CC BY
12Ветеринарный врач. 2023. № 1 . С. 15 - 20. The Veterinarian. 2023; (1): 15- 20
Научная статья
УДК 619:616.98.578.636
DOI: 10.33632/1998-698Х_2023_1_15
Биологические свойства бактерий рода Moraxella, выделенных в Республике Казахстан
Рано Саитомаровна Саттарова 1, Флюра Альбертовна Бакиева 2, Карлыгаш Ерболатовна Боранбаева 3, Айдана Есещызы Аскарова 4, Геннадий Николаевич Спиридонов 5
1 2 Казахский научно-исследовательский ветеринарный институт, отдел эпизоотологического мониторинга и оценки рисков бактериальных болезней животных, Алматы, Казахстан, [email protected]
3' 4 Казахский национальный аграрный исследовательский университет, кафедра клинической ветеринарной медицины, Алматы, Казахстан, [email protected]
5 Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности, лаборатория бактериальных патологий животных, отдел бактериологии, Казань, Россия, [email protected]
Автор, ответственный за переписку: Рано Саитомаровна Саттарова, [email protected]
Аннотация. В статье приведены результаты изучения биологических свойств бактерий рода Moraxella, выделенных из пораженных глаз крупного рогатого скота мясного направления продуктивности, содержащихся в хозяйствующих субъектах Республики Казахстан. Бактериологическому исследованию подвергнуто 339 пробы биоматериала. Изучены биологические свойства двух эпизоотических изолятов бактерий рода Moraxella, из числа выделенных нами от больных животных, а также референтных штаммов Moraxella bovis АТСС 17948™ и Moraxella bovoculi ВАА 1259™, полученных от «LGC Standards Sp.z. o.o.» (Польша). Полученные результаты свидетельствуют о том, что бактерии Moraxella bovis и Moraxella bovoculi, возбудители моракселлеза крупного рогатого скота, обладают гемолитическими свойствами, гиалуронидазной активностью in vivo, не ферментируют сахара, каталазоотрицательны, не образуют индол. Бактерии Moraxella bovis представляют собой диплобациллы длиной 1,5-2,0 мкм и шириной 0,5-1,0 мкм с округленными концами, расположенные парами в виде коротких цепочек или одиночно. Старые культуры и культуры после 48-72-часовой инкубации прогрессивно становятся полиморфными, проявляя вариабельность в размерах и форме клеток. Бактерии Moraxella bovoculi представляют собой грамотрицательные диплококки с диаметром клеток 0,7-1,3 мкм. При изучении дезаминазной активности культур моракселл положительные результаты наблюдали у бактерий Moraxella bovoculi у референтного штамма ВАА 1259™ и эпизоотического штамма № 2 «ФармАгро». Штаммы Moraxella bovis референтного АТСС 17948™ и полевого дезаминазной активностью не обладали. Бактерии рода Moraxella были патогенны для белых мышей при внутрибрюшинном введении. Полученные результаты исследований следует учитывать при разработке лечебно-профилактических мероприятий.
Ключевые слова: крупный рогатый скот, моракселлез, инфекционный кератоконъюнктивит, Moraxella, биологические свойства
Biological properties of bacteria of the genus Moraxella isolated in the Republic of Kazakhstan
Rano S. Sattarova 1, Flyura A. Bakiyeva 2, Karlygash Е. Boranbayeva 3, Aidana Е. Askarova 4, Gennady N. Spiridonov 5
1 2 Kazakh Scientific Research Veterinary Institute LLP, Department of epizootic monitoring and risk assessment of bacterial animal diseases, Almaty, Kazakhstan, [email protected]
3 4 Kazakh National Agrarian Research University, Department of Clinical Veterinary Medicine, Almaty, Kazakhstan, [email protected]
5 Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Laboratory of Bacterial Animal Pathologies, Department of Bacteriology, Kazan, Russia, [email protected]
The author responsible for the correspondence: Rano S. Sattarova, [email protected]
Abstract. The article presents the results of studying the biological properties of bacteria of the genus Moraxella, isolated from the of affected eyes cattle, kept in economic entities of the Republic of Kazakhstan. To bacteriological examination 339 biomaterial samples were subjected. The biological properties of two epizootic isolates of bacteria of the genus Moraxella, isolated from sick animals, as well as reference strains of Moraxella bovis ATCC 17948ТМ and Moraxella bovoculi BAA 1259™ obtained from LGC Standards Sp.z. o.o." (Poland). The obtained results indicate that the bacteria Moraxella bovis and Moraxella bovoculi, are causative agents of Pinkeye in cattle, have hemolytic properties, hyaluronidase activity in vivo, do not ferment sugar, are catalase-negative, and do not form indole. Bacteria Moraxella bovis are diplobacilli, 1.5-2.0 цт long and 0.5-1.0 цт wide with rounded ends, arranged in pairs, in the form of short chains or singly. Old cultures and cultures after 48-72 hours of incubation progressively become polymorphic, showing variability in cell size and shape. Moraxella bovoculi bacteria are gram-negative diplococci with a cell diameter of 0.71.3 цт. Study of deaminase activity of Moraxella cultures, shows positive results in Moraxella bovoculi bacteria: in the reference strain BAA 1259 ТМ and epizootic strain № 2 «FarmAgro». Reference and field strains of Moraxella bovis ATCC 17948ТМ don t hove deaminase activity. Bacteria of the genus Moraxella were pathogenic for white mice when administered intraperitoneally. The results of our research should be taken into account when developing therapeutic and preventive measures.
Keywords: cattle, Pinkeye of cattle, infectious keratoconjunctivitis, Moraxella, biological properties
Введение. Инфекционный кератоконъюнктивит моракселлезной этиологии впервые в Республике Казахстан был обнаружен и идентифицирован в 2016 году среди импортированного крупного рогатого скота абердин-ангусской породы [5].
Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота (ИКК), морaкcеллез или розовый глаз (Pinkeye) - заразное заболевание, которое поражает глаза крупного рогатого скота любого возраста, чаще у молодняка до 10-12 месячного возраста [8, 16]. Для заболевания характерны такие клинические признаки как слезотечение, катаральный или фиброзно-гнойный керaтоконъюнктивит, помутнения роговицы, прободение глазного яблока, потере зрения [17, 9, 16].
В Австралии это заболевание среди крупного рогатого скота мясного направления продуктивности ежегодно наносит ущерб более чем в 23 миллиона долларов, из-за потерь продукции, расходов на лечение и снижения продажной стоимости животного [16].
Конъюнктивит чаще всего вызывается бактериями Moraxella bovis. В то же время есть информация, что есть и другие потенциальные возбудители болезни. К ним относятся бактерии Moraxella bovoculi [17], микоплазмы [12], телязия [15, 11], хламидии, вирус инфекционного ринотрахеита крупного рогатого скота [2, 3]. Все эти микроорганизмы увеличивают риск инфицирования глаз. Мухи являются возможными трансмиссивными переносчиками возбудителя болезни. Помимо патогенов причиной заболевания глаз могут быть механическое повреждение органа зрения инородными предметами. Даже крошечные предметы, такие как остьи растений, пыль и пыльца могут попасть в глаз животного, мацерировать роговицу и облегчить прикрепление моракселл к роговице. Эти раздражители также вызывают конъюнктивит, что способствует дальнейшему распространению бактерий [7, 10, 18].
Исследователями [17] доказано, что возбудитель моракселлеза прикрепляться к роговице через фимбрий и вызывает повреждение эпителия роговицы. Последующее повреждение эпителия роговицы происходит действием структурного токсина (RTX) (цитотоксина) и гемолизина.
Однако бактерии рода Moraxella продуцируют множество ферментов, которые, хотя и не доказано их непосредственное участие в патогенезе и не изучены так подробно, как пили и цитотоксин могут быть вовлечены в развитие ИКК. К ним относятся различные гидролитические ферменты, включая эстеразу С4, эстеразу - липазу С8, липазу С14, фосфоамидазу, фосфатазу, лейцин и валин [9].
Цель наших исследований - изучение некоторых биологических свойств моракселл, в частности гиалуронидазной, уреазной активностей.
Материалы и методы. При постановке диагноза на инфекционный кератоконъюнктивит учитывали эпизоотологические сведения, клинические симптомы болезни, данные батериологических и серологических исследований биоматериалов. Для изучения биологических свойств выделенных культур в опыт взяты две эпизоотические культуры Moraxella bovis, из числа выделенных нами от больных животных, а также референтные штаммы Moraxella bovis АТСС 17948ТМ и Moraxella bovoculi ВАА 1259™, полученные от «LGC Standards Sp.z. o.o.» (Польша) на основании договора № 1 от 30 октября 2018 года.
Биоматериал был взят из носовых пазух и пораженных глаз крупного рогатого скота, содержащихся в некоторых хозяйствующих субъектах Алматинской, Акмолинской и Западно-
Казахстанской областей. Идентификaцию возбудителя моракселлеза осуществляли путем бактериологического исследования биоматериала, взятого стерильными палочками с пластиковой ручкой в транспортировочной пробирке со средой Amies в индивидуальной упаковке (Италия).
Лабораторные исследования проводили согласно «Методическим указаниям по диагностике, лечению и специфической профилактике ИКК КРС», утвержденным 19.10.2017 Минсельхоз России [6].
Для изучения биологических свойств выделенных культур в опыт взяты эпизоотические изоляты культур Moraxella, из числа выделенных нами из пораженных глаз крупного рогатого скота мясного направление продуктивности хозяйствующих субъектов Алматинской области. Всего исследовано 339 проб от 113 животных.
Результаты посева биоматериала на агар Хоттингера с 5 % содержанием дефибринированной крови барана учитывали через сутки после инкубирования при температуре 37 °С. При этом изучали размер, цвет и форму изолированных колоний. Обращали внимание на рост сопутствующей условно-патогенной микрофлоры.
Далее, гладкие гемолитические S-формы колонии пересевали на агар Хоттингера с 5 % содержанием крови барана с целью для выделения чистой культуры.
Сахаролитические свойства выделенных изолятов Moraxella изучали на среде Гисса, протеолитические свойства на желатиновом мясопептонном агаре. Изучали также индолообразующую и каталазную активность бактерий. Для индикации образования индола использовали раствор щавелевой кислоты.
Реакция на каталазу носит противоречивый характер [8, 4]. Для определения каталазной активности суточную культуру брали бактериологической петлей и на поверхности предметного стекла смешивали с 0,05-0,1 мл 3 % раствора перекиси водорода.
Патогенность культур бактерий Moraxella определяли на лабораторных животных. Для этого белым мышам внутрибрюшинно вводили 500 млн микробных клеток.
Изучение дезаминазной активности культур моракселл проводили путем высева исследуемых культур на питательную среду с добавлением в нее 0,002 % фенолрота и 0,1 % адениловой кислоты с последующим выдерживанием посевов в термостате при температуре от 37 °С до 38 °С в течение 24 часов. Наблюдение цвета культуры производилось визуально по изменению цвета питательной среды от светло-лимонного до красно-малинового [6].
Оценка дезаминазной активности проводилось по четырёхбалльной системе:
+++ - изменение цвета среды от светло-лимонного до красно-малинового в течение 2 часов
роста,
++ - красно-малиновый цвет среда приобретала по истечении 4 часов,
+ - изменение цвета среды от светло-лимонного до красно-малинового наступало по истечении 8 часов роста бактериальной культуры.
Проводили изучение гиалуронидазной активности выделенных изолятов бактерий Moraxella in vitro по методике, описанной А. Э. Высоцким и соавт. [1].
Гиалуронидазную активность изучаемых культур in vivo (на лабораторных животных) проводили по следующей схеме:
№ 1 - раствор трипановая синька+физраствор, вводили внутрикожно по 0,2 см3,
№ 2 - бактериальную суспензию 10 млрд концентрации, которую смешивали 1:1 с 1 %-ым раствором трипановой синьки и вводили внутрикожно по 0,2 см3,
№ 3 - трипановая синька + раствор гиалуронидазы вводили внутрикожно по 0,2 см3.
Все три взвеси вводили одному кролику альбиносу внутрикожно на боковую поверхность, предварительно выбритой от кожи по 0,2 см3.
Учет и оценка результатов внутрикожного распространения введенной взвеси учитывали через 24 часа после инъекции препаратов.
Результаты исследований. Исследуемые культуры МогахеПа bovis обладали гемолитическими свойствами, образуя узкую зону ß - гемолиза на 5 % дефибринированном кровяном агаре Хоттингера. При микроскопировании в мазках, окрашенных по Граму, бактерии представляли собой короткие палочки, расположенные парами или короткими цепочками. На жидкой питательной среде бактерии росли в виде помутнения среды и выпадения на дне пробирки небольшого осадка.
Бактерии Moraxella bovoculi представляют собой грамотрицательные диплококки.
Бактерии рода Moraxella в средах Гисса не оказывали ферментирующего действия на сахара, т.е. при росте они не меняли цвет питательной среды на розовый или малиновый. При посеве на желатиновый агар наблюдалось слоистое разжижение в основном в верхней части пробирки.
Культуры бактерий рода Moraxella являются каталазоположительными, т.е. при перемешивании с раствором перекиси водорода образуют пузырьки газа. Реакция на образование индола была отрицательной.
Бактерии Moraxella вызывают гибель белых мышей в течение 24 часов при внутрибрюшинном введении им суточной агаровой культуры в дозе 500 млн микробных клеток.
При изучении дезаминазной активности культур моракселл, положительный результат наблюдался у референтного штамма Moraxella bovoculi ВАА 1259™ и эпизоотического штамма № 2 (ФармАгро). У всех остальных полевых культур и референтного штамма Moraxella bovis АТСС 17948™ изменение цвета питательной среды не наблюдалось.
При изучении гиалуронидазной активности бактерий рода Moraxella in vitro в опытной пробирке не образовывался муцин, т.е. реакция была отрицательной.
В контрольной пробирке сгусток муцина образовался в результате взаимодействия гиалуроновой и уксусной кислот.
Далее, определяли гиалуронидазную активность изучаемых культур in vivo. Полученные данные отражены на рисунке 3.
а - сразу после введение б - через 24 часа
Рисунок 3 - Гиалуронидзная активность при внутрикожном введении баквзвеси культур моракселл
На рисунке 3 видно, что на месте укола № 2 суточной бактериальной взвеси культур Moraxella с трипановой синькой наблюдается расширение зоны до 2 см в радиусе через 24 часов после инъекции. В положительной контрольной точке укола № 3, на месте введение гиалуронидазы с трипановой синькой, расширение зоны около 0,5 см. В отрицательной контрольной точке укола № 1 распространение краски не наблюдается.
Заключение. Эпизоотические культуры Moraxella bovis, из числа выделенных от пораженых глаз больных животных, а также референтные штаммы Moraxella bovis АТСС 17948ТМ и Moraxella bovoculi ВАА 1259ТМ обладали гемолитическими свойствами, образуя узкую зону ß-гемолиза. Культуры Moraxella bovis представляли собой диплобациллы с округленными концами, а Moraxella bovoculi грамотрицательные дипло- и тетракокки.
В средах Гисса не оказывают ферментирующего действия на сахара, каталазоотрицательны, не образуют индол, не выделяют аммиак, являются патогенными для белых мышей. При изучении дезаминазной активности выделенных культур, выделение аммиака наблюдалась у эпизоотического штамма № 2 и референтного штамма Moraxella bovoculi ВАА 1259™.
Полученные данные свидетельствуют, что выделенные нами бактериальные культуры моракселл обладали гиалуронидазной активностью. Гиалуронидаза усиливает и отягощает течение патологического процесса у животных, ускоряет микробное распространение в тканях.
Следовательно, результаты наших исследований свидетельствуют о том, что возбудитель моракселлеза крупного рогатого скота обладает гемолитическим свойствам, не ферментируют сахара, каталазоотрицательны, не образует индол, являются патогенными для белых мышей. Moraxella bovoculi обладает деаминазной активностью и гиалуронидазной активностью in vivo.
Благодарности: авторы выражают благодарность доктору ветеринарных наук, профессору, академику НАН РК Иванову Николаю Петровичу за оказанную методическую помощь в проведении работы.
Литература
1. Высоцкий, А. Э. Справочник по бактериологическим методам исследований в ветеринарии / А. Э. Высоцкий, З. Н. Барановская. - URL: http://www. studmed.ru>...baranovskaya-zn...bakteriologicheskim...v... (дата обращения: 11.06.2022).
2. Лебедев, А. В. Частная ветеринарная хирургия / А. В. Лебедев, В. А. Черванев // Москва : Колос, 1997. - 496 с.
3. Майчук, Ю. Ф. Новое в эпидемиологии и фармакотерапии глазных инфекций / Ю. Ф. Майчук // Клиническая офтальмология. - 2000. - Т. 1. - С. 48-51.
4. Методические рекомендации по диагностике, лечению и специфической профилактике инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, вызванного бактериями Moraxella bovis и Moraxella bovoculi / Г. Н. Спиридонов, Х. З. Гаффаров, А. И. Никитин [и др.]. - Москва : Росинформагротех, 2017. - 36 с.
5. Моракселлез у КРС в Казахстане / Н. П. Иванов, А. А. Султанов, Ф. А. Бакиева [и др.] // Известий НАН РК. Серия аграрных наук. - 2016. - № 5 (35). - С. 20-29.
6. Саримбекова, С. Н. Факторы патогенности бактерий, обнаруживаемых (заселяющихся) в молоке коз : дис. ... магистр тех. наук, 2014. - 74 с.
7. Субботин, В. В. Биологические свойства выделенных культур Moraxella bovis / В. В. Субботин,
B. Н. Карайченцев, В. В. Карайченцев // Ветеринарная патология. - 2014. - № 2. -С. 31-34.
8. Штамм Moraxella bovoculi «СХ-Ч6 №-ДЕП» возбудителя инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / Г. Н. Спиридонов, Л. Ш. Дуплева,А. Г. Спиридонов [и др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н. Э. Баумана. - 2017. - Т. 232 (№ 4). -
C.140-143.
9. Angelos, J. A. Infectious bovine keratoconjunctivitis (pinkeye) / J. A. Angelos // Vet. Clin N Am Food Anim Pract. - 2015. - No 31. - Р. 61-79.
10. Brown, J. F. Relationship of feeding activity of face fly (Musca autumnalis DeGeer) toproduction of keratoconjunctivitis in calves. / J. F. Brown, Jr. Adkins // Am. J. Vet. Res. - 1972. - No 33. - P. 2551-2555.
11. Gabriela, C. P. Moraxella bovis pathogenicity: An update / C. P. Gabriela, J. C. Carfagnini, L. Minatel // Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases. - 2008. - No 31. (https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0147957108000155 (дата обращения: 11.06.2022).
12. Krafsur, E. S. Bovine thelaziasis in Iowa / E. S. Krafsur, C. J. Church // J Parasitol. - 1985. - No 71 (3): Р.279-86. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed /4040164) (дата обращения: 11.06.2022).
13. Ladouceur, C. A. Eye worms in cattle in Indiana / C. A. Ladouceur, K. R. Kazacos // J Am Vet Med Assoc. - 1981. - 178 (4): 385-7. - URL: https: // www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7195389 (дата обращения: 11.06.2022).
14. Moraxella bovoculi sp. nov., isolated from calves with infectious bovine keratoconjunctivitis / J. A. Angelos, P. Q. Spinks, L. M Ball, L. W. George // Int J Syst Evol Microbiol. - 2007. - No 57. - Р. 789-795.
15. Pathogenesis of Bacterial Infections in Animals. Fourth Edition / Carlton L. Gyles, John F. Prescott, Glenn Songer, Charles O. Thoen. - 2010. - P. 469-481.
16. Schnee, C. Point prevalence of infection with Mycoplasma bovoculi and Moraxella spp. in cattle at different stages of infectious bovine keratoconjunctivitis / C. Schnee, M. Heller, E. Schubert // Vet J. - 2015. - No 203 (1). - Р. 92.
17. Transmission of Moraxella bovis from Blood Agar Cultures to Hereford Cattle by Face Flies (Diptera: Muscidae) / J. J. Arends, R. E. Wright, P. B. Barto, K. S. Lusby // J. Econ. Entomol. - 1984. - No 77. - P. 394-398.
18. The role of face flies in an episode of infectious bovine keratoconjunctivitis / R. R. Gerhardt, J. W. Allen, W. H. Greene, P. C. Smith // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1982. - No 180. - P. 156-159.
19. Whittier, W. Pinkeye in Beef Cattle / W. Whittier, John Currin, Nancy Currin // Virginia Cooperative Extension Publications. - URL: https: // ext.vt.edu>index.html. - Дата публикации: 01 мая 2009.
References
1. Vysotsky, A. E. Handbook of bacteriological research methods in veterinary medicine / A. E. Vysotsky, Z. N. Baranovskaya. - URL: http://www. studmed.ru >.baranovskaya-zn.. .bakteriologicheskim .v. (accessed: June 11, 2022).
2. Lebedev, A. V. Private veterinary surgery / A. V. Lebedev, V. A. Chervanev // Moscow : Kolos, 1997. - P. 496.
3. Maichuk, Yu. F. New in the epidemiology and pharmacotherapy of eye infections / Yu. F. Maychuk // Clinical ophthalmology. - 2000. - Vol. 1. - P. 48-51.
4. Guidelines for the diagnosis, treatment and specific prevention of infectious bovine keratoconjunctivitis caused by the bacteria Moraxella bovis and Moraxella bovoculi / G. N. Spiridonov, Kh. Z. Gaffarov, A. I. Nikitin [et al.]. - Moscow : Rosinformagrotech, 2017. - P. 36.
5. Pinkeye of cattlein in Kazakhstan / N. P. Ivanov, A. A. Sultanov, F. A. Bakieva [et al.] // Izvestiya NAN RK. Seriya Agrarnykh Nauk. - 2016. - No 5 (35). - С. 20-29.
6. Sarimbekova, S. N. Pathogenicity factors of bacteria found (inhabited) in goat milk : Cand. ... master of tech. Sciences, 2014. - P. 74.
7. Subbotin, V. V. Biological properties of the isolated Moraxella bovis cultures / V. V. Subbotin, D. V. Karaichentsev, V. N. Karaichentsev // Veterinary Pathology. - 2014. - No 2. - P. 31-34.
8. Moraxella bovoculi strain «CX-Ch6 No. -DEP» of the causative agent of infectious bovine keratoconjunctivitis. / G. N. Spiridonov, L. Sh. Dupleva, A. G. Spiridonov [et al.] // Uchenye zapiski KGAVM im. N.E. Bauman. - 2017. - Vol. 232 (No 4). - P. 140-143.
9. Angelos, J. A. Infectious bovine keratoconjunctivitis (pinkeye) / J. A. Angelos // Vet. Clin N Am Food Anim Pract. - 2015. - No 31. - Р. 61-79.
10. Brown, J. F. Relationship of feeding activity of face fly (Musca autumnalis DeGeer) toproduction of keratoconjunctivitis in calves. / J. F. Brown, Jr. Adkins // Am. J. Vet. Res. - 1972. - No 33. - P. 2551-2555.
11. Gabriela, C. P. Moraxella bovis pathogenicity: An update / C. P. Gabriela, J. C. Carfagnini, L. Minatel // Comparative Immunology, Microbiology and Infectious Diseases. - 2008. - No 31. -P. 449-458. - URL: https://doi.org/10.1016/j.cimid.2008.04.001
(https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0147957108000155 (accessed: 11.06.2022).
12. Krafsur, E. S. Bovine thelaziasis in Iowa / E. S. Krafsur, C. J. Church // J Parasitol. - 1985. - No 71(3): Р.279-86. https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed /4040164) (accessed: 11.06.2022).
13. Ladouceur, C. A. Eye worms in cattle in Indiana / C. A. Ladouceur, K. R. Kazacos // J Am Vet Med Assoc. - 1981. - 178 (4): 385-7. - URL: https: // www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/7195389 (accessed: 11.06.2022).
14. Moraxella bovoculi sp. nov., isolated from calves with infectious bovine keratoconjunctivitis / J. A. Angelos, P. Q. Spinks, L. M Ball, L. W. George // Int J Syst Evol Microbiol. - 2007. - No 57. -Р. 789-795.
15. Pathogenesis of Bacterial Infections in Animals. Fourth Edition / Carlton L. Gyles, John F. Prescott, Glenn Songer, Charles O. Thoen. - 2010. - P. 469-481.
16. Schnee, C. Point prevalence of infection with Mycoplasma bovoculi and Moraxella spp. in cattle at different stages of infectious bovine keratoconjunctivitis / C. Schnee, M. Heller, E. Schubert // Vet J. - 2015. - No 203 (1). - Р. 92.
17. Transmission of Moraxella bovis from Blood Agar Cultures to Hereford Cattle by Face Flies (Diptera: Muscidae) / J. J. Arends, R. E. Wright, P. B. Barto, K. S. Lusby // J. Econ. Entomol. - 1984. - No 77. - P. 394-398.
18. The role of face flies in an episode of infectious bovine keratoconjunctivitis / R. R. Gerhardt, J. W. Allen, W. H. Greene, P. C. Smith // J. Am. Vet. Med. Assoc. - 1982. - No 180. - P. 156-159.
19. Whittier, W. Pinkeye in Beef Cattle / W. Whittier, John Currin, Nancy Currin // Virginia Cooperative Extension Publications. - URL: https: // ext.vt.edu>index.html. - Published: May 01 2009.
Вклад авторов:
Саттарова Р. С. - концепция и дизайн исследований, проведение экспериментальной части работы, интерпретация результатов, написание текста.
Бакиева Ф. А. - проведение экспериментальной части работы, интерпретация результатов. Боранбаева К. Е. - проведение экспериментальной части работы. Аскарова А. Е. - проведение экспериментальной части работы.
Спиридонов Г.Н. - редактирование текста, утверждение окончательной версии статьи. Все авторы сделали эквивалентный вклад в подготовку публикации. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Contribution of the authors:
Rano S. Sattarova - research concept and designs, conducting the experimental part of the work, interpretation of the results, writing of the text.
Flyura A. Bakiyeva - conducting the experimental part of the work, interpretation of the results.
Karlygash Е. Boranbayeva - conducting the experimental part of the work.
Aidana Е. Askarova - conducting the experimental part of the work.
Gennady N. Spiridonov - editing of the text, approval of the final version of the article.
All authors have made an equivalent contribution to the preparation of the publication.
The authors declare that there is no conflict of interest.
© Саттарова Р. С., Бакиева Ф. А., Боранбаева К. Е., Аскарова А. Е., Спиридонов Г. Н. 2023
