CC BY
12
ВЕСТНИК ГЕМАТОЛОГИИ, том XVII, № 3, 2021
рианты резус-антигенов с ослабленной экспрессией и предупреждать посттрансфузионные осложнения, связанные с несовместимостью по данной системе.
Цель. Исследовать полиморфизмы генов RHD и RHCE и дать серологическую характеристику ослабленных вариантов кодируемых ими антигенов.
Материалы и методы. Материалом исследований являлись эритроциты 213 человек с ослабленным антигеном RhD, которым было выполнено генетическое типирование, и 9 человек, у которых определяли полиморфизмы гена RHCE. Серологическое определение слабых и парциальных вариантов антигена RhD проводили 5 методами: метод агглютинации на плоскости с Цоликлоном анти-D супер, реакция агглютинации в солевой среде, гелевый метод с Цоликлонами, непрямой антиглобулиновый тест, непрямой антиглобулиновый тест в гелевом методе с применением гелевых карт. Определение других антигенов системы Резус проводили методом агглютинации на плоскости с Цоликло-нами анти-С супер, анти-Cw супер, анти-с супер, анти-Е супер, анти-е супер и в гелевом методе с гелевыми картами. Молекулярное исследование осуществляли методом полимеразной цепной реакции (с секвенс-специфическими праймерами (ПЦР-ССП] для гена RHD и с аллель-специфическими праймерами (ПЦР-АСП] для гена RHCE] и методом прямого секвенирования по Сэнгеру.
Результаты. У двух человек со слабым антигеном RhD были обнаружены аллели RHD*DNB и RHD*DVII, кодирующие парциальные варианты RhD - RhDNB (серологически определенный фенотип - CCDwee) и RhDVII (серологически был установлен редкий фенотип CCDwEe, в сыворотке крови обнаружены антитела анти-D]. Заподозрить присутствие парциальных антигенов RhD можно по расхождению результатов двух серологических методов: слабая агглютинация или химера с Цоликлоном на плоскости и сильная реакция в гелевом методе.
У 211 человек были определены 12 различных аллелей гена RHD, кодирующих ослабленные варианты антигена RhD: RHD weak type 1 (54 случая], RHD weak type 2 (25 случаев], RHD weak type 3 (119 случаев], RHD weak type 4.2 (DAR] (2 случая], RHD weak type 6 (1 слу-
чай] RHD weak type 15 (3 случая], RHD weak type 67 (1 случай], RHD weak type G255R (1 случай], RHD weak type 122 (1 случай], RHD weak type IVS5-38del4 (1 случай], RHD*Dpxi (2 случая] и новый ген RHD*423delGAT (1 случай]. В серологических исследованиях слабый антиген RhD weak type 1 во всех случаях сочетался с фенотипом CcDwee, как и варианты RhD weak type G255R, RhD weak type 122 и RhD weak type IVS5del4; вариант RhD weak type 3 в 17 из 19 случаев также сочетался с этим фенотипом (в 2 случаях выявлены фенотипы ccDwee и CCDwee]. Антигены RhD weak type 2, RhD weak type 15 и RhD weak type 67 сочетались с фенотипом ccDwEe, антиген RhD weak type 4.2 (DAR] - с фенотипом ccDwee. Варианты RhD weak type 2, RhD weak type 15, RhD weak type 67, RhD weak type G255R и RhD weak type IVS5del4 не реагировали с Цоликлоном анти-D на плоскости (RhD weak type 15 выявлялся только в классическом непрямом антиглобулиновом тесте и в гелевом непрямом антиглобулиновом тесте], RhD weak type 122 показывал мелкую пылевидную агглютинацию. Наиболее эффективными методами определения слабых вариантов антигена RhD были классическая непрямая проба Кумбса и непрямая проба Кумбса в геле. Антиген, кодируемый геном RHD*423delGAT, серологически не выявляется ни в одном методе (фенотип Ccdee].
Из 9 человек, у которых изучали полиморфизмы гена RHCE, у пятерых был обнаружен ген RHCE*Cw (в 3 случаях фенотипы CwcDee, в 2 случаях фенотипы CwCDee]. У 2 человек прямым секвенированием был выявлен аллель RHCE*Ce.09, кодирующий антиген RhCx (при этом методом ПЦР-ССП был определен обычный ген RHCE*C], серологически были установлены фенотипы foDee и CcDEe (но эритроциты не реагировали с Цоликлоном анти-С на плоскости]. Еще у 2 человек с фенотипами CucDEe (экспрессия RhC ослаблена] и Ccdee молекулярное исследование определило обычный ген RHCE*C.
Выводы. Полиморфизм генов RHD и RHCE среди россиян значительно выражен. Варианты слабых и парциальных вариантов антигенов RhD и RhC могут быть установлены только при молекулярно-генетиче-ском исследовании.
Киселева А.Н., Бутина Е.В., Исаева Н.В.
АССОЦИАЦИЯ ГЕНОВ СИСТЕМЫ HLA КЛАССА II С ПАТОЛОГИЕЙ СПЕРМАТОГЕНЕЗА
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», Киров
Введение. Бесплодие является одной из нерешенных проблем современной медицины и характеризуется снижением или отсутствием способности к воспроизведению потомства. Бесплодный брак - ненаступление беременности в течение одного года регулярной половой жизни без применения контрацептивных средств. В настоящее время доля бесплодных супружеских пар достаточно стабильна и не имеет тенденции к снижению. Внимание врачей и научного сообщества сосредоточено на углубленном изучении множества факторов,
вызывающих нарушение фертильности. Особое место среди них занимают гены системы ^А. Одной из ее важнейших функций, которая тесно связана с контролем иммунного ответа, является участие в репродуктивных процессах. Мужское бесплодие может быть связано с патоспермией, эякуляторными, сексуальными, анатомическими, эндокринными, воспалительными, иммунологическими и другими причинами. В структуре бесплодного брака оно составляет до 40%, и ему необходимо уделять такое же пристальное внимание, как
МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ
и женскому.
Цель. Изучить частоту распределения аллельных вариантов генов системы ^А класса II у мужчин с патологией сперматогенеза.
Материалы и методы. Определение генов системы ^А класса II осуществлено у 29 мужчин с астенозоо-спермией (снижение концентрации подвижных сперматозоидов], 7 - с олигоастенозооспермией (снижение подвижности и концентрации сперматозоидов] и у 50 - с нормальной фертильностью (группа сравнения]. Идентификация аллельных вариантов генов системы ИЬА класса II ^В1*, DQA1*, DQB1*) выполнена методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с использованием реактивов и оборудования
фирмы «ДНК-Технология», Россия.
Результаты. Установлено, что у мужчин с астенозоо-спермией ген DRB1*04 выявлялся достоверно чаще, чем в группе сравнения (37,9% (11/29] против 16,0% (8/50); Х2=4,8; р<0,05). Ген DRB1*13 характерен для мужчин с олигоастенозооспермией (57,1% (4/7] против 18,0% (9/50); /2=5,3; р<0,05). Достоверных различий в частотах распределения других генов системы HLA класса II не получено.
Выводы. Таким образом, на основании анализа результатов проведенного исследования можно заключить, что наличие в генотипе мужчины DRB1*04 и DRB1*13 коррелирует с нарушением сперматогенеза.
Киселева А.Н., Бутина Е.В., Исаева Н.В., Попонина Е.А. СВЯЗЬ ^Л-ГЕНОВ С ПРИВЫЧНЫМ НЕВЫНАШИВАНИЕМ БЕРЕМЕННОСТИ
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», Киров
Введение. Система антигенов главного комплекса гистосовместимости человека (ИЬА) обеспечивает контроль, запуск и реализацию иммунного ответа, взаимодействие всех иммунокомпетентных клеток организма, распознавание своих и чужеродных элементов, а также измененных собственных клеток. Полиморфизм генов главного комплекса гистосовместимости играет важную роль в нормальном течении беременности. Риск ранних потерь плода и бесплодие, возможно, ассоциированы с присутствием определенных аллелей ИЬА, а также с совпадением супругов по нескольким генам ИЬА. В литературе имеются сведения о возможной корреляции между невынашиванием беременности и аутоиммунными процессами, связанными со специфическими ИЬА-аллелями.
Цель. Изучить частоту встречаемости генов системы ИЬА класса II у женщин и мужчин из супружеских пар с привычным невынашиванием беременности.
Материалы и методы. Идентификация генов системы ИЬА класса II выполнена у 24 женщин и 24 мужчин в супружеских парах с привычным невынашиванием беременности (3 и более самопроизвольных прерывания беременности), 50 женщин и 50 мужчин с нормальной фертильностью (группа сравнения). Типирование аллельных вариантов генов системы ИЬА класса II (0ЯБ1*, DQA1*,
DQB1*) осуществляли методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени с наборами для моле-кулярно-генетического тестирования «НЬА^ЯВ1», «ИЬА-DQA1», «ИЬА^Б1» («ДНК-Технология», Россия).
Результаты. Определены ассоциативные связи ИЬА-специфичностей с фертильными нарушениями. В группе сравнения достоверно чаще, чем в группе женщин с привычным невынашиванием беременности, выявлялись гены DRB1*08 (18,0% против 0%; /2=4,9; р<0,05), DQA1*04:01 (16,0% против 0%; /2=4,3; р<0,05) и DQB1*04:01/04:02 (16,0% против 0%; /2=4,3; р<0,05). У мужчин из группы с репродуктивными нарушениями статистически чаще, чем в группе сравнения, регистрировался ген DQB1*03:02 (33,3% против 12,0%; /2=4,8; р<0,05). Достоверных различий в частоте встречаемости гомологичных аллелей у супругов с репродуктивными нарушениями и в группе сравнения не установлено.
Выводы. Таким образом, наличие у женщин ИЬА-генов DRB1*08, DQA1*04:01, DQB1*04:01/04:02 ассоциировано с нормальным гестационным процессом, присутствие у мужчин гена DQB1*03:02 предрасполагает к привычному невынашиванию беременности в супружеской паре.
Ключников Д.Ю.1, Вавилов М.Н.2, Макаренко О.А.3, Логинова М.А. 4, Трусова Л.М.1, Волчков С.Е.5, Суслова Т.А.2, Тюмина О.В16, Гайфуллина РФ.7,8
РАЗЛИЧИЯ В ПРОФИЛЯХ АЛЛЕЛЕЙ HLA-A, -B, -DRB1 У ТАТАР РОССИИ
1Государственное бюджетное учреждение здравоохранения «Самарский областной медицинский центр Династия», г.Самара
2Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Челябинский государственный университет», Челябинск
3Благотворительный фонд «Национальный регистр доноров костного мозга имени Васи Перевощикова», г.Москва 4Федеральное государственное бюджетное учреждение науки «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови Федерального медико-биологического агентства», г.Киров 5Некоммерческое партнерство «Регистр доноров кроветворных клеток и публичных банков пуповинной крови», г.Самара
6Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Самарский
