CC BY
24
УДК 615.31.012.015.11:542
ИССЛЕДОВАНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ АКТИВНОСТИ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ 1,Э-ДИАЗИНОНА-4 И ИХ АЦИКЛИЧЕСКИХ ПРЕДШЕСТВЕННИКОВ, ПОЛУЧЕННЫХ НА ОСНОВЕ ДОФАМИНА
Луговой И. С., Кодониди И.П., Сергеева Е. О., Смирнова Л.П., Аджиенко В.В.
Пятигорский медико-фармацевтический институт - филиал ФГБОУ ВО «Волгоградский государственный медицинский университет», г. Пятигорск, Россия
Аннотация. На основе логико-структурного подхода обоснованы структуры производных пиримидин-4(1Н)-она и амидов о-аминобензойной кислоты, которые являются ациклическими предшественниками хиназолинона-4. Проведен предварительный анализ фармакологических свойств прогнозируемых структур с помощью программ PASS, Биоэврика, Autodock 4.0 и отобраны наиболее перспективные соединения. Осуществлен целенаправленный синтез веществ-лидеров: ([2-(3,4-дигидроксифенил)этил]-2,6-диметил-5-фенил-1Н-пиримидин-4-он) и (бен-зоиламино-Ы-[2-(3,4-дигидроксифенил)этил]бензамид). Целью исследования является изучение противовоспалительного действия соединений-лидеров. Противовоспалительный эффект оценивали по влиянию исследуемых веществ на фазы экссудации и пролиферации воспалительного процесса. Результаты эксперимента свидетельствуют, что изучаемые соединения достоверно уменьшают экссудацию по сравнению с контрольной группой и в сравнении с диклофенаком. Изучение соединений - лидеров выявило, что исследуемые соединения обладают пролиферативной активностью. Производное о-аминобензойной кислоты с остатком дофамина достоверно повышало пролиферацию по отношению к контрольной группе и в сравнении с диклофенаком.
Ключевые слова. молекулярное конструирование, производные 1,3-диазинонов-4, пиримидин-4(1Н)-она, амидо-бензоиламинобензойной кислоты, противовоспалительная активность
В последнее время на основе производных пиримидин-4(1Н)-она, хиназолинона-4 и амидов о-бензоиламинобензойной кислоты создаются новые высокоэффективные биологически активные вещества [2, 3, 4, 8]. В предыдущей статье нами приведены результаты прогноза противовоспалительной активности соединений - лидеров пиримидин-4(1Н)-она и амида о-бензои-ламинобензойной кислоты с фрагментом дофа-
(1)
Рисунок 1
мина, позволяющие предположить их выраженное противовоспалительное действие, а также методы синтеза целевых соединений [5].
Структуры целенаправленно синтезированных соединений приведены ниже: соединение 1 ([2-(3,4-дигидроксифенил)этил]-2,6-диметил-5-фенил-1Н-пиримидин-4-он), рисунок 1;
соединение 2 (2-бензоиламино-К-[2-(3,4-дигид-роксифенил)этил]бензамид) рисунок 2.
OH
NH
OH
(2)
Рисунок 2
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
O
Ph
Н3С
O
OH
Цель исследования: изучить противовоспалительное действие соединений - лидеров пири-мидин-4(1Н)-она и амида о-бензоиламинобен-зойной кислоты с фрагментом дофамина.
Результаты исследования. Противовоспалительное действие веществ 1 и 2 изучали на модели ватной гранулемы (хроническое пролифе-ративное воспаление) [1, 3, 6]. Эффективность соединений оценивали по степени экссудации и пролиферации. В качестве препарата сравнения был выбран диклофенак, так как основным механизмом действия диклофенака, установленным в условиях эксперимента, считается торможение биосинтеза простагландинов [7]. Простаглан-дины играют важную роль в генезе воспаления, боли и лихорадки. In vitro диклофенак натрия в концентрациях, эквивалентным тем, которые достигаются при лечении пациентов, не подавляет биосинтез протеогликанов хрящевой ткани. Для животных в контрольном опыте был использован физиологический раствор. Для исследований использовали крыс-самцов линии Wistar массой 200-220 г на момент начала эксперимента. Эксперименты на животных выполнялись в соответствии с правилами по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ [6]. Во время опытов животные содержались в контролируемых условиях: температура окружающего воздуха 22±2°С, относительная влажность 65±5%. Для размещения животных использовались макролоновые клетки Т-3 с кормовыми углублениями, оборудованные стальными решетчатыми крышками. В качестве подстилочного материала применяли древесные опилки нехвойных пород древесины. Животные содержались на стандартном пищевом рационе (полнорационный комбикорм, рецепт ПК-120 для содержания лабораторных животных, ГОСТ Р 50258-92, производитель ООО «Лаборатор-корм») со свободным доступом к корму и воде. Вода водопроводная подавалась в стандартных
Результаты определения противовосг
питьевых бутылочках. У белых крыс, находящихся под хлоралгидратным наркозом (доза 350 мг/кг), в области спины выстригали шерсть. В асептических условиях ножницами делали разрез кожи и подкожной клетчатки длиной около 1 см. Пинцетом в подкожной клетчатке через разрез формировали полость, в нее помещали про-стерилизованный ватный шарик массой 15 мг, после чего на рану накладывали два шва. Изучаемые соединения 1 и 2 в дозе 10 мг/кг, а также препарат сравнения диклофенак в дозе 13 мг/кг (соответствует дозе взрослого человека), в эквивалентном объеме воды вводили с помощью зонда в желудок в течение 7 дней. Для проведения экспериментов использовали водные суспензии исследуемых соединений 1 и 2. С целью получения стабильных суспензий вещества 1 и 2 предварительно растирали с Твином-80. Контрольным животным в желудок вводили физиологический раствор в таком же объеме [3]. На восьмые сутки опыта, имплантированные шарики с образовавшейся вокруг них грануляционной тканью извлекали, взвешивали, затем высушивали до постоянной массы при 60-65оС. О величине экссудативной фазы воспаления судили по разнице в массе (мг) шарика до и после высушивания, о величине пролиферативной фазы -по разнице между массой (мг) высушенного шарика и его исходной массой 15 мг [1, 3].
Величину экссудации рассчитывали по формуле: т3 = т1 - т2,
где: т3 - величина экссудации, г; т1 - масса ватного шарика сразу после извлечения из животного, г; т2 - масса ватного шарика после высушивания, г.
Величину пролиферации рассчитывали по формуле: т4 = т2 - 0,015,
где: т4 - величина пролиферации, г; т2 -масса ватного шарика после высушивания, г;
0.015 - исходная масса ватного шарика, г. Результаты эксперимента представлены в таблице
1.
Таблица 1
[тельной активности соединений 1 и 2
Объекты исследования, доза Экссудация, мг Пролиферация, мг
Контроль 210,0±7,1 33,0±2,9
Диклофенак , 13мг/кг 183,0±2,7* Рк<0,005 ((ДР= -13%) 30,0±1,7 Рк>0,1 Рд>0,1
Вещество 1, 10мг/кг 121,0±5,9*л Рк<0,001 (ДР= -42%) 43,0±8,5 Рк>0,1 (ДР= -30%)
Рд<0,001 (ДР= -34%) Рд>0,1 (ДР= - 43%)
Вещество 2, 10 мг/кг 113,0±2,7*л Рк<0,001 (ДР= -46%) Рд<0,001 (ДР= -38%) 55,0±7,3 Рк<0,05 (ДР= +67%) Рд<0,001 (ДР= +83%)
Примечание: *- достоверно по отношению к контролю; л - достоверно по отношению к диклофенаку
Результаты эксперимента, представленные в таблице 1, показывают, что изучаемые соединения 1 и 2 достоверно уменьшили экссудацию по сравнению с контрольной группой на 42% и 46%, соответственно. Сравнение этих показателей с результатами, полученными в группе животных, принимавших препарат сравнения диклофенак, выявило достоверные отличия (снижение экссудации на 34% и 38%, соответственно). По ограничению экссудации вещество 1 достоверно не отличалось от вещества 2. Анализ влияния объектов исследования на пролиферативную стадию воспаления показал, что вещество 2 достоверно повышало пролиферацию по отношению к контрольной группе и в сравнении с диклофенаком на 67% и 83%, соответственно. Вещество 1 повышало уровень пролиферации по отношению к контрольной группе и в сравнении с диклофена-ком на 30% и 43%, соответственно, но эти данные были недостоверными (не было достоверных отличий от контрольной группы животных).
Таким образом, в опытах на крысах на модели хронического пролиферативного воспаления (ватной гранулемы) исследуемые вещества PDMDopha и IQDopha в эффективной дозе 10 мг/кг обладали достоверной антиэкссудативной активностью, сопоставимой с лекарственным средством диклофенак.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бадальян З.В., Темирбулатова А.М., Степанова Э.Ф. Разработка технологии и фармакологические исследования нативного сока подорожника // Известия Самарского научного центра Российской академии наук. 2014. Т. 16. № 1-3. С. 718-720. URL:
http://www.ssc.smr.ru/media/joumals/izvestia/2014/201 4_1_718_720.pdf (дата обращения: 25.10.2016).
2. Изучение взаимосвязи структура - противовоспалительная активность в ряду 2-винилензамещен-ных производных 4-(2,6-диметил-4-оксо-5-фенил-4^ пиримидин-1-ил)-бензсульфамида / В.С. Сочнев, И.П. Кодониди, Е.О. Сергеева, Л.А. Саджая, Э.Т. Оганесян, А.Ф. Бандура, Д.С. Золотых //Современные проблемы науки и образования. 2015. №2. URL: http://www.science-
education.ru/ru/article/view?id=22094 (дата обращения: 25.10.2016).
3. О противовоспалительной активности новых гетерилзамещенных производных 2,3-дигидро-1^хи-назолин-4-она/ А.Ф. Бандура, Э.Т. Оганесян, И.П. Кодониди, Е.О. Сергеева, Л.А. Саджая, В.С. Сочнев, Д.С. Золотых, И.С. Луговой, А.Ю. Базганов //Фундаментальные исследования. 2014. -№ 9-6.- С. 12601263. URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=35050 (дата обращения: 25.10.2016).
4. Оганесян Э.Т., Ивченко А.В., Кодониди И.П. Исследование взаимосвязи структура-активность в ряду производных хромона и пиримидина //Химико-фармацевтический журнал. 1993. Т. 27. № 3. С. 10-12.
5. Прогноз и синтез новых производных 1,3-ди-азинона-4 и их ациклических предшественников, полученных на основе дофамина / И.С. Луговой, И.П. Кодониди, Оганесян Э.Т., А.А. Глушко, А.В. Бичеров // Здоровье и образование в XXI веке. Журнал научных статей. 2016 . №4 . С. 118-123.
6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией Р.У. Хабриева. М.: ОАО «Изд-во «Медицина», 2005. 832 с.
7. Харкевич Д.А. Фармакология. М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 908 с.
8. Pyrimidine as Antiinflammatory Agent: A Review / M. Amir [et al.] // Indian J. of Pharm. Sciences, 2007, May-June, рр. 337-343.
RESEARCH OF ANTIINFLAMMATORY ACTIVITY OF NEW DERIVATIVES OF 1,3-DIAZINON-4 AND THEIR ACYCLIC PREDECESSORS RECEIVED ON THE BASIS OF DOPAMINE
Lugovoy I.S., Kodonidi I.P., Sergeeva E. O., Smirnova L.P., Adzhienko V. V.
Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute, a branch of "Volgograd State Medical University", Pyatigorsk, Russia
Annotation. Structures of derivatives a pyrimidin-4 (1H)-on and amides o-petrolylaminobenzol acid (acyclic predecessors hinazolinon-4) are proved on the basis of logiko-structural approach proved. The analysis of pharmacological properties of the predicted structures has been carried out by means of the PASS programs, BIOEVRIKA, Autodock 4.0. The most perspective connections have been chosen. We carried out targeted synthesis of the leading substances: [2-(3,4 -dihydroxyphenyl) aethylium] - 2,6 - dimethyl - 5 - phenyl - 1H - a pyrimidine - 4 -one and benzoilamin-N-[2-(3,4 dihy-droxypheny l) aethylium] benzamide. Research objective is studying of anti-inflammatory action of connections - leaders. The anti-inflammatory effect was estimated on influence of the studied substances on phases of an ekssudation and proliferation of inflammatory process. Results of the experiment demonstrate that the studied connections authentically reduce an ekssudation in comparison with control group and in comparison with diclofenac. Studying of connections -leaders has revealed that the studied connections have proliferative activity. Derivative o-petrolylaminobenzol acid from the dopamine rest authentically increased proliferation in relation to control group and in comparison with diclofenac.
Key words. computer forecasting of biological activity, derivatives of 1,3-diazinon-4, 4 oxopyrimidin, amide o-petrol-ylaminobenzol acid, anti-inflammatory activity, diclofenac
REFERENCES
1. Badalyan Z.V., Temirbulatova A.M., Ste-panova E.F. Development of technology and pharmacological researches of native juice of a plan-tain//News of the Samara scientific center of the Russian Academy of Sciences, 2014, vol. 16, № 13, pp. 718-720. Available at: http://www. ssc. smr.ru/media/journals/izves-tia/2014/2014_1_718_720.pdf (Accessed 25 th October 2016) (in Russian)
2. Studying of interrelation structure - anti-inflammatory activity among the 2-vinilen-zameshchennykh of derivatives 4 (2,6-dimethyl-4-oxo-5-phenyl-4h-pyrimidin-1-il) - benzsulphamide / V.S. Sochnev, I.P. Kodonidi, E.O. Sergeeva, L.A. Sadzhaya, E.T. Oganesyan, A.F. Bandura, D.S. Zolotyih // The Modern problems of science and education, 2015, № 2, Available at: http://www.sci-ence-education.ru/ru/article/view?id=22094 (Accessed 25th October 2016) (in Russian)
3. About antiinflammatory activity new het-erosubstituted derivatives of 2,3-dihydro-1H -quinazolin - 4 - on/ A.F. Bandura, E.T. Oganesyan, I.P. Kodonidi, E.O. Sergeeva, L.A. Sadzhaya, V.S.
Sochnev, D.S. Zolotyih, I.S. Lugovoy, A.Yu. Ba-zganov // Fundamentalnyie issledovaniya, 2014, № 9-6, pp. 1260-1263. Available at: http://funda-mental-research.ru/ru/article/view?id=35050 (Accessed 25th October 2016) (in Russian)
4. Oganesyan E.T., Ivchenko A.V., Kodonidi I.P. Interrelation research structure activity among derivatives of a hromon and a pyrimidin // Chemical and pharmaceutical magazine, 1993, vol. 27, № 3, pp. 10-12. (in Russian)
5. The forecast and synthesis of new derivatives of 1,3-diazinon-4 and their acyclic predecessors received on the basis of dopamine / I.S. Lugovoy, I.P. Kodonidi, Oganesyan E.T., A.A. Glushko, A.V. Bicherov // The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2016, №4, pp. 118123. (in Russian)
6. The guide to experimental (preclinical) studying of new pharmacological substances / Under the general edition of R. U. Habriev, M.: Medicine, 2005, 832 pages. (in Russian)
7. Harkevich D.A Pharmacology. M.: GE-OTAR-Media, 2010, 908 p. (in Russian)
8. Pyrimidine as Antiinflammatory Agent: A Review / M. Amir [et al.] // Indian J. of Pharm Sciences, 2007, May-June, pp. 337-343.
