CC BY
77
УДК 61:575(470.621) ББК 52.54(2Рос.Ады) Б 58
Бжецов К.З.
Аспирант кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, тел. 8903466082, e-mail: [email protected] Муженя Д.В.
Аспирант кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, тел. 89064351332, e-mail: [email protected] Тугуз А.Р.
Доктор биологических наук, профессор кафедры ботаники факультета естествознания Адыгейского государственного университета, тел. 89184384418, e-mail: [email protected] Беретарь С.Х.
Главный врач Адыгейского республиканского клинического онкологического диспансера, тел. (8772)
54-48-26
Тлиш Э.Х.
Кандидат медицинских наук, врач-ординант Адыгейского республиканского клинического онкологи, . 89183984354
Алдонина Л.Д.
.
диспансера, тел. (8772) 54-48-03 Ашканова Т.М.
, . 89034663883
Калакуток К.Б.
Главный врач Адыгейской республиканской клинической больницы, тел. 89618199999
Частота C819T, G1082A полиморфизмов гена IL-10 у жителей Республики Адыгея со злокачественными новообразованиями молочной железы и сердечно-сосудистыми заболеваниями
(Рецензирована)
Аннотация
Частота носительства аллели C819T гена IL-10 у жителей Республики Адыгея: доноров, кардиологических и онкологических больных со злокачественными новообразованиями молочной железы со-
30%, 23% 40%. -
сосудистых осложнений носительство C819T аллели гена IL-10 превышает аналогичные показатели для кардиологических больных с выраженными клиническими симптомами сердечно-софдистых заболеваний (ССЗ) и составляет 53,3% и 20% соответственно. Достоверных различий в частоте G1082A аллели гена IL-10 в обследованных группах не выявлено. Таким образом, носительство G1082A и C819T .мутаций гена IL-10 у жителей Республики Адыгея не ассоциировано с риском развития рака молочной железы и ССЗ.
Ключевые слова: противовоспалительный цитокин IL-10, аллельные полиморфизмы C819T и G1082A IL-10, частота встречаемости, рак .молочной железы, сердечно-софдистые заболевания, Рес-.
Bzhetsov K.Z.
Post-graduate student of Botany Department of Natural Science Faculty of Adyghe State University, ph. 8903466082, e-mail: [email protected] Muzhenya D.V.
Post-graduate student of Botany Department of Natural Science Faculty of Adyghe State University, ph. 89064351332, e-mail: [email protected] Tuguz A.R.
Doctor of Biology, Professor of Botany Department of Natural Science Faculty of Adyghe State University, ph. 89184384418, e-mail: [email protected] Beretar S.Kh.
Head Physician of the Adyghe Republican Clinical Oncological Hospital, ph. (8772) 54-48-26
Tlish E.Kh.
Candidate of Medicine, Doctor-Ordinant of the Adyghe Republican Clinical Oncological Hospital,
ph.89183984354
Aldonina L.D.
Head of Radiological Branch of the Adyghe Republican Clinical Oncological Hospital, ph. (8772) 54-48-03
Ashkanova T.M.
Doctor of Higher Category of the Adyghe Republican Clinical Hospital, ph. 89034663883
Kalakutok K.B.
Head Physician of the Adyghe Republican Clinical Hospital, ph. 89618199999
Frequency of occurrence of IL-10 gene polymorphisms C819T and G1082A at Adygheya Republic inhabitants with the malignant mammary tumors and cardiovascular diseases
Abstract
Frequency of occurrence of IL-10 gene C819T allele at the Adygheya Republic inhabitants, namely: donors, cardiologic and oncological patients with the malignant mammary tumors, is accordingly 30 %, 23 % and 40 %. The oncological patients without accompanying cardiovascular complications show the occurrence of IL-10 gene C819T allele exceeding similar indicators for cardiologic patients with the expressed clinical symptoms of cardiovascular diseases (CVD) and making 53.3 % and 20 % accordingly. Trustworthy distinctions in frequency of occurrence of IL-10 gene G1082A allele in the surveyed groups have not been revealed. Thus, the occurrence of IL-10 gene G1082A and C819T mutations at Adygheya Republic inhabitants is not associated with risk of development of a cancer of a mammary gland and CVD.
Key words: anti-inflammatory cytokine IL-10, IL-10 gene allelic polymorphisms C819T and G1082A, frequency of occurrence, a mammary gland cancer, cardiovascular diseases, Adygheya Republic.
Гены цитокинов обладают чрезвычайно высокой степенью полиморфизма. Количество установленных мутаций в одном гене может достигать нескольких десятков, причем они могут располагаться как в кодирующих экзонах, некодирующих интронах, так и в промоторных участках гена, которые регулируют интенсивность его экспрессии. Мутации генов цитокинов могут влиять на течение иммунологических процессов [1, 2].
Противовоспалительный цитокин IL-10, продуцируемый активированными моноцитами и Т-лимфоцитами, вовлечен в регуляцию воспалительного ответа и иммунных реакций организма. В ряде исследований IL-10 отводится ключевая роль в аутоиммунном ответе, индукции (формировании) периферической толерантности посредством ингибирования воспалительных реакций (процессов). Механизм действия IL-10 аналогичен IL-4 и связан со снижением экспрессии MHC-II, что может играть важную роль в канцерогенезе [2-5].
Известно несколько наиболее распространенных мутаций гена IL-10 (C592A,
С819Т, G1082A), ассоциированных с такими заболеваниями, как персистирующие микоплазмы, папилломавирусная инфекция, целиакия, базедова болезнь, неходжкинская лимфома [1, 2, 6, 7].
Типы, частоты мутантных гаплотипов IL-10 и их ассоциированность с заболеваниями определяются этнической принадлежностью. Показано, что существуют выраженные этнические различия в распределении частот аллелей и генотипов полиморфных вариантов IL-10 и других цитокинов, но восприимчивость к персистенции патогенных микроорганизмов в разных этногеографических группах ассоциируется с наличием у индивидов конкретных аллелей и полиморфных локусов IL-10 и IL-1. Фрагментарные исследования, проведенные в ряде стран, выявили высокую степень корреляции одних гаплотипов с риском предрасположенности, прогноза развития и исхода лечения инфекционных, лимфопролиферативных и других заболеваний. По данным Barisani et. al. (2006), в европеоидной популяции C592A, С819Т, G1082A мутации IL-10 ассоциируются с целиакией и некоторыми серозными повреждениями
пищеварительного тракта, неблагоприятным исходом при лечении нехождкинских лимфом [2, 6-11].
Когортное исследование, проведенное у женщин с патологией беременности, однако, не выявило достоверных ассоциаций полиморфизма промоторной области IL-10 цитокина с осложнениями по сравнению с контрольной группой. Скрининговые популяционные исследования, проведенные Langsenlenhner U., et al (2005) в Австрии и включающие группы женщин здоровых (500) и онкологических больных (500) с гистологически верифицированным диагнозом рака молочной железы, выявили более высокие частоты (7,3%) мутации C592A IL-10 у здоровых женщин, что позволяет считать наличие C592A IL-10 низким прогностическим фактором развития рака молочной железы. Аналогичные исследования у больных раком простаты в Австрии также не выявили ассоциированности мутаций C592A IL-10 с риском развития заболеваний [10, 12-15].
Противоречивые данные по прогностической значимости носительства мутаций промоторной части IL-10 получены при лечении злокачественных лимфом у жителей Германии и Польши, что предполагает необходимость этногеографического изучения распространенности аллелей IL-10 [7, 10, 13].
Цель работы: пилотные исследования по определению частоты полиморфизмов гена IL-10 (С819Т, G1082A) и выявлению их ассоциированности с сердечно-
сосудистыми заболеваниями и злокачественными новообразованиями молочной железы у жителей Республики Адыгея
Контингент обследованных лиц. В исследование включены 10 доноров (контрольная группа), 46 больных, в том числе 33 с онкологическими и 13 с ССЗ.
Группа контроля подобрана эмпирически, в возрасте от 23 до 60 лет, без клинических проявлений онкологических и ССЗ. По данным опроса, осмотра, регистрации ЭКГ, у 3 доноров установлена наследственная отягощенность по ССЗ: у близких родственников выявлены различные клинические варианты ишемической болезни сердца (ИБС) и стадии гипертонической болезни (ГБ) (II-III).
Онкологические больные (n=33) в возрасте от 45 до 72 лет (29 пациенток 45-65 лет) с сопутствующей сердечно-сосудистой патологией и без таковой, находившиеся в 2009-2010 гг. на лечении в радиологическом отделении Адыгейского республиканского клинического онкологического диспансера (АРКОД) г. Майкопа, оперированы по поводу гистологически верифицированного рака молочной железы.
Кардиологические больные (n=13) госпитализированы в стационарное отделение Адыгейской республиканской клинической больницы (АРКБ) (г. Майкоп, Республика Адыгея) с разными вариантами ИБС, в том числе: с нарушениями ритма в виде желудочковой экстрасистолии, параксизмов предсердной тахикардии после перенесенного инфаркта миокарда (n=1); со стабильной стенокардией напряжения II-IV функционального класса (n=5), с прогрессирующей стенокардией с исходом в стенокардию напряжения III функционального класса (n=2); с непроникающим (Q-негативным) инфарктом миокарда (ИМ), (n=2).
Сопутствующие заболевания и осложнения: ГБ III-стадии у всех обследованных кардиологических больных (n=13); хроническая сердечная недостаточность II-III стадии, II-IV функционального класса (ФК) по NYHA (New York Heart Association).
Полиморфизм гена противовоспалительного цитокина IL-10 определен универсальной системой для выявления точечных мутаций («SNP-экспресс») в геноме человека методом ПЦР аллель-специфичными праймерами с использованием комплектов реагентов НПФ «Литех» с единой системой пробоподготовки закрытого типа «ДНК-экспресс-кровь», детекцией продуктов амплификации методом горизонтального электрофореза в 3% агарозном геле (НПФ «Литех») и визуализацией ре-
зультатов электрофореза при облучении длиной волны 310 нм в УФ-трансиллюминаторе (BIO-RAD, USA).
Выделение ДНК доноров и больных из лейкоцитов цельной крови с помощью реагента «ДНК-экспресс-кровь» (НПФ «Литех»). Кровь у больных и доноров в утренние часы отобрана из локтевой вены в вакуумные пробирки с антикоагулянтом (ЭДТА). 1000 мкл цельной крови в пробирках на 1,5 мл (типа «Эппендорф» с замком) отцен-трифугировано при 3000 об/мин и комнатной температуре (+18...+25°С) в течение 5 мин для разделения крови и удаления плазмы. Форменные элементы заморожены при -20°С на 1 час и после полного размораживания при +18...+25°С, в содержимое пробирок внесен реактив «ДНК-экспресс-кровь» в объеме, равному исходному (1 мл), все тщательно перемешано (10 сек) на вортексе, помещено в предварительно прогретый до 98°С термостат на 15 минут. Затем пробирки охлаждены до 70°С, отцентрифугированы в высокоскоростной микроцентрифуге со скоростью 8000-14000 об/мин при +18...+25°С в течение 15 сек. Отобранный в пластиковые пробирки супернатант использован в качестве исследуемого образца ДНК.
ПЦР с использованием комплекта реагентов «SNP-экспресс». Амплификация проведена в пробирках на 200 мкл, с плоскими крышками (PCR®TUBES, Axygen), с пронумерованными анализируемыми пробами и отрицательным контролем. Для каждой пробы подготовлены 2 пробирки: N (норма) и Р (патология) с рабочими амплификаци-онными смесями (НОРМА и ПАТОЛОГИЯ), полученными за 20-30 минут до ПЦР из размороженных и доведенных до комнатной температуры, тщательного перемешанных комплектов реагентов («Литех») из расчета на 1 пробу: 17,5 мкл разбавителя; 2,5 мкл реакционной смеси; 0,2 мкл Tag-полимеразы. После добавления Tag-полимеразы и перемешивания пипетированием, в каждую из пронумерованных пробирок (отдельно для НОРМЫ и для ПАТОЛОГИИ) внесено по 20 мкл соответствующей амплификационной смеси, добавлено во все пробирки по 1 капле (около 25 мкл) минерального масла и по 5 мкл образца анализируемой ДНК под слой масла. В качестве отрицательного контрольного образца - разбавитель в объеме 5 мкл в оба контроля. Пробирки плотно закрыты и после центрифугирования при 1500-3000 об/мин на микроцентрифуге-вортексе в течение 3-5 секунд (+18 ...+25°С), помещены в прогретый до температуры +94°С (установившаяся температура в режиме «Пауза») амплификатор (Mj Mini, БиоРад) с режимом амплификации:
T, Co Время Количество циклов
9 о Pause
93° 1 мин 1
93° 10 сек 35
64 10 сек
° 2 7 20 сек
° 2 7 1 мин 1
10° Storage
Детекция продуктов амплификации проведена методом горизонтального электрофореза в 3% агарозном геле (Литех) с 1% бромистым этидием (Литех, ) в электрофоретической камере (SUB-CELL, Био-Рад) при напряженности электрического поля 1015 В/См, после внесения в лунки агарозного геля амплификата (15-20 мкл) в последовательности, соответствующей нумерации проб. Контроль за электрофоретическим разделением осуществлен визуально по движению полосы красителя от старта на 1,5-2 см (время разгонки 30 ± 2 мин.).
Результаты электрофореза визуализированы при УФ-облучении (длина волны
310 нм) в трансиллюминаторе (Gel Doc XR, Био-Рад) с помощью программы Quantity One. Наличие сигнала определяется по интенсивности свечения полос ампликонов.
Результаты исследований
У онкологических больных, по данным осмотра кардиолога и регистрации ЭКГ, выявлены сопутствующие сердечно-сосудистые заболевания, поэтому представлялось целесообразным их разделение на возрастные группы с клиническими проявлениями ССЗ и без таковых (табл. 1).
Таблица 1
Возрастные группы обследованных больных и доноров
Возрастные группы Доноры (n=10) Кардиологические больные (n=13) Онкологические больные (n=33)
с ССЗ (n=13) без ССЗ (n=20) Всего онкологических больных (n=33)
До 30 лет 2 - - - -
31 - 40 4 - - - -
41 - 50 1 2 3 7 10
51 - 60 3 3 5 8 13
61 - 70 - 5 4 4 8
> 70 - 3 1 1 2
Средний возраст 45 62 60 58 67
В группах онкологических больных с сердечно-сосудистыми осложнениями (п=13; 39.4%) и без таковых (п=20; 60.6%) различий по возрасту не выявлено, но значительно превышают средний возраст доноров.
Наличие или отсутствие точечных мутаций С819Т и 01082А гена ГЬ-10 установлено при выявлении сигналов, трактуемых как патологическая точечная мутация в гомозиготном (Р§ош), гетерозиготном (Р§0 состояниях, а также нормальная гомозигота (^ош). Отсутствие каких-либо сигналов (Р§ош, Р§^ ^ош), подтвержденных повторными исследованиями, расценивается как негативный (№§) результат.
Частота С819Т мутации гена ГЬ-10 в обследованных группах
В 20% случаев доноры являются носителями С819Т аллели гена ГЬ-10, в том числе Р§ош 10% и 10% Pgt (табл. 2), что превышает аналогичные показатели в других эт-ногеографических исследованиях [2, 8, 14].
У кардиологических больных только в 13,% (2 из 13) выявлена С819Т мутация гена ГЬ-10 и оба сигнала соответствуют гетерозиготному состоянию.
Частоты встречаемости точечной мутации С819Т гена ГЬ-10 у онкологических больных представлены в таблице 2.
В соответствии с данными, приведенными в таблице 2, мутация в локусе 819 с заменой нуклеотида цитозина на тимин (С819Т) у ГЬ-10 выявлена у 10 (40%) из 25 обследованных онкологических больных с диагнозом рак молочной железы. В 3 случаях - гомозиготная патология (Pgom) и в 7- патологическая гетерозиготное состояние (Pgt). Нормальное гомозиготное состояние по данному локусу подтверждено у 12 больных (48%) и у 3 -отсутствие нормальной или патологической аллели.
Частота мутации гена ГЬ-10 С819Т у доноров и онкологических больных
Точечная мутация Доноры (п=10) Онкологические больные (п=25)
гена ГЬ-10 Р§ош Р^ ^ош Р§ош Р^ ^ош
Частота С 819Т 1 1 8 - 3 7 12 3
% от п в группах 10% 10% 80% - 12% 28% 48% 12%
При сравнении распределения мутации ГЬ-10 С819Т в группе онкологических больных с ССЗ у 2 (20%) выявлен положительный сигнал мутантного гена (1РОош и 1Р01;) и у 12 (60%) подтверждена нормальная гомозигота; негативный сигнал выявлен у двух из 10 обследованных онкологических больных с ССЗ (табл. 3).
Таблица 3
Частота мутации гена ГЬ-10 С819Т у онкологических больных
Тип мутации ГЬ-10 Онкологические с ССЗ (п=10) Онкологические без ССЗ (п=15)
РОош Р^ ^ош РОош РО1 ^ош
ГЬ-10 С819Т 1 1 6 2 2 6 6 1
% от п в группах 10* 10* 60* 20* 13,3** 40** 40** * * 6,
* - от числа онкологических больных с ССЗ, **- от числа онкологических больных без ССЗ
Частота С819Т мутации ГЬ-10 в гомо- (п=2; 13,3%) и гетерозиготном (п=6; 40%) состоянии у онкологических больных без выраженных клинических симптомов ССЗ выше (п=8; 53,3%), что не позволяет считать наличие этого полиморфизма как высокий фактор риска сердечно-сосудистых осложнений при онкопатологии.
При анализе частоты встречаемости этой аллели в зависимости от гистологического варианта опухолей, стадии заболеваний и наличия иной сопутствующей патологии достоверных различий не выявлено (данные не приведены).
01082Л мутация гена ГЬ-10
01082А аллель гена ГЬ-10 исследована у 10 доноров, 13 кардиологических и 33 онкологических больных, данные по частотному распределению представлены в таблице 4.
У 3 из 10 доноров выявлена мутантная 01082Л аллель, в том числе 1 Р§ош и 2 Р§1 (табл. 4).
Из 13 кардиологических больных с выраженными клиническими проявлениями ССЗ только у 1 (7,6%) обнаружена мутантная 01082А аллель ГЬ-10.
Общая частота полиморфизма 01082Л гена ГЬ-10 у онкологических больных составляет 36,3 % (п=12), 6 % (п=2) - гомозиготная форма, а 30,3 % (п=10) в гетерозиготная аллель. Нормальное гомозиготное состояние этого гены по локусу 1082 выявлено в 39,4 % случаев (п=13), негативный сигнал - в 24,3 % (п=8) (табл. 4).
Частота мутации гена ГЬ-10 01082А у онкологических больных
Тип точечной мутации гена ГЬ-10 Доноры (п=10) Онкологические больные (п=33)
Р§ош Р§1 ^ош Р§ош Р^ ^ош
01082Л, число носителей 1 2 1 6 2 10 13 8
% от числа в группах 10% 20% 10% 60% 6% 30,3% 39,4% 24,3%
При осложненных сердечно-сосудистыми заболеваниями диагнозах рака молочной железы выявлено меньшее число больных - носителей 01082Л полиморфизма гена ГЬ-10.
В соответствии с данными, представленными в таблице 5, в группах доноров, онкологических больных с ССЗ и без таковых, достоверных различий в частоте встречаемости 01082Л полиморфизма гена ГЬ-10 не выявлено.
Таблица 5
Частота 01082Л полиморфизма гена ГЬ-10 в группах доноров и онкологических больных с сердечно-сосудистыми осложнениями, без ССЗ
Мутации гена ГЬ-10 Доноры (п=10) Онкологические больные (п=33)
с ССЗ (п=13) без ССЗ (п=20)
Р§ош О1 ^ош Р§ош О1 ^ош Р§ош О1 ^ош
О 1082 Л 1 2 1 6 1 3 8 1 1 7 5 7
Частота (%) в группах 10 20 10 60 7,7 23 61,6 7,7 5 35 25 35
2 частота (%) мутантных аллелей 30 30,7 40
При анализе зависимости частоты мутации 01082Л гена ГЬ-10 от стадии заболевания, степени злокачественности новообразований, гистотипов опухолей, возраста больных, достоверных различий не выявлено (данные не представлены).
Достоверных различий в частотах мутантных аллелей 01082Л и С819Т ГЬ-10 у онкологических больных с гистологически верифицированным диагнозом рака молочной железы не выявлено.
Сочетанное, т.е. одновременное носительство двух разных полиморфизмов ГЬ-10 выявлено у 1 донора (Р§1 С819Т и Р§1 01082Л) и у 3 онкологических больных (у 2 женщин С819Т и 01082Л аллели ГЬ-10 находятся в гетерозиготном состоянии, у 1 -в гомозиготном состоянии).
В определенном проценте случаев не выявлено ни патологической мутации, ни нормальной последовательности участков гена ГЬ-10 (№§), что может трактоваться как отсутствие искомых аллелей, но не исключать других мутаций.
Сравнительная частота С819Т и 01082Л аллелей ГЬ-10 в обследованных группах онкологических больных и доноров
Тип мутации ГЬ-10 Онкологические больные (n=25) Доноры (n=10)
с ССЗ (n=10) без ССЗ (n=15)
PGm PGt Ngm Neg PGom PGt Ngom Neg Pgom PGt Ngom Neg
ГЬ-10 819Т 1 1 6 2 2 6 6 1 1 1 8 -
% от п в группах 10 10 60 20 13.3 40 40 6.6 10 10 80 -
Тип мутации ГЬ-10 Онкологические больные (n=33) Доноры (n=10)
с ССЗ (n=13) без ССЗ (n=20)
PGm PGt Ngm Neg PGom PGt Ngom Neg Pgom PGt Ngom Neg
ГЬ-10 01082Л 1 3 8 1 1 7 5 7 1 2 1 6
% от п в группах 7.7 23 61.6 7.7 5 35 25 35 10 20 10 60
Выводы
1. У жителей Республики Адыгея выявлена высокая частота C819T и G1082A полиморфизмов гена IL- 10.
2. Носительство C819T и G1082A аллелей IL-10 не ассоциировано с наиболее часто регистрируемыми у населения Республики Адыгея злокачественными новообразованиями молочной железы и сердечно-сосудистыми заболеваниями.
3. Сочетанное носительство C819T и G1082A аллелей IL-10 у жителей Республики Адыгея не ассоциировано с онкопатологией.
Примечания:
1. Ковальчук Л.В., Ганковская Л.В., Рубакова ЭЛ. Система цитокинов. М., 1999. 78 с.
2. Kurzrock R. Cytokine deregulation in cancer / R. Kurzrock // Pharmacother. 2001. № 10. P. 543547.
3. Бережная H.M., Чехун В.Ф. Система цитокинов и рак. Киев: Диа, 2000. 224 с.
4. Воззианов А.Ф., Бутенко АЖ., Зак КЛ. Цитокины. Биологические и противоопухолевые свойства. Киев: Наукова Думка, 1998. 314 с.
5. Распределение частот аллелей и генотипов полиморфных локусов IL-1B, IL-1RN и IL-10 у человека при персистенции микоплазм (MYCOPLASMA HOMINIS) / О.А. Чернова [и др.] // Цитокины и воспаление. 2008. № 4. С. 25.
6. Аллельный полиморфизм генов про- и противовоспалительных цитокинов при инфаркте миокарда в европеоидной популяции мужчин / В Л. Коненков [и др.]. Новосибирск, 2008. 85 .
7. Interleukin-10 gene polymorphisms influence the clinical course of non-Hodgkin's lymphoma / K. Bogunia-Kubik [et al.] // Clinical Immunology. 2008. T. 71, № 2. P. 146-150.
8. . . - -
ми при аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток: автореф. дис. ... канд. мед. наук. СПб., 2008. 11 с.
9. IL-10 polymorphisms are associated with early-onset celiac disease and severe mucosal damage in patients of Caucasian origin / D. Barisani [et al.] // Breast Cancer Res Treat. 2006. T. 8, № 3. P. 169-174.
10. The interleukin-10 gene promoter polymorphism - 1087AG does not correlate with clinical outcome in non-Hodgkin's lymphoma / D. Kube [et al.] // Universitatsmedizin der Georg-August-Universitat / Department of Hematology and Oncology. 2007. 75 p.
11. Interleukin-10 -1082 G/A promoter polymorphism and pregnancy complications: results of a prospective cohort study in 1,616 pregnant women / F. Stonek [et al.] // Acta Obstet Gynecol Scand. 2008. Vol. 87, No. 4. P. 430-433.
12. Interleukin-10 [ATA] promoter haplotype and prostate cancer risk: a population-based study / T. Eder [et al.] // Eur J Cancer. 2007. Vol. 43, No. 3. P. 477-483.
13. Effect of interleukin-10 gene polymorphisms on clinical outcome of patients with aggressive non-Hodgkin's lymphoma: an exploratory study / D. Kube [et al.] // Breast Cancer Res Treat. 2008. Vol. 15, No. 12. P. 377-384.
14. Interleukin-10 promoter polymorphism is associated with decreased breast cancer risk / U. Langsenlehner [et al.] // Breast Cancer Res Treat. 2005. Vol. 90, No. 2. P. 113-115.
15. Genetic polymorphisms of interleukin (IL)-1B, IL-1RN, IL-8, IL-10 and tumor necrosis factor alpha and risk of gastric cancer in a Chinese population / W. Lu [et al.] // Carcinogenesis. 2005. No. 26. P 631-636.
