н. Варваше-вич). Исследовано более 1600 субкультур псевдотуберкулезных микробов, каждая при 2 сроках контроля.
Установлено, что отдельные пестициды давали бактерицидный эффект, другие действовали бактериостатнчески или не влияли отрицательно на размножение псевдотуберкулезных культур (см. таблицу). Наибольшее, ло неодинаковое бактерицидное действие на Y. pseudotuberculosis оказывали гранозан и цинеб. В концентрации цинеба 25 мкг/мл и выше уже в первые 2 сут погибли все (за исключением одной) субкультуры псевдотуберкулезных микробов. Однако все они дали хороший рост при концентрации вещества 10 мкг/мл и через неделю. Отношение к гранозану выразилось в индивидуальной устойчивости отдельных микробных клеток разных субкультур к действию различных концентраций пестицида в течение первых 2 сут. Через 1 нед единичные жизнеспособные клетки сохранились лишь в 1 субкультуре I серовара (концентрация гранозана 400 мкг/мл). Тиазон и карбофос оказывали возрастающее бактерицидное действие на псевдотуберкулезные культуры, начиная с концентраций 100 и 200 мкг/мл соответственно, а ТМТД — на субкультуры отдельных штаммов только в концентрации 400 мкг/мл. ДДВФ задерживал рост культур в бульоне во всех концентрациях в 1-е сутки после посева, а линурон действовал бактериостатнчески на все субкультуры в течение срока наблюдения лишь в концентрации 400 мкг/мл. Другие пестициды и применявшиеся растворители не влияли на размножение псевдотуберкулезных микробов.
Исследования при косом освещении показали, что большинство субкультур 16 изученных штаммов Y. pseudotuberculosis под действием пестицидов расслаиваются на разноцветно светящиеся колонии. Особенно резко учащается диссоциация микробных клеток из S-формы в R-форму. У псевдотуберкулезных микробов — это ложная R-форма, проявление фенотипической изменчивости, она легко реверсирует в S-форму при 2—8 °С ("I. Н. Вар-вашевич и соавт.). В косом свете колонии S-формы были медно-красные, красные или красные с фиолетовым ободком по верхнему краю колонии, нижняя часть колонии — зелено-изумрудного цвета. Соотношения тонов и интенсивность свечения варьировали. Эти колонии относились к третьему варианту Y. pseudotuberculosis, типичному для «диких» штаммов (Т. Н. Варвашсвич и соавт.). Колонии ложной R-формы имели однотонный бронзовый, розово-бронзовый или золотистый цвет с ровными или
Характер действия некоторых пестицидов на жизнеспособность псевдотуберкулезных микробов
Действие па псевдоту-беркулеэные микробы
Пестицид
После 2 сут
EDI0. мкг/мл •
рост"
После 7 сут
EDt0. мкг/мл
рост
Бактерицидное: выраженное
умеренное
слабое
Гранозан Цинеб Тиазон Карбофос Тиурам (ТМТД)
18,4 18,2 169,9 253,8 более 400
Единичные клетки
» а
Слабый Умеренный Хороший
Менее 10 17,5 163,5 194,1 Более 400
Единичные клетки » »
Умеренный »
Хороший
Бактериостатическое
Дихлорофос (ДДВФ) Линурон
Задержка в 1-е сутки роста всех
культур То же при 400 мкг/мл Хороший рост остальных культур
Рост хороший
Единичные клетки при 400 мкг/мл Хороший рост остальных культур
Отсутствие отрицательного
ДДТ, ГХЦГ, 2,4-Д, дилдрин, хлорофос, севин, цирам, ратин-дан
Хороший и обильный рост
Хороший и обильный_ рост
* Концентрация, при которой гибнет 50 % культур. ** Рост культур при концентрации выше ЕЭ^,.
«рваными» краями. После 2 сут воздействия наименьший эффект R-диссоциации вызывал ТМТД (у 9,4±3,0% субкультур), наибольший — ГХЦГ (у 51,0±5,1%), а также цинеб в концентрации 10 мкг/мл (у 62,5± 12,5%). Через 7 сут наблюдались иные результаты: статистически значимое и резкое увеличение числа субкультур с R-формой вызывали ДДТ (/=5,42, Р<0,001), тиазон (/=7,33, /5<0,001), значительное увеличение — цирам (/=2,403, Р<0,05). Некоторое повышение частоты появления микробов в R-форме в субкультурах от севина, ТМТД, 2,4-Д, ДДВФ, ГХЦГ, дилдрина, цинеба (10 мкг/мл у 87,5± ±8,5%) или уменьшение их частоты от хлорофоса, лину-рона, карбофоса и ратиндана было статистически недостоверно. По сравнению с концентрациями 10—100 мкг/мл при концентрациях пестицидов 200 и 400 мкг/мл, как правило, достоверно уменьшалась частота R-форм в субкультурах: после 2 сут взаимодействия с севином (/= = 2,47, Я<0,05), хлорофосом (/=2,69, Р<0,01), 2,4-Д (/=2,11, Р<0,05), карбофосом (/=2,16, Р<0,05), ратин-даном (/=2,946, Р<С,01), через 7 сут с ДДТ (/=2,940, Р<0,01), ГХЦГ (/=2,883, Р<0,01), при обоих сроках с тиазоном (/=9,081, Р<0,001), ДДВФ (/=7,928, /= = 6,143, Р<0,001), линуроном (/=2,263, Р<0,05; /= = 2,915, Р<0,01). Увеличение концентрации цирама, ТМТД и дилдрина не вызывало достоверного эффекта. Лишь ДДТ с увеличением концентрации и только в первые 2 сут вызвал некоторое учащение количества субкультур с R-формой. Максимальное количество культур с этой формой наблюдалось при концентрации пестицидов 10—100 мкг/мл.
В зависимости от особенностей самих псевдотуберкулезных микробов образованием R-формы реагировали на 2 пестицида (ТМТД и хлорофос) — 1 (II), на 6—1, на 7—1, на 8—3 (все 1), на 9—2 (I и III), на 10—1 (I), на 12 — 2(1 и III), на 13—1 (IV), на 15—1 штамм (III серовара). В большинстве субкультур в R-форму диссоциировали единичные или немногие микробные клетки. Под воздействием тиазона, цинеба (10 мкг/мл), ГХЦГ, ДДТ их было множество в субкультурах 9—10 штаммов. В отдельных субкультурах появлялись единичные клетки Y. pseudotuberculosis, формировавшие колонии ровного зеленого, голубого и сиреневого цвета: под действием ДДТ — у 5, цирама — у 1, дилдрина — у 1, цинеба — у 1, тиазона — у 3, севина — у 5, хлорофоса — у 6, ДДВФ — у 12 штаммов. Появление таких разноцветный колоний не носило закономерного характера, при
4—5 СС все они реверсировали в типичные медно-красны или красные колонии (3-й вариант по Т. Н. Варвашевич) Лишь в отдельных случаях из сиреневых колоний выраста ли единичные колонии R-формы. В контроле культу и растворителей R-диссоцнацня появлялась нерегулярно у единичных клеток и преимущественно в 7-суточны субкультурах. Согласно выборочному контролю, по куль-туральным, биохимическим, серологическим и биологическим характеристикам S- и R-форма отнесены к типичным. Культуры R-формы микробов были авнрулентными для белых мышей даже в дозе 1 млрд. микробных клеток подкожно, при 4—5 °С они реверсировали в S-форму при ближайших пересевах.
Представленные данные свидетельствуют о том. что при воздействии в течение 2—7 сут пестициды в концентрации 10—400 мкг/мл влияют на размножение, выживаемость и фенотипическую изменчивость (появлением R-формы микробов) многих штаммов Y. pseudotuberculosis. Эта изменчивость носит временный адаптивный характер и проявляется в среде с высокими концентрациями пестицидов, многие из которых (тиазон, севин и др.) обладают мутагенными свойствами (А. П. Шицкова и Р. А. Рязанова). Снятие действия пестицидов ведет к реверсии микробов в исходные варианты. Пестициды испытаны нами в концентрациях, превосходящих применяющиеся в сельском хозяйстве. Однако стойкость многих из них (ДДТ, ГХЦГ, гранозана) не исключает их накопления во внешней среде. Отдельные пестициды сняты с производства или используются с ограничениями (дилдрин, ДДТ, гранозан и др.). При этом сохраняют свое принципиальное значение два обстоятельсва: за период применения во внешней среде накопились значительные количества пестицидов, в частности ДДТ, и-их действие на окружающую природу продолжается; растущие потребности народного хозяйства не уменьшают, а наоборот, расширяют поиски и диапазон производства, применения и, следовательно, воздействия на окружающую среду все новых пестицидов, характер действия которых на патогенные микроорганизмы не контролируется. Если справедлива гипотеза о том, что ложная R-форма псевдотуберкулезных микробов является наиболее приспособленной к сапрофнтическому существованию вне животного организма в теплый период года (Г. П. Сомов), то напрашивается парадоксальный вывод: повсеместному процветанию псевдотуберкулеза челови<а дал толчок, активно способствовал и способствует сам человек. Действительно, применение пестици-
сельском хозяйстве помогает переходу Y. pseudo-ulosis в ложную R-форму и, следовательно, лучшему иванию возбудителя в открытой природе. Заметим том, что хронологически распространение псевдо-кулезной инфекции человека совпадает со все воз-"щим использованием пестицидов. Накапливая на и храня крупные запасы овощей, картофеля, корне-в при низких температурах, человек создает опти-ые условия не только для развития и приумножения яций Y. pseudotuberculosis (в хранилищах), но и еверсин его сапрофитической и безовидной R-формы огеннын S-вариант.
м представляется целесообразным и своевременным нить гигиеническую и токсикологическую оценку новых пестицидов (и других ядохимикатов, попадаю-во внешнюю среду) микробиологической оценкой пользованием патогенных видов микроорганизмов чных систематических и экологических групп, оды. 1. В экспериментальных условиях установ-различное по характеру действие некоторых пести-на культуры 16 приморских штаммов Y. pseudo-culosis: бактерицидное, бактериостатическое, вызы-ее фенотипическую изменчивость (диссоциацию в рму).
Наиболее выраженное бактерицидное действие ока-т гранозан (при разных концентрациях) и цинеб концентрации 25 мкг/мл и выше). Пестициды, способствующие диссоциации псевдо-кулезных микробов в R-форму,— тиазон, ДДТ, Г, цинеб (10 мкг/мл) могут играть роль экологиче-факторов, благоприятных для существования воз-теля во внешней среде.
ТЕРАТУРА. Варвашевич Т. Н. Изучение из-нчнвости псевдотуберкулезного микроба (Возбудите-
ля дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки). Автореф. дис. канд. Алма-Ата, 1978.
Варвашевич Т. Н., Дзадзиева М . Ф., Сомов Г. П. — Ж. мнкробиол., 1976, № 1, с. 115—118.
Варвашевич Т. Н., Дзадзиева М. Ф., Сомов Г. П.— Там же, 1977, № 9, с. 141—142.
Гайдукова Н. С., Сучкова Н. Г. — В кн.: Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1975, вып. 1(41), с. 144— 145.
Знаменский В. А. — В кн.: Природноочаговые болезни Урала, Сибири и Дальнего Востока. Свердловск, 1969, с. 183—184.
Кузнецов В. Г. — Гиг. и сан., 1978, № 7, с. 38—41.
Кузнецов В. Г., Раковский В. И., Гребенщиков Л. А. и др. — Ж. микробиол., 1975, № 10, с. 34—38.
Кузнецов В. Г., Раковский В. И., Валекжанин В. С. и др. — Там же, 1976, № 7, с. 138—139.
Лазарев О. П., Краснов В. Я., Благовидов О. Р. — В кн.: Проблемы особо опасных инфекций. Саратов, 1969, вып. 3, с. 203—204.
Петровский К. С. — Гиг. и сан., 1978, № 11, с. 43—47.
РожковаЛ. П. Эпидемиология дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки (псевдотуберкулеза человека) на Дальнем Востоке. Автореф. дне. канд. М., 1977.
Сомов Г. П. Дальневосточная скарлатиноподобнаи лихорадка. М., 1979.
Федоров Л. И., Бунин В. Т. — В кн.: Природа Сахалина и здоровье человека. Южно-Сахалинск, 1971, вып. 2, с. 86—87.
Шицкова А.П., Рязанова Р. А. Гигиена и токсикология пестицидов. М., 1975.
Barre N., Louzis С., Treignier M. et al. — С. R. Acad. Sei. (Paris), 1977, v. 284, p. 2297—2300.
Barre N., Bercovier H., Treignier M. et al. — Med. Mal. Infect., 1979, v. 9, p. 34—39.
Поступила 24/1V 1980 г.
(14.771:в14.73:831.85
С. М. Гращенко, В. Ф. Дричко, Э. М. Крисюк, Э. П. Лисаченко, Т. М. Поникарова, Д. К. Попов, В. П. Шамов
К НОРМИРОВАНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ ЕСТЕСТВЕННЫХ РАДИОНУКЛИДОВ В ФОСФОРНЫХ УДОБРЕНИЯХ
Ленинградский научно-исследовательский институт радиационной гигиены Министерства здравоохранения РСФСР, Радиевый институт им. В. Г. Хлопина
)дной из задач радиационной гигиены является регла-гация дозовых нагрузок всех известных источников (зирующего излучения. Назрела необходимость уста-1ения допустимого содержания естественных радио-|вных нуклидов в любой находящейся в сфере хозяйст-юй деятельности человека продукции, которая по аву сырья и особенностям технологии может иметь пшенные примеси радионуклидов. 5 результате хозяйственной деятельности человека юсфере увеличивается неконтролируемый поток естест-|ых радионуклидов (ЕРН) и создается дополнитель-источник облучения всего населения (В. Ф. Дричко оавт.). Один из источников дополнительного облуче-населеиия — фосфорные удобрения, естественная реактивность которых обусловлена присутствием приме-и и ТИ в сырье, поступающем на их производство. :сте с удобрениями ЕРН рассеиваются по всей площа-пахотных земель, что неизбежно приводит к повыше-> концентрации их в почве, растениях, тканях человека ответствующим увеличением доз облучения его тканей называет необходимость проведения радиоэкологиче-х исследований в окультуренных биогеоценозах. Ко-ной целью этих исследований должно быть получение ¡ений, необходимых для обоснования допустимых кон-трацнй ЕРН в удобрениях.
В ФРГ с начала применения фосфорных удобрений концентрации U и Ra в окультуренных почвах возросли на 9 и 6% соответственно, а доза облучения населения — на 5% (И. Мель). В районах интенсивного использования удобрений наблюдается удвоение концентраций в почве U (Menzel) и Th (М. Е. Коновалова и соавт.). При использовании удобрений воздействие ионизирующего излучения от EPH, содержащихся в удобрениях, на население и его определенные контингенты может быть обусловлено за счет увеличения дозы внутреннего облучения вследствие повышения концентрации EPH в продуктах питания растительного и животного происхождения, воде и водных организмах, в результате ингаляции радона и пыли удобрений при их изготовлении, хранении, транспортировке и использовании; кроме того, возможно возрастание дозы внешнего облучения организма при транспортировке, хранении и применении удобрений.
Рассмотрим перечисленные пути воздействия.
Поступление с рационом. Дозу фонового облучения каждого органа или ткани D<j,( можно записать в виде формулы:
% = (1) 1
