CC BY
15
CHARACTERISTICS OF GROWTH AND DEVELOPMENT OF YOUNG RATS BY USING
NANOSTRUCTURED DRUG
Girfanov A.I., Bozova G.B., Katnov V.E., Ezhkov V.O.
Summary
The aim of this work is to study the growth and development of young rats after oral administration of different doses of a complex preparation on the basis of nanozeolite and amino acids. The object of the study were white rats of the Wistar breed (n=12), aged 1 month. The integrated product asked animals mixed with grain, the control group received grain, kneaded with distilled water. Studied the changes of live weight gain of animals. Found that the best results in comparison with the control group, showed the first and third experimental group, the maximum result was observed in the third group.
DOI 10.31588/2413-4201-1883-245-1-36-40 УДК: 619:617.711/713-002-022.6
ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА АССОЦИИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА НА ОСНОВЕ АНТИГЕНОВ БАКТЕРИЙ MORAXELLA BOVIS И
MORAXELLA BOVOCULI
Дуплева Л.Ш. - к.б.н, ст.н.с., Спиридонов Г.Н. - д.б.н., зав. лабораторией, Хусаинов И.Т. - мл.н.с., Махмутов А.Ф. - к.б.н., вед.н.с.
ФГБНУ «Федеральный центр токсикологической, радиационной и биологической безопасности»
Ключевые слова: инфекционный кератоконъюнктивит, профилактика, бактерии Moraxella bovoculi и Moraxella bovis, антигенная активность, вакцина
Keywords: infectious keratoconjunctivitis, prevention, bacteria Moraxella bovoculi and Moraxella bovis, antigenic activity, vaccine.
Инфекционный кератоконъюнктивит (ИКК) крупного рогатого скота (КРС) - острое заразное заболевание, проявляющееся серозно-гнойными истечениями из глаз, инъекцией сосудов конъюнктивы, помутнением и изъязвлением роговицы и частичной или полной потерей зрения пораженного глаза. Инфекционный керато-конъюнктивит крупного рогатого скота широко распространен во многих странах мира с развитым животноводством, наносящий большой экономический ущерб [4, 6]. Наиболее подвержены заболеванию молодые животные.
В Российской Федерации это представляет немалую опасность для крупных животноводческих хозяйств, специализирующихся на выращивании скота мясного направления. Как правило, поражения глаз начинают регистрироваться весной, мак-
симальная заболеваемость наблюдается в июле-августе, а минимальная - в октябре.
Конъюнктивит регистрируется у всех возрастных групп животных, чаще всего у телок, в возрасте от 0 до 3 месяцев - 31% случаев, от 3 до 6 месяцев - 40 % случаев подвержены заболеваниям глаз. Заболеваемость мало зависит от породы животного; в большинстве случаев подвержены болезням те животные, которые содержатся в неблагоприятных условиях и получают несбалансированный корм в условиях высокой продуктивности [1].
Первостепенная роль в развитии инфекционного кератоконъюнктивита принадлежит вирулентной бактерии Moraxella bovis. Потоки активного солнечного света предрасполагают к воздействию бактерий на глаза крупного рогатого скота. Источником бактерий Moraxella bovis яв-
ляются больные животные, клинически здоровые животные могут быть переносчиками возбудителя. Возбудитель инфекционного кератоконъюнктивита был завезен во многие животноводческие хозяйства с импортируемым скотом из других государств. Ведущими диагностическими признаками при подозрении на инфекционный кератоконъюнктивит являются: интенсивное проявление острого конъюнктивита, светобоязнь, выделения из глаз и носа, эрозия роговицы и нарушение зрения [9].
Бактерии сохраняют жизнеспособность в секретах глаз и носа в течение многих месяцев после клинического выздоровления [2, 7].
До недавнего времени наиболее важным представителем этого рода в ветеринарии считалась Moraxella bovis, вызывающая инфекционный кератоконъюнкти-вит у крупного рогатого скота. В последние годы нами установлено, что инфекционный кератоконъюнктивит крупного рогатого скота может быть вызван другими представителями рода Moraxella, в частности, бактериями Moraxella bovoculi [5]. Проведенные нами исследования подтверждаются данными зарубежных авторов, согласно которым инфекционный керато-конъюнктивит может быть вызван бактериями Moraxella bovoculi [10, 11, 8].
Для специфической профилактики ИКК у крупного рогатого скота используется ряд вакцин, различающихся принципами получения и способом вакцинации [12, 14]. Качество вакцин и их иммуноген-ная активность во многом определяется интенсивностью реакции организма [3].
При применении биопрепарата важен предварительный подбор используемого штамма бактерий. Иммунизация очень эффективна на ранней стадии вспышки инфекционного кератоконъюнк-тивита [13]. Рекомендуется вакцинировать животных за шесть недель до выпаса, а ревакцинацию - через 14 дней. Таким образом, практически возможно добиться искоренения ИКК или понизить заболеваемость животных [15].
Целью данного исследования явилась оценка напряженности иммунитета у вакцинированных животных в течение
определенного периода времени, а также изучение иммунобиологических свойств ассоциированной вакцины против ИКК крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi через 12 месяцев хранения при температуре 4-8 0С по следующим показателям: стерильность, безвредность и антигенная активность у лабораторных животных.
Материал и методы исследований. Вакцина против инфекционного ке-ратоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi в качестве антигенов содержит инактивированные формалином клеточные суспензии штаммов бактерий Moraxella bovis «Г97-ВНИВИ» и Moraxella bovoculi «СХ-Ч6-ДЕП» в одинаковых соотношениях и адсорбент - 6 % гель гид-роксида алюминия.
Разработанная вакцина была проис-следована на стерильность, безвредность, ареактогенность и антигенную активность на лабораторных животных. Для этого из разных мест каждой партии вакцины отбирали пробу в количестве, определенном ГОСТ 31929-2013. Контроль вакцины на стерильность проводили путем высева препарата на питательные среды по общепринятой методике (ГОСТ 28085-2013).
Для проверки безвредности использовали смесь вакцины из трех флаконов по 15 см3 каждый, объединенных в стерильных условиях в отдельной емкости. Вакцинную смесь перемешивали и вводили подкожно 10 белым мышам в дозе 0,5 см3 в область лопаток. Наблюдение продолжалось 10 дней.
Антигенную активность изготовленной вакцины контролировали на 3 кроликах массой 2,5-3,0 кг, которым биопрепарат вводили подкожно в дозе 2 см3 дважды с интервалом 14 дней. Крупный рогатый скот вакцинировали следующими дозами: от 2 до 6 месяцев - 2,5 см3, молодняк от 6 до 9 месяцев - 4 см3, молодняк старше года и взрослых особей - 5 см3.
Через регулярные промежутки времени у животных брали кровь и сыворотку исследовали на наличие специфических антител к антигенам бактерий Moraxella
bovis и Moraxella bovoculi в иммунофер-ментном анализе (ИФА). Оценка иммунобиологических свойств ассоциированной вакцины после изготовления и через 1 год хранения при температуре 4-8 0C проводилась по показателям стерильности, без-
вредности и антигенной активности.
Результат исследований. Результаты изучения антигенной активности биопрепарата на животных представлены в таблицах 1-3.
Таблица 1 - Уровень специфических антител в сыворотке крови вакцинированных кроликов
(p<0,05)
Срок исследований после второй иммунизации Уровень антител в ИФА сыворотке крови кроликов (M±m, n=3)
Moraxella bovoculi Moraxella bovis
14 день 7466,67±3456,40 3733,33±1728,20
90 день 5333,33±1306,39 2133,33±653,20
180 день 4266,67±1306,39 2133,33±653,20
270 день 3200,00±0,00 1600±0,00
360 день 3200,00±0,00 1600±0,00
Таблица 2 - Уровень антител в сыворотке крови кроликов, иммунизированных ассоциированной^_
Срок исследования после второй иммунизации Уровень антител в ИФА сыворотке крови кроликов (M±m, n=3)
Moraxella bovoculi Moraxella bovis
14 день 6400,0±0,0 3200,0±0,0
180 день 5333,33±1306,39 2666,67±653,20
360 день 2666,67±653,20 1600,0±0,0
Таблица 3 - Уровень специфических антител в сыворотке крови крупного рогатого скота, иммунизированного против ИКК (р<0,05)_
Группа животных Доза, 3 см3 Уровень антител в ИФА (M±m, n=5)
Moraxella bovoculi Moraxella bovis
промежуток времени, дни
через 14 через 180 через 360 через 14 через 180 через 360
Молодняк 2-4 месяцев 2,5 5760,0 ±715,54 4800,0 ±1066,67 2560,0 ±438,18 3840,0 ±715,54 3200,0 ±0,0 2240,0 ±438,18
Молодняк 6-9 месяцев 4,0 4480,0 ±876,36 3840,00 ±715,54 2560,0 ±438,18 3840,0 ±715,54 2880,0 ±357,77 2880,0 ±357,77
Молодняк старше 12 месяцев 5,0 5760,0 ±715,54 4480,0 ±876,36 2880,0 ±357,77 4480,0 ±876,36 3520,0 ±876,36 2240,0 ±438,18
Из данных таблицы 1 видно, что после иммунизации антигенная активность разработанной вакцины сохраняется в течение 12 месяцев на достаточном уровне.
Результаты проведенных исследований показали, что антигенная активность ассоциированной вакцины против ИКК крупного рогатого скота, хранившейся в течение года при 4-8 0С, по сравнению с
первоначальной, существенно не понизилась. В течение срока наблюдения вакцина оставалась стерильной и безвредной. Вследствие этого, срок годности вакцины установлен в течение 12 месяцев.
Результаты таблицы 3 показывают, что ассоциированная вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого обладает антигенной актив-
ностью и вызывает формирование напряженного иммунного ответа у крупного рогатого скота после двукратной вакцинации. Через 12 месяцев после иммунизации у животных наблюдается незначительное снижение специфических антител в сыворотке крови, что существенно не сказывается на напряженности иммунитета.
Заключение. Предложена ассоциированная вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi. Проведено изучение ее безвредности, антигенной и иммуногенной активности на лабораторных животных и крупном рогатом скоте. Установлено, что ассоциированная вакцина безвредна для лабораторных и восприимчивых животных, обладает высокой антигенной и иммуногенной активностью.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Ахряпина, Е.Н. Распространение офтальмопатий крупного рогатого скота / Е.Н Ахряпина, О.А. Столбова // Государственный аграрный университет Северного Зауралья. - Актуальные вопросы науки и хозяйства: новые вызовы и решения. -Сборник материалов LII междунар. студенческой научно-практич. конф. - 2018. -С. 230-234.
2. Борисевич, В.Б. Инфекционные кератоконъюнктивиты крупного рогатого скота / В.Б. Борисевич, Б.В. Борисевич, П.Д. Солонин [и др.] // Ветеринария. -2006. - № 1. - С. 18-19.
3. Васильева, Е.А. Клиническая биохимия сельскохозяйственных животных / Е.А. Васильева. - М.: Изд. «Россель-хозиздат». - 1974. - 192 с.
4. Гаффаров, Х.З. Эпизоотологиче-ские и этиологические аспекты инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / Х.З. Гаффаров, Д.М. Мин-нахметов, Г.Н. Спиридонов [и др.] // Матер. межд. науч. конф., посвящ. 125-летию КГАВМ. - Казань. - 1998. - Ч. 1. - С. 2931.
4. Дуплева, Л.Ш. Вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi /
Л.Ш. Дуплева, Г.Н. Спиридонов, И.Т. Ху-саинов // Актуальные вопросы совершенствования технологии производства и переработки продукции сельского хозяйства: Мосоловские чтения: матер. междунар. научно-практической конференции. -Йошкар-Ола. - 2019. - Выпуск XXI. - С. 387-389.
5. Патент РФ № 2264227 Ассоциированная вакцина для специфической профилактики инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе бактерий Moraxella bovis и герпесви-руса типа 1 / Х.З. Гаффаров, Г.Н. Спиридонов, А.З. Равилов [и др.] // Заявка 2004105105/13 от 24.02.2004. - опубл. 20.11.2005. - Бюл. № 32.
6. Саттарова, Н.В. Диагностика инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота методом ИФА / Н.В. Саттарова, Л.В. Валебная // Науко-во-техшчний бюллетень Украшська ака-демiя аграрних наук Мшютерство аграрноi пол^ики Украши. - Львiв. - 2009. -Випуск 10. - № 3. - С.179-182.
7. Спиридонов, Г.Н. Специфическая профилактика кератоконъюнктивитов крупного рогатого скота, вызываемых бактериями Moraxella bovis и Moraxella bovoculi / Г.Н. Спиридонов, Л.Ш. Дуплева, И.Т. Хусаинов [и др.] / Ветеринарный врач. - Казань. - 2019. - № 4. - С. 8-13.
8. Черных, О.Ю. Проблема инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота / О.Ю. Черных, А.А. Лысенко, Ю.Д. Дробин, Н.А. [и др.] // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - Краснодар. - 2016. - № 63. - С.156-162.
9. Angelos, J.A. Differentiation of Moraxella bovoculi sp. nov. from other coc-coid moraxellae by the use of polymerase chain reaction and restriction endonuclease analysis of amplified DNA / J.A. Angelos, L.M. Ball // J. Vet. Diagn. Invest. - 2007. -V. 19 - P.532-534.
10. Galvao, K.N. Ulcerative blepharitis and conjunctivitis in adult dairy cows and association with Moraxella bovoculi / N. K. Galvao, J. A. Angelos // Can Vet J. -2010. - V. 51 (4). - P. 400-402.
11. Gwin, R. Medicament and method
for producing immunity to infections bovine keratoconjunctivitis / R. Gwin // United States Patent. - № 4.539.201; of 03.09.1985.
12. Leidner, J. Shut the lid on pinkeye /J. Leidner // Progr. Farmer. - 1987. - V. 102. - № 4. - P. 24-27.
12. Lepper, A.W.D. The protective efficacy of cloned Moraxella bovis pili in monovalent and multivalent vaccine formulations
against experimentally induced infectious bovine keratoconjunctivitis (IBK) / A.W.D. Lepper, J.L. Atwell, P R. Lehrbach, C.L. Schwartzkoff [et al] // Vet. Microbiology. - 1995. - V. 45. - P.129-138.
13. Mazoch, M. Nakazlivy zanet rohovky a spojivky skotu, preventivni a lece-bna vakcinace / M. Mazoch // Veterinarstvi. -1987. - V. 37. - № 4. - P. 159-160.
ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА АССОЦИИРОВАННОЙ ВАКЦИНЫ ПРОТИВ ИНФЕКЦИОННОГО КЕРАТОКОНЪЮНКТИВИТА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА НА ОСНОВЕ АНТИГЕНОВ БАКТЕРИЙ MORAXELLA BOVIS И MORAXELLA BOVOCULI
Дуплева Л.Ш., Спиридонов Г.Н., Хусаинов И.Т., Махмутов А.Ф.
Резюме
Представлена ассоциированная вакцина против инфекционного кератоконъюнктивита крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi. В качестве антигенов вакцина содержит инактивированные формалином клеточные суспензии штаммов бактерий Moraxella bovis «Г97-ВНИВИ» и Moraxella bovoculi «СХ-Ч6-ДЕП», взятые в одинаковых соотношениях, и адсорбент - 6 % гель гидроксида алюминия. Представлены результаты изучения иммунобиологических свойств ассоциированной вакцины против ИКК крупного рогатого скота на основе антигенов бактерий Moraxella bovis и Moraxella bovoculi. Полученные данные показывают, что ассоциированная вакцина оставалась стерильной, безвредной и антигенно активной в течение периода наблюдения.
IMMUNOBIOLOGICAL PROPERTIES OF AN ASSOCIATED VACCINE AGAINST INFECTIOUS KERATOCONJUNCTIVITIS OF CATTLE BASED ON ANTIGENS OF BACTERIA MORAXELLA BOVIS AND MORAXELLA BOVOCULI
Dupleva L.Sh., Spiridonov G.N., Khusainov I.T, Makhmutov A.F.
Summary
An associated vaccine against infectious keratoconjunctivitis in cattle based on the antigens of the bacteria Moraxella bovis and Moraxella bovoculi is presented. As antigens, the vaccine contains formalin-inactivated cell suspensions of bacterial strains Moraxella bovis «G97-VNTVI» and Moraxella bovoculi «SH-CH6-DEP» taken in the same proportions and the adsorbent is 6 % aluminum hydroxide gel.
The results of studying the immunobiological properties of an associated vaccine against cattle ICC based on antigens of bacteria Moraxella bovis and Moraxella bovoculi are presented. The data obtained show that the associated vaccine remained sterile, harmless and antigenically active during the observation period.
