CC BY
15
ВКМ, и осадок. Полученные результаты показали, что в супернатанте обнаружен версикан в небольших количествах и нет бигликана и перлекана. В ткани идентифицированы все компоненты ВКМ. Содержание версикана и бигликана в ткани условно нормальной аорты было существенно больше, чем в бляшке. В гомогенате ткани аневризматически расширенной аорты присутствовали практически все исследуемые компоненты, исключая ламинин. Растворимой формы декорина в бляшках обнаружено больше, чем в нормальной аорте, однако в го-могенатах этих же образцов его содержание примерно одинаково. В бляшке повышена также активность ММП-9 по сравнению с нормальной аортой. Гистологический анализ материала в этом исследовании не проводили.
Полученные нами предварительные данные подтверждают имеющиеся литературные и являются началом для дальнейшего исследования механизмов участия белков и ПГ ВКМ и эндотелиального гликокаликса в патогенезе АС, что, в свою очередь, может быть полезным в разработке лечения.
Литература:
1. Gialeli, C., Shami, A., Gonpalves, I. Current Opinion in Lipidology. 2021. V. 32. № 5 p 277
2. Максименко А.В., Турашев А.Д. Биоорганическая химия. 2014. V. 40. № 3. с. 259-274.
3. Fischer J.W., Steitz S.A., Johnson P.Y., et al. Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. 2004. V. 24. № 12. P. 2391-2396.
4. Tran, P. K., Agardh, H. E., Tran-Lundmark et al. Atherosclerosis, 2007. V.190 № 2, p. 264-270.
КОНСЕРВАТИВНОЕ ВОССТАНОВЛЕНИЕ МЯГКИХ ТКАНЕЙ ЛИЦА ПОСЛЕ УКУСОВ ЖИВОТНЫХ
З.А. Евсюкова
Кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии, МГМСУ им. А.И. Евдокимова, Москва, Россия
e-mail: zoya.evsyukova@gmail.com
Ключевые слова: рваная рана лица, регенерация кожи, лечение ран, реконструкция лица, укус собаки, факторы роста, профилактика рубцов.
Собака, как говорится, — друг человека, а вот человек собаке друг не всегда, ибо подавляющее количество нападений собак на человека провоцируется им самим. Согласно данным Росздравнадзора, в 2021 году с укусами животных в ЛПУ обратилось около 400 тыс чел, 70% всех укусов были нанесены собаками. Укусы собак являются серьезной медико-социальной проблемой, поскольку требуют мультикомплексного экстренного подхода в лечении пациента, что не всегда представляется возможным. Укушенная рана, нанесенная собакой, сама по себе является фактором риска бешенства, столбняка, а также гнойного расплавления тканей, поскольку микрофлора полости рта собак содержит специфические виды бактерий, которые могут быть резистентны к классическим антибиотикам. Другим важным моментом является факт того, что формирующиеся рубцы после завершения лечения становятся зачастую выраженным психотрав-мирующим фактором для пострадавшего.
Данный доклад является своеобразным протоколом ведения укушенных ран лица, основанном на принципах регенеративной медицины. В нем рассматриваются все
доступные практикующим специалистам методы, включая препараты и технологии, которые значительно улучшают результаты лечения данного вида ран. Приведены собственные клинические случаи, на примерах которых разобраны протоколы их лечения.
Доклад будет полезен всем врачам, работающим с ранами и рубцами, а также специалистам, которые занимаются эстетической медициной, т. к. протоколы ведения укушенных ран, основанные на принципах регенеративной медицины, являются эффективными, значительно улучшая результаты лечения, что отражается не только на функции мягких тканей лица, но и на психическом здоровье пациента.
СКАФФОЛД КАК ИСКУССТВЕННАЯ НИША ДЛЯ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК
М.Н. Егорихина, Д.Я. Алейник, Ю.П. Рубцова, И.Н. Чарыкова, И.И. Кобякова, М.Л. Бугрова, Д.Д. Линькова
ФГБОУ ВО ПИМУ Минздрава России, Нижний Новгород, Россия
e-mail: egorihina.marfa@yandex.ru
Ключевые слова: скаффолд, гидрогель, биополимеры, фибриноген, коллаген, мезенхимальные стволовые клетки, структура.
Активность клеточных процессов стволовых клеток регулируется внутренними и внешними сигналами клеточной ниши. В целом нишу стволовых клеток можно представить как микроокружение клеток, предоставляющее комплекс сигналов химических факторов, факторов роста и биофизических сигналов, которые определяют свойства стволовых клеток. В то же время концепция «ниши» предполагает обратную связь. Клетки способны моделировать свое микроокружение, поддерживая гомеостаз либо ремоделируя состав и структуру внеклеточного матрикса. Для обеспечения регенеративного потенциала продуктов тканевой инженерии при разработке носителей клеток, скаффолдов и тканеинженерных конструкций необходимо учитывать концепцию «ниши». В работе рассматривается с точки зрения искусственной клеточной ниши для мезенхимальных стволовых клеток жировой ткани человека, оригинальный гидрогелевый биополимерный скаффолд на основе криопреципитата плазмы крови и коллагена.
Материалы и методы. Для формирования скаффол-да (Пат.№ 2653434) использовали криопреципитат плазмы крови и коллаген. Клеточный материала — МСК жировой ткани человека. Исследование структуры скаф-фолдов — сканирующая и трансмиссионная электронная микроскопия. Исследование пассивной и активной биодеградации проведено с использованием рефрактометрии. Для контроля за ростом клеток использовали методы световой, фазово-контрастной и флуоресцентной микроскопии. Оценивали пролиферативную активность и жизнеспособность (Пат. 2675376). Секреторную активность клеток оценивали с использованием ИФА.
Скаффолд обеспечивает адгезию клеток, активный клеточный рост и пролиферативную активность. Клетки, культивируемые в скаффолде, отличаются развитым ци-тоскелетом, образуют межклеточные контакты и формируют клеточную сеть. МСК, культивируемые в скаффолде, меняют свое микроокружение, секретируя VEGF-A и ремо-делируя структуру скаффолда. Были оценены процессы
биодеградации скаффолдов, после культивирования их в течение 24 часов и 6 суток. Обнаруженные различия подтвердили изменения свойств скаффолдов, ремодели-руемых клетками в процессе культивирования. Обобщая полученные результаты, можно сделать вывод о том, что процессы, происходившие при культивировании скаффол-да, были сходны с естественными процессами «динамической взаимности». Это позволяет рассматривать представленный скаффолд в качестве искусственной ниши клеток. Представленный в работе комплексный подход может быть использован и для характеристики других скаффолдов с позиции концепции искусственной ниши клеток. Работа выполнена при финансовой поддержке Минздрава России в рамках гос задания № 121022500010-6 (ЕГИСУ).
Сделано предположение, что снижение эффективности прямой межклеточной коммуникации МСК-МСК in vivo может негативно отразиться как на функционировании стромальных предшественников в местах их расположения, так и на возможности их мобилизации из тканевых депо. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РФФИ № 20-015-00075.
Литература:
1. Nimiritsky P.P., Eremichev R.Y., Alexandrushkina N.A. et al. Int. J. Mol. Sci. 2019. V. 20. № 4. P. 823.
2. Rodríguez-Fuentes D.E., Fernández-Garza L.E., Samia-Meza J.A. et al. Arch. Med. Res. 2021. V. 52. № 1. P. 3.
3. Orekhov A.N., Andreeva E.R., Bobryshev Y.V. Tissue Cell. 2016. V. 48. № 1. P. 25.
РОЛЬ ЩЕЛЕВЫХ КОНТАКТОВ В ПОЛЯРИЗАЦИИ ФЕНОТИПА МУЛЬТИПОТЕНТНЫХ МЕЗЕНХИМАЛЬНЫХ СТРОМАЛЬНЫХ КЛЕТОК
М.И. Ездакова1, Д.К. Матвеева1, С.В. Буравков2, Е.Р. Андреева1
1 Институт медико-биологических проблем РАН, Москва, Россия
2 Факультет фундаментальной медицины МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия
e-mail: andreeva_er@mail.ru
Ключевые слова: Мультипотентные мезенхимальные стро-мальные клетки, щелевые контакты, ингибиторы, фенотипи-ческая поляризация.
Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (МСК) играют важную роль в физиологическом и репаративном ремоделировании тканей [1, 2]. Периваскулярная ниша — одно из наиболее известных локальных депо МСК. Ранее мы показали, что субэн-дотелиальные МСК формируют в этих локусах общую сеть [3]. В сосудистой стенке in situ в месте контакта МСК-МСК экспрессируется белок щелевых контактов (ЩК) Сх43, что предполагает возможность прямой межклеточной коммуникации. Наличие такой интегрированной системы обеспечивает, по-видимому, поддержание «покоящегося» (steady-state) фенотипа МСК. Нарушение целостности сети может вести к утрате гомотипических контактов и фенотипической поляризации с образованием «активированного фенотипа» МСК.
Мы оценили, как ингибирование гомотипических ЩК может влиять на свойства МСК, востребованные в ремоделировании тканей: внутриклеточные компар-тменты, паракринную, в частности ангиогенную активность, способность к миграции и фагоцитозу. В митотиче-ски неативных МСК коммуникацию через Щк подавляли с помощью специфического ингибитора — карбеноксо-лона. С помощью проточной цитофлуориметрии в МСК с заблокированными ЩК было показано двукратное увеличение массы митохондрий. Трансмембранный потенциал митохондрий и уровень АФК, а также активность лизосомального компартмента при этом не изменялись. МСК с заблокированными ЩК менее активно мигрировали в модели «раны». Способность к фагоцитозу частиц латекса была снижена. В кондиционированной среде (КС) от МСК с заблокированными ЩК был достоверно ниже уровень плейотропных IL-6, IL-8, MCP-3. Эта КС не стимулировала ненаправленную миграцию эндотелиальных клеток и рост основных сосудов в хориоаллантоисной оболочке эмбриона перепела.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ НЕПОКРЫТЫХ ЧАСТИЦ ОКСИДА ЖЕЛЕЗА FE3O4 ДЛЯ МЕЧЕНИЯ КЛЕТОК И ПОСЛЕДУЮЩЕГО ИХ ОТСЛЕЖИВАНИЯ IN VIVO МЕТОДОМ МАГНИТНО-РЕЗОНАНСНОЙ ТОМОГРАФИИ
Н.И. Енукашвили1 2, 3, И.Е. Коткас2, В.В. Багаева3, Д.С. Боголюбов1, А.Ю. Бородина4, Д.С. Никитенко5, Г.С. Яцемирский3, А.Ю. Артамонов6, И.В. Миндукшев7, О.В. Супильникова2 3, И.И. Масленникова2, 3, Е.М. Приходько3
1 ФГБУН Институт цитологии РАН, Санкт-Петербург, Россия
2 ФГБОУ ВО СЗГМУ им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия
3 ООО «Покровский банк стволовых клеток», Санкт-Петербург, Россия
4 АО НПО «ДОМ ФАРМАЦИИ», Ленинградская обл., пос. Кузьмоловский, Россия
5 ООО «Ветеринарная клиника неврологии, травматологии и интенсивной терапии», Санкт-Петербург, Россия
6 Институт экспериментальной медицины, Санкт-Петербург, Россия
7 ФГБУН Институт эволюционной физиологии
и биохимии им. И.М. Сеченова, Санкт-Петербург, Россия
e-mail: nienewmail@yandex.ru
Ключевые слова: магнетит, наночастицы оксида железа, биораспределение, наночастицы, получаемые методом электрического взрыва проволоки, мезенхимные стромальные клетки, фибробласты.
При использовании многих клеточных технологий необходимым условием является верификация присутствия трансплантированных клеток в месте инъекции и отсутствия их миграции за его пределы. Существующие методы (биопсия, оптический имиджинг и т. д.) не всегда соответствуют запросам исследователей и клиницистов. Предложено использовать метод магнитно-резонансной томографии (МРТ) для отслеживания трансплантированных клеток, меченных наночастицами контрастирующего вещества (чаще всего — оксидов железа Fe3O4 и Fe2O3). Около 92% наночастиц оксидов железа получают химическими и только 6% — физическими методами. При этом наночастицы, полученные физическими методами, могут быть наработаны в больших количествах и содержат меньше токсичных примесей. Цель работы: оценка возможности использования полученных электровзрывным методом магнитных наночастиц (80-120 мкм) Fe3O4
