CC BY
6
ВСЕРОССИЙСКАЯ НАУЧНО-ПРАКТИЧЕСКАЯ КОНФЕРЕНЦИЯ С МЕЖДУНАРОДНЫМ УЧАСТИЕМ «АКТУАЛЬНЫЕ ВОПРОСЫ ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ», ПОСВЯЩЕННАЯ 90-ЛЕТИЮ РОССИЙСКОГО НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКОГО ИНСТИТУТА ГЕМАТОЛОГИИ И ТРАНСФУЗИОЛОГИИ
Санкт-Петербург 30 июня - 1 июля 2022 г.
замораживали в парах жидкого азота и хранили при температуре минус 196 оС до трансплантации. ЛК размораживали непосредственно перед трансплантацией. Сразу после размораживания ЛК отмывали от ДМСО смесью альбумина и полиглюкина, центрифугируя (2000g) в течение 5 мин., затем вводили внутривенно пациенту. К оценке жизнеспособности ЯСК в образцах ЛК приступали сразу после окончания технологических этапов: перед замораживанием (смесь нативных ЛК с ДМСО), после декриоконсервирования (образцы неотмытых ЛК) и отмывания (образцы отмытых ЛК). Методом проточной цитоме-трии определяли процент клеток, негативных по содержанию ДНК-тропного красителя 7-актиноминомицина D (жизнеспособных) среди ЯСК и в популяции, отвечающей за восстановление гемопоэза, ГСК. Результаты представлены в виде медианы и интерквартильного интервала (Ме [I квартиль; III квартиль]). Статистическую значимость различий оценивали с помощью критерия сдвига (положения) Вилкоксона, при этом использовали программу STADIA (Россия),
Результаты. Жизнеспособность ЯСК в ЛК больных после
смешивания с ДМСО перед замораживанием составила 96,1 [94,0; 98,8] %, популяции ГСК - 96,2 [94,8; 98,5] %; после размораживания ЛК наблюдалось существенное снижение числа 7-AAD-негативных ЯСК (80,6 [76,0; 89,4] %, р = 0,002) и ГСК (86,7 [67,6; 92,9] %), р = 0,005). После отмывания ЛК от DMCO число жизнеспособных ЯСК и популяции ГСК также было меньше, чем в ЛК после смешивания с DMCO и до замораживания: 92,2 [85,2; 96,4] % (р = 0,008) и 94,4 [94,5; 95,2] % (р = 0,045) соответственно. Показано, что процедура отмывания не оказала негативного влияния на жизнеспособность ЯСК и популяции ГСК. После трансфузии отмытых клеточных продуктов отсутствовали гистаминоподобные реакции, обусловленные токсичностью ДМСО (кожные, сердечно-сосудистые, неврологические, желудочно-кишечные.
Выводы. Жизнеспособность ЯСК существенно уменьшается в размороженных ЛК по сравнению с таковой в нативных ЛК. Отмывание от ДМСО ГСК-содержащих ЛК, позволяющее нивелировать токсическое влияние криоконсерванта на организм больного, не снижает качества трансплантационного материала.
С.И. Капустин, С.П. Свитина, Н.Е. Корсакова, Е.В. Ефремова, Ж.Ю. Сидорова, Н.Н. Силина,
Л.П. Папаян, С.В. Волошин, С.С. Бессмельцев
ЧАСТОТА ВСТРЕЧАЕМОСТИ АЛЛЕЛЬНЫХ ВАРИАНТОВ ГЕНОВ ПЛАЗМЕННОГО ЗВЕНА СИСТЕМЫ ГЕМОСТАЗА У БОЛЬНЫХ PH-НЕГАТИВНЫМИ ХРОНИЧЕСКИМИ МИЕЛОПРОЛИФЕРАТИВНЫМИ НОВООБРАЗОВАНИЯМИ
ФГБУ «Российский научно-исследовательский институт гематологии и трансфузиологии Федерального медико-биологического агентства», Санкт-Петербург
Введение. Тромботические осложнения остаются важной клинической проблемой при РЬ1-негативных хронических ми-елопролиферативных новообразованиях (ХМПН) и нередко приводят к инвалидизации и летальному исходу. Высокий риск развития тромботических осложнений - особенность течения многих ХМПН, но чаще они встречаются у пациентов с истинной полицитемией (ИП) - 12-39 % случаев на момент диагностики и 10-25% по мере прогрессирования заболевания, что связано с резким увеличением числа форменных элементов крови, ге-матокрита и повышением вязкости крови. Среди пациентов с эссенциальной тромбоцитемией (ЭТ) частота тромбозов достигает 7-26% на момент диагностики, 8-31% по мере прогресси-рования. При первичном миелофиброзе (ПМФ) она составляет 4-7% в дебюте и 2-4% по мере прогрессирования. Увеличение риска тромбозов у больных ХМПН может быть обусловлено целым рядом причин - наличием основного заболевания, применением определенных видов его терапии, сопутствующей патологией, классическими факторами риска тромбоза, а также наследственной предрасположенностью к протромботическим сдвигам в системе гемостаза. На сегодняшний день значение генетических факторов риска в развитии тромботических осложнений у больных ХМПН до конца не выяснено.
Цель. Определить частоту встречаемости (ЧВ) аллельных вариантов некоторых генов, кодирующих факторы плазменного звена гемостаза, в группе больных ХМПН.
Материалы и методы. Объектом исследования явилась группа из 88 больных ХМПН (34 мужчины и 54 женщины, средний возраст - 54,4 ± 14,4 лет), проходивших лечение в клиническом отделении химиотерапии гемобластозов, депрессий кроветворения и трансплантации костного мозга ФГБУ РосНИИГТ ФМБА России. В исследование были включены 33 пациента с ИП, 25 больных ЭТ, 20 человек с ПМФ и 10 - со вторичным ми-елофиброзом. Наличие тромботических осложнений в анамнезе выявлено у 27 (30,7 %) больных ХМПН. При этом венозные тромбозы наблюдались у 11 (12,5%) пациентов, артериальные
- у 16 (18,2 %) человек. Контрольную группу (КГ) составили 200 здоровых лиц, не имевших в анамнезе тромботических осложнений и соответствовавших по полу и возрасту группе обследованных больных. Все лица, включенные в настоящее исследование, являлись жителями Северо-западного региона Российской Федерации. В качестве материала исследования использована геномная ДНК, выделенная из лейкоцитов периферической крови. Для типирования аллельного полиморфизма генов плазменного звена гемостаза (FI-A, FI-B, FII, FV, FXII, FXIII-A, ТРА, РА1-1) использовали метод ПЦР-ПДРФ, основанный на анализе полиморфизма длин рестрикционных фрагментов продуктов ПЦР, полученных с помощью обработки специфической эндо-нуклеазой рестрикции. Статистическая обработка результатов проводилась с помощью точного критерия Фишера для определения коэффициента «отношения шансов» (OR - odds ratio) с 95% доверительным интервалом (CI - confidence interval), а также р-значения.
Результаты. В группе больных ХМПН было выявлено статистически значимое увеличение доли гомозигот по варианту 312Ala гена FI-A (13,6% против 5,5% в норме; OR=2,7; 95% CI: 1,1-6,4; p=0,031). Кроме того, в обследованной группе пациентов была обнаружена выраженная тенденция к увеличению ЧВ протромбогенного генотипа FXII 46TT (11,4% против 6,5% в КГ; OR=1,8; 95% CI: 0,8-4,4; p=0,16). Интересно, что в ходе исследования не было обнаружено корреляции между присутствием у больных ХМПН изученных протромботических генетических вариантов, в том числе таких известных факторов риска тромбоза, как мутации FII 20210 G/A и FV 1691 G/A, и наличием тром-ботических эпизодов в анамнезе.
Выводы. Увеличение ЧВ генотипа FI-A 312 Ala/Ala в группе больных ХМПН свидетельствует о возможном вовлечении данного варианта в патогенез заболевания, что требует дальнейшего изучения. Для установления роли полиморфизма изученных генов в развитии тромботических осложнений у больных ХМПН также необходимо проведение дополнительных исследований.
