CC BY
147
УДК: 582.232:581.19 DOI: 10.12737/19646
БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫЕ МЕДИЦИНСКИЕ ПРЕПАРАТЫ НА ОСНОВЕ САПРОПЕЛЕВОГО ГУМИНОВОГО КОМПЛЕКСА
В .В. ПЛАТОНОВ, М.А. ЛАРИНА, Е.Д. ДМИТРИЕВА, М.А БОДЯЛ
Медицинский институт, Тульский государственный университет, ул. Болдина, 128, Тула, Россия, 300028
Аннотация. Проведены подробные данные вещественного состава различных водорослей, бактерий, зоопланклона, высших растений, участвующих в формировании органического вещества сапропе-лей. Изучены особенности химического состава и биологической активности сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области. Показаны перспективы широкого применения различных сапропелевых препаратов в современной медицине.
Одной из фундаментальных проблем современной медицины является разработка биологически активных препаратов из природного растительного и животного сырья как средств повышения неспецифической резистенции организма.
Весьма перспективными для этой цели являются гуминовые вещества, выделенные из сапропелей, торфов и углей. Выявлена практическая безвредность для крови, сердечно-сосудистой и эндокринной систем, жизненно важных органов на уровне патогистологических и гистохимических исследований. Они не вызывают аллергии и анафилаксии, патологической сенсибилизации к лекарственным веществам, апирогенны, не обладают терапогенными, эмбриотоксическими и канцерогенными свойствами.
Гуминовый комплекс является ценным компонентом сапропелей, стимулирует биологические процессы в организме человека и животных, обладает антимикробным, антисептическим действием. Низкомолекулярная фракция, включающая органоминеральные формы, проникает через кожу и транспортирует к органам различные физиологически активные вещества. Гуминовые кислоты сапропелей обладают кортизоноподобным действием, вызывают непосредственные ферментативные реакции как в стенках капилляров, так и в клетках эпителия, адсорбирующих цитохромоксидазу, щелочную фосфатазу, АТФ, тормозят действие гиалуронидазы, входящей в состав соединительной ткани, и таким образом купируют воспалительные процессы у больных полиартритом.
Ключевые слова: биологически активные препараты, сапропелевый гуминовый комплекс.
BIOLOGICALLY ACTIVE MEDICAL DRUGS ON THE BASIS OF SAPROPEL HUMIC COMPLEX
V.V. PLATONOV, M.A. LARINA, E.D. DMITRIEVA, M.A. BODYAL
Medical Institute, Tula State University, Boldin Str., 128 Tula, Russia, 300028
Abstract. The detail analysis of the material composition of a variety of algae, bacteria, zooplanklon, higher plants involved in the formation of organic substance of sapropel, was carried out. The authors studied the characteristics of the chemical composition and biological activity of sapropel in the river Tikhaya Sosna of the Belgorod region. It was shown the prospects for widespread use of sapropel of various drugs in modern medicine.
One of the fundamental problems of modern medicine is the development of biologically active compounds from natural plant and animal materials as a means of improving the body's non-specific resistance. Very promising for this purpose are humic substances derived from sapropel, peat and coal. It was revealed the practical harmlessness for blood, cardiovascular and endocrine systems, vital organs at the level of histopathological and histochemical studies. They do not cause allergies and anaphylaxis, pathological sensitization to drugs, non-pyrogenic, do not have the embryotoxic and carcinogenic properties.
The humic complex is a valuable component of sapropel, stimulating biological processes in humans and animals, has antimicrobial, antiseptic effect. The low molecular weight fraction consists of organo-mineral forms, penetrates through the skin and transports various physiologically active substances to organs.
The humic acid of sapropel have cortisone-like action, cause direct enzymatic reactions in the walls of the capillaries, as well as in epithelial cells, adsorbing cytochrome oxidase, alkaline phosphatase, ATP, inhibit the action of hyaluronidase, being in the connective tissue, and thus cropped inflammation process in patients with arthritis.
Key words: biologically active drugs, sapropel humic complex.
Выявлено благоприятное действие гуминовых кислот (ГК) и фульвокислот (ФК) на нормализацию энергетики и экскреторной функции пораженной печени [1, 2].
Итоги испытаний солей ГК - в таких моделях болезней, как токсическая анемия (введение фенил-гидразина), токсический гепатит (введение СС14), язва желудка (введение серотонина), гиперхолестре-
немия, иммобилизационный стресс характеризует гуминовые препараты (ГП), вызывающими состояние неспецифически повышенной сопротивляемости организма [3, 4, 35-37].
Н. Самутин [5] доказал, что сапропель является эффективным противовоспалительным средством пролонгированного действия при хронической воспалительной патологии суставов. При применении аппликаций восстанавливаются масса иммунокомпетентных органов (тимус, селезёнка), клеточность тимуса и продукция антителообразующих клеток в селезёнке, показатели фагоцитоза иммунных комплексов.
Важную роль в формировании биологической активности сапропелевых гуминовых веществ (ГВ) играют: ГК и ФК, липиды, ферменты типа пероксидазы, полифенолоксидазы, дегидрогеназы, каталазы; витаминный комплекс (аскорбиновая кислота, витамин В, Р и др.). Липиды, являющиеся продуктами жизнедеятельности синезелёных водорослей, проявляют бактериостатическую и бактерицидную активность, оказывают противовоспалительное, обезболивающее, иммуномодулирующее действие, положительное влияние на гемодинамику суставов, тонус вегетативной нервной системы. Экстракт высокополярных липидов сульфидных иловых грязей, содержащий фосфолипиды, каротины, ксантофиллы, хлорофилл и его производные, стерины, миксоксантофиллы, высокомолекулярные кислоты в случае его применения в сочетании с ультрафонофорезом, при лечении острого воспаления придатков матки на фоне антибактериальной терапии уменьшает выраженность гемодинамических нарушений, экссудативных процессов, предупреждает разрастание соединительной стромы, уменьшает выраженность вызываемых воспалительным процессом массивных явлений атрезии фолликулов в яичниках, стимулирует их рост и образование жёлтых тел [5].
Для сапропелей содержащих микрофлору, участвующую в переработке азотистых соединений: нитрифицирующие, денитрифицирующие группы, а также микробактерии, плесневые грибы, выявлена ферментативная активность по каталазе, пероксидазе, дегидрогеназе [6].
При оценке биологической активности ряда лечебных сапропелевых грязей в качестве критериев использовали напряженность протекающих в пелоидах микробиологических процессов и выраженность антимикробных свойств в отношении E. coli, Cl. perfringens, St. aeruginosa [7].
Установлена связь биологической активности сапропелевых пелоидов с их актиокислительными свойствами, большая воль в формировании которой отводится жирорастворимым антиоксидантам фе-нольной природы - токоферолы, проявляющие способность связывать активные свободные радикалы. Сапропели, обогащенные водорастворимыми витаминами, обладают выраженными антимикробными свойствами по отношению к золотистому стафилококку [8].
Авторами [9, 10] выявлены антагонисты среди бактерий и актиномицетов по отношению к золотистому и белому стафилококку, тифозной палочке и паратифозной палочке В, к патогенным грибкам человека (Achovion Schorleini, Achovion gypseum и др.), к микрофлоре гинекологических больных. Доказано, что сапропелевые лечебные грязи оказывают положительное влияние на периферическую нервную, эндокринную, сердечно-сосудистую, пищеварительную системы, улучшают состояние опорно-двигательного аппарата, стимулируют метаболистические процессы в печени людей, излечивают кожные и гинекологические заболевания; способствуют быстрому прекращению воспалительных процессов и хорошему излечению экзем, дерматитов, ожогов, что обусловлено наличием в сапропеле антибиотиков и отсутствием патогенных микроорганизмов [11-13].
В. Никольский и Б. Минеев [14] установили бактерицидное действие сапропеля по отношению к болезнетворным микроорганизмам и присутствие в нём микробов, выделяющих антибиотики. Патогенных микроорганизмов в сапропеле не обнаружено.
Антибактериальные свойства выделенных из сапропелей микроорганизмов изучались по отношению к стандартным микробиологическим тест-культурам, а также к патогенным грибам кожи и волос человека, палочке Волковица-Фриша, штаммам, выделенным у женщин, страдающих воспалительными процессами мочеполовой сферы. Установлено, что бактерии и актиномицеты, содержащиеся в сапропелевых грязях, проявляют антибактериальные свойства в большей степени к грамположительным микроорганизмам. Стабилизирующий и терапевтический эффект ГП был подтвержден специальными исследованиями уровня нейромедиаторов в крови крыс (увеличение содержания ацетилхолина, предупреждение снижения холистеразы) за счёт повышения реактивных свойств ЦНС (повышение функциональной активности симпатической и парасимпатической частей нервной системы) [15].
Несомненно, что столь широкий спектр физиологического действия исходных сапропелей, а также различных препаратов на их основе, определяется особенностями химического состава сапропелей, который в свою очередь генетически связан с исходными растительным и животным материалом участвовавшим в сложном процессе сапропелеобразования [38-44].
Исходным материалом, определившим состав органического вещества сапропелей, преимущественно является планктон, богатый жирами, восками и белками [16]. Ведущие положение занимают диатомовые (9-48%), синезелёные (10-25%), протококковые (9-17%), золотистые (3-6%), десмидиевые, нитчатые (1-5%) водоросли. Карбонатным сапропелям сопутствуют вольвоксовые водоросли. В кремнистых
сапропелях наибольшее количество диатомовых. Протококковые и синезёленые преобладают в сапропе-лях органического и карбонатного типов [16].
Набор ОВ, продуцируемых водорослями в окружающую среду чрезвычайно широк.
Установлено, что зелёные и некоторые синезелёные водоросли обладают способностью выделять: углеводы, органические кислоты, аминокислоты, амины, полипептиды, витамины, фенолы, ростовые вещества. Углеводы продуцируются во внешнюю среду водорослями Chlorococcum ellipsoideam и Chlo-midomonas globosa. Количество полисахаридов колеблется от 3 до 113 мг/л. Из моно- и дисахаридов в среде - глюкозы и фруктозы. Исследованы экстрацеллюлярные водорастворимые полисахариды культуры хлорелла.
Экстрацеллюлярные углеводные компоненты синезелёных водорослей изучены в значительно меньшей степени. Количество полисахаридов, продуцируемых Anabaenaflos-aguac A-37 составляет почти 40% общего количества образующихся в клетке углеводов, или 28% количества органического материала. Это глюкуроновая кислота, глюкоза, ксилоза, рибоза в соотношениях 1:88:39:3 [23-25].
Синезелёные водоросли выделяют также свободные аминокислоты, амиды и пептиды. Синезелё-ная водоросль Lyngbya aestuarii выделяет в среду: цистеин, гистидин, аргинин, серин, треонин, аспараги-новую и глютаминовую кислоты, L-a-аланин, пролин, тирозин, метионин, валин, фенилаланин, лейцин [26-28].
Синезелёные водоросли выделяют в окружающую среду щавелевую, янтарную, яблочную, лимонную и винную кислоты, эфирные масла, альдегиды, летучие кислоты, физиологически активные вещества, фенолы, токсины [29-30]. Важной особенностью водорослей является их способность выделять витамины: водорастворимые В2, В6, РР, аскорбиновую, фолиевую и пантотеновою кислоты; жирорастворимые витамины Е и p-каротин клетки водорослей в культурную среду не продуцировали. Клетки сине-зелёных азотофиксирующих водорослей Cylindrospermum muscicola выделяют витамин B12 и ауксинопо-добные биологически активные вещества, особенно при наличии солей кобальта [31]. Водоросль Nos-tocspecies из лишайника Collematenax выделяет витамин группы В (тиамин), рибофлавин, никотиновую и пантотеновую кислоты и биотин. Особый интерес представляют токоферолы (витамина Е), витамина К, пластохинона А и a-токоферилхинона, обнаруженные у синезелёных водорослей Anabaena variabilis, Chlorogleaefritschii, Nostoc muscorum, Masrigocladuse aminosus [32]
У ряда синезелёных водорослей были идентифицированы обычные филлохинон (витамин К), пла-стохинон-9, a-токоферилхинон; определены обычные для высших растений a- и р-токоферолы.
Распределение основных стеролов и каротиноидов значительно варьирует у водорослей, относящихся к различным классам. В зелёных водорослях накапливаются преимущественно эргостерол, но присутствуют и другие стеролы, например холестерол и фукостерол. Холестерол преобладает в красных водорослях, в то время как у бурых водорослей основным стеролом является фукостерол. Концентрации стеролов в водорослях могут достигать 0,3% сухого веса. Относительное содержание каротиноидов оказалось наиболее высоким у бурых водорослей, в которых оно поднимается до 6 мг/г (0,6 % сухого веса)
Из основных жирных кислот в водорослях представлены все насыщенные и ненасыщенные моно-карбоновые кислоты с неразветвленной цепью и чётным числом атомов углерода от С12 до С20. Жирные кислоты с разветвлённой цепью изо- и антеизотипов если и присутствуют, то обычно остаются второстепенным компонентами водорослей, что контрастирует с той ролью, которую они играют у бактерий.
Наиболее высоким содержанием характеризуются пальмитиновая (Cj6) и стеариновая (Q8) кислоты. Полиненасыщенные жирные кислоты гораздо более типичны для водорослей, чем для высших растений.
Количественное содержание липидов в составе водорослей изменяется от 5 до 25% от сухого веса. В липидной фракции водорослей обычно содержится 3-5% углеводов. Это насыщенные и ненасыщенные углеводороды как с неразветвленной, так и с разветвленной цепью от С12 до С33, среди которых преобладают н-С15 или н-С 17, на их долю приходится более 90% от общего содержания углеводородов гомологического ряда.
В водорослях: Botrycoccus braunii (золотисто-коричневая) и Anacystis montana (синезелёная) были идентифицированы олефиновые углеводороды, содержащие от 17 до 33 атомов углеводорода в неразветвленной цепи, с преобладанием нечётных углеводородов С12, С27, С29 и С31. Общее содержание оле-финовых углеводородов колеблется от 0,1 до 0,1% сухого веса.
Важнейшими представителями зоопланктона являются фораминиферы и копеподы. Поскольку зоопланктон, в особенности копеподы, питается непосредственно фитопланктоном, существует некоторое сходство состава липидной фракции фито- и зоопланктона. Доля липидной фракции у некоторых копепод необычно высокая: почти 30% сухого веса. В состав липидной фракции копепод из отряда Cala-noida входят: углеводороды (3,0), сложные эфиры восков, включая эфиры стеролов (30,0), тримоногли-цериды (4,0), полярные липиды (свободные кислоты, холестерол, моноглицериды и т.д.), фосфолипиды (17 и 45%, соответственно).
В формировании ОВ сапропелей весьма важна воль бактерий и наземных высших растений. Бактерии, наиболее примитивные организмы, обладают чрезвычайно высокой приспособляемостью, и поэтому их химический состав подвержен значительным изменениям. Около 80% или более составляет
вода, остальное - органическое вещество. В пересчете на сухую массу в бактериях до 50% углерода, 1015% азота, 2-6% фосфора, 1% серы. Среди химических соединений около 50% массы бактерий составляют белки, 20% материал клеточных мембран и 10% - липиды. Компонентами бактериальных мембран являются: липиды нейтральные (9%), фосфолипиды (28%), белки (50%), полисахариды (15-20%). Многие бактерии способны накапливать жировые вещества, полисахариды, полифосфаты и серу. В липидной фракции бактерий установлены разнообразные стеролы С27-С29 в цепи. По типу эти стеролы относятся главным образом к холестеролу С27, эргостеролу С28 и стигмастеролу С29.
В составе бактерий обнаружены тритерпены рядов гопана. Жирные кислоты, извлеченные из бактерий, обычно представлены соединениями ряда С10-С20. Наиболее важными в количественном отношении является жирные кислоты с разветвлённой цепью изо-антеизоконфигурации.
Основная масса высших растений, в особенности кустарники и деревья, представлена главным образом целлюлозой и лигнином (50-70%); липиды и белки играют второстепенную роль. Однако в некоторых частях высших растений: листьях, спорах, коре, пыльце, семенах и плодах - могут скапливаться значительные количества липидов и липидоподобных веществ. Содержание жира в семенах и плодах различных растений меняется от 1 до 50%. В листьях сосредоточены значительные количества липидов и липидоподобных соединений (восков, кутина, суберина и т.д.)
Липиды, образовавшиеся в высших растениях, характеризуются многими специфическими чертами. Среди н-алканов от С10 до С40 отмечается значительное преобладание нечетных углеводородов над чётными (в 10 и более раз), что особенно заметно в диапазоне н-С23 - н-С35, причем наиболее сильно выражено у н-С27, н-С29 и н-С31. Относительно широко, особенно в восках растительного происхождения, распространены алифатические спирты с чётным числом (от С24 до С30) атомов углерода. В качестве другого типичного компонента высших растений выступают фенольные соединения, в том числе конифери-ловый, синапиловый и кумариловый спирты. Повсеместно встречаются насыщенные жирные кислоты с неразветвленной цепью (С8-С26); при этом самую важную роль играют пальмитиновая (С16) и стеариновая (С18). Из ненасыщенных неразветвленных жирных кислот часто встречаются молекулы с 14,16,18 и 20 атомами углерода.
Типичными соединениями, поставляемыми высшими наземными растениями, являются также различные оксикислоты с 12-26 атомами углерода, которые появляются после разрушения кутина и суберина. Основными стеролами высших растений считаются цитостерол и стигмастерол [33].
Цель исследования - подробное изучение особенностей химического состава сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области, ГК и ФК, а также биотестирование ГП и с привлечением различных штаммов микроорганизмов, белых мышей и морских свинок, установление генетической связи состава сапропеля с исходным биоматериалом [34].
Объекты и методы исследования. 1. Ботанический состав сапропеля. Степень разложения органического материала 98%; остатки растений и животных не превышают 2%. В непромывном материале преобладают диатомовые водоросли класс пенатые (55%), а также нитчатые желто-зелёные (7%), возможно занесённые из верхних слоев водоёма. Промывной материал: остатки животных, беспозвоночные в т.ч.: дафнии (15%), древесина лиственных (береза - Batalo, ива - Salix) - (7%); осока Carex (плоды, корни, реже эпидермис) - (5%); корни злаков в т.ч.: тростника Phragmites - (5%), камыша Scerpuc (эпидермис) - (3%); листья зеленых мхов (Calliergonellecus pidate) - 2%; споры и пыльца - 1%, горец земноводный (Polygonum amphibium), рдест (Potamogetonsp).
2. Зоотехнический состав сапропеля. Протеин (14,99), Са (4,77), Р (1,14), клетчатка (4,13), жир (2,65), мг/кг сухого сапропеля.
3. Химический состав ОВ сапропеля (ОВС). Выход отдельных сапропелевых продуктов составил (масс. % от ОВС): водорастворимые (ВРВ) - 11,3, легко гидролизуемые (ЛГВ) - 21,5 и трудногидроли-зуемые вещества (ТГВ) - 17,7, негидролизуемый остаток (НГО) - 9,1, целлюлоза - 6,3, ГК - 11,2 и ФК -19,6, битумы (Б) - 3,3.
ВРВ, ЛГВ, уроновые (УК) и ФК изучались препаративной тонкослойной хроматографией (ПТСХ), с привлечением большого числа стандартных соединений. В их составе были идентифицированы и количественно определены аминокислоты, сахара и водорастворимые карбоновые кислоты.
Среди аминокислот обнаружены: L-a-аланин, лейцин, фенилаланин, валин, глицин, аспарагин, аргинин, лизин, гистидин, аспарагиновая и глутаминовая кислоты, тирозин, цистеин, триптофан, глутамин, серин, изолейцин, треонин. Сумма аминокислот варьирует (масс. % 102 от ОВС): от 1902,99 (ЛГВ) до 2714,58 (УК). Основу аминокислот ВРВ составляют лейцин (612,22), аспарагиновая (153,84) и глутами-новая (105,75) кислоты, треонин (75,72), фенилаланин (41,54), аспарагин (50,67) и тирозин (32,75), масс. % 102 от ОМС, как известно, наиболее стабильных при диагенезе.
В составе ЛГВ доминируют: гистидин (588,66), лейцин (395,66), аспарагин (335,03), фенилаланин (138,33), глутаминовая (98,47) и аспарагиновая (78,15) кислоты (масс. % 102 от ОВС). Аминокислоты УК в основном представлены: глутамином (152,33), гистидином (55,47), валином (39,03) и глутаминовой кислотой (7,35) масс. % 102 от ОВС.
ФК обогащены лейцином (171,42), глутаминовой кислотой (226,77), треонином (169,63), гистиди-ном (35,71), цистеином (35,71), изолецином (35,71), масс. % 102 от ОВС.
Сахара представлены: арабинозой, D-галактозой, D-глюкозой, L-рамнозой, лактозой, мальтозой, раффинозой, количественное содержание которых максимально для ФК (745,0) и минимально для ВРВ (17,02), масс. % 102 от ОВС.
Среди водорастворимых карбоновых кислот идентифицированы: щавелевая, салициловая, о-фталевая, галловая, феруловая, ванилиновая, сиреневая, терефталевая, бензойная, малоновая, метилян-тарная, в количественном соотношении от (365,53) ФК до (6,67) ВРВ, масс. % 102 от ОВС.
Для ВРВ сахара, в основном, представлены: D-галактозой (7,54), D-глюкозой (3,76), L-рамнозой (2,08); водорастворимые карбоновые кислоты: щавелевой (1,27), янтарной (0,78), салициловой (0,93), бензойной (0,59) и малоновой (0,50), масс. % 102 от ОВС.
Среди сахаров ЛГВ доминируют: D-галактоза (79,17), D-глюкоза (39,53), L-рамноза (16.87) и мальтоза (11,99); водорастворимых карбоновых кислот: янтарная (40,60), щавелевая (16,90), феруловая (11,22), метилянтарная (6,47), масс. % 102 от ОВС. Среди кислот ЛГВ представляют интерес ванилиновая, галловая, сиреневая, являющиеся, вероятно, продуктами окислительной деструкции дигидроконифе-рилового спирта, составляющего основу лигнина высших растений.
Для УК, по сравнению с ЛГВ, отмечается преобладание сахаров и водорастворимых карбоновых кислот. Среди первых преобладают: D-галактоза (153,01) и D-глюкоза (81,19); в составе вторых - щавелевая (93,31), янтарная (71,87), салициловая (14,68) и метилянтарная (11,75), масс. % 102 от ОВС.
Определенное количество аминокислот, сахаров и водорастворимых карбоновых кислот соизвле-кается при щелочном гидролизе сапропеля в ходе выделения ГК, определяя состав их водорастворимой части - ФК. Вероятно при щелочном гидролизе расщепляются сложноэфирные связи, посредством которых аминокислоты связаны с макромолекулой ГК. Обнаружены моносахаридов: D-глюкозы, L-арабинозы, может быть следствием гидролиза сложных полисахаридов, фрагментарно включенных в макромолекулу ГК.
ФК обогащены D-галактозой (358,91), D-глюкозой (205.35), L-рамнозой (78,56), мальтозой (53,57), щавелевой (151,78), янтарной (107,14), салициловой (37,49), малоновой (14,28) и метилянтарной кислотой (21,43), масс. % 102 от ОВС.
4. Химический состав ГК. Выход ГК - 11,32 масс.% ОМС; средняя молекулярная масс (а.е.м.) -1272; элементный (масс. % daf): С (64,7), H (5.1), N (4,0), O+S (26,2) и функциональный состав (мг-экв/г): фенольные (ФГ) - 13,45, карбоксильные (КрГ) - 5,10, хиноидные (ХГ) - 9,05, кетонные группы (КГ) -0,98, иодное число (ИЧ) - 2,10; Н/С(ат) 0,946, молекулярная формула: С68,59 Н6488 N3 64 O+S20 83.
В ИК-Фурье спектре ГК установлено присутствие полос поглощения (п.п.) следующих структурных фрагментов (v, см-1): ароматических, преимущественно, неконденсированных циклов (3100-3000, дублет 1600-1500, 1459, 1235, серия п.п. в областях 1200-900 и 900-650,3080-3030, 1175-1125, 1100-1070); насыщенных циклов и алкильных заместителей (2960, 2921, 2854, 1459, 1383, 725); фурановых гетеро-циклов (3165-3125, 1547, 1495, 1030-1015, 870, 802-740); интенсивные п.п. фенольных и вторичных спиртовых (3500-3300, 3630, 3615, 1410-1310, 1200), карбоксильных (2600, 1714-1700, 1300), метоксильных (2850-2830), хиноидных (1675, 1645), сложноэфирных и кетонных групп (1740-1735, 1175, 960), циклических ангидридов (1850-1835, 1785-1765), тропонов и трополонов (1635); аминогрупп и пиррольных циклов (широкая 3200, 3550-3300, 1680, несколько п.п. в области 2200-1800); пиридиновых, хинолиновых, изохинолиновых и пиперидиновых (3480-3450, 3450, 3370-3300, 1490, 1360-1260, 745) тиофеновых гете-роциклов (3125-3040, 1520, 1050, 755-680, 840, 865), первичных и вторичных амидов (1665-1617, 1546-1520).
УФ/ВИС-спектр ГК характерен для присутствия в их составе ненасыщенных карбоновых кислот и их производных (200,220); нафталиновых колец (210, 212, 220, 270, 240, 310); п-комплексов металлов с фенольными и хиноидными группировками (450-445); каротиноидов, производных витамина «А», дике-тонов, ненасыщенных кетонов (450-455, 480-495, 415); сопряженных пиррольных циклов, типа порфири-нов, хлорофиллов (450, 510, 545), порфиринов (408, 525, 760, 720), бензольных циклов (200, 260); хлорофилла "а" (420, 450-455, 340, 495, 645, 685, 700, 710-720), хлорофилла "b" (450-455, 580, 645), хлорофилла "с" (450-455, 645, 685); бактериохлорофилла "а" (475), Х-дикетонов (340-350, 280); ненасыщенных лактонов и сложных эфиров (200, 220-230, 240), н.м.
В 'НЯМР-спектре ГК присутствует очень широкая п.п ароматических протонов (от 8,5 до 6,3 м.д.), что указывает на наличие в ГК бензольных и нафталиновых колец, замещенных группами COOR, OR, Alk. Широкая полоса в области (5,0-4,0 м.д) отвечает за сигналы группы COOCH2-, O-CH3, -CH=CH-. В области высокого поля сигналы при 0,83 м.д принадлежит протонам концевых CH3-групп; сигнал при 1,24 м.д - СН2 - протонам.
Отношение интегральных интенсивностей данных полос поглощения позволяет приписать среднестатистическому алкильному радикалу структуру СН3(СН2)6-. Отношение числа ароматических и алифатических протонов - 13:16. Уширение всех сигналов указывает на присутствие в ГК парамагнитных частиц, вероятнее всего ионов Fe (II) и Co (III).
Обобщение данных элементного, эмиссионного спектрального, рентгено-флуоресцентного, количественного функционального анализов, криоскопии по Расту, ИК-Фурье, УФ/ВИС- и 1НЯМР-спектроскопии позволило сделать вывод, что сапропелевые ГК имеют весьма сложный, полифункциональный состав, включают, пиррольные и тиофеновые гетероциклы, с высоким вкладом алифатических заместителей, циклоалкановых фрагментов.
5. Биологическое тестирование сапропелевых препаратов. Были использованы ГК и ФК, которые в различных концентрациях вводились в состав питательных сред для выращивания различных групп микроорганизмов: E.coli, St.aureus, Candida, C.diphterie, в т.ч.: высокотребовательных, как, например, дифтерийная палочка (C.diphterie), для роста которых требуется среда с высоким содержанием ам-миного азота, глюкозы, нативного белка, что достигается введением в состав среды крови, сыворотки животных.
Установлено, что наибольшей биологической активностью обладают ГК, введеные в состав питательной среды в минимальных концентрациях (1 мл на 10 мл нейтрального агара). На чашках отмечается обильный рост нетребовательных микроорганизмов, таких как E.coli и St.aureus. Колонии увеличенных размеров по сравнению с контролем, а также отмечается умеренный рост высокотребовательных C.diphterie и Candida, тогда как в отсутствии ГК рост микроорганизмов на агаре не наблюдается.
ФК вызывают угнетение роста микроорганизмов. Чем выше концентрация ФК, тем заметнее эффект угнетения, вплоть до отсутствия роста микроорганизмов.
Результаты изучения биологической активности сапропелевых ГК и ФК могут быть успешно использованы в конструировании питательных сред для диагностики инфекционных заболеваний.
Биологическая активность исходного сапропеля, сапропелевых ГК и ФК была также изучена на морских свинках и белых мышах. Были взяты контрольная и опытная группы морских свинок (самца в возрасте 1,5 месяца) по 10 особей в группе и белых мышей (самцы в возрасте 1,0 месяц) по 20 особей в группе. Все животные получали хозяйственный рацион в виде суточной нормы кормов лабораторных животных в граммах на 1 животное.
Морские свинки: зерно (20), морковь (120), свекла (120).
Белые мыши: зерно (11), морковь (3), свекла (3).
Рацион питания животных не сбалансирован, и его основу составляют углеводы. Протеиновые добавки отсутствовали. С целью установления влияния сапропеля, растворов ГК и ФК на физиологию животных и характер их поведения в опытных группах препараты в неограниченном количестве скармливали вместе с основным кормом.
Установлено, что подкормка сапропелем и препаратами на его основе оказала положительное влияние на рост опытных животных. В контрольной группе живая масса морских свинок за 90 дней увеличилась на (19,3 -21,9)%, в опытной на (26,3-44,,3%). В контрольной группе белых мышей за 90 дней живая масса возросла на (11,6-15,4%), а в опытной на (10,5-15,0%). В контрольной группе белых мышей из-за несбалансированного питания, а именно недостатка микроэлементов, жиров и протеина, которыми богаты сапропель и сапропелевые препараты, было загрызено и съедено 50% особей. В течение эксперимента в данной группе животные вели себя неспокойно и агрессивно, постоянно нападали друг на друга. Незначительные различия живой масс контрольных и опытных белых мышей, по-видимому, можно объяснить использованием контрольными особями животного сырья.
Морские свинки и белые мыши в опытных группах в течение всего времени (90 дней) чувствовали себя хорошо, были спокойными и поедали корм с большой охотой. Кишечных расстройств не наблюдалось, улучшилось качество шерсти.
Морфобиохимическое исследование крови позволило сделать вывод о нормальном состоянии здоровья животных. В целом различия между группами по гематологическим показателям были незначительными и находились в пределах физиологических норма. В опытных группах животных отмечалось несущественное увеличение лейкоцитов.
После 3-х дневного восстановительного периода контрольные и опытные животные были заражены анаэробной токсигенной культурой Clostridium perfringes.
Контрольные группы животных погибли на 2-й день после заражения, а опытные - на 4-ый день. При вскрытии трупов животных во всех группах были обнаружены все характерные признаки заражения Clostridium perfringes.
У опытных животных относительное развитие сердца, печени, желудка, тонкого и толстого кишечника уступало контролю, что по-видимому, связано с более эффективным функционированием этих органов.
Обобщение экспериментальных данных позволило констатировать: Скармливание животным натурального сапропеля и сапропелевых ГК и ФК, характеризующихся высоким содержанием протеина, жиров, аминокислот, сахаров, клетчатки, микроэлементов, сбалансировало рацион их питания.
Отмечено увеличение живой масс, улучшение гематологических показателей крови, иммунной системы, выразившееся в повышении устойчивости животных при заражении культурой Clostridium perfringes.
Заключение. Комплексом современных физико-химических методов, включая технический, ботанический, зоотехнический, элементный, количественный функциональный, рентгено-флуоресцентный анализы, криоскопию, ИК-Фурье, УВ/ВИС и :НЯМР-спектроскопию выполнено подробное исследование особенностей вещественного состава исходного сапропеля р. Тихая Сосна Белгородской области, его различных групповых составляющих. Проведено биотестирование гуминовых препаратов, что позволило научно обосновать целесообразность использования последних в медицинской практике.
Литература
1. Царфик Л.Г., Кисилев Б.В. Лечебные грязи и другие теплоносители. М.: Высшая школа, 1990. 127 с.
2. Пилоидотерапия распространенных заболеваний. Пятигорск, 1985. 192 с.
3. Позднякова А.В. Профилактическое действие гумата натрия при стрессе // Гуминовые удобрения: теория и практика их применения. 1983. Т. 9. С. 149-151.
4. Шарипкина А.Я., Колотенко В.П. Профилактическое действие гумата натрия при интоксикации организма крыс CC14 // Гуминовые удобрения: теория и практика их применения. 1983. Т. 9. С.131-134.
5. Самути Н.Н. Экспериментальное обоснование применение иловой сульфидной грязи при адь-ювантном артрите // Вопросы курортологии, физиотерапии и ЛФК. 1998. №1. С. 28-30.
6. Корнилова М.Г. Биологически активные компоненты сапропелей Тюменской области: Авто-реф. дис... канд. биол. наук. Свердловск, 1972. 25 с.
7. Килина Е.С., Тронова Т.М., Клопотова Н.Г. Биологическая активность лечебных сапропелевых грязей Сибири // Вопросы курортологии, физиотерапии и ЛФК. 1997. №2. С. 23-25.
8. Джабарова Н.К., Карелина О.А., Клопотова Н.Г. Витаминные комплексы как один из показателей биологической активности пелоидов // Вопросы курортологии, физиотерапии и ЛФК. 1997. №2. С. 25-27.
9. Марченко Л.О. Изучение антибактериальных свойств сапропелей Белоруссии и выделенных из них микроорганизмов // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника, 1976. С. 109-115.
10. Марченко Л.О., Гуринович Е.С. Микробиологические исследования сапропелей Белорусских озер // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Минск: Наука и техника. 1976. С. 74-81.
11. Использование сапропелей при остеоартрозе у участников ликвидации последствий аварии на Чернобыльской АЭС / Иванова Т.Г., Тронова Т.М., Капилевич Л.В. [и др.] // Вопросы курортологии, физиотерапии и ЛФК. 1997. №3. С. 23-25.
12. Антонов И.П., Кашицкий Э.С., Сикорская И.С.Основные итоги и перспективные вопросы лечебного использования сапропелевых грязей // Проблемы использования сапропелей в народном хозяйстве. Тез.докл. респ. конф. Минск, 1981. С. 146.
13. Решетова Г.Г., Килина Е.С., Шустов Л.П. Применение сапропелевой грязи оз. Кирек у больных позвоночным остеохондрозом и остео артрозом: метод. рекомендации. Томск, 1996. 9 с.
14. Никольский В.В., Минеев Б.И. Итоги микробиологического изучения сапропеля озера Тарас-Куль // Сапропели группы Тюменских озер и их лечебный свойства, 1995. С. 139-143.
15. Физиологические и фармакологические аспекты использования местных природных ресурсов лекарственного сырья и готовых препаратов в практике // Тез.докл. Уральской зональной конференции. 1975. С. 102-121.
16. Потонье Г. Сапропелиты. М.: Изд-во журн. нефти и сланц. хоз, 1920. 45 с.
17. Винберг Г.Г. Некоторые количественные данные по биомессе планктона озер БССР // Уч. Зап. БГУ им. В .И. Ленина. Сер. биол. Минск. 1954. Вып.17. С. 57-60.
18. Казаков Е.И., Пронина М.В. Химический состав различных форм планктона и бентоса // Тр. лаб. генезиса сапропеля. М.-Л. 1941. Вып.2. С. 49-57.
19. Корде Н.В. Синезеленые водоросли как образователи сапропелевых отложений // Тр. лаб. сапропелевых отложений. 1950. Вып. 4. С. 68-90.
20. Мессинова М.А., Панкратова В.Я. Разложение пресноводного фитопланктона и роль микроорганизмов в этом процессе // Тр. лаб. генезиса сапропеля. 1941. Вып. 2. С. 131-140.
21. Корде Н.В. Биостратификация и типология русских сапропелей. М.: Изд-во АН СССР, 1960. 22 с.
22. Штурм Л. Д., Феодоровская Н.П. Изучение превращения жировых веществ в связи с генезисом иловых отложений // Тр. лаб. генезиса сапропеля. 1941. Вып. 2. С. 93-99.
23. Серенков Г.П., Пахомова М.В. Изучение углеводов некоторых видов водорослей // Науч. докл. высш. школы. биол. науки. 1961. №1. С. 167-171.
24. Серенков Г.П. Пахомова М.В. К биохимии синезеленых водорослей. Экология и физиология синезеленых водорослей. М.-Л, 1965. С. 177-187.
25. Tischer R.G., Moore B.G. An extracellular polysacchariade produced by Palmella mucosa Kütz // Arch. Mikrobiol. 1964. V. 49, № 2. Р. 158-166.
26. Горюнова С.В., Ржанова Г.Н. Прижизненные выделения азотосодержащих веществ Lyngbya aestuarii и их физиологическая роль. Биология синезеленых водорослей. М., 1964. С. 111-118.
27. Watahabe A. Production in cultural solution of some amino acids by the atmospherie nitrogen-fixing blue-gree algae // Arch. Biochem. And Biophys. 1951. V. 34, №1. Р. 50-54.
28. Fogg G.E. The Production of extracellular nitrogenous substances by a blue-gree alge // Proc. Roy. Soc. London. B. 1952. V. 139, № 896. P. 372-397.
29. Горюнова С.В. Химический состав и прижизненные выделения синезеленой водоросли Oscillatoria splendida Grew. М.-Л.: Изд-во АН СССР, 1950. С. 156.
30. Ranson G. Observations sur lagent essentiel de la dissolution du cslocure dans les regions exondees des les caraliennes de J'Archpel des Tuamoty Conclusions sur les processus de la dissolution du calcarie // C.r. Acad. sci. D. 1955. V. 240, № 9. Р. 1007-1010.
31. Venkataraman G.S., Neelakantan S. Effect of the cellular constituents of the nitrogen fixin blue-green algae Cylindrospermus muscola on the root growth of rice plants // J. Gen. and Appl. Microbiol. 1967. V. 13, № 1. P. 53-61.
32. Henriksson E. Studies in the physiology of the Lichem Collema. 4. The occurrence of polysaccharides and some vitamins outside the cells of the phycobiont Nostos sp // Physiol. plant. 1961. V. 14. Р. 813-817.
33. Судьина Е.Г., Шнюкова Е.И., Костлан Н.В., Мушак П.А., Тупик Н.Д. Биохимия синезеленых водорослей. Киев: Наук. думка, 1978. 264 с.
34. Дмитриева Е.Д. Химический состав и биологическая активность сапропеля Белгородской области: Автор. дис.канд.хим.наук. Санкт-Петербург: СПГТУ, 2003. С. 22.
35. Платонов В.В., Елисеев Д.Н., Трейтяк Р.З., Швыкин А.Ю., Хадарцев А. А., Хрупачев А.Г. Интродукция гидроксильных и карбоксильных групп в молекулярную структуру гуминовых веществ торфа для увеличения их биостимулирующей и адаптогенной способности // Вестник новых медицинских технологий. 2011. № 3. С. 34-36.
36. Платонов В.В., Хадарцев А.А., Фридзон К.Я., Чуносов С.Н. Химический состав и биологическая активность сапропеля оз. Глубокое (Татарстан) // Вестник новых медицинских технологий. 2014. № 3. С. 199-204.
37. Платонов В.В., Хадарцев А.А., Чуносов С.Н., Фридзон К.Я. Биологическое действие сапропе-лей // Фундаментальные исследования. 2014. № 9, Ч. 11. С. 2474-2480.
38. Платонов В.В., Елисеев Д.Н., Половецкая О.С., Хадарцев А.А. Сравнительная характеристика особенностей торфяных гуминовых и гиматомелановых кислот во взаимосвязи со спецификой их физиологического действия // Вестник новых медицинских технологий. 2010. № 4. С. 9-11.
39. Платонов В.В., Елисеев Д.Н., Трейтяк Р.З., Швыкин А.Ю., Хадарцев А. А., Хрупачев А.Г. Ок-симетилирование гуминовых веществ как способ повышения их детоксицирующих и протекторных свойств // Вестник новых медицинских технологий. 2011. № 4. С. 35-37.
40. Половецкая О.С., Платонов В.В., Сапаров А.С., Хадарцев А.А. Химический состав экстратов сапропеля Краснодарского края (г. Приморско-Ахтарск) // Почвоведение и агрохимия. 2013. № 2. С. 53-62.
41. Половецкая О.С., Платонов В.В., Хадарцев А.А. Особенности химического состава экстрактов сапропеля Краснодарского края // Вестник новых медицинских технологий. 2013. № 2. С. 446-452.
42. Платонов В.В., Хадарцев А. А., Фридзон К.Я. Химический состав и биологическая активность сапропеля оренбургской области (п. Соль-Илецк), генетическая связь с составом сапропелеобразовате-лей // Вестник новых медицинских технологий (электронный журнал). 2014. Публикация 1-6. №1. URL: http://medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2014-1/4873.pdf (дата обращения: 03.07.2014). DOI: 10.12737/5040.
43. Платонов В.В., Дмитриева Е.Д., Проскуряков В.А., Сыпченко А.Я., Хадарцев А.А. Биологическая активность сапропеля и препаратов на его основе // ТГПУ-Спб., 2003. Деп. в ВИНИТИ 03.07.2003. № 1262. 20 с.
44. Тахир А., Платонов В.В., Половецкая О.С., Хадарцев А.А. Генетическая связь состава биоматериала с хитмическим составом сапропеля астраханской области и его биологической активностью. В книге: 16 научно-техническая конференция молодых ученых, аспирантов, студентов. Тезисы докладов: в 2 частях. 2014. С. 78-80.
References
1. Tsarfik LG, Kisilev BV. Lechebnye gryazi i drugie teplonositeli. Moscow: Vysshaya shkola; 1990. Russian.
2. Piloidoterapiya rasprostranennykh zabolevaniy. Pyatigorsk; 1985. Russian.
3. Pozdnyakova AV. Profilakticheskoe deystvie gumata natriya pri stresse. Guminovye udobreniya: teo-riya i praktika ikh primeneniya. 1983;9:149-51. Russian.
4. Sharipkina AY, Kolotenko VP. Profilakticheskoe deystvie gumata natriya pri intoksikatsii organizma krys CCl4. Guminovye udobreniya: teoriya i praktika ikh primeneniya. 1983;9:131-4. Russian.
5. Samuti NN. Eksperimental'noe obosnovanie primenenie ilovoy sul'fidnoy gryazi pri ad'yuvantnom ar-trite. Voprosy kurortologii, fizioterapii i LFK. 1998;1:28-30. Russian.
6. Kornilova MG. Biologicheski aktivnye komponenty sapropeley Tyumenskoy oblasti [dissertation]. Sverdlovsk (Sverdlovsk region); 1972. Russian.
7. Kilina ES, Tronova TM, Klopotova NG. Biologicheskaya aktivnost' lechebnykh sapropelevykh grya-zey Sibiri. Voprosy kurortologii, fizioterapii i LFK. 1997;2:23-5. Russian.
8. Dzhabarova NK, Karelina OA, Klopotova NG. Vitaminnye kompleksy kak odin iz pokazateley biolo-gicheskoy aktivnosti peloidov. Voprosy kurortologii, fizioterapii i LFK. 1997;2:25-7. Russian.
9. Marchenko LO. Izuchenie antibakterial'nykh svoystv sapropeley Belorussii i vydelennykh iz nikh mi-kroorganizmov. Problemy ispol'zovaniya sapropeley v narodnom khozyaystve. Minsk: Nauka i tekhnika; 1976. Russian.
10. Marchenko LO, Gurinovich ES. Mikrobiologicheskie issledovaniya sapropeley Belorusskikh ozer. Problemy ispol'zovaniya sapropeley v narodnom khozyaystve. Minsk: Nauka i tekhnika; 1976. Russian.
11. Ivanova TG, Tronova TM, Kapilevich LV, et al. Ispol'zovanie sapropeley pri osteoartroze u uchastni-kov likvidatsii posledstviy avarii na Chernobyl'skoy AES. Voprosy kurortologii, fizioterapii i LFK. 1997;3:23-5. Russian.
12. Antonov IP, Kashitskiy ES, Sikorskaya IS.Osnovnye itogi i perspektivnye voprosy lechebnogo ispol'zovaniya sapropelevykh gryazey. Problemy ispol'zovaniya sapropeley v narodnom khozyaystve. Tez.dokl. resp. konf. Minsk; 1981. P. 146. Russian.
13. Reshetova GG, Kilina ES, Shustov LP. Primenenie sapropelevoy gryazi oz. Kirek u bol'nykh pozvo-nochnym osteokhondrozom i osteo artrozom: metod. rekomendatsii. Tomsk; 1996. Russian.
14. Nikol'skiy VV, Mineev BI. Itogi mikrobiologicheskogo izucheniya sapropelya ozera Taras-Kul'. Sa-propeli gruppy Tyumenskikh ozer i ikh lechebnyy svoystva. 1995;139-3. Russian.
15. Fiziologicheskie i farmakologicheskie aspekty ispol'zovaniya mestnykh prirodnykh resursov le-karstvennogo syijya i gotovykh preparatov v praktike. Tez.dokl. Ural'skoy zonal'noy konfersntsii. 1975:102-21. Russian.
16. Poton'e G. Sapropelity. Moscow: Izd-vo zhurn. nefti i slants. khoz; 1920. Russian.
17. Vinberg GG. Nekotorye kolichestvennye dannye po biomesse planktona ozer BSSR. Uch. Zap. BGU im. Lenina VI. Ser. biol. Minsk; 1954. V.17. Russian.
18. Kazakov EI, Pronina MV. Khimicheskiy sostav razlichnykh form planktona i bentosa. Tr. lab. genezi-sa sapropelya. Moscow-Leningrad; 1941. V. 2. Russian.
19. Korde NV. Sinezelenye vodorosli kak obrazovateli sapropelevykh otlozheniy. Tr. lab. sapropelevykh otlozheniy. 1950. V. 4. S. 68-90. Russian.
20. Messinova MA, Pankratova VY. Razlozhenie presnovodnogo fitoplanktona i rol' mikroorganizmov v etom protsesse. Tr. lab. genezisa sapropelya. Moscow-Leningrad; 1941. V.2. Russian.
21. Korde NV. Biostratifikatsiya i tipologiya russkikh sapropeley. Moscow: Izd-vo AN SSSR; 1960. Russian.
22. Shturm LD, Feodorovskaya NP. Izuchenie prevrashcheniya zhirovykh veshchestv v svyazi s genezi-som ilovykh otlozheniy. Tr. lab. genezisa sapropelya. Moscow-Leningrad; 1941. V. 2. Russian.
23. Serenkov GP, Pakhomova MV. Izuchenie uglevodov nekotorykh vidov vodorosley. Nauch. dokl. vyssh. shkoly. biol. nauki. 1961;1:167-71. Russian.
24. Serenkov GP, Pakhomova MV. K biokhimii sinezelenykh vodorosley. Ekologiya i fiziologiya sineze-lenykh vodorosley. Moscow-Leningrad; 1965:177-7. Russian.
25. Tischer RG, Moore BG. An extracellular polysacchariade produced by Palmella mucosa Kutz. Arch. Mikrobiol. 1964;49(2):158-66.
26. Goryunova SV, Rzhanova GN. Prizhiznennye vydeleniya azotosoderzhashchikh veshchestv Lyngbya aestuarii i ikh fiziologicheskaya rol'. Biologiya sinezelenykh vodorosley. Moscow; 1964. Russian.
27. Watahabe A. Production in cultural solution of some amino acids by the atmospherie nitrogen-fixing blue-gree algae. Arch. Biochem. And Biophys. 1951;34(1):50-4.
28. Fogg GE. The Production of extracellular nitrogenous substances by a blue-gree alge. Proc. Roy. Soc. London. B. 1952;139(896):372-97.
29. Goryunova SV. Khimicheskiy sostav i prizhiznennye vydeleniya sinezelenoy vodorosli Oscillatoria splendida Grew. Moscow-Leningrad: Izd-vo AN SSSR; 1950. Russian.
30. Ranson G. Observations sur lagent essentiel de la dissolution du cslocure dans les regions exondees des les caraliennes de J'Archpel des Tuamoty Conclusions sur les processus de la dissolution du calcarie. C.r. Acad. sci. D. 1955;240(9):1007-10.
31. Venkataraman GS, Neelakantan S. Effect of the cellular constituents of the nitrogen fixin blue-green algae Cylindrospermus muscola on the root growth of rice plants. J. Gen. and Appl. Microbiol. 1967;13(1):53-61.
32. Henriksson E. Studies in the physiology of the Lichem Collema. 4. The occurrence of polysaccharides and some vitamins outside the cells of the phycobiont Nostos sp. Physiol. plant. 1961;14:813-7.
33. Sud'ina EG, Shnyukova EI, Kostlan NV, Mushak PA, Tupik ND. Biokhimiya sinezelenykh vodorosley. Kiev: Nauk. dumka; 1978. Russian.
34. Dmitrieva ED. Khimicheskiy sostav i biologicheskaya aktivnost' sapropelya Belgorodskoy oblasti [dissertation] Sankt-Peterburg (Sankt-Peterburg region): SPGTU; 2003. Russian.
35. Platonov VV, Eliseev DN, Treytyak RZ, Shvykin AY, Khadartsev AA, Khrupachev AG. Introdukt-siya gidroksil'nykh i karboksil'nykh grupp v molekulyarnuyu strukturu guminovykh veshchestv torfa dlya uveli-cheniya ikh biostimuliruyushchey i adaptogennoy sposobnosti. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2011;3:34-6. Russian.
36. Platonov VV, Khadartsev AA, Fridzon KY, Chunosov SN. Khimicheskiy sostav i biologicheskaya ak-tivnost' sapropelya oz. Glubokoe (Tatarstan). Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2014;3:199-204. Russian.
37. Platonov VV, Khadartsev AA, Chunosov SN, Fridzon KY. Biologicheskoe deystvie sapropeley. Fun-damental'nye issledovaniya. 2014;9(11):2474-80. Russian.
38. Platonov VV, Eliseev DN, Polovetskaya OS, Khadartsev AA. Sravnitel'naya kharakteristika osoben-nostey torfyanykh guminovykh i gimatomelanovykh kislot vo vzaimosvyazi so spetsifikoy ikh fiziologichesko-go deystviya. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2010;4:9-11. Russian.
39. Platonov VV, Eliseev DN, Treytyak RZ, Shvykin AY, Khadartsev AA, Khrupachev AG. Ok-simetilirovanie guminovykh veshchestv kak sposob povysheniya ikh detoksitsiruyushchikh i protektornykh svoystv. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2011;4:35-7. Russian.
40. Polovetskaya OS, Platonov VV, Saparov AS, Khadartsev AA. Khimicheskiy sostav ekstratov sapro-pelya Krasnodarskogo kraya (g. Primorsko-Akhtarsk). Pochvovedenie i agrokhimiya. 2013;2:53-62. Russian.
41. Polovetskaya OS, Platonov VV, Khadartsev AA. Osobennosti khimicheskogo sostava ekstraktov sapropelya Krasnodarskogo kraya. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy. 2013;2:446-52. Russian.
42. Platonov VV, Khadartsev AA, Fridzon KY. Khimicheskiy sostav i biologicheskaya aktivnost' sapro-pelya orenburgskoy oblasti (p. Sol'Iletsk), geneticheskaya svyaz' s sostavom sapropeleobrazovateley. Vestnik novykh meditsinskikh tekhnologiy (elektronnyy zhurnal). 2014 [cited 2014 Jul 03];1: [about 8 p.]. Russian. Ava-liable from: http://medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2014-1/4873.pdf. DOI: 10.12737/5040.
43. Platonov VV, Dmitrieva ED, Proskuryakov VA, Sypchenko AY, Khadartsev AA. Biologicheskaya aktivnost' sapropelya i preparatov na ego osnove. TGPU-Sankt-Peterburg. Dep. v VINITI; 2003. Russian.
44. Takhir A, Platonov VV, Polovetskaya OS, Khadartsev AA. Geneticheskaya svyaz' sostava biomateria-la s khitmicheskim sostavom sapropelya astrakhanskoy oblasti i ego biologicheskoy aktivnost'yu. V knige: 16 nauchno-tekhnicheskaya konferentsiya molodykh uchenykh, aspirantov, studentov. Tezisy dokladov: v 2 chastyakh; 2014. Russian.
Библиографическая ссылка:
Платонов В.В., Ларина М.А., Дмитриева Е. Д., Бодял М.А. Биологически активные медицинские препараты на основе сапропелевого гуминового комплекса // Вестник новых медицинских технологий. Электронное издание. 2016. №2. Публикация 1-1. URL: http://www.medtsu.tula.ru/VNMT/Bulletin/E2016-2/1-1.pdf (дата обращения: 04.05.2016). DOI: 10.12737/19646.
