CC BY
30
2014, Т. 4, № 1
Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»
TNF-4 и ER1 повышена у больных (22%) по сравнению с популяцией (3%). Риск развития БА OR = 11,09. Риск развития при А-XxPp в подгруппе со средней тяжестью течения составил OR = 21,9.
Анализ сочетаний функционально ослабленного генотипа гена ER1 с другими представленными в работе генами не выявил достоверных отличий, также не показано отличий при анализе сочетаний генов цитокиновой системы и системы детоксикации друг с другом.
Можно предположить, что причиной различий между полиморфными вариантами разных генов и развитием различных форм атопической БА является существование нескольких заболеваний, объединенных общим термином «бронхиальная астма».
ВОЗМОЖНОСТИ ДИАГНОСТИКИ АКТИВНОГО ТУБЕРКУЛЕЗА У ВЗРОСЛЫХ И ДЕТЕЙ ПО ОЦЕНКЕ ЭКСПРЕССИИ CD27 НА ЭФФЕКТОРНЫХ ЛИМФОЦИТАХ CD4
А.В. Пантелеев, И.Ю. Никитина
ФГБУ ЦНИИ туберкулеза РАМН, Москва
В связи с широким распространением заболеваемости туберкулезом (ТБ) большое значение имеет своевременная диагностика активного ТБ (АТБ) и ТБ инфицирования (ТБИ) — состояний, требующих принципиально различных схем лечения. Особые трудности диагностика ТБ представляет в тех случаях, когда заболевание не сопровождается выделением мокроты или наличием в ней микобактерий, что наиболее часто встречается у детей. В таких ситуациях большое значение имеют иммунологические методы диагностики: туберкулиновый тест, диа-скинтест и «интерфероновые» тесты (IGRAs). Эти тесты, однако, не позволяют дифференцировать АТБ и ТБИ.
Недавно для диагностики ТБ в ЦНИИТ РАМН был предложен тест «Mtb-CD27». Пилотные исследования у взрослых показали, что тест позволяет дифференцировать больных АТБ и лиц с ТБИ. Целью настоящей работы явилась валидация теста «Mtb-CD27» у взрослых и оценка возможности его использования для диагностики ТБ у детей.
В исследовании участвовали 38 взрослых больных ТБ, 17 взрослых здоровых человек, имеющих контакт с больными ТБ, 19 детей с АТБ и 9 детей с диагнозом ТБИ.
Иммунологические тесты проводили по методике, разработанной ранее. Кратко, образцы крови культивировали с PPD. Через 12 ч с помощью проточной цитометрии выявляли IFNy продуцирующие лимфоциты CD4 и определяли процентное содержание среди них клеток с низкой экспрессией рецептора CD27 (CD27low; высокодифференцирован-ные эффекторы). Содержание клеток CD27low выше 31,5 от всех лимфоцитов CD4+IFNy+% рассматривали как признак АТБ (положительный результат теста, Nikitina et al., 2012). У взрослых положительные результаты теста были получены у 35 из 39 больных и у 5 из 17 «контактов» (чувствительность — 89,5%, специфичность — 70,5%). При этом у 4 «контактов» наблюдаются близкие значения к пороговым. Положительные результаты теста были получены у 16 из 18 детей с диагнозом АТБ и у 2 из 9 детей с диагнозом ТБИ (чувствительность — 88,9%, специфичность — 77,8%).
Проведенные исследования подтверждают возможность и целесообразность использования теста «Mtb-CD27» для дифференциальной диагностики АТБ и ТБИ у взрослых. Возможность использования теста у детей требует дальнейшей валидации на большей выборке.
ДЕТЕКЦИЯ ИНФЕКЦИИ COXIELLA BURNETII У МИГРИРУЮЩИХ ПТИЦ В БОЛГАРИИ
Ю.А. Панферова1, Н.К. Токаревич1, Б. Николов2, П. Зехтинджиев2, Т. Димова3, Х. Найденски3
1ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
2Институт экосистемных исследований АН Болгарии, София, Болгария
3Институт микробиологии Стефана Ангелова АН Болгарии, София, Болгария
Птицы играют существенную роль в поддержании стабильной циркуляции возбудителей ряда трансмиссивных инфекций на территории существующих очагов, а также могут участвовать в переносе возбудителей в процессе миграций. Мигрирующие птицы могут являться биологическими либо механическими переносчиками патогенов, а также переносить инфицированных эктопаразитов на новые территории.
В рамках данного исследования проводился отлов перелетных птиц в период сезонных миграций, отбор проб крови и детекция ДНК Coxiella burnetii. Отлов птиц проводился на стоянках по пути пролета в период весенних и осенних миграций птиц в 2011— 2013 гг. (южная часть Черноморского побережья Болгарии, Атанасовское озеро; северо-восточная часть Черноморского побережья Болгарии, озеро Даран-кулак). Детекция C. burnetii в пробах проводилась методом стандартной ПЦР с использованием прай-меров к генам супероксид-дисмутазы sod и мембранного белка Coml.
Всего было исследовано 888 образцов крови птиц. Положительными на присутствие ДНК коксиелл были образцы крови четырех птиц, отловленных в районе Атанасовского озера: 3 пробы от пеночки-веснички (Phylloscopus trochilus) и 1 проба от соловья западного (Luscinia megarynchos). Пораженность кок-сиеллами птиц составила 0,45%
Обнаружение ДНК C. burnetii в крови птиц, по-видимому, может свидетельствовать об их относительно недавней инфицированости патогеном и подтверждает возможность участия птиц в качестве переносчиков C. burnetii в природных очагах.
Исследование поддержано грантами Института Пастера № ACIP-08-2010 и № 59-2013.
АПРОБАЦИЯ ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИКУМА ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ АНТИТЕЛ К Vi-АНТИГЕНУ ВОЗБУДИТЕЛЯ БРЮШНОГО ТИФА
Е.Л. Петрова1, Н.К. Мирошникова1, С.Б. Ибраева2, В.Н. Вербов1, Л.А. Кафтырева1
1 ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт-Петербург
2 Департамент профилактики заболеваний и госсанэпиднадзора, Бишкек, Кыргызстан
Брюшной тиф — антропонозная кишечная инфекция, вызываемая Salmonella typhi. У части переболевших формируется хроническое бактерионоситель-
Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»
Инфекция и иммунитет
ство, которое способствует возникновению новых случаев заболевания. Поэтому исследование сывороток крови декретированного контингента на наличие антител к Уьантигену в Российской Федерации является обязательным (СП 3.1.1.2137-06 № 31).
Цель работы заключалась в апробации нового эритроцитарного диагностикума для выявления хронического бактерионосительства возбудителя брюшного тифа путем выявления антител к VI-антигену в реакции пассивной гемагглютинации.
Работа проводилась в Республике Кыргызстан в период 2003—2013 гг. Исследовано 470 образцов сывороток, собранных от лиц, переболевших брюшным тифом в последние десять лет. Диагноз был подтвержден выделением возбудителя из крови и фекалий. Выявление М-антител проводили с использованием «Диагностикума эритроцитарного сальмонеллезно-го ^-антигенного жидкого» от двух производителей: экспериментальные серии производства НИИЭМ им. Пастера (Санкт-Петербург) и производства ООО «Биодиагностика» (Москва). Кроме того, в сыворотке крови, переболевших брюшным тифом, определяли антитела к О-антигенному комплексу сальмонелл группы Д с помощью «Диагностикума эритроцитар-ного сальмонеллезного О-антигенного жидкого», производства ООО «Биодиагностика» (Москва).
По суммарным данным, ^-антитела обнаружены в 114 сыворотках (24,3%), О-антитела — в 171 сыворотке (36,4%), причем в 54 сыворотках обнаружены VI- и О-антитела (11,5%); в 60 образцах — только VI-антитела (12,8%), в 117 образцах — только О-антитела (24,9%).
Результаты серологического исследования сывороток лиц, переболевших брюшным тифом, показали, что у 12,8% обследованных после перенесенного острого заболевания брюшным тифом, возможно, сформировалось хроническое носительство возбудителя брюшного тифа, о чем свидетельствовало наличие М-антител. Реконвалесценты брюшного тифа выявлены в 11,5% случаев по наличию VI- и О-антител. В целом, М-антитела в диагностических титрах выявлены у 24,3% обследованных.
Расхождений в результатах при использовании VI-диагностикумов разных производителей не обнаружено. Следует отметить, что разработанный нами диагно-стикум имеет ряд практических преимуществ: 1) более четкая регистрация положительных и отрицательных результатов (за счет сенсибилизации эритроцитов хро-матографически очищенным М-антигеном); 2) быстрое получение результатов (30 мин против 60 мин) за счет использования куриных эритроцитов; 3) визуальный контроль стадии внесения сыворотки за счет изменения цвета раствора-разбавителя.
РОЛЬ НЕКОТОРЫХ ПРО-И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ ЦИТОКИНОВ В ИММУНОПАТОГЕНЕЗЕ ЛЕПТОСПИРОЗОВ
О.А. Петрова
ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт -Петербург
Лептоспироз является одной из наиболее широко распространенных и социально значимых зооантро-понозных инфекций. Полиморфизм клинических проявлений лептоспирозов и отсутствие патогно-моничных симптомов болезни приводят к поздней диагностике, нерациональному лечению, что явля-
ется одной из причин высокой летальности при этой инфекции, достигающей на некоторых территориях 25%. Новые данные помогут уточнить иммунопато-генез данного заболевания и помогут обосновать инновационные подходы в современной тактике комплексной терапии заболевания (иммунокоррекция).
Цель работы. Изучение роли про- и противовоспалительных цитокинов для углубления знаний об иммунопатогенезе лептоспирозов.
Материалы и методы. Объектом исследования служили сыворотки крови от больных лептоспиро-зом (n = 86) и 14 сывороток от практически здоровых лиц. Количественное измерение цитокинов проводили на анализаторе «MagPix» («Millipore», США), основанном на технологии хМАР (мультиплексный анализ) с использованием магнитных частиц «Milliplex Mag». Математическую обработку данных осуществляли с применением программы GraphPad Prizm 6 (GraphPad Software, США). Для описания полученных результатов использовались стандартные методы непараметрической статистики.
Результаты. В группе больных лептоспирозом по сравнению с контрольной группой выявлены достоверно повышенные уровни IL-8, IL-10, MCP-1, TNFa (p < 0,05). Проведен корреляционный анализ полученных результатов содержания цитокинов в сыворотке крови с помощью мультиплексного анализа, выявлены корреляционные связи между TNFa и MCP-1, TNFa и IL-1Ra (r = 0,51; r = 0,49 соответственно), такие же связи были обнаружены и в группе контроля (но более сильные: r = 0,69 для обоих случаев). Так же была выявлена корреляционная связь между IL-12 (р70) и IFNy (r = 0,55) в опытной группе, нехарактерная для группы контроля.
Выводы. Получены новые данные о содержании цитокинов у больных лептоспирозом и у практически здоровых лиц. Мы получаем новые знания о взаимодействии цитокинов и механизмах иммунопато-генеза лептоспирозов.
ФОРМИРОВАНИЕ CD4+ И СD8+ Т-КЛЕТОК ИМУНОЛОГИЧЕСКОЙ ПАМЯТИ У ВОЛОНТЕРОВ ПОСЛЕ ВАКЦИНАЦИИ ЖИВЫМИ АТТЕНУИРОВАННЫМИ ГРИППОЗНЫМИ ВАКЦИНАМИ А (H5N2) И А (H1N1)pdm2009 Г.Д. Петухова, И.В. Лосев, С.А. Донина, А.Н. Найхин ФГБУ НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург
Высокая патогенность некоторых птичьих вирусов гриппа А позволяет считать их потенциально пандемическими для человеческой популяции. За 2003— 2014 гг. было зарегистрировано 650 случаев инфицирования людей вирусами А (H5N1), из них 386 летальных. Кроме того, в 2009 г. мир столкнулся с пандемией нового гриппа А (H1N1). Вакцинация признана одним наиболее эффективных видов профилактики заболевания в периоды эпидемий и пандемий. Основной целью любой вакцинации является формирование клеток иммунологической памяти, обеспечивающих ускоренный и усиленный иммунный ответ при повторной встрече с возбудителем инфекции. Целью настоящего исследования являлась оценка способности живых гриппозных вакцин (ЖГВ) A/17/Утка/ Потсдам/86/92 (H5N2) и А/17/Калифорния/2009/38 (H1N1) индуцировать формирование CD4+ и CD8+ Т-клеток иммунологической памяти у людей.
