CC BY
17
БИОЛОГИЧЕСКИЕ НАУКИ
«НАУКА. ИННОВАЦИИ. ТЕХНОЛОГИИ», №3, 2014
удк 577.861: Э. А. Манвелян [E. A. Manveljan], 615.214/015.45 В. Ю. Сыса [V. Yu. Sysa],
И. П. Кодониди [I. P. Kodonidi], Э. Т. Оганесян [E. T. Oganesyan]
ДЕЙСТВИЕ АМИДОВ
ОРТО-БЕНЗОИЛАМИНОБЕНЗОЙНОЙ
КИСЛОТЫ,
ПРОИЗВОДНЫХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ ХИНАЗОЛИНОНА-4, НА ПОВЕДЕНИЕ САМЦОВ КРЫС В «ОТКРЫТОМ ПОЛЕ»
Action of amides of ortho-benzoylaminobenzoic acid precursors quinazolinone - 4 on the behavior of male rats in the «open field»
При тестировании в «открытом поле» исследован спектр действия (противотревожный, седативный, активирующий эффекты) биологически активных соединений - амидов о-бензоиламинобензойной кислоты, предшественников хиназолинона-4, использованных в дозе 50 мг/кг у самцов крыс.
Ключевые слова: амиды о-бензоиламинобензойной кислоты, предшественники хиназолинона-4; седативное, активирующее и противот-ревожное действие, «открытое поле», самцы.
Range of activity (anxiolytic, sedative, activating effects) of biologically active compounds - amides of ortho-benzoylaminobenzoic acid precursors quinazolinone-4, with administration of a dose 50 mg / kg on male rats was investigated in an open field.
Key words: amides of ortho-benzoylaminobenzoic acid precursors quin-azolinone-4; sedative, activating and antianxiety action, "open field", males.
ВВЕДЕНИЕ
Поиск и создание новых высокоэффективных и безопасных лекарственных средств - приоритетная задача фармации и фармакологии. Исследование спектров фармакологической активности новых синтезированных веществ, оценка зависимости «структура-активность» открывает возможности конструирования новых эффективных препаратов. Варьирование различными гетероциклическими остатками, введенными в структуры предшественников хиназолинона-4, позволяет получить вещества с выраженной психотропной, в том числе, анксиолитичес-кой, антидепрессивной, ноотропной активностью [4, 5, 13, 17].
Выявление спектров активности, степени проявления действия изучаемых субстанций позволяет давать прогноз их дальнейшему использованию. В доклинических исследованиях при скрининге соединений с психотропным эффектом используются разные модельные ситуации, в том числе дискриминационные тесты, а также широко применяется методика «открытого поля» [2, 3, 15].
Цель исследования - изучение спектров поведенческой активности амидов о-бензоиламинобензойной кислоты, производных предшественников хиназолинона-4, у самцов крыс при тестировании в «открытом поле».
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Эксперименты были проведены на белых половозрелых крысах - самцах линии Wistar массой 200-220 г. Оценивали поведение животных в тесте «открытое поле», в котором, согласно классическим представлениям, у животных проявляются ориентировочно-исследовательская, защитно-оборонительная поведенческие реакции [7, 15]. Ориентировочно-исследовательская реакция животных оценивается по горизонтальной и вертикальной двигательной активности, исследованию «норок»; эмоциональный статус оценивают по числу болюсов, наличия и частоты груминга.
В наших экспериментах тестирование животных проводили при электрическом освещении (360 Вт), нормальной температуре, отсутствии посторонних звуков, в фиксированное время. Крысу помещали в центр поля и далее в течение 2-х минут регистрировали: латентный период выхода животного из центрального квадрата (сек), число пересеченных линий, вертикальных стоек, обследованных отверстий («норок»), умываний, дефекаций. По совокупности повышения латентности выхода из центра поля, снижения вертикальной и горизонтальной активности судили о «се-дативном» действии вещества, а при повышении исследовательской активности, снижении частоты груминга и количества фекальных болюсов (вегетативная представленность эмоциональности) - «противотревож-ном» влиянии [7].
Амиды о-бензоиламинобензойной кислоты, производные предшественников хиназолинона-4, - 7 субстанций, синтезированы на кафедре органической химии Пятигорского медико-фармацевтического
института [6]. Вещества (лабораторные шифры: I - PDM2Taz1,3,4; II -ImPDM2Taz-1,3,4; III - PDM3Taz5SH; IV - ImPDM3Taz5SH; V - NsQPhS; VI - NsQPhSD; VII - NsQPhD) в дозе 50 мг/кг, препарат сравнения диазе-пам в дозах 0,1 и 0,5 мг/кг вводили внутрибрюшинно однократно за 30 минут до исследования. Контрольные самцы получали соответственно твин 80 и физиологический раствор (0,4 мл внутрибрюшинно) в аналогичных режимах. Учитывая большую чувствительность к веществам с психотропным влиянием преимущественно в вечернее часы (1, 8-11), каждое тестирование начинали проводить в 18 ч с продолжительностью процедуры изучения поведения для групп крыс 1,0-1,5 ч.
Животные содержались в стандартных условиях вивария. Во время проведения экспериментов полностью соблюдались принципы Хельсинкской Декларации о гуманном обращении с объектами исследования.
По итогам тестирования рассчитывались среднеарифметические значения показателей поведения. Результаты обрабатывали статистически с использованием пакета компьютерных программ «Excel» и «BIOSTAT». Выявление статистически значимых отличий проводили с помощью критериев Стьюдента, Вилкоксона - Манна - Уитни [14].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Опыты показали, что в условиях «открытого поля» при введении соединений IV, V, VI выявляется тенденция к увеличению латен-тности выхода из центра поля по сравнению с контрольными животными, получавшими растворитель (приняты за 100 %). Сдвиг при этом был статистически значим для вещества V (353 %, p < 0,001) (рассчитывали в % по отношению к контрольной группе самцов). На фоне соединений I-III, VII, напротив, наблюдалось ограничение латентного периода выхода крыс из центра поля, при этом достоверное снижение было зарегистрировано на фоне соединений I (73 %, p < 0,05),VII (38 %, p < 0,05) (табл. 1).
Анализ локомоторной активности выявил достоверное увеличение числа вертикальных стоек у самцов, получавших вещество VII (203 %, p < 0,01). Оценка горизонтальной активности животных показала тенденцию к увеличению количества пересеченных линий в «открытом поле» при введении веществ I, VI, VII.
Оценка исследовательского поведения проводилась по изменению числа обследованных отверстий. Сравнительный анализ показал отсут-
Таблица 1. ВЛИЯНИЕ АМИДОВ О-БЕНЗОИЛАМИНОБЕНЗОйНОй КИСЛОТЫ, ПРОИЗВОДНЫХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ ХИНАЗОЛИНОНА-4, НА ПОКАЗАТЕЛИ ПОВЕДЕНИЯ (%) САМЦОВ КРЫС В «ОТКРЫТОМ ПОЛЕ»
Время выхода из центра поля (с) Двигательная активность Исследовательская активность Эмоциональность
Вещества вставание перемещение груминг дефекация
73* 119 121 148 267* 39
II 93 113 102 93 0 77**
III 93 90 99,8 56 167 26**
IV 200 88 111 167 200 128
V 353*** 121 108 222* 0 38**
VI 113 125 116 148* 0 64*
VII 38* 203** 122 0 166 38**
Примечание:
100 % — контрольный уровень соответственно самцов крыс, получавших растворитель. * — при р < 0,05; ** — при р < 0,01.
ствие указанной активности при использовании соединения VII и ограничение частоты обнюхиваний на фоне веществ II, III. Вместе с тем, при введении соединений V (222 %, р < 0,05), VI (148 %, р < 0,05) животные достоверно чаще исследовали «норки».
Наблюдения также выявили отсутствие груминга у самцов, получавших соединения II, V, VI. Впрочем, при введении субстанции I животные достоверно чаще умывались (267 %, р < 0,05).
О снижении эмоциональности животных свидетельствовало уреже-ние вегетативных реакций, определяемое по ограничению числа фекальных болюсов при использовании соединений II (77 %, р < 0,01), III (26 %, р < 0,01), V (38 %, р < 0,01), VI (64 %, р < 0,05), VII (38 %, р < 0,01).
При введении диазепама в малой дозе (0,1 мг/кг) у самцов животных по сравнению с группой контрольных крыс отмечалась тенденция к увеличению числа обследованных «норок». На фоне препарата достоверно ниже была частота груминга, заметно меньше подсчитывалось фекальных болюсов. При использовании препарата сравнения в большей дозе (0,5 мг/кг) у животных не отмечали исследовательской активности, реже наблюдали акты груминга и вегетативные эмоциональные реакции.
Таким образом, выполненное исследование выявило «седативное» влияние соединения V и «активирующее» действие веществ I, VII при тестировании животных в «открытом поле». Также в результате экспериментов показано наличие «противотревожной» активности у соединений - амидов о-бензоиламинобензойной кислоты, производных предшественников хиназолинона-4, выявленные ранее по результатам тестирования производных 4-оксо-пиримидина в условиях конфликтной ситуации [5, 6, 12]. При этом «противотревожное» влияние субстанций II, III, V-VII отчетливее по сравнению с действием диазепама в исследованных дозах. Также по результатам наблюдений можно говорить о проявлении активирующего эффекта вещества VII, аналогично сочетающегося с антидепрессивным действием, установленным в плавательном тесте для биологически активных соединений - производных 4-ок-со-пиримидина [16].
ВЫВОДЫ
1. При однократном введении амидов о-бензоиламинобен-зойной кислоты, производных предшественников хина-золинона-4, установлено «седативное» влияние вещества V и «активирующее» действие соединений I, VII при тестировании самцов крыс в «открытом поле».
2. При однократном введении амидов о-бензоиламинобен-зойной кислоты, производных предшественников хи-назолинона-4, показана «противотревожная» активность соединений II, III, V-VII у самцов крыс в «открытом поле».
ЛИТЕРАТУРА
1. Батурин В.А., Манвелян Э.А., Булгакова М. Д. Влияние стресса на галоперидоловую каталепсию у интактных и овариоэктомирован-ных самок крыс в разное время суток // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2012. - Т. 75. - № 5. - С. 3-6.
2. Иноземцев А. Н., Агапитова А. Е., Бокиева С. Б., Глазова Н. Ю., Левицкая Н. Г., Каменский А. А., Мясоедов Н. Ф. Разнонаправленное влияние семакса на формирование и функциональные нарушения реакции активного избегания у крыс // Журнал высшей нервной деятельности. - 2013. - Т. 63. - № 6. - С. 711-718.
3. Иноземцев А. Н., Капица И. Г., Гарибова Т. Л., Бокиева С. Б., Воронина Т. А. Сопоставление влияния ноотропов и анксиолитиков на функциональные нарушения реакции избегания у крыс // Вестник московского университета. Серия 16. Биология. - 2004. - № 3. -С. 24-30.
4. Кодониди И.П., Оганесян Э.Т., Глушко А.А., Тюренков И.Н., Багме-това В.В., Золотых Д.С., Погребняк А.В. Молекулярное конструирование и целенаправленный синтез N-замещенных производных 4-оксо-1,4-дигидропиримидина на основе тормозных медиаторов // Химико-фармацевтический журнал. - 2009. - Т. 43. - № 10. -С. 32-39.
5. Кодониди И.П., Бандура А.Ф., Манвелян Э.А., Сыса В.Ю., Соч-нев В.С., Смирнова Л.П., Оганесян Э.Т., Савенко И.А., Сергиенко А.В., Арльт А.В., Ивашев М.Н. Компьютерное прогнозировнаие биомолекул // International jornal of experimental education. - 2013. -№ 11. - С. 153-154.
6. Кодониди И.П., Оганесян Э.Т., Жогло Е.Н., Сочнев В.С., Ивченко А.В., Манвелян Э.А., Сыса В.Ю. Целенаправленный синтез амидов о-бензоиламино-бензойной кислоты в качестве предшественников хиназолинонов-4, обладающих влиянием на ЦНС // Сборник материалов Третьей Международной научной конференции «Новые направления в химии гетероциклических соединений» (Пятигорск, 17-21 сентября 2013 г.). - Ставрополь: Изд-во СКФУ, 2013. - С. 280.
7. Манвелян Э. А. Анисимова Н. А., Батурин В. А. Половая диссимиляция поведения при стресс-воздействии различной интенсивности и изменении функции надпочечников. - Ставрополь: Изд-во СКФУ, 2013. - 107 с.
8. Манвелян Э. А. Булгакова М.Д., Батурин В. А. Роль яичников и над-почеч-ников в реализации каталептогенной активности галопери-дола. - Ставрополь: Изд-во СКФУ, 2014. - 137 с.
9. Манвелян Э. А., Анисимова Н. А. Влияние диазепама на поведение самок и самцов крыс при многопараметрическом тестировании на протяжении суточного цикла // Биологические основы индивидуальной чувствительности к психотропным средствам: материалы конференции (1-4 июня 2010 г. Москва). - М.: Фолиум, 2010. - С. 60.
10. Манвелян Э. А., Батурин В. А. Половые и хронобиологические различия в активности диазепама у крыс в тесте конфликтной ситуа-
ции // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2008. -№ 4. - С. 11-13.
11. Манвелян Э. А., Батурин В.А., Анисимова Н. А. Изменение эффективности диазепама у адреналэктомированных самцов и самок крыс при многопараметрическом тестировании // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2013. - № 4. - С. 7-10.
12. Манвелян Э. А., Сыса В.А., Кодониди И.П., Оганесян Э.Т. Влияние производных 4-оксо-пиримидина на поведение самцов крыс в условиях конфликтной ситуации // Материалы IV съезда фармакологов России «Инновации в современной фармакологии» (Казань, 18-21 сентября 2012). - М.: Изд-во Фолиум, 2012. - С. 220.
13. Погребняк А.В., Оганесян Э.Т., Кодониди И.П., Магонов М.М. Молекулярное дизайн производных оксопиримидина // Химико-фармацевтический журнал. - 2003. - Т. 37. - № 12. - С. 5-10.
14. Реброва О. Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA, МедиаСФЕ-РА. - М., 2002.
15. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р. У Хабриева. - М., 2005. - 512 с.
16. Сыса В.Ю., Манвелян Э.А., Оганесян Э.Т., Кодониди И.П., Агад-жанян А.М, Корсун Т.А., Макеева А. П. Оценка антидепрессивного действия биологически активных соединений - производных 4-ок-со-пиримидина // Физиологические проблемы адаптации: сборник научных статей Всероссийской конференция с международным участием (Ставрополь, 9-11 апреля 2013 г). - Ставрополь: СКФУ, 2013. - С. 222-224.
17. Филимонов Д. А. Прогноз спектров биологической активности органических соединений // Российский химический журнал. - 2006. -Т. 50. - № 2. - С. 66-75.
ОБ АВТОРАХ
Манвелян Элеонора Аслибековна, доктор фармацевтических наук, профессор кафедры медицинской биохимии, клинической лабораторной диагностики и фармации СКФУ 355013, г. Ставрополь, ул. Пушкина, 1а. Тел.: 35-50-68, 8-909-770-66-95. Е-маП: [email protected].
Manveljan Eleonora Aslibekovna, Doctor of pharmaceutical sciences, professor of chair of medical biochemistry, clinical laboratory diagnostics and pharmacy SKFU, 355013, Stavropol, Pushkin St., 1а. Phone: 35-50-68, 8-909-770-66-95. Е-маП: [email protected].
Сыса Валерия Юрьевна, соискатель кафедры медицинской биохимии, клинической лабораторной диагностики и фармации СКФУ. Телефон 89187690521, e-mail: [email protected].
Sysa Valeria Yryevna, applicant of chair of medical biochemistry, clinical laboratory diagnostics and pharmacy NCFU. Phone 89187690521, e-mail: [email protected].
Кодониди Иван Панайотович, доктор фармацевтических наук, доцент кафедры органической химии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития. г. Пятигорск, ул. Калинина, 11. Телефон 8-879-3-46-02-84, e-mail: [email protected].
Kodonidi Ivan Panayotovich, doctor of pharmaceutical sciences, associate professor of Department of Organic Chemistry Piatigorsky Medical and Pharmaceutical Institute - Branch of Volgograd State Medical University Health Ministry. Phone 8-879-3-46-02-84, e-mail: [email protected].
Оганесян Эдуард Тоникович, доктор фармацевтических наук, професор, заведующий кафедрой органической химии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский государственный медицинский университет» Минздравсоцразвития. г. Пятигорск, ул. Калинина, 11. Телефон 8-8793-46-02-84, e-mail: [email protected].
Oganesyan Edward Tonikovich, doctor of pharmaceutical sciences, professor, head of the Department of Organic Chemistry Piatigorsky Medical and Pharmaceutical Institute - Branch of Volgograd State Medical University Health Ministry. Phone 8-879-3-46-02-84, e-mail: [email protected].
