МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
но у одного было 2 клона, а у другого 4.
Мутации в гене N0^!^ выявлялись у пациентов с CLL#99, #6, #1, #28А, #3 с частотой, соответственно 3(25%), 4 (23,5%), 7(21,8%), 2(16%) и 2(13%). В большинстве случаев выявлялась широко распространенная мутация c.7544_7545delCT Также были обнаружены мутации (по 1 случаю) с.7558_756^е1СТТС и р^2444Х у пациентов в ^#1 и с.7547_755^е1 у пациента с CLL#28A. Одновременное наличие мутаций в генах ТР53 и N0^!^ было обнаружено у 4 пациентов - по 2 случая подгруппах CLL#1 и CLL#6.
Мутации в гене SF3B1 были выявлены у 8 (53,3%) пациентов с CLL#3. В подгруппах CLL#6 (исследовали 11 пациентов), #99 и #28А мутаций в данном гене обнаружено не было. В подгруппе #1 мутации в гене SF3B1 не исследовали.
Делеция 17р13/ТР53 была обнаружена у 9 из 27 исследованных больных с CLL#1 (33%), и у 4 из 14 больных с CLL#6 (28,5%). В группе CLL#3 данная делеция была выявлена у
только 1 больного из 12, а среди пациентов с CLL#99 и #28А (9 и 4 исследованных случаев) она обнаружена не была.
Выводы. Наши результаты показывают, что в подгруппах CLL#1, CLL#6, CLL#3 генетические нарушения встречаются значительно чаще, чем в целом у пациентов с ХЛЛ, по литературным данным. Возможно, это связано с тем, что часть пациентов в нашей выборке имели рецидив после режима FCR. В подгруппе CLL#99, также как и в сходной по строению рецептора подгруппе CLL#1, мутации в гене TP53 встречаются аномально часто, но с низкой VAF, что в настоящее время не имеет доказанного негативного клинического значения. Интересно, что две подгруппы с геном IGHV1-69 в основе SAR демонстрируют абсолютно противоположную картину по частоте встречаемости нарушений в исследуемых генах. Дальнейшее изучение генетических нарушений при этих и других группах САР поможет в будущем оптимизировать терапию и углубить понимание патогенеза заболевания.
А.В. Боровикова, Ж.М. Жабакова, Г.Ж. Абильдинова
частота выявляемости мутации jak2 в казахстане
Республиканское государственное предприятие «Больница Медицинского центра управления делами Президента Республики Казахстан», г. Нур-Султан, Казахстан
Введение. Миелопролиферативные заболевания представляют собой группу гематологических заболеваний, характеризующихся первичным расстройством кроветворных стволовых клеток, приводящим к росту одного или нескольких типов клеток крови. Наиболее важным критерием в диагностике миелопролиферативных заболеваний является мутация V617F в 14 экзоне гена Jak2, который кодирует не-рецепторную тирозинкиназу, участвующую в передаче сигнала от рецепторов цитокинов и факторов роста к ядру клетки и экспрессирован в ранних предшественниках гемопоэза.
Цель. Определить частоту встречаемости гена JAK2 при хронических миелопролиферативных заболеваниях.
Материалы и методы. Молекулярно-генетическое исследование проведено 259 пациентам. Выделение ДНК проводили из 500 мкл крови с использованием набора реагентов PureLink Genomic DNA Mini Kit (Thermo Scientific, США) и в соответствии с инструкцией производителя. Концентрацию ДНК оценивали с помощью прибора Qubit4 (Thermo Scientific, США). При интерпретации результатов учитывали «Серую зону» - образцы, имеющие долю мутантного аллеля от 4 до 7%. При наличии «Серой зоны» пациенты проходили повторное исследование через 6 месяцев. Детекцию и количественный учет гена JAK2 проводили с помощью ПЦР-RT
QuantStudio 12 Flex (Applied biosystem). Возрастной диапазон пациентов и средний возраст (± SD) составляли от 28 до 80 лет и 45,89 ± 15,60 года соответственно.
Результаты исследования. Группу исследования составили 269 человек, из них 133 (49,4%) пациентов с подозрением на истинную полицитемию (ИП) и 132 (49%) пациента на с подозрением на первичный миелофиброз и 4 (1,5%) пациента с Ph-негативным хроническим миелолейкозом (ХМЛ). Частота выявляемости в группе исследования мутации в 14 экзоне гена JAK2 составила 47% (127). Среди 133 пациентов с ИП мутация JAK2 обнаружена у 66 пациентов, что составило 49,6%, у 132 пациентов с ПМФ - у 58 (43,9%). В группе первичных больных, обследованных с целью дифференциальной диагностики при Ph (-) ХМЛ, мутация была выявлена у 3 (75%) из 4 пациентов, что позволило достоверно подтвердить диагноз.
Изучена частота мутации JAK2 в зависимости от возраста и пола. Возрастной пик обнаружения мутации V617F гена JAK2 у заболевших находится между 40 и 70 годами с преобладанием заболеваемости у женщин после 60 лет.
Выводы. Частота мутации JAK 2 при хронических миелопролиферативных заболеваниях составила в исследуемой группе 47%, чаще диагностируется у женщин старше 60 лет.
И.А. Булдаков1, С.В.Волошин1, В.А. Шуваев1,2, С.В.Петров1, М.С.Фоминых11 С.С. Бессмельцев1, А.В. Чечеткин1, И.С. Мартынкевич1
секвенирование следующего поколения в определении
bcr-abl-независимых механизмов развития резистентности к терапии
итк у пациентов с хф хмл: результаты пилотного исследования
1Федеральное государственное бюджетное учреждение «Российский научно-исследовательский институт гематологии
и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», г. Санкт-Петербург 2 Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Городская клиническая больница имени В.В. Вересаева» Департамента здравоохранения г. Москвы
Введение. С каждым годом накапливается все больше данных о механизмах развития первичной и вторичной резистентности к терапии ингибиторами тирозинкиназ (ИТК) у пациентов с хМл. Технология секвенирования следующего поколения (NGS) позволяет обнаруживать мутации в киназном домене BCR-ABL химерного гена у значительной части пациентов с резистентностью к терапии ИТК. Но, по-
прежнему остаются неясными причины резистентности у пациентов без мутаций в киназном домене BCR-ABL.
Цель. Определить BCR-ABL-независимые молекулярно-генетические маркеры резистентности к терапии ИТК у пациентов с ХМЛ с применением NGS.
Материалы и методы. Мы исследовали образцы крови 15 пациентов с резистентным течением ХФ ХМЛ (8 мужчин