CC BY
649. Epizootologicheskie osobennosti yashchura tipa A, vyzvannye geterologichnymi shtammami virusa [Epezootological peculiarities of FMD type A caused by virus heterological strains] / A.V.Mishchenko [et al.] // Veterinariya. - 2014. - № 11. - P. 20-24.
10. Yashchur [The foot and mouth disease] / A.N.Burdov [et al.]; edited by A.N.Burdov. - Moscow: Agropromizdat, 1990. - 320 p.
11. Yashchur. Kodeks zdorov'ya nazemnyh zhivotnyh MEHB [The foot and mouth disease. Code of terrestrial animal health] // Vsemirnaya organizaciya zdravoohraneniya zhivotnyh. Glava 8.5. - World organisation for animal health, 2013. - P. 517-546.
12. High potency vaccines induce protection against heterologous challenge with foot-and-mouth disease virus / K.E.Brehm, N.Kumar, N.N.Thulke, V.Haas // Vaccine. - 2008. - № 26 (13). - P. 1681-1687.
13. Foot-and-mouth disease virus // Preventive Veterinary Medicine. - 2014. - № 113. - P. 23-33.
УДК 619:617.711/.713-002-022.6
БИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА БАКТЕРИЙ MORAXELLA BOVOCULI - ВОЗБУДИТЕЛЯ ИНФЕКЦИОННОГО КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
Г.Н.Спиридонов - доктор биологически наук, зав. лабораторией; Л.В.Валебная - кандидат биологических наук, ст. научный сотрудник; Л.Ш.Дуплева - кандидат биологических наук, ст. научный сотрудник; А.Г.Спиридонов - кандидат биологических наук, ст. научный сотрудник;
Ю.В.Юсупова - научный сотрудник.
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности», г.Казань (420075, г.Казань, Научный городок-2, тел. +7(843) 239-53-37, e-mail: [email protected]).
В последние годы установлена этиологическая роль бактерий Moraxella bovoculi при инфекционном керато-конъюнктивите крупного рогатого скота. Целью исследований явилось изучение биологических свойств бактерий Moraxella bovoculi, выделенных от больных инфекционным кератоконъюнктивитом крупного рогатого скота. Для выделения бактерий Moraxella bovoculi проводился посев смывов из глаз больных телят на кровяной МПА. Идентификация микроорганизмов проводилась путем изучения их биохимических, морфологических, тинктори-альных, антигенных и вирулентных свойств. От больных инфекционным кератоконъюнктивитом крупного рогатого скота выделены гемолитические изоляты бактерий Moraxella bovoculi. Изучены их биологические свойства. Установлено, что бактерии представляют собой грамотрицательные диплококки диметром 0,7-1,3 мкм, спор не образуют. На кровяном МПА формируют колонии белого цвета диаметром < 1 мм, круглые, выпуклые, с ровными краями, зоной ß-гемолиза. Moraxella bovoculi факультативный аэроб, не ферментирует сахаров, не образует индол, не разжижает желатину, дает положительную реакцию на оксидазу и отрицательную - на пробу с лакмусовым молоком. Штамм «СХ-Ч6 № -ДЕП» Moraxella bovoculi, выделенный от больного инфекционным кератоконъюнктивитом теленка, депонирован во Всероссийской государственной коллекции штаммов микроорганизмов, используемых в ветеринарии и животноводстве. Штамм характеризуется полным набором антигенов, типичных для бактерий Moraxella bovoculi. Штамм активно образует эндотоксин, переходящий в анатоксин под действием тепла и формалина. Продуцируемый токсин обладает гемолитическим и некротическим действиями. Патогенен для белых мышей, ЛД50 составляет 5,0x10 микробных клеток. Инактивированная формалином культура бактерий при подкожном введении индуцирует у телят 2-4 месячного возраста образование специфических антител к бактериям Moraxella bovoculi и формирование специфического иммунитета.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: крупный рогатый скот, инфекционный кератоконъюнктивит, возбудитель, Moraxella bovoculi, биологические свойства.
Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота - острое контагиозное заболевание, характеризующееся слезотечением, гиперемией сосудов конъюнктивы, светобоязнью, серозно-гнойным истечением, помутнением и изъязвлением роговицы, деформацией глазного яблока в виде кератоглобуса или кератоконуса, частичной или полной потерей зрения [1, 8].
Разноречивость взглядов среди исследователей в отношении этиологии болезни, отсутствие методов и средств диагностики и специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита, завоз племенного поголовья крупного рогатого скота из стран Западной Европы - возможного носителя возбудителя заболевания - привели к появлению в отдельных регионах стационарно неблагополучных очагов и сохранению
тенденции дальнейшего распространения этой болезни. В настоящее время заболевание имеет довольно широкое распространение в скотоводческих хозяйствах многих регионов Российской Федерации. Нами зарегистрировано заболевание в республиках Татарстан, Башкортостан, в Самарской, Челябинской, Тверской, Воронежской, Ленинградской и других областях РФ.
Заболевание причиняет значительный экономический ущерб развитию скотоводства вследствие снижения удоев молока до 50%, прироста массы тела на 31-37%, гибели животных, а также затрат на проведение лечебно-профилактических мероприятий.
Причиной инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота является сочетание физического фактора и биологического возбудителя. Ведущая роль при его возникновении принадлежит гемолитическим бактериям Moraxella bovis и Moraxella bovoculi на фоне солнечного ультрафиолетового облучения или других возможных предрасполагающих факторов. В качестве сопутствующей микрофлоры часто встречаются ß-гемолитические стрептококки, стафилококки, осложняющие инфекционный процесс. На течение болезни, как у отдельных животных, так и у всего поголовья неблагополучного стада влияют: недостаток витамина А, пыль и высокая трава на пастбище, травмирующая глаза [2, 3, 7].
Согласно определителю бактерий Берджи 1984 г. род Moraxeto, предложенный Lwoff (1939), относился к семейству Neisseriaceae. Однако, с современных позиций таксономии, на основе изучения 16S рРНК и анализа рРНК-ДНК гибридизации, в настоящее время род Moraxeto отнесён к семейству Moraxellaceae. Известно 20 представителей этого рода, большинство которых связаны с болезнями человека. Они вызывают бронхит, бронхопневмонию, конъюнктивит, средний отит, синусит, септический менингит, септицемию. До недавнего времени для ветеринарной медицины наиболее важным представителем этого рода считался Moraxella bovis, вызывающий инфекционный керато-конъюнктивит крупного рогатого скота. В последние годы установлено, что инфекционный кератоконъюн-ктивит крупного рогатого скота может быть вызван другими представителями рода Moraxella, в частности бактериями Moraxella bovoculi. Впервые эти бактерии были выделены при инфекционном кератоконъюн-ктивите у молочных коров калифорнийскими учеными Angelos J.A. и соавт. в 2005 году [9]. Вероятно, бактерии Moraxella bovoculi существовали в популяции крупного рогатого скота и раньше. И все те грамотри-цательные кокки, выделяемые тогда от крупного рогатого скота при кератоконъюнктивитах, определяли как «Moraxella ovis», а фактически являлись бактериями Moraxella bovoculi. Благодаря современным методам молекулярного анализа удалось различить Moraxella ovis и Moraxella bovoculi [10, 11, 12].
Цель исследований - выделение и изучение основных биологических свойств возбудителя инфекци-
онного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота - бактерий Moraxella bovoculi.
Материалы и методы. Выделение чистой культуры предполагаемого возбудителя осуществляли в лабораторных условиях путем первичного посева проб смывов из глаз больных телят, доставленных из стационарно неблагополучных по инфекционному кера-токонъюнктивиту хозяйств, на кровяной МПА. Посевы инкубировали в термостате при температуре 370С в течение 24 ч. На 2-й день изучали характер выросших колоний: определяли величину, формы их очертаний, цвет, поверхность, наличие зоны ß-гемолиза. Затем выявляли под микроскопом структуру и края колоний. Из отдельных колоний готовили мазки и окрашивали по Граму. Идентификацию микроорганизмов проводили путем изучения их биохимических, морфологических, тинкториальных свойств в соответствии с «Кратким определителем бактерий Bergeys» (1948) и «Определителем зоопатогенных микроорганизмов» [6].
Определение сахаролитических свойств культур бактерий Moraxella bovoculi осуществляли путем их пересева в среды Гисса с 1% содержанием глюкозы, сахарозы, лактозы, сорбита и маннита. Посевы инкубировали при 370С в течение 5 сут, после чего проводили учет результатов.
О протеолитической активности культур бактерий судили по их способности разжижать желатин. Для этого производили посев культуры в столбик желатина, следя за тем, чтобы укол пришелся строго по оси пробирки. Посев оставляли при комнатной температуре на 48 часов.
Для установления оксидазной активности на поверхность 18-часовой агаровой культуры бактерий Moraxella bovoculi наносили каплю 1% раствора параа-минодиметиланилина гидрохлорида и каплю 1% спиртового раствора а-нафтола.
Тест на каталазную активность проводили на предметных стеклах, используя 24-часовую культуру бактерий, выращенную на триптон-соевом агаре. На каждую культуру штамма бактерий наносили по 1 капле 3% раствора перекиси водорода. Показания снимали сразу же и через 5 мин. О реакции судили по образованию пузырьков.
При определении образования индола культурой бактерий Moraxella bovoculi использовали реакцию Эрлиха. По изменению цвета реактива судили о наличии индола в эфирной вытяжке среды.
Результаты исследований. В процессе изучения этиологии инфекционного кератоконъюнктивита в 7 скотоводческих хозяйствах Республики Татарстан и в 2-х хозяйствах Челябинской области нами выделены 39 культур микроорганизмов, по морфологическим и культуральным свойствам сходных с возбудителями инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота - бактериями Moraxella bovis и Moraxella bovoculi. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота, вызванный бактериями Moraxella
bovoculi, мы диагностировали в 4-х хозяйствах Республики Татарстан и в двух хозяйствах Челябинской области. Клинические признаки инфекционного кера-токонъюнктивита, вызванного бактериями Moraxella bovoculi, были схожи с таковыми при поражении бактериями Moraxella bovis.
Проводили изучение биологических свойств культур бактерий Moraxella bovoculi, изолированных из патологического материала от больных инфекционным кратоконъюнктивитом животных. Установили,
что на кровяном мясопептонном агаре при температуре 370С в аэробных условиях бактерии Moraxella bovoculi формируют рассеянные колонии небольших размеров (< 1 мм в диаметре) с зоной полного гемолиза (ß-гемолиз). Колонии не имеют склонности к слиянию, если только не были расположены близко друг к другу. Они были круглые, выпуклые, с ровными краями белого или серовато-белого цвета. Все изоляты имели узкую зону ß-гемолиза вокруг или под каждой колонией (рис. 1 ).
Рис. 1. Колонии бактерий Moraxella bovoculi после 24-часовой инкубации на кровяном мясопептонном агаре, выделенных при ИКК у крупного рогатого скота.
На жидких питательных средах - мясопептонном и триптозо-соевом бульонах в течение 48-часового культивирования при температуре 370С вызывают незначительное помутнение среды с осадком, который при взбалтывании образует хлопья.
В мазках, окрашенных по Граму, бактерии Moraxella bovoculi представляют собой грамотрица-тельные диплококки, с редко встречающимися кокками; диаметр клеток составляет 0.7-1.3 мкм, смежные стороны клеток уплощены (рис. 2).
Рис. 2. 24-часовая культура бактерий Moraxella bovoculi, выделенная при ИКК у крупного рогатого скота. Окраска по Граму ( х320).
При определении ферментативных и протеоли-тических свойств установили, что бактерии Moraxella bovoculi не ферментируют сахаров, не образуют индол; не разжижают желатину; дают положительную реакцию на оксидазу и отрицательную на пробу с лакмусовым молоком. Штаммы характеризуются полным набором антигенов, типичных для бактерий рода
Moraxella. Активно образуют эндотоксин, переходящий в анатоксин под действием тепла и формалина. Продуцируемый ими токсин обладает гемолитическим и некротическим действиями. LD50 для белых мышей составляет 5*108 микробных клеток. Телята 1-2- месячного возраста в полевых условиях сравнительно легко заражаются при введении им в конъюнктиваль-
ный мешок 24-часовой культуры Moraxella bovoculi в дозе 1,0 см3, содержащей не менее 1,0х109 микробных клеток, при наличии естественного или искусственного ультрафиолетового облучения.
Инактивированная формалином культура бактерий Moraxella bovoculi при подкожном введении индуцирует у телят образование специфических антител в сыворотке крови в титрах 1:1280 - 1:5120 в ИФА, а также формирование специфического иммунитета.
Проведена идентификация штамма бактерий Moraxella bovoculi «СХ-Ч6», выделенного от теленка 7-месячного возраста, больного с признаками острого кератоконъюнктивита, методом ПЦР и секвенирова-ния ДНК в ФГБУ «ВГНКИ». В ходе исследований определена нуклеотидная последовательность фрагмента гена 16S рРНК штамма (с 246 по 1121 п.н. по полной нуклеотидной последовательности данного гена). При помощи программы Blast проведен сравнительный анализ нуклеотидных последовательностей исследу-
емого штамма с последовательностями микроорганизмов, представленных в базах данных нуклеотидных последовательностей Gen Bank. При этом установлена наибольшая гомология анализируемых последовательностей с геном 16S рРНК Moraxella bovoculi (100% гомология). Данный штамм прошел депонирование в лаборатории качества и стандартизации бактериальных средств для ветеринарного применения ФГБУ «ВГНКИ» под регистрационным названием «Moraxella bovoculi «СХ-Ч6 № -ДЕП» инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота». На штамм получен Патент РФ на изобретение №2521651, он признан производственным и предназначен для изготовления вакцин против инфекционного кратоконъюнктивита крупного рогатого скота и диагностикумов [4, 5].
Провели сравнительное изучение основных куль-турально-морфологических и биохимических свойств бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi, результаты которых представлены в таблице 1.
Таблица 1
Биологические свойства видов бактерий рода Moraxella
Показатели Moraxella bovis Moraxella bovoculi
Морфология Палочки, диплобациллы Кокки, диплококки
Тип колоний (R) S
Подвижность - (дергающееся) -
Гемолиз +
Каталазная активность +
Оксидазная активность + +
Рост на минимальной среде - -
Разжижение желатина + -
Редукция нитратов
Сахаролитические свойства - -
Гидролизтвина 80 +
Уреазная активность - -
Цитрат - -
Фениланиндезаминазная активность - +
Ферментация в лакмусовом молоке + -
Примечание: + - положительные;
- - отрицательные;
(+) - большинство положительные;
(-) - большинство отрицательные.
Заключение. Изучена этиологическая структура инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота в 7 скотоводческих хозяйствах Республики Татарстан и в 2-х хозяйствах Челябинской области. Установлено, что возбудителем болезни являются бактерии из рода Moraxella - Moraxella bovis и Moraxella bovoculi. Результаты исследования биологических
свойств выделенных изолятов бактерий Moraxella bovoculi позволили депонировать штамм «СХ-Ч6 № -ДЕП» в лаборатории качества и стандартизации бактериальных средств для ветеринарного применения ФГБУ «ВГНКИ» в качестве производственного для изготовления вакцин против инфекционного керато-конъюнктивита и диагностикумов.
Литература
1. Клинико-эпизоотологические особенности инфекционных диарей новорожденных телят и основные принципы их профилактики и лечения / Х.З.Гаффаров [и др.] // Труды первого съезда вет. врачей РТ. - Казань, 1995.
- С.163-167.
2. Инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота / Х.З.Гаффаров [и др.] // Ветеринария. -2007. - № 12. - С. 21-24.
3. Карайченцев, Д.В. Совершенствование лабораторной диагностики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота: автореф. дис. ... канд. вет. наук / Д.В.Карайченцев. - М., 2016. - 23 с.
4. Пат. 2521651 Рос. Федерация, МПК C12N1/20, А61К39/00. Штамм бактерий Moraxella bovoculi «СХ-Ч6 № -ДЕП», используемый для изготовления диагностикумов и вакцин против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / А.В.Иванов, Г.Н.Спиридонов, А.А.Иванов, Л.В.Валебная, Ю.В.Юсупова, А.Г.Спиридонов, А.Р.Нургалиева, Х.Н.Макаев; заявитель ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности». - № 2013117096/10; заявл. 15.04.2013; опубл. 10.07.2014, Бюл. № 19. - 6 с.
5. Пат. 2589819 Рос. Федерация, МПК А61К35/74, А61К33/06, А61К31/115, А61Р31/04. Вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi / Г.Н.Спиридонов, А.В.Иванов, А.Н.Чернов, А.Г.Спиридонов, А.А.Иванов, Л.В.Валебная, Х.Н. Макаев, Р.Х.Юсупов, Л.Ш.Дуплева; заявитель и патентообладатель ФГБУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности». - № 2015120081/15; заявл. 27.05.2015; опубл. 10.07.2016, Бюл. № 19. - 10 с.
6. Сидоров, М.А. Определитель зоопатогенных микроорганизмов: справочник / М.А.Сидоров, Д.И.Скороду-мов, В.Б.Федотов. - М.: Колос, 1995. -169 с.
7. Спиридонов, Г.Н. Инфекционный кератоконьюнктивит крупного рогатого скота / Г.Н.Спиридонов // Проблемы профилактики и борьбы с особо опасными, экзотическими и малоизученными инфекционными болезнями животных: труды Междун. науч.-производ. конф., посвящ. 50-летию ВНИИВВиМ. Том 2. - Покров, 2008. - С. 195-197.
8. Методические рекомендации по диагностике, лечению и специфической профилактике инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота, вызванного бактериями Moraxella bovis и Moraxella bovoculi / Г.Н. Спиридонов [и др.]. - М, 2016. - 27 с.
9. Moraxella bovoculi sp. nov., isolated from calves with infectious bovine keratoconjunctivitis / J.A.Angelos, P.Q.Spinks, L.M.Ball, L.W.George // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. - 2007. - Vol .57. - P. 789-795.
10. Angelos, J.A. Differentiation of Moraxella bovoculi sp. nov. from other coccoid moraxellae by the use of polymerase chain reaction and restriction endonuclease analysis of amplified DNA / J.A.Angelos, L.M.Ball // J. Vet. Diagn. Invest. -2007. - Vol. 19. - P. 532-534.
11. Angelos, J.A. Recombinant Moraxella bovoculi cytotoxin-ISCOM matrix adjuvanted vaccine to prevent naturally occurring infectious bovine keratoconjunctivitis / J.A.Angelos, L.M.Ball // Vet Res Commun. - 2010. - Mar. - № 34 (3).
- Р. 535-537.
12. Galvao, K.N. Ulcerative blepharitis and conjunctivitis in adult dairy cows and association with Moraxella bovoculi / N.K.Galvao, J.A.Angelos // Can Vet J. - 2010. - Vol. 51 (4). - P. 400-402.
BIOLOGICAL PROPERTIES OF MORAXELLA BOVOCULI BACTERIA - THE CAUSATIVE AGENT OF THE INFECTIOUS BOVINE KERATOCONJUNCTIVITIS
Spiridonov G.N. - Doctor of Biological Sciences; Valebnaya L.V. - Candidate of Biological Sciences, Dupleva L.Sh. - Candidate of Biological Sciences, Spiridonov A.G. - Candidate of Biological Sciences,
Ysupova Y.V. - researcher.
Federal Center for Toxicological, Radiation and Biological Safety, Kazan (e-mail:[email protected]).
During the recent years the etiological role of Moraxella bovoculi bacteria in cattle infectious keratoconjunctivitis has been established. The aim of the research was to study the biological properties of Moraxella bovoculi bacteria isolated from calves infected with infectious keratoconjunctivitis. For Moraxella bovoculi bacteria isolation washings from the eyes of infected calves was cultivated in blood meat - peptone agar (MPA). The microorganisms were identified by studying their biochemical, morphological, tinctorial, antigenic and virulent properties. Hemolytic isolates of Moraxella bovoculi bacteria were isolated from calves having infectious keratoconjunctivitis. Their biological properties were studied. The bacteria were established to represent gram-negative diplococci with a diameter of 0.7-1.3 ym, they do not form a spore. On the blood MPA, white colonies of <1 mm in diameter are formed, round, convex, with flat edges, a zone of ß-hemolysis. Moraxella bovoculi is an optional aerobic microorganism, it does not ferment sugars, does not form indole, does not dilute gelatin, it positively responses to oxidase and negatively - for a sample with litmus milk.
The strain «SKH-CH6 №-DEP» Moraxella bovoculi, isolated from calves infected with infectious keratoconjunctivitis, is deposited in the All-Russian state collection of microorganism strains for veterinary and animal health needs. The strain is characterized by a complete set of antigens, typical for bacteria Moraxella bovoculi. The strain actively forms endotoxin, which transforms into an anatoxin under the influence of heat and formalin. The toxin produced has hemolytic and necrotic effects. Pathogen for white mice, LD50 is 5.0 x 108 microbial cells. Formalin-inactivated bacterial culture with subcutaneous administration induces the formation of specific antibodies to Moraxella bovoculi bacteria in the calves of 2-4 months of age and the formation of specific immunity.
KEYWORDS: cattle, infectious keratoconjunctivitis, pathogen, Moraxella bovoculi, biological properties.
References
1. Kliniko-epizootologicheskiye osobennosti infektsionnykh diarey novorozhdennykh telyat i osnovnyye printsipy ikh profilaktiki i lecheniya [Clinical and epizootological features of infectious diarrhea in newborn calves and the main principles of their prevention and treatment] / KH.Z. Gaffarov, G.N.Spiridonov, F.V.Yeliseyeva, M.A. Yefimova [et al.] // Trudy pervogo syezda vet. vrachey RT. - Kazan. - 1995. - P. 163-167.
2. Gaffarov, KH.Z. Infektsionnyy keratokonyunktivit krupnogo rogatogo skota [Cattle Infectious keratoconjunctivitis] / KH.Z.Gaffarov, A.V.Ivanov, L.V.Valebnaya, G.N.Spiridonov, L.SH.Dupleva, M.A.Yefimova // Veterinariya. - 2007. - №12.
- P.21-24.
3. Karaychentsev, D.V. Sovershenstvovaniye laboratornoy diagnostiki infektsionnogo keratokonyunktivita krupnogo rogatogo skota [Improving laboratory diagnostics of cattle infectious keratoconjunctivitis]: abstract from dissertation thesis for candidate of veterinary sciences. / D.V.Karaychentsev. - Moskva. - 2016. - 23 p.
4. Patent 2521651 Rossiyskoy Federatsii., MPK C12N1/20, A61K39/00. Shtamm bakteriy Moraxella bovoculi «SKH-CH6 №-DEP», ispolzuyemyy dlya izgotovleniya diagnostikumov i vaktsin protiv infektsionnogo keratokonyunktivita krupnogo rogatogo skota [Patent 2521651 the Russian federation, IPC C12N1/20, A61K39/00. The bacterial strain Moraxella bovoculi «SKH-CH6 №-DEP» used for the manufacture of diagnosticums and vaccines against infectious keratoconjunctivitis of cattle] / A.V.Ivanov, G.N.Spiridonov, A.A.Ivanov, L.V.Valebnaya, YU.V.Yusupova, A.G.Spiridonov, A.R.Nurgaliyeva, KH.N.Makayev; applied by «Federal Center of toxicological, radiation, and toxicological safety». - № 2521651; published on 10.07.2014, Bulletin № 19. - 6 p.
5. Patent. 2589819 Rossiyskoy Federatsii, MPK A61K35/74, A61K33/06, A61K31/115, A61P31/04. Vaktsina protiv infektsionnogo keratokonyunktivita krupnogo rogatogo skota na osnove antigenov bakteriy Moraxella bovis i Moraxella bovoculi [Patent# 2589819 the Russian federation, IPC A61K35/74, A61K33/06, A61K31/115, A61P31/04. Cattle infectious keratoconjunctivitis vaccine based on Moraxella bovis and Moraxella bovoculi bacterial antigens ] / G.N.Spiridonov, A.V.Ivanov, A.N.Chernov, A.G.Spiridonov, A.A.Ivanov, L.V.Valebnaya, KH.N.Makayev, R.KH.Yusupov, L.SH.Dupleva; applied by and patent owner: FGBU «Federal Center of toxicological, radiation, and toxicological safety».
- №2589819; published on 10.07.2016, Bulletin № 19. - 10 p.
6. Sidorov, M.A. Opredelitel zoopatogennykh mikroorganizmov: Spravochnik [The determinant of zoopathogenic microorganisms: Handbook] / M.A.Sidorov, D.I.Skorodumov, V.B.Fedotov. - Moscow: Kolos. - 1995. - P. 169-176.
7. Spiridonov, G.N. Infektsionnyy keratokonyunktivit krupnogo rogatogo skota [Cattle Infectious keratoconjunctivitis] / G.N.Spiridonov // Problemy profilaktiki i borby s osobo opasnymi, ekzoticheskimi i maloizuchennymi infektsionnymi boleznyami zhivotnykh - Problems of prevention and control of animal particularly dangerous, exotic, and under-investigated infectious diseases: proceedings from the Int.Sci.conference dedicated to 50th anniversary of All-Russian Research Veterinary Virology and Microbiology. - P 2. - Pokrov. - 2008. - P. 195-197.
8. Spiridonov, G.N. Metodicheskiye rekomendatsii po diagnostike, lecheniyu i spetsificheskoy profilaktike infektsionnogo keratokonyunktivita krupnogo rogatogo skota, vyzvannogo bakteriyami Moraxella bovis i Moraxella bovoculi [Methodical recommendations for detection, treatment and specific prevention of cattle infectious keratoconjunctivitis caused by bacteria Moraxella bovis and Moraxella bovoculi] / G.N.Spiridonov, KH.Z.Gaffarov, A.I.Nikitin, K.KH.Papunidi, L.V.Valebnaya, A.N.Chernov, L.SH.Dupleva, A.G.Spiridonov, KH.N.Makayev // Moscow. - 2016. - 27 p.
9. Angelos, J.A. Moraxella bovoculi sp. nov., isolated from calves with infectious bovine keratoconjunctivitis / J.A.Angelos, P.Q.Spinks, L.M.Ball, L.W.George // Int. J. Syst. Evol. Microbiol. - 2007. - V.57. - P. 789-795.
10. Angelos, J.A. Differentiation of Moraxella bovoculi sp. nov. from other coccoid moraxellae by the use of polymerase chain reaction and restriction endonuclease analysis of amplified DNA / J.A.Angelos, L.M.Ball // J.Vet. Diagn. Invest. -2007. V. 19 - P. 532-534.
11. Angelos, J.A. Recombinant Moraxella bovoculi cytotoxin-ISCOM matrix adjuvanted vaccine to prevent naturally occurring infectious bovine keratoconjunctivitis / J.A.Angelos, L.M.Ball // Vet Res Commun. - 2010. - Mar. - № 34 (3).
- P. 535-537.
12. Galvao, K.N. Ulcerative blepharitis and conjunctivitis in adult dairy cows and association with Moraxella bovoculi / N. K.Galväo, J.A.Angelos // Can Vet J. - 2010. - V.51(4). - P. 400-402.
