CC BY
8
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
263
Многие причины осложнений беременности основаны на факторах иммунобиологического взаимодействия на границе матка — плодное яйцо (плацента). Расшифровка механизмов регуляции этих взаимоотношений помогла бы решить проблемы в регенерационной медицине, в трансплантологии и в поиске методов лечения преэклампсии.
Иммуногистохимичскими методами изучены особенности локализации в плаценте биогенных аминов (кате-холамины, гистамин и серотонин), послойная топография макрофагов (00-68) и тучных клеток (триптаза) при преэклампсии (ПЭ).
Исследованы 24 плаценты от родильниц, перенесших ПЭ. Контролем служили 8 плацент от женщин с физиологическим течением беременности и родов. Кусочки, вырезанные из материнского, среднего и плодного слоев плаценты, обработаны общепринятыми гистологическими и иммуногистохимическими методами для выявления вышеназванных веществ и клеточных структур.
Установлено, что гистамин, серотонин и катехоламины выявляются диффузно в структурах плаценты и более отчетливо в макрофагах (гранулярных люминесцирующих клетках). При ПЭ содержание биогенных аминов в плаценте превышает нормальные показатели в 1,6 раза. Одновременно выявляется дисбаланс содержания биогенных аминов между клеточными структурами и стромой.
При легкой ПЭ экспрессия 0068 в материнской части плаценты достоверно не отличается от нормы, но в плодной части и в среднем слое достоверно повышается, превышая нормальные показатели примерно в 1,5 раза. При тяжелом течении ПЭ экспрессия 0068 повышается 3,5 раза во всех слоях плаценты.
При физиологическом течении беременности выявляются единичные тучные клетки в строме и в межворсинчатом пространстве. Триптаза в норме выявлялась в синци-тиотрофобласте, эндотелии капилляров, в строме ворсин хориона. При этом в межворсинчатом пространстве обнаруживались единичные триптазаположительные клетки.
При легком течении ПЭ экспрессия триптазы в структурах плаценты повышается и превышает норму более чем в 2 раза, а при тяжелом течении — экспрессия триптазы резко снижается и достоверно не отличается от нормальных показателей, но сопровождается появлением триптазы в межворсинчатом пространстве, что может свидетельствовать о срыве адаптационных возможностей матери и плода.
Выявленные особенности иммуногистохимических показателей в плаценте могут дать дополнительную информацию для расшифровки механизмов патогенеза преэклампсии.
ЧАСТИЧНОЕ РЕПРОГРАММИРОВАНИЕ КАК СПОСОБ РЕВИТАЛИЗАЦИИ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК ЧЕЛОВЕКА
М.А. Шорохова1, Ю.С. Иванова1, Л.Л. Алексеенко1, И.В. Кожухарова1, Н.А. Пуговкина1, А.П. Домнина1, И.К. Кунеев1, 2, Т.М. Гринчук1, О.Г. Люблинская1
1 Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 Санкт-Петербургский политехнический университет Петра Великого (СПбПУ), Санкт-Петербург, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: МСК, мезенхимные стволовые/стро-мальные клетки, клеточное старение, ревитализация, частичное репрограммирование.
Поиск путей предотвращения старения культивируемых мезенхимных стволовых/стромальных клеток человека (МСК) имеет как фундаментальное, так и прикладное значение, поскольку старение культур МСК препятствует внедрению в медицинскую практику клеточных продуктов, создаваемых на основе этих клеток. В данный момент мировым научным сообществом тестируется несколько стратегий замедления старения как на уровне клеток, так и на уровне организма в целом: модулирование сигнальных путей, ассоциированных с индукцией старения, элиминация стареющих клеток из популяции или из тканей организма с использованием сенолитиков, низкокалорийная диета и др. Однако, изучение процесса частичного репрограммирования клеток и возможностей с помощью этой технологии омолодить (ревитали-зировать) клетки и/или организм только начинается [1]. Примечательно, что наибольший успех в этой области был достигнут именно на моделях in vivo, тогда как клеточных работ в системе in vitro довольно мало, а полученные результаты иногда противоречивы. Настоящая работа направлена на изучение возможности ревитализировать постаревшие МСК эндометрия человека (эМСК) с применением техники частичного репрограммирования.
В своем исследовании мы оценили изменения,кото-рые произошли после индукции репрограммирования в культурах эМСК, постаревших в результате длительного культивирования (35-40 пассажей). Проведенные тесты показали, что спустя 3-5 дней после начала ре-программирования с помощью Сендай вирусов, кодирующих факторы Яманаки (OSKM), эМСК сохраняли свой фенотип и характеризовались экспрессией поверхностных маркеров, типичных для МСК. В то же время, ре-программируемые клетки утратили черты постаревших: они изменили морфологию, утратили распластанность и уменьшились в размере; уменьшился сигнал автофлуоресценции, связанный c накоплением в постаревших клетках липофусцина; в ядрах исчезли разрывы ДНК; сократилось количество клеток, экспрессирующих галактозидазу, ассоциированную со старением; активизировались системы тиол-дисульфидного обмена, контролирующие клеточный редокс-метаболизм. В реви-тализированных клетках изменилась активность маркерных генов клеточного старения: снизилась экспрессия p21, ингибитора циклин-зависимых киназ, опосредующего блокирование пролиферации постаревших клеток; увеличилась экспрессия генов-участников ответа на повреждение ДНК (Chk1 и ATM), чья сниженная активность обеспечивает толерантность стареющих клеток к перси-стирующим разрывам ДНК; повысилась экспрессия генов, отвечающих за активизацию редокс-метаболизма клеток (TXN и PRDX1).
Таким образом, проведенные нами тесты выявили признаки ревитализации эМСК, наблюдаемые через 3-5 дней после индукции репрограммирования клеток. Работа поддержана грантом РНФ № 22-24-20122.
Литература:
1. Ocampo A., Reddy P., Martinez-Redondo P., et al. Cell 2016; V.
167. P.1719.
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
