Биомиметические конденсационные сложные сополиэфиры Текст научной статьи по специальности «Химические науки»

Высокомолекулярные соединения

Серия А

ВЫСОКОМОЛЕКУЛЯРНЫЕ СОЕДИНЕНИЯ, Серия А, 2006, том 48, № 8, с. 1365-1372

= СИНТЕЗ

УДК 541.64: 542.954

БИОМИМЕТИЧЕСКИЕ КОНДЕНСАЦИОННЫЕ СЛОЖНЫЕ СОПОЛИЭФИРЫ

© 2006 г. В. А. Васнев, Г. Д. Маркова, М. Л. Кештов, А. С. Перегудов, А. Р. Хохлов

Институт элементоорганических соединений имени А.Н. Несмеянова Российской академии наук

119991 Москва, ул. Вавилова, 28 Поступила в редакцию 28.03.2006 г. Принята в печать 10.04.2006 г.

Сополиконденсацией гидрофильных и гидрофобных сомономеров получены сополитерефталаты бмс-(4-гидрокси-3-метилфенил)-2,2-пропана и Ы-метилдиэтаноламина и их хлористоводородные соли различного состава и микроструктуры. Показано, что переход от статистических белковоподоб-ных структур к блочным позволяет сохранить биомиметические свойства сополимеров при меньшем содержании заряженных звеньев в макромолекулах. Способность заряженных полимеров оставаться в растворе в водных средах была использована для синтеза проявляющего фунгицидную активность сополитерефталата №бис-(гидроксиэтил)тетрадецилметиламмоний бромида и Ы-ме-тилдиэтаноламина.

В последние годы на основе компьютерного дизайна белковоподобных макромолекул были разработаны новые теоретические представления по созданию биомиметических функциональных сополимеров, образующих устойчивые в гидрофильных средах гидрофобные глобулы с гидрофильной внешней оболочкой [1—3]. Полученные в дальнейшем экспериментальные результаты показали применимость предложенных теоретических разработок для создания глобулярных белковоподобных высокомолекулярных соединений. Первыми примерами исследований в данной области послужили полимеризационные структуры [4], а также неорганические силоксановые полимеры. В последние годы были синтезированы белковоподобные конденсационные сополимеры с третичными аминогруппами в основной цепи макромолекул, которые как по строению, так и по методу их получения являются более близкими аналогами реальных биологических систем [5, 6]. Очевидно, что образование биомиметических конденсационных полимеров возможно двумя

E-mail: vasnev@ineos.ac.ru (Васнев Валерий Александрович).

способами: полимераналогичным превращением (гидрофилизацией) макромолекул наружного слоя гидрофобных полимерных глобул и поликонденсационным синтезом амфифильных сополимеров. Первое из указанных направлений - это реакции солеобразования аминосодержащих полимеров с кислотами или их кватернизации с га-лоидалкилами, приводящие к получению биомиметических полимеров. Второе направление -синтез белковоподобных сополимеров статистической и блочной микроструктуры низкотемпературной сополиконденсацией гидрофильных и гидрофобных сомономеров. Можно предположить, что при определенном количественном соотношении и характере распределения гидрофильных и гидрофобных звеньев в макромолекулах такие полимеры будут проявлять биомиметические свойства. При добавлении воды в раствор сополимера в органическом растворителе макромолекулярные клубки перестраиваются в гидрофобные глобулы с гидрофильным внешним слоем, что приводит к их устойчивости в водной среде. Такой подход экспериментально ранее не был реализован.

В рамках сформулированной задачи в качестве объекта исследования были выбраны сложные со-полиэфиры, получаемые акцепторно-каталитиче-ской сополиконденсацией дихорангидрида дикар-

боновой кислоты (интермономера) с бисфенолом и аминосодержащим гликолем или его кватерни-зованным производным. Реакции синтеза сополимеров и их строение представлены на схеме

С1С

О

С(СН3)3

СН3 СН3Г

СС1 + X НОСН2СН2КСН2СН2ОН -*)НОСН2СН2Н+СН2СН2ОН

СНз

3(С2Н5)3Ы

-2(С2Н5)3Ы НС1

С(СН3)3

[о у1 о

С(СН3)3

(1)

С1С II

о

СНз СН3

I 4—' о х—' сн3 х—'

СНз

со

II

о

СНз

-ОН + (1 - X) НОСН2СН2НСН2СН2ОН -

СНз

с-

СНз

СНз л

-о

3(С2Н5)3К 2(С2Н5)3 НСГ

II

СН3

с—а^^—сосн2сн2ысн2сн2о- -О ^—' о

НС1

(2)

СН3

СО

II

о

СНз СН3

СНз

-О

СН3 У

с—0^—сосн2сн2н+сн2сн2о- -6 ^^ О н

(3)

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

Дихлорангидрид терефталевой кислоты (ХАТК) и триэтиламин (ТЭА) очищали по известным методикам, их константы соответствовали литературным данным [7, 8].

1Ч-метилдиэтаноламин и 5-трет - бутил изоф-талевую кислоту фирмы "АМпсЬ' использовали без предварительной очистки.

2>мс-(4-гидрокси-3-метилфенил)-2,2-пропан (ди-метилдиан) и дихлорангидрид 5-трет-бутилизо-фталевой кислоты получали по описанным мето-

дикам, их константы совпадали с приведенными в литературе [9, 10].

Синтез К-бмс-(гидроксиэтил)диметиламмоний иодида проводили следующим способом. В трех-горлую колбу, снабженную мешалкой и трубкой для подачи аргона, загружали 20 г (0.168 моля) 1Ч-метилдиэтаноламина и 23.87 г (0.168 моля) све-жеперегнанного иодистого метила. Реакционную смесь во время добавления иодистого метила охлаждали до 0°С. Затем температуру в бане поднимали до комнатной и перемешивали 4 ч. Образовавшийся белый парафинообразный осадок промывали бензолом от непрореагировавших ис-

ходных соединений и высушивали в вакууме 12-15 ч при 45°С. Выход 36.64 г (83.52%); 7Ш1 = 54-55°С.

Найдено, %: С 28.79; Н6.15; 148.35; N5.68. Для С6Н161Ш2

вычислено, %: С 27.59; Н6.13; 148.66; N5.36.

Аналогичным способом при температуре реакции 80-100°С и постоянном перемешивании в течение 7 ч получали М-бмс-(гидроксиэтил)бу-тилметиламмоний иодид С9Н201МО2 в виде масляной густой жидкости и парафинообразные Ы-бмс-(гидроксиэтил)октилметил-аммоний бромид С13Нз0ВгЖ)2, Г4-бмс-(гидроксиэтил)децил-метиламмоний бромид С15Н34ВгЫ02 и М-бмс-(гидроксиэтил)тетрадецилметиламмоний бромид С19Н42ВгЖ)2. Чистоту полученных веществ подтверждали данными элементного микроанализа:

Найдено, %: С 35.61; Н7.31; 141.94; N4.68. ДляС9Н20ШО2

вычислено, %: С 35.64; Н7.26; 141.92; N4.62.

Найдено, %: С 50.40; Н9.56; Вг 25.46; N4.57. ДляС13Н3оВгЖ)2

вычислено, %: С 50.00; Н9.62; Вг 25.64; N4.49.

Найдено, %: С 52.79; Н 10.33; Вг 23.83; N4.00. Для С15Нз4В^02

вычислено, %: С 52.94; Н 10.00; Вг 23.53; N4.12.

При постадийном способе сополиконденсации вначале проводили поликонденсацию части интермономера с одним из сомономеров и половинным количеством ТЭА, а затем в полученный реакционный раствор добавляли второй сомономер со второй половиной ТЭА, вводили оставщуюся часть интермономера и реакцию продолжали 1 ч.

При трехстадийной сополиконденсации сначала по отдельности вели поликонденсацию каждого из сомономеров с интермономером. При этом в одном из растворов интермономер находился в избытке, а во втором - в недостатке по отношению к диолу. Затем оба объема объединяли и реакцию продолжали в течение 2 ч.

Ниже в качестве примера приведены методики получения сополитерефталата диметилдиана и К-метилдиэтаноламина.

Одностадийная поликонденсация

В трехгорлую колбу, снабженную мешалкой и трубкой для подачи аргона, загружали 3.04 г (0.0119 моля) диметилдиана, 0.0744 г (0.0006 моля) ^метилдиэтаноламина, 25 мл дихлорэтана и 2.525 г (0.025 моля) ТЭА. Реакционную смесь нагревали на водяной бане до 40°С, добавляли 2.5375 г (0.0125 моля) ХАТК и перемешивали в течение 1 ч. Полученный полимер высаждали в метиловый спирт, отфильтровывали, отмывали водой от солянокислого ТЭА, промывали метиловым спиртом и сушили в вакууме 12-15 ч при 50°С до постоянной массы.

Найдено, %: С 57.86; Н 10.45; Вг 20.18; N3.36; Для С19Н42ВгЖ)2

вычислено, %: С 57.58; Н 10.61; Вг 20.20; N3.54.

Сложные сополиэфиры синтезировали методами одностадийной, постадийной и трехстадийной акцепторно-каталитической поликонденсации в дихлорэтане.

При одностадийной поликонденсации к раствору сомономеров и триэтиламина добавляли дихлорангидрид дикарбоновой кислоты и перемешивали реакционную смесь 2 ч.

Постадийная поликонденсация

В трехгорлую колбу, снабженную мешалкой и трубкой для подачи аргона, загружали 3.04 г (0.0119 моля) диметилдиана, 2.3189 г (0.01142 моля) ХАТК и 25 мл дихлорэтана. Реакционную смесь перемешивали 5 мин и добавляли 2.3998 г (0.0238 моля) ТЭА, затем перемешивали 15 мин и вводили в зону реакции 0.0744 г (0.00062 моля) М-метилдиэтаноламина и 0.1263 г (0.00125 моля) ТЭА, снова перемешивали 15 мин, добавляли 0.2186 г ХАТК и вели реакцию еще в течение 1 ч. Полученный сополимер высаждали в метиловый спирт, отфильтровывали, промывали водой от солянокислого ТЭА, промывали метиловым

Таблица 1. Влияние условий синтеза* на микроструктуру (А"м) сополитерефталата диметилдиана и Ы-ме-тилдиэтаноламина (реакция (2))

Образец, № Способ сополиконденсации Ллог> Дл/г

1 Постадийная 0.51 0.98

2 Одностадийная 0.41 0.56

3 Трехстадийная 0.62 0.27

* Синтез проводили при мольном соотношении диметил-диан : М-метилдиэтаноламин = 0.75 : 0.25. Выход сополимеров 98-100 %.

спиртом и сушили в вакууме 12-15 ч при 50°С до постоянной массы.

Трехстадийная поликонденсация

В первую трехгорлую колбу, снабженную мешалкой и трубкой для подачи аргона, загружали 3.04 г (0.0119 моля) диметилдиана, 2.3189 г (0.01142 моля) ХАТК и 11 мл дихлорэтана. Реакционную смесь перемешивали 5 мин, добавляли 2.3998 г (0.02376 моля) ТЭА и перемешивали еще 15 мин.

Во вторую трехгорлую колбу, снабженную мешалкой и трубкой для подачи аргона, загружали 0.0744 г (0.00062 моля) ГЧ-метилдиэтанолами-на, 0.2186 г (0.00108 моля) ХАТК и 11 мл дихлорэтана. Реакционную смесь перемешивали 5 мин, добавляли 0.1894 г (0.001875 моля) ТЭА и перемешивали еще 15 мин. Содержимое второй колбы перегружали в первую, смывали остатки синтеза со стенок второй колбы 3 мл дихлорэтана, добавляли их в реакционный объем и продолжали перемешивание 2 ч.

Логарифмическую вязкость полимеров определяли для их 0.5%-ных растворов в тетрахлор-этане при 25°С.

В процессе изучения биомиметических свойств полимеров высаждение сополимеров водой проводили двумя методами: 1) к раствору 0.05 г незаряженного сополимера в 10 мл ./И-крезола приливали 3.5 мл метанола и затем в полученный раствор постепенно добавляли воду; 2) к раствору

0.05 г незаряженного сополимеров в 10 мл ле-кре-зола добавляли 1 мл метанола с соляной кислотой для образования рассчитанного количества солевых групп (образование заряженного полимера), а затем постепенно воду.

Для количественной оценки микроструктуры сополиэфиров использовали коэффициент микрогетерогенности Км, величину которого определяли методом ЯМР lH [ 11]. Спектры ЯМР снимали для 10%-ных растворов полимеров в дейтери-рованном хлороформе на спектрометре АМХ-400 фирмы "Bruker" с частотой 400.13 МГц.

Определение фунгицидной активности

Фунгицидная активность четвертичных солей N-метилдиэтаноламина и сополитерефталата диметилдиана и К-бис-(гидроксиэтил)тетрадецил-метиламмоний бромида определяли по радиальному росту мицеллярного гриба Fusarium oxysporum, взятого из коллекции культур Laboratory for Plant Pathology (Department of Marine Sciences and Applied Biology, University of Alicante, Spaine).

Раствор Antifungal assay agar фирмы "Sigma" (агар), содержащий 0.2 мг/мл испытуемого вещества, и контрольный раствор агара стерилизовали 20 мин при 121°С и выливали первый в четыре, второй - в две стерильные чашки Петри диаметром 9 см, помещенные в стерильный бокс. После охлаждения инокулировали образцы цилиндрическими кусочками 6 мм в диаметре, взятыми с края трех - пятидневных колоний Fusarium oxysporum на агаре. Образцы инкубировали в темном месте при 24°С. Радиальный рост колонии измеряли каждодневно в течение 3 недель.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Опираясь на данные, полученные нами по синтезу амфифильных сложных полиэфиров [5], мы полагали, что объектами исследования могли быть сополи-5-трет-бутилизофталаты N-метилдиэтаноламина и 1Ч-бмс-(гидроксиэтил)диметил иодида (уравнение (1)), которые хорошо растворяются в органических растворителях. К сожалению, из-за наложения сигналов различных метальных групп в области 1.1-1.4 м.д. нам не удалось рассчитать микроструктуру таких полимеров, и

мы остановили свой выбор на сополитерефтала-тах диметилдиана и N-метилдиэтаноламина (реакция (2)). 1

В спектрах ЯМР !Н сополитерефталатов диметилдиана и N-метилдиэтаноламина (раство-

ры в дейтерохлороформе) присутствуют сигналы (синглеты) при 8.34 и 8.02 м.д., соответствующие гомотриадам А и Б, а также квадруплет-ный сигнал (8.25, 8.22, 8.13 и 8.11 м.д.) от гете-ротриады В:

СН3 СН3 СН3 СН3

Гомотриада А СН3 СН3

—OCH2CH2NCH2CH2OC—COCH2CH2NCH2CH2O— Ö ' Ö Гомотриада Б

СНз СН3 сНз

~OH0b?^0bOC^QbcOCH2CH2NCH2CH2O-

Гетеротриада В

Из данных ЯМР спектров были рассчитны величина Км и средняя длина блоков, служащие количественной характеристикой регулярности строения полимерной цепи [11].

С целью нахождения оптимальных условий образования статистических (£м = 1) и блочных сополиэфиров (Км = 0-1) был проведен синтез сополимера одного и того состава различными способами (табл. 1). Как следует из полученных данных, постадийная сополиконденсация приводит к образованию статистической микроструктуры полимера с Ки = 0.98. Одностадийная сополиконденсация с добавлением последним в зону реакции ХАТК ведет к блочному строению полимерной цепи (Км = 0.56); еще большая упорядоченность сополиэфира (Км = 0.27) достигается при трехстадийном методе проведения реакции. Полученные результаты использованы в синтезе сополиэфиров различной микроструктуры и состава, представленных в табл. 2.

Для придания биомиметических свойств ами-носодержащим сополимерам была проведена

гидрофилизация внешнего слоя макромолекул и оценена их устойчивость к гидрофильной среде при 20°С. С этой целью аминогруппы сополиэфиров, находящихся в форме клубков, переводили в солевую форму взаимодействием с HCl (реакция (3)) и сравнивали устойчивость 1%-ных растворов незаряженного и заряженного полимеров в органическом растворителе к действию осадителя -воды. Полученные данные также приведены в табл. 2.

Установлено, что способность сополимеров высаждаться из раствора в органическом растворителе водой зависит от количества заряженных звеньев и характера их распределения в макромолекулах. Статистические сополиэфиры остаются в растворе при содержании заряженных аминосо-держащих гликольных звеньев 50-20% (табл. 2, образцы 1-3). Уменьшение количества солевых фрагментов с 20 до 15 и 5% приводит к высажде-нию полимеров водой (табл. 2, образцы 4, 5). Обращает на себя внимание тот факт, что переход от статистических структур к блочным (длина блока hac ~ 5) позволяет расширить границу

Таблица 2. Результаты синтеза и исследования сополитерефталатов диметилдиана и N-метилдиэтаноламина*

Образец, № Мольное соотношение мономеров Ллоп Дл/г А/** х 10"3 Микроструктура Высаждение сополимеров

"ас "be Не заряженная форма СН3 -ch2nch2- Заряженная форма СН3 СГ -CH2N+CH2- н

Статистические сополиэфиры

1 50:50 0.35 - 0.96 2.1 2.0 Осадок Нет

2 75:25 0.51 25.0 0.98 3.8 1.4 » »

3 80:20 0.25 - 1.05 5.0 1.2 » »

4 85: 15 0.65 17.4 0.77 8.3 1.5 » Осадок

5 95:5 1.07 39.0 0.95 25.0 1.1 » »

Блочные сополиэфиры

6 80:20 0.62 14.5 0.27 14.3 5.0 Осадок Нет

7 85: 15 0.60 15.6 0.21 33.3 5.5 » »

* Синтез проводили методами одностадийной, постадийной (статистические сополимеры) и трехстадийной (блочные сополимеры) сополиконденсацией. Выход сополимеров составляет 98-100%. ** Определяли методом светорассеивания в хлороформе.

устойчивости сополимеров к водным растворам. Блочные сополиэфиры не высаждаются водой даже при содержании заряженных звеньев 15% (табл. 2, образцы 6,7).

Следует отметить, что заряженные сополиэфиры, которые не высаждаются водой из органического растворителя (табл. 2, образцы 1-3), после выделения из раствора в воде уже не растворяются. По-видимому, при постепенном добавлении воды к раствору полимера в органическом растворителе наблюдается переход от полимерных клубков к глобулам с заряженным внешним слоем, который и придает устойчивость макромолекулам в водной среде.

Представлялось интересным использовать найденную способность амфифильных сополиме-

ров оставаться в растворе в водных системах для получения полимерных водорастворимых фунгицидов. С этой целью были синтезированы кватер-низованные алкилпроизводные N-метилдиэтаноламина (реакция (4)) и гомополимеры на их основе (реакция (5)):

СН3 I

HOCH2CH2NCH2CH2OH + Alk Hal —

СН3 Hal" (4)

I

—- H0CH2CH2N+CH2CH20H ' Alk

где Alk = СН3, W-C4H9, н-С8Н17, h-C10H2i, и-С14Н29; Hal = J", Br.

°K>0

О — о

СН3 НаГ I

СС1 + H0CH2CH2N+CH2CH20H Alk

3(C2Hs)3N -2(С2Н5)з HCl

-c4fV<

CH3 Hal" I

C-^^cOC^C^NW^Of (5)

О

о

Alk

Поскольку гомополиэфиры оказались не рас- сти была проведена только для четвертичных со-творимы в воде, оценка фунгицидной активно- лей ^метилдиэтаноламина (рис. 1). Как видно, в

выбранном ряду кватернизованных производных наибольшую фунгицидную активность проявляют 1Ч-6ш>(гидроксиэтил)децил и М-6мс-(гидрок-сиэтил)тетрадецилметиламмоний бромиды.

Исходя из полученных данных по фунгицид-ной активности мономеров, был синтезирован со-

Как и следовало ожидать, данный сополимер не высаждается водой из раствора в Ы^-диметил-формамиде. Он уступает исходному >1-6ш>(гид-роксиэтил)тетрадецилметиламмоний бромиду и М-бмс-(гидроксиэтил)децилметиламмоний бромиду по фунгицидной активности, но превосходит

d, мм

Рис. 1. Фунгицидные свойства кватернизованных

СН, Hal" I

соединений HOCH2CH2N+CH2CH2OH , ще R = Н (7), R

СН3 (2), С4Н9 (3), «-С8Н17 (4), н-С10Н21 (5), н-С14Н29 (6); светлая колонка - сополимер с 80% СН3 В г

-CH^CH,N+CH7CHo " " I

С14Н29

полиэфир, содержащий максимальное количество фунгицидноактивного сомономера, в данном случае 80% звеньев К-бмс-(гидроксиэтил)тетра-децилметиламмоний бромида, и 20% звеньев гидрофильного сомономера Ы-метилдиэтаноламина, заряженных соляной кислотой:

(6)

(7)

активность К-6мс-(гидроксиэтил)октиламмоний бромида в 3 раза (рис. 1).

Таким образом, в результате проведенного исследования впервые методом сополиконденсации синтезированы белковоподобные конденсационные сложные сополиэфиры и найдена зависимость биомиметических свойств от состава и микроструктуры макромолекул. Показана возможность проявления фунгицидной активности сополимерами, содержащими кватернизованные аммонийные производные N-метилдиэтаноламина.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Khokhlov A.R., Khalatur P.G. II Physica. A. 1998. V. 249. № 1. P. 253.

2. Khokhlov A.R., Ivanov V.A., Shusharina N.P., Khalatur P.G. // The Physics of Complex Liquids / Ed. by Yonezawa F., Tsuji K., Kaij K., Doi M., Fujiwara N. Singapore: World Scientific, 1998. P. 155.

3. Lozinsky V.l. II Adv. Polym. Sei. V. 196. P. 87.

4. Лозинский В.И., Сименел H.A., Курская E.A., Гринберг В.Я., Дубовик A.C., Галаев И.Я., Мат-тиасон Б., Хохлов А.Р. // Докл. РАН. 2000. Т. 375. № 5. С. 637.

С1С II

о

-о-

СН3 Вг" I

СН3

3(C2H5)3N

СС1 + 0.8 HOCH2CH2N+CH2CH2OH + O.2HOCH2CH2NCH2CH2OH _2(c2H5bN нсГ О С,4Н29

СН3 Вг"

■C^Q-COCH2CH2N-CH2CH20

0 0 с14н29

СН3

с—а^р—COCH2CH2NCH2CH2O-Ö ^—' Ö

HCl

СН3 ВГ

С—(См—СОСН>СН^+СН^СНоО

Д W А " "I " " 0 ° С14Но9

СН3 СГ

С—CQCH2CH2N+CH2CH20 ■

о

о

н

5. Маркова Г.Д., Васнев В Л., Кештов MJI., Виноградова C.B., Гаркуша О.Г. // Высокомолек. соед. А. 2004. Т. 46. №4. С. 615.

6. Кештов МЛ., Маркова Г.Д., Васнев В.А., Хохлов А.Р. // Высокомолек. соед. А. 2005. Т. 47. № 5. С. 725.

7. Салазкин С.Н., Калачев А.И., Коршак В.В., Виноградова C.B. М., 1975. 22с. - Деп. в ВИНИТИ 14.04.75. № 1064.

8. Корилак В.В., Виноградова C.B., Васнев В.А. // Высокомолек. соед. А. 1968. Т. 10. № 6. С. 1329.

9. Th. Lincke // Liebigs Ann. Chem. 1913. V. 400. P. 33.

10. McCall M.A., Calwell J.R., Macre H.G., Beard H.M. // J. Macromol. Sei. A. 1969. V. 3. № 5. P. 911.

11. Васнев В.А., Виноградова C.B., Маркова Г.Д., Вой-текунас В.Ю. // Высокомолек. соед. А. 1997. Т. 39. № 3. С. 412.

Biomimetic Condensation Copolyesters

V. A. Vasnev, G. D. Markova, M. L. Keshtov, A. S. Peregudov, and A. R. Khokhlov

Nesmeyanov Institute of Organoelement Compounds, Russian Academy of Sciences, ul. Vavilova 28, Moscow, 119991 Russia

Abstract—Copolyterephthalates of bis(4-hydroxy-3-methylphenyl)-2,2-propane and N-methyldiethanola-mine and their hydrochloric salts of various compositions and microstructures have been prepared by the co-polycondensation of hydrophilic and hydrophobic comonomers. It has been shown that the transition from random proteinlike structures to the block ones makes it possible to preserve biomimetic properties of the copolymers at a smaller content of charged units in macromolecules. The ability of charged polymers to survive in aqueous solutions has been used for the synthesis of copolyterephthalate of N-bis(hydroxyethyl)tetradecylme-thylammonium bromide and N-methyldiethanolamine demonstrating the fungicidal activity.