CC BY
11
В связи с этим, изучение фитохимического состава и фармакологической активности аврана лекарственного является актуальной проблемой, в первую очередь как перспективного противоопухолевого лекарственного средства с целью дальнейшей разработки на его основе различных лекарственных форм.
Содержащиеся в Авране лекарственном биологически активные вещества, перспективны для дальнейшего изучения, с последующей разработкой новых лекарственных средств. Важным является вопрос максимального извлечения БАВ из растения, их стандартизация, разработка технологии и состава удобных для применения лекарственных форм, способствующих проявлению всех полезных свойств травы аврана лекарственного.
Литература:
1. В.М. Булаев, Е.В. Ших, Д.А. Сычев. — М. МЕДпресс-информ, 2011. — 144 с.
2. Н.А. Наволокин, Д.А. Мудрак, Н.В. Полуконова, [и др.] Злокачественные опухоли. — 2017. — Т.7, № 3. — C. 133-134.
3. Отчет по оценке результатов доклинических исследований экстракта аврана лекарственного и основных его активных компонентов.
4. Fisher, D.E. Cell. — 1994. — Vol. 78. — P. 539-542.
ВНЕКЛЕТОЧНЫЕ ВЕЗИКУЛЫ МСК ПЕРЕКЛЮЧАЮТ ФЕНОТИП МАКРОФАГОВ С ПРОВОСПАЛИТЕЛЬНОГО НА ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫЙ
У.Д. Дьячкова1, М.А. Виговскийг 2, Н.А. Басалова2, О.А. Григорьева2, А.Ю. Ефименког 2
1 Факультет фундаментальной медицины, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
2 Институт регенеративной медицины, МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: dyachkovauliana@gmail.com
Ключевые слова: макрофаги, внеклеточные везикулы, ме-зенхимные стромальные/стволовые клетки, воспаление.
Воспаление — это защитный механизм, запуск которого происходит одним из первых при повреждении тканей. В развитии воспалительных реакций важную роль играют макрофаги. В норме происходит их поляризация в провоспалительный фенотип (М1-классически активированные) для привлечения иммунных клеток и их активации, а затем переключение на противовоспалительный (М2-альтернативно активированные), что приводит к разрешению воспаления. Однако, в определенных условиях воспаление может приобрести характер хронического, что сопровождается избыточной секрецией цитокинов и других биологически активных молекул, которые приводят к развитию и прогрессированию фиброза. Сегодня перспективным терапевтическим подходом к лечению фиброза является использование мезенхимных стромаль-ных клеток (МСК) и их секретома. Показано, что в составе внеклеточных везикул, продуцируемых МСК (ВВ-МСК), окружающим клеткам могут передаваться специфические некодирующие микроРНК, хотя механизм их влияния на макрофаги и воспаление в целом остается малоизученным. Поэтому целью нашей работы стало изучение влияния ВВ-МСК на поляризацию макрофагов и возможные механизмы их действия. Для этого мы выделяли моноциты из периферического крови человека и стимулировали их дифференцировку в макрофаги с помощью GM-CSF. После этого мы добавляли LPS в комбинации с IFNg для
поляризации в М1-тип, IL-4 — в М2а-тип либо ВВ-МСК жировой ткани человека, а после этого анализировали уровень экспрессии генов про- и противовоспалительных факторов. С помощью ПЦР анализа мы показали, что действие ВВ-МСК, сходно с влиянием IL-4, стимулирует экспрессию генов-маркеров М2а-макрофагов (CD200R1). При этом снижается экспрессия генов-маркеров М1-макрофагов (IL-6, CD86, IL-1 b, CCR7, TNFa, COX2), увеличение которых происходит под действием LPS+lFNg. С помощью таргетного ПЦР-анализа микроРНК мы показали, что ВВ-МСК содержат микроРНК 27a-3p. Данная микроРНК, по данным литературы, подавляет сигнальный каскад GM-CSF, LPS или INFg, снижая транскрипцию своей мишени NFKB1, ингибируя поляризацию в М1-тип.Таким образом, ВВ-МСК способны переключать фенотип макрофагов с провоспалительного на противовоспалительный, в том числе за счет переноса специфических некодирую-щих микроРНК, механизм действия которых требует дальнейших исследований.Исследование поддержано грантом РФФИ № 19-29-04172.
БИОХИМИЧЕСКИЙ АНАЛИЗ КОМПОНЕНТОВ ВНЕКЛЕТОЧНОГО МАТРИКСА АОРТЫ И ЭНДОТЕЛИАЛЬНОГО ГЛИКОКАЛИКСА ПРИ РАЗЛИЧНЫХ ПАТОЛОГИЯХ
П.Е. Евстигнеева1, В.Е. Успенский2, И.В. Воронкина1
1 ФГБНУ ИЭМ, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБУ НМИЦ им. В.А. Алмазова Минздрава России, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: adamova.polina@gmail.com
Ключевые слова: атеросклероз, аорта, гликокаликс, внеклеточный матрикс, атеросклеротическая бляшка, аневризма аорты.
Сердечно-сосудистые заболевания, причиной и началом которых часто является атеросклероз (АС), являются самой распространенной причиной смерти в развитых странах. Для разработки стратегий лечения и профилактики АС необходимо понимание биохимических механизмов, лежащих в основе данного патологического процесса.
В последнее время исследователи обратили внимание на роль внеклеточного матрикса (ВКМ) и эндо-телиального гликокаликса в патофизиологии АС [1]. Установлено, что раннее интимальное утолщение стенки сосудов сопровождается накоплением в них версика-на, который становится маркером начального развития АС и причиной рестенозов после ангиопластики [2]. Также известно изучение содержания в бляшках хондро-итинсульфата, гепарансульфата и декорина, который локализуется в местах их кальцификации [3]. Содержание перлекана при АС снижено по сравнению с нормой [4]. В найденных работах авторы в основном проводили гистологическое изучение материала. Результаты разных исследований часто противоречивы.
В представленной работе был проведен биохимический анализ интраоперационно полученного материала: тканей нормальных и измененных (аневризма) аорт и атеросклеротических бляшек. Определяли такие компоненты ВКМ, как коллагены 1 и 4 типа, эластин, лами-нин, и протеогликаны (ПГ) версикан, декорин, бигликан, перлекан, а также анализировали уровни активности ММП-9, -2 и -1. Образцы гомогенизировали и анализировали супернатант, содержащий растворимую часть
ВКМ, и осадок. Полученные результаты показали, что в супернатанте обнаружен версикан в небольших количествах и нет бигликана и перлекана. В ткани идентифицированы все компоненты ВКМ. Содержание версикана и бигликана в ткани условно нормальной аорты было существенно больше, чем в бляшке. В гомогенате ткани аневризматически расширенной аорты присутствовали практически все исследуемые компоненты, исключая ламинин. Растворимой формы декорина в бляшках обнаружено больше, чем в нормальной аорте, однако в го-могенатах этих же образцов его содержание примерно одинаково. В бляшке повышена также активность ММП-9 по сравнению с нормальной аортой. Гистологический анализ материала в этом исследовании не проводили.
Полученные нами предварительные данные подтверждают имеющиеся литературные и являются началом для дальнейшего исследования механизмов участия белков и ПГ ВКМ и эндотелиального гликокаликса в патогенезе АС, что, в свою очередь, может быть полезным в разработке лечения.
Литература:
1. Gialeli, C., Shami, A., Gonpalves, I. Current Opinion in Lipidology. 2021. V. 32. № 5 p 277
2. Максименко А.В., Турашев А.Д. Биоорганическая химия. 2014. V. 40. № 3. с. 259-274.
3. Fischer J.W., Steitz S.A., Johnson P.Y., et al. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2004. V. 24. № 12. P. 2391-2396.
4. Tran, P. K., Agardh, H. E., Tran-Lundmark et al. Atherosclerosis, 2007. V.190 № 2, p. 264-270.
КОНСЕРВАТИВНОЕ ВОССТАНОВЛЕНИЕ МЯГКИХ ТКАНЕЙ ЛИЦА ПОСЛЕ УКУСОВ ЖИВОТНЫХ
З.А. Евсюкова
Кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии, МГМСУ им. А.И. Евдокимова, Москва, Россия
e-mail: zoya.evsyukova@gmail.com
Ключевые слова: рваная рана лица, регенерация кожи, лечение ран, реконструкция лица, укус собаки, факторы роста, профилактика рубцов.
Собака, как говорится, — друг человека, а вот человек собаке друг не всегда, ибо подавляющее количество нападений собак на человека провоцируется им самим. Согласно данным Росздравнадзора, в 2021 году с укусами животных в ЛПУ обратилось около 400 тыс чел, 70% всех укусов были нанесены собаками. Укусы собак являются серьезной медико-социальной проблемой, поскольку требуют мультикомплексного экстренного подхода в лечении пациента, что не всегда представляется возможным. Укушенная рана, нанесенная собакой, сама по себе является фактором риска бешенства, столбняка, а также гнойного расплавления тканей, поскольку микрофлора полости рта собак содержит специфические виды бактерий, которые могут быть резистентны к классическим антибиотикам. Другим важным моментом является факт того, что формирующиеся рубцы после завершения лечения становятся зачастую выраженным психотрав-мирующим фактором для пострадавшего.
Данный доклад является своеобразным протоколом ведения укушенных ран лица, основанном на принципах регенеративной медицины. В нем рассматриваются все
доступные практикующим специалистам методы, включая препараты и технологии, которые значительно улучшают результаты лечения данного вида ран. Приведены собственные клинические случаи, на примерах которых разобраны протоколы их лечения.
Доклад будет полезен всем врачам, работающим с ранами и рубцами, а также специалистам, которые занимаются эстетической медициной, т. к. протоколы ведения укушенных ран, основанные на принципах регенеративной медицины, являются эффективными, значительно улучшая результаты лечения, что отражается не только на функции мягких тканей лица, но и на психическом здоровье пациента.
СКАФФОЛД КАК ИСКУССТВЕННАЯ НИША ДЛЯ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
М.Н. Егорихина, Д.Я. Алейник, Ю.П. Рубцова, И.Н. Чарыкова, И.И. Кобякова, М.Л. Бугрова, Д.Д. Линькова
ФГБОУ ВО ПИМУ Минздрава России, Нижний Новгород, Россия
e-mail: egorihina.marfa@yandex.ru
Ключевые слова: скаффолд, гидрогель, биополимеры, фибриноген, коллаген, мезенхимальные стволовые клетки, структура.
Активность клеточных процессов стволовых клеток регулируется внутренними и внешними сигналами клеточной ниши. В целом нишу стволовых клеток можно представить как микроокружение клеток, предоставляющее комплекс сигналов химических факторов, факторов роста и биофизических сигналов, которые определяют свойства стволовых клеток. В то же время концепция «ниши» предполагает обратную связь. Клетки способны моделировать свое микроокружение, поддерживая гомеостаз либо ремоделируя состав и структуру внеклеточного матрикса. Для обеспечения регенеративного потенциала продуктов тканевой инженерии при разработке носителей клеток, скаффолдов и тканеинженерных конструкций необходимо учитывать концепцию «ниши». В работе рассматривается с точки зрения искусственной клеточной ниши для мезенхимальных стволовых клеток жировой ткани человека, оригинальный гидрогелевый биополимерный скаффолд на основе криопреципитата плазмы крови и коллагена.
Материалы и методы. Для формирования скаффол-да (Пат.№ 2653434) использовали криопреципитат плазмы крови и коллаген. Клеточный материала — МСК жировой ткани человека. Исследование структуры скаф-фолдов — сканирующая и трансмиссионная электронная микроскопия. Исследование пассивной и активной биодеградации проведено с использованием рефрактометрии. Для контроля за ростом клеток использовали методы световой, фазово-контрастной и флуоресцентной микроскопии. Оценивали пролиферативную активность и жизнеспособность (Пат. 2675376). Секреторную активность клеток оценивали с использованием ИФА.
Скаффолд обеспечивает адгезию клеток, активный клеточный рост и пролиферативную активность. Клетки, культивируемые в скаффолде, отличаются развитым ци-тоскелетом, образуют межклеточные контакты и формируют клеточную сеть. МСК, культивируемые в скаффолде, меняют свое микроокружение, секретируя VEGF-A и ремо-делируя структуру скаффолда. Были оценены процессы
