CC BY
11ПРИМЕНЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ И ПРОБИОТИКОВ
УДК 636.2.033.084.522.2:636.087:612.017.1
АНТИОКСИДАНТНЫЙ СТАТУС, ФЕРМЕНТНО-МЕТАБОЛИТНЫЙ ПРОФИЛЬ И ПРОДУКТИВНОСТЬ ТЕЛЯТ ПРИ ПРИМЕНЕНИИ КОМПЛЕКСНОЙ ДОБАВКИ ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ, КАРНИТИНА, ВИТАМИНОВ И МИКРОЭЛЕМЕНТОВ
Агафонова А.В., Галочкина В.П., Галочкин В.А.
ВНИИ физиологии, биохимии и питания животных, Боровск, Калужской обл.,
Российская Федерация
Эксперимент проведен на двух группах телят черно-пестрой породы по 6 голов в группе в течение двух месяцев, с 30-го по 90-й день жизни. С месячного возраста на протяжении 10 дней один раз в сутки телята опытной группы получали с ЗЦМ препарат, состоящий из комплекса ингредиентов в количестве, г/гол. в сутки: цитрат натрия — 0.8, янтарная кислота - 0.3, фумаровая кислота — 1.0, карнитин — 0.5, витамин В2 - 0.002, глицин - 0.05, хлористый магний - 0.001, витамин С - 0.002, глюкоза — 3, сера элементарная - 5. За 2 мес. эксперимента прирост живой массы в контрольной группе составил 176%, а в опытной — 201% (P<0.01). На протяжении двух месяцев эксперимента в опытной группе отмечены более высокие уровни антиоксидантной активности крови, концентрации восстановленных сульфгидрильных групп (P<0.01), активности каталазы (Р<0.001), ЛДГ и пируваткарбоксила-зы (Р<0.001), концентрации альфа-аминного азота на фоне снижения уровня мочевины (P<0.05) и концентрации окисленных дисульфидных групп в сравнении с контролем. Заключили, что разработанный комплексный препарат у телят молочного периода оказывает адаптогенное действие, повышает антиоксидантную защиту, неспецифическую резистентность и интенсивность роста.
Ключевые слова: телята, биологически активные вещества, биохимический профиль крови, продуктивность, неспецифическая резистентность
Проблемы биологии продуктивных животных, 2015, 3: 104-111
Введение
При выращивании и откорме молодняка крупного рогатого скота животные подвержены сильным стрессовым воздействиям, особенно в промышленных комплексах, что отрицательно влияет на продуктивность. Особенно неблагоприятное влияние состояние стресса оказывает на животных в ранний период развития, когда органы и ткани функционально еще окончательно не сформировались и организм не может регулировать обмен веществ адекватно внешним воздействиям стрессовых факторов. Такая ситуация неблагоприятно отражается на состоянии неспецифической резистнтности, здоровья и продуктивности животных (Галоч-кин, Черепанов, 2013а). Для устранения негативного влияния состояний стресса различной этиологии в современном животноводстве, в том числе при выращивании молодняка крупного рогатого скота, широко используют биологически активные вещества — витамины, анти-оксиданты, органические кислоты, минеральные вещества, карнитин и др. в составе комплексных препаратов (Матвеев и др., 1993; Amjed et al., 2013; Silper et al., 2013; Flaga et al., 2014; Garcia et al., 2014; Garcia et al., 2015; Maciej et al., 2015; Santos et al., 2015; Галочкин и др., 2015).
В последние годы в Шотландии создана коммерческая антистрессовая добавка «Feed-Food Magic Antistress». В препарат входит около 50 компонентов, его рекомендуется использовать в птицеводстве, свиноводстве, мясном и молочном животноводстве. По мнению разработчиков, в настоящее вреся необходимо переходить от ориентации на витамины и антиокси-данты к разработке комплексных препаратов широкого спектра действия, в том числе влияющих на сиртуины (белки — транскрипционные факторы), шапероны (белки теплового шока) и витагены (Сурай, Фисинин, 2013).
Целью наших исследований было разработать и апробировать добавку биологически активных веществ, повышающих неспецифическую резистентность и продуктивность телят молочного периода.
Материал и методы
Опыт проведен в опытном хозяйстве Ермолино Калужской области на двух группах телочек черно-пестрой породы в период молочного питания (с 60-го по 90-й день жизни) по 6 голов в каждой. Телятам обеих групп выпаивали ЗЦМ по нормам в соответствии с возрастом. Опытная группа на протяжении 10 дней от начала эксперимента дополнительно получала испытуемую кормовую добавку, состоящую из комплекса ингредиентов в количестве, г/гол. в сутки: цитрат натрия - 0.8, янтарная кислота - 0.3, фумаровая кислота - 1.0, карнитин - 0.5, витамин В2 - 0.002, глицин - 0.05, хлористый магний - 0.001, витамин С -0.002, глюкоза - 3, сера элементарная - 5 (Галочкин и др. 2015). В состав препарата органические кислоты включены с целью стимуляции анаболических процессов и активизации глюконеогенеза; карнитин - для интенсификации внутриклеточного трансмембранного переноса жирных кислот и ацетил-КоА в митохондрии и пероксисомы; микроэлементы - для активизации тканевых коферментов, стимуляции становления функций преджелудков и поддержания микробиологических процессов в рубце.
В конце опыта (в возрасте 3-мес.) были взяты пробы крови пункцией яремной вены. В сыворотке крови определяли концентрацию тиоловых соединений (низкомолекулярные сульфгидрильные группы - восстановленный глутатион + цистеин) с дитионитробензойной кислотой (Thannhauser et al., 1984), дисульфидных групп (низкомолекулярные дисульфидные группы - окисленный глутатион + цистин) с нитротиосульфобензойной кислотой (Thannhauser et al. 1984); общую антиоксидантную активность (Клебанов.1988), малоновый диальдегид и активность каталазы (с наборами фирмы «Юнимед»), активность пируваткар-боксилазы (Scruton et а! 1973) в модификации Галочкиной (1997), активность лактатдегидро-геназы - с использованием набора фирмы Lachema в присутствии НАД, концентрацию аминного азота ^ее et al., 1965), концентрацию глюкозы и мочевины - с помощью тест-систем Лахема (Lachema), концентрацию неэтерифицированных жирных кислот (НЭЖК) - с набором фирмы Randex.
Результаты и обсуждение
Комплекс показателей, характеризующих неспецифическую резистентность, свидетельствует о высокой биологической эффективности разработанного препарата, подтверждением чему является снижение в организме телят опытной группы процессов перекисного окисления липидов и повышение функциональной активности систем, ответственных за редукцию глутатиона - важнейшего регулятора окислительно-восстановительных процессов в организме (табл. 1). За 2 мес. эксперимента прирост живой массы в контрольной группе составил 176, а в опытной - 201% (Р<0,01).
Более высокие величины суммарной антиоксидантной активности и сниженные значения концентрации малонового диальдегида (Р<0,05) в крови у телят опытной группы, по сравнению с контрольной, свидетельствуют о выраженном адаптогенном действии добавки БАВ (табл. 1). Снижение концентрации малонового диальдегида характеризует способность
защитных систем организма справляться с процессами липопероксидации и окисления кислорода по одноэлектронному пути, в процессе которого образуется основная масса сверхре-акционноспособных свободных радикалов - недоокисленных кислородных продуктов, понижающих неспецифическую резистентность организма животных.
В опытной группе отмечена существенно более высокая концентрации сульфгидриль-ных и сниженная концентрация дисульфидных групп, в сравнении с контрольной группой. Величина отношения концентраций сульфгидрильных групп к дисульфидным характеризует «буферную емкость» антиоксидантной системы организма. В предыдущих работах (Галоч-кин, 2008; Галочкин, Галочкина, 2013б; Галочкин и др., 2013в, 2013г) было показано, что в ситуациях метаболического стресса всегда отмечается снижение содержания БН-групп и повышение концентрации ББ-групп.
Таблица 1. Живая масса и показатели неспецифической резистентности телят (М±т, п= 6)
Возра Живая масса, кг Ср. сут. Изучаемые показатели
ст, мес., прирост , г ОАоА, МДА мкг/мл мМ БН-группы, мМ ББ- группы, мМ ТДС
1 48.5±2.7 Контрольная группа 45.8±10.1 2.76±0.44 0.50±0.11 0.28±0.06 1.81 ±0. 5
2 66.3±1.2 593 48.5±11,0 2,68±0,57 0.49±0.12 0.25±0.08 1.95±0.4
3 85.4±2.8 636 49,8±10,5 3,01±0,60 0.53±0.12 0.27±0.07 1,99±0.5
1 48.9±2.6 Опытная группа 46.9±9.8 2.88±0.46 0.55±0.16 0.28±0.07 1.94±0.6
2 77.6±1.5** 690 51,3±10,2 2,33±0.42* 0.74±0.13** 0.20±0.05* 3,6±0.3**
3 98.3±2.9** 770 54,7±12.8 2,45±0.52* 0.65±0.09* 0.23±0.06** 2,83±0.5*
Примечания: ОАоА - общая антиоксидантная активность; МДА - малоновый диальдегид; БН-группы -сульфгидрильные группы (восстановленный глутатион + цистеин); ББ-группы - дисульфидные группы (окисленный глутатион+ цистин); ТДС - отношение БН/ББ. *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001 по и критерию при сравнении с контролем.
Динамика изменений соотношения сульфгидрильных и дисульфидных групп низкомолекулярных соединений в плазме крови подтвердила наше предположение о положительном влиянии испытуемой добавки как глутатионсберегающего фактора. Показатели тиол-дисульфидной системы свидетельствуют о том, что неспецифическая резистентность и буферная емкость антиоксидантной системы увеличились и, следовательно, увеличились адаптационно-защитные функции организма у телят опытной группы по сравнению с контролем. Это обстоятельство не могло не отразиться на приростах живой массы телят. Тиол-дисульфидное отношение является определяющим как в обеспечении регуляторных процессов обмена веществ, так и в системе защитных реакций организма. Повышение концентрации восстановленных сульфгидрильных групп и снижение содержания окисленных дисульфидных групп в опытной группе происходило синхронно с улучшением показателей обмена веществ, неспецифической резистентности и продуктивности.
Каталаза представляет собой важнейшее звено в системе антиоксидантной защиты. В нашем эксперименте активность каталазы у телят опытной группы возросла в 2,5 раза (Р<0,001) против контроля (табл. 2). Каталаза — исключительно высокоактивный и широко распространенный фермент; когда в клетке накапливается излишек Н202, каталаза превращает ее в Н20 и молекулярный кислород, в отличие от пероксидазы, которая разрушает перекись водорода до воды и атомарного кислорода. В пероксисомах используется перекись водорода, образованная другими ферментами, функция которых заключается в окислении побочных продуктов метаболизма, в том числе, фенолов, муравьиной кислоты, формальдегида и других соединений с помощью "окислительной реакции": Н202 + Я'Н2 ^ R,+ 2Н20 (Галочкин и др., 2015). Этот тип окислительных реакций особенно важен в клетках печени и почек, перокси-сомы которых обезвреживают множество ядовитых веществ, попадающих в кровоток.
Одной из задач проведенного эксперимента было изучить динамику активности ключевых ферментов метаболизма углеводов — лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и пируваткарбоксилазы ПК). Пировиноградная кислота — самый востребованный метаболит у жвачных, за нее конкурирует более десятка различных ферментов. В один ряд с пируватом по участию в различных реакциях можно поставить только оксалоацетат, но ввиду методических трудностей этот метаболит определяют крайне редко. Частично пируват расходуется на синтез оксалоацетата под действием ПК, или восстанавливается до молочной кислоты в анаэробных условиях под действием цитоплазматической ЛДГ. Пируват используется также при синтезе ацетил-КоА под действием ПДГ, а также направляется на путь глюконеогенеза под действием фосфое-нолпируваткарбоксикиназы.
Пируваткарбоксилаза наиболее активна, когда организм нуждается в максимальной окислительной активности и в производстве энергии. Сопоставительное изучение активности пируваткарбоксилазы и лактатдегидрогеназы информативно для оценки соотношения противоположно направленных потоков гликолиза и глюконеогенеза. Величину отношения ПК/ЛДГ в плазме крови можно использовать в качестве индекса общей направленности метаболизма пирувата в сторону окисления в цикле Кребса или на глюконеогенез.
Таблица 2. Активность ферментов и концентрация метаболитов в крови телят
(м± m, п=6)
Воз- Показатели
раст, Ката- ПК ЛДГ Лизо- Глю- а-Ы, Белок НЭЖК, Мочеви
мес лаза (Е) (Е) цим коза, мМ мг% мМ на, мМ
(Е) мкг/л мМ
Контрольная группа
1 10,5 5,80 23,4 15,3 3,74 2,99 78,3 0,10 4,36
±2,1 ±0,7 ±5,1 ±3,9 ±0,64 ±0,36 ±14,6 ±0,02 ±0,6
2 11,9 8,63 16,3 15,2 3,55 2,73 80,2 0,18 4,39
±3,8 ±1,3 ±4,2 ±4,3 ±0,71 ±0,32 ±17,1 ±0,017 ±0,7
3 9,9 7,22 21,5 15,4 3,89 2,76 79,5 0,22 4,69
±4,5 ±0,9 ±5,8 ±4,5 ±0,56 ±0,41 ±16,8 ±0,05 ±0,7
Опытная группа
1 9,5 5,56 19,6 15,5 3,84 3,11 84,4 0,11 4,77
±2,5 ±0,8 ±3,0 ±4,0 ±0,43 ±0,60 ±25,1 ±0,04 ±0,8*
2 30,2 10,9* 26,4 16,4 4,24 3,42 85,6 0,15 4,01
±4,9 ±1,6 ±6,1 ± 5,1 ±0,49 ±0,81* ±21,3 ±0,06* ±0,5*
*** **
3 25,3 14,1 52,4 17,2 4,80 3,43 85,7 0,18 3,85
±5,1 *** ±1,7 *** ±9,5 *** ±5,8 ±0,79 * ±0,75* ±20,3* ±0,05* ±0,5*
Примечания: ПК - пируваткарбоксилаза, ЛДГ — лактатдегидрогеназа, а-Ы - азот а-аминогрупп, НЭЖК -неэтерифицированные жирные кислоты. *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001 по Г -критерию при сравнении с контролем.
Уже на первом месяце жизни у телят начинается период активного формирования функции стенки рубца, в том числе транспорта продуктов рубцовой ферментации, глюконео-генеза из пропионата и лактата, генерации восстановленной формы НАД через лактат, высоко активен синтез ацетил-КоА из пирувата. Весь комплекс метаболических процессов в клетках органов и тканей организма теленка настраивается на переработку возрастающего потока продуктов рубцовой ферментации. Повышение активности ЛДГ (на 144%) и ПК (на 62%) у телят опытной группы относительно контроля (Р<0,001) указывает на более раннюю активизацию функционирования рубца и большее поступление из рубца лактата. Одновременно в организме образуется и больше лактата вследствие активизации анаэробного окисления глюкозы в мышечной ткани. Известно, что при интенсивном росте мышечной ткани в ней усиливается гликолиз (Махинько, Никитин, 1975).
Повышение интенсивности роста мышечной ткани сопровождалось усилением в ней гдиколических процессов; образующийся в мышцах пируват превращается в менее токсичный лактат, который в печени вновь превращается в пируват под действием ЛДГ печени, а ПК является первым ключевым ферментом на пути глюконеогенеза из пирувата.
При менее развитой функции рубца у контрольных телят, глюкоза в крови поддерживается преимущественно за счет поступления из кишечника, тогда как в опытной группе повышенная продукция глюкозы могла обеспечиваться за счет поступления пропионата и лактата из рубца. При высокой активности лактатдегидрогеназы поток пирувата, образовавшегося из лактата, может быть направлен на карбоксилирование и далее на глюконеогенез или он в виде оксалоацетата может включаться в цикл Кребса. Возможно также превращение пирувата в ацетил-КоА с использованием в цикле Кребса для окисления и выработки энергии.
Субстратом пируватдегидрогеназы и пируваткарбоксилазы является пируват. Пируват-дегидрогеназа ингибируется при высоких значениях соотношений АТФ/АДФ, НАДН/НАД, ацетил-КоА/КоА и активируется при низких значениях. Пируваткарбоксилаза, наоборот, активируется при высоких уровнях отношений нуклеотидов, а при низких - ингибируется. Указанные два фермента, катализирующие два альтернативно направленных потока, не могут одновременно иметь повышенную активность. У телят в двух- и трехмесячном возрасте в опытной группе при более высоком среднесуточном приросте живой массы (соответственно на 16,4 и 21,1% относительно телят контрольной группы) значительное повышение активности ПК и ЛДГ в крови свидетельствует об активации анаэробного окисления глюкозы в мышцах и ее синтеза из пирувата в печени. В этот же период при активизации ферментативных процессов в содержимом рубца увеличивается поток ацетата в кровь, который может пойти на липогенез или на образование ацетил-КоА. Такая метаболическая ситуация при низком значении (ниже единицы) отношения активностей ПК/ЛДГ у подопытных телят говорит об использовании пирувата и в реакциях цикла Кребса через оксалоацетат, образующийся при карбоксилировании пирувата. И в большей степени это выражено у телят опытной группы. Такая направленность метаболических процессов способствовала повышению интенсивности роста. О более интенсивном росте мышц и отложении мышечного белка свидетельствует снижение в плазме крови содержания мочевины на 9% (Р<0,01) при повышении концентрации альфа-аминного азота и белка.
Сложившаяся совокупность метаболических процесов повышала не только интенсивность роста, но и неспецифическое звено иммунной системы. В условиях опыта изменения активности лизоцима были схожи со сдвигами в суммарной антиоксидантной активности. Лизоцим (мурамидаза) — это важный фермент антибактериальной защиты и компонент системы неспецифической резистентности организма. Считается, что в филогенезе он играл роль наиболее древнего фактора противомикробной защиты. Лизоцим расщепляет мураминовую кислоту в составе оболочки грамположительных микроорганизмов, вызывая их бактериоли-зис. Фермент синтезируется в гранулоцитах, моноцитах и макрофагах, которые секретируют его в кровь. В связи с этим концентрация лизоцима в крови (хотя он присутствует во всех жидкостях организма) характеризует пролиферативную и функциональную активность этих клеток и традиционно используется для оценки фагоцитарной активности. Уровень лизоцима в опытной группе телят был выше на 6-12%. по сравнению с контролем.
У новорожденных телят практически отсутствуют запасы жира (особенно самой его ре-акционноспособной фракции - бурой жировой ткани). Судя по более низкому содержанию НЭЖК в крови телят опытной группы, у них процессы липогенеза преобладали над процессами окисления липидов.
Снижение содержание мочевины на 9% (P<0.01) и повышение концентрации альфа-аминного азота в крови согласуется с более высокими среднесуточными приростами живой массы и повышенным отложением белка в теле телят опытной группы.
Таким образом, разработанная комплексная добавка у телят молочного периода способствует снижению перекисного окисления липидов, активизации системы редукции глута-тиона и активности лизоцима, становленмию системы неспецифической резистентности, ускоренному развитие функции преджелудков и более высокой интенсивности роста. Предложенный способ может быть использован как при выращивании бычков на мясо, так и при выращивании ремонтного молодняка для молочного стада.
ЛИТЕРАТУРА
1. Галочкин В.А., Агафонова А.В., Галочкина В.П., Черепанов Г.Г. Метаболические и регуляторные функции пероксисом // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2015. - № 1. - С. 5-25.
2. Галочкина В.П. Определение активности пируваткарбоксилазы // В кн.: Методы биохимического анализа. - Боровск: ВНИИФБиП, 1997. - С. 240-249.
3. Галочкин В.А. Новые горизонты повышения неспецифической резистентности и продуктивности животных. - Боровск: ВНИИФБиП, 2008. - 97 с.
4. Галочкин В.А., Черепанов Г.Г. Неспецифическая резистентность, продуктивных животных: трудности идентификации, проблемы и пути решения // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2013а. - № 2. - С. 5-29.
5. Галочкин В.А., Галочкина В.П. Влияние нового антиоксиданта дигидроэтоксихина на неспецифическую резистентность, продуктивность и качество продукции цыплят-бройлеров // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2013б. - № 2. - С. 49-55.
6. Галочкин В.А., Боряев Г.И., Галочкина В.П. Сравнительная оценка влияния антиоксидантов дигидроэтоксихина и селенопирана на неспецифическую резистентность, яйценоскость кур-несушек, оплодотворенность яиц и выводимость цыплят // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2013в. - № 2. - С. 40-48.
7. Галочкин В.А., Боряев Г.И., Галочкина В.П.. Влияние нового комплекса водорастворимого и жирорастворимого антиоксидантов на здоровье, продуктивность кур-несушек родительского стада и инкубационные качества яиц // Проблемы биологии продуктивных животных. - 2013г. - № 3. -С. 53-59.
8. Галочкин В.А., Агафонова А.В., Галочкина В.П. Способ выращивания молодняка крупного рогатого скота: патент РФ № 2547548, 2015.
9. Дорофейчук В.Г. Определение активности лизоцима нефелометрическим методом // Лаб. дело. -1968. - № 1. - С. 28.
10. Жаворонков Л.П. Статистические методы в экспериментальной биологии и медицине. - Обнинск, 2011. - 51 с.
11. Клебанов И.И. Оценка антиокислительной активности плазмы крови // Лабораторное дело. - 1988. - № 11. - С. 59-62.
12. Матвеев В.А., Галочкина В.П., Панасенко В.Н., Буркова Е.И.. Способ кормления молодняка крупного рогатого скота: патент РФ № 244493, 1993
13. Махинько В.И., Никитин В.Н. Обмен веществ и энергии в онтогенезе // В кн.: Возрастная физиология (ред. В.Н. Никитин). - Л.: Наука, 1975. - 691 с.
14. Сурай П.Ф. и Фисинин В.И. Современные методы борьбы со стрессами в птицеводстве: от антиоксидантов к витагенам // Сельскохозяйственная биология. - 2012. - № 4. - С. 3-15.
15. Amjed A. Sarzamin K., Muhammad M. Effect of Different Levels of Organic Acids Supplementation on Feed Intake, Milk Yield and Milk Composition of Dairy Cows during Thermal Stress // Greener Journal of Agricultural Sciences. - 2013. - No. 3. - Р. 762-768.
16. Flaga J., Gorka P., Zabielski R., Kowalski Z.M.. Differences in monocarboxylic acid transporter type 1 expression in rumen epithelium of newborn calves due to age and milk or milk replacer feeding // J. Dairy Sci. - 2014. - No. 97. - Р. 5045-5064.
17. Garcia M., Shin J. Increasing intake of essential fatty acids from milk replacer benefits performance, immune responses, and health of preweaned Holstein calves // J. Anim. Physiol. Anim. Nutr. - 2015. - № 9. - Р. 521-530.
18. Garcia M., Greco L.F., Favoreto M.G., Marsola R.S. Effect of supplementing essential fatty acids to pregnant nonlactating Holstein cows and their preweaned calves on calf performance, immune response, and health // J. Vet. Med. Sci. - 2014. - Vol. 76. - Р. 877-885.
19. Lee Ya Pin, Tunikazu Takahashi. An improved colorimetric determination of amino acids with the use of ninhydrin // Anal. Biochem. - 1965. - Vol. 14. - No. 1. - P. 71-75.
20. Maciej J., Schäff C., Kanitz E. Bioavailability of the flavonol quercetin in neonatal calves after oral administration of quercetin aglycone or rutin // J. Dairy Sci. - 2015. - No. 11. - Р. 5-10.
21. Santos F.H., De Paula M.R., Lezier D.', Silva J. Essential oils for dairy calves: effects on performance, rumen fermentation and intestinal fauna // J. Dairy Sci. - 2015. - Vol. 98. - Р. 458-477.
22. Scrutton M.C., Wnite M.D. Pyruvate carboxylase cpecific inactivation of acetyl-CoA-dependent oxalo-acetate synthesis during modification of the enzyme by trinitrobensene sulfonate // J. Biol. Chem. - 1973. - Vol. 2. - Р. 213 - 219.
23. Silper B., Lana A.M., Carvalho A.U. Effects of milk replacer feeding strategies on performance, ruminal development, and metabolism of dairy calves // J. Appl. Microbiol. - 2013. - Vol. 26. - Р. 133-140.
24. Thannhauser T.W., Konishi Y., Scheraga H.A. Sensitive quantitative analysis of disulfide bonds in polypeptides and proteins // Analytical Biochemistry. - 1984. - Vol. 138. - No. 1. - P.181-188.
REFERENCES
1. Amjed A. Sarzamin K., Muhammad M. Effect of different levels of organic acids supplementation on feed intake, milk yield and milk composition of dairy cows during thermal stress. Greener Journal of Agricultural Sciences. 2013, 3: 762-768.
2. Flaga J., Gorka P., Zabielski R., Kowalski Z.M. Differences in monocarboxylic acid transporter type 1 expression in rumen epithelium of newborn calves due to age and milk or milk replacer feeding. J. Dairy Sci. 2014, 97: 5045-5064.
3. Galochkin V.A., Agafonova A.V., Galochkina V.P., Cherepanov G.G. Problemy biologiiproductivnykh zhivotnykh - Problems of Productive Animal Biology. 2015, 1: 5-25.
4. Galochkin V.A. Novye gorizonty povysheniya nespetsificheskoi rezistentnosti i produktivnosti zhivotnykh (New horizons in the increasing of natural resistance in productive animals). Borovsk: VNIIFBiP Publ., 2008, 97 p.
5. Galochkin V.A., Cherepanov G.G. Problemy biologii productivnykh zhivotnykh - Problems of Productive Animal Biology. 2013, 2: 5-29.
6. Galochkin V.A., Galochkina V.P. Problemy biologii productivnykh zhivotnykh - Problems of Productive Animal Biology. 2013, 2: 49-55.
7. Galochkin V.A., Boryaev G.I., Galochkina V.P. Problemy biologii productivnykh zhivotnykh - Problems of Productive Animal Biology. 2013, 2: 40-48.
8. Galochkin V.A., Boryaev G.I., Galochkina V.P. Problemy biologii productivnykh zhivotnykh - Problems of Productive Animal Biology. 2013, 3: 53-59.
9. Galochkin V.A., Agafonova A.V., Galochkina V.P. Sposob vyrashchivaniya molodnyaka krupnogo rogatogo skota (Method of rearing cattle). Patent RF No. 2547548, 2015.
10. Garcia M., Shin J. Increasing intake of essential fatty acids from milk replacer benefits performance, immune responses, and health of preweaned Holstein calves. J. Anim. Physiol. Anim. Nutr. 2015, 9: 521530.
11. Garcia M., Greco L.F., Favoreto M.G., Marsola R.S. Effect of supplementing essential fatty acids to pregnant nonlactating Holstein cows and their preweaned calves on calf performance, immune response, and health. J. Vet. Med. Sci. 2014, 76: 877-885.
12. Lee Ya Pin, Tunikazu Takahashi. An improved colorimetric determination of amino acids with the use of ninhydrin. Anal. Biochem. 1965, 14(1): 71-75.
13. Maciej J., Schäff C., Kanitz E. Bioavailability of the flavonol quercetin in neonatal calves after oral administration of quercetin aglycone or rutin. J. Dairy Sci. 2015, 11: 5-10.
14. Makhin'ko V.I., Nikitin V.N. In: Vozrastnaya fiziologiya (Age physiology, Ed. V.N. Nikitin). Leningrad: Nauka, 1975, 691 p.
15. Matveev V.A., Galochkina V.P., Panasenko V.N., Burkova E.I. Sposob kormleniya molodnyaka krupnogo rogatogo skota (Method of the feeding young cattle). Patent RF No. 244493, 1993.
16. Santos F.H., De Paula M.R., Lezier D., Silva J. Essential oils for dairy calves: effects on performance, Thannhauser T.W., Konishi Y., Scheraga H.A. Sensitive quantitative analysis of disulfide bonds in polypeptides and proteins. Analytical Biochemistry. 1984, 138(1): 181-188.
17. Santos F.H., De Paula M.R., Lezier D.', Silva J. Essential oils for dairy calves: effects on performance, cours, rumen fermentation and intestinal fauna. J. Dairy Sci. 2015, 98: 458-477.
18. Scrutton M.C., Wnite M.D. Pyruvate carboxylase cpecific inactivation of acetyl-CoA-dependent oxalo-acetate synthesis during modification of the enzyme by trinitrobensene sulfonate. J. Biol. Chem. 1973, 2: 213-219.
19. Silper B., Lana A.M., Carvalho A.U. Effects of milk replacer feeding strategies on performance, ruminal development, and metabolism of dairy calves. J. Appl. Microbiol. 2013, 26: 133-140.
20. Surai P.F., Fisinin V.I. Sel'skokhosyaistvennaya biologiya - Agricultural Biology. 2012, 4: 3-15.
Antioxidant status, enzyme-metabolite profile and growth performance in calves under application of complex supplement of organic acids, carnitine,
vitamins and trace elements
Agafonova A.V., Galochkina V.P., Galochkin V.A.
Institute of Animal Physiology, Biochemistry and Nutrition, Borovsk Kaluga oblast,
Russian Federation
ABSTRACT. The trial was conducted on 12 Black-and-White calves, 6 calves each during 2 mo, from 30th up to 90th day of life. Starting from 1 mo of age for 10 days once a day, calves of treatment group received a milk replacer supplemented with preparation consisting of a complex of ingredients at the dose, g/calf per day: sodium citrate - 0.8, succinic acid - 0.3, fumaric acid - 1.0, carnitine - 0.5, vitamin B2 - 0.002, glycine - 0.05, magnesium chloride - 0.001, vitamin C - 0.002, glucose - 3, elemental sulfur - 5. After 2 months of the experiment, the weight gain in the control group increased by 176%, while in treatment group by 201% (P<0.01). During 2 months, the increase was indicated in threatment group in antioxidant activity of blood, in concentrations of reduced sulfhydryl groups (P <0.01), in the activity of catalase (P <0.001), LDH and pyruvate carboxilase (P<0.001), in the concentration of alpha-amino nitrogen due to lower levels of urea (P<0.05) and in concentration of the oxidized disulfide groups compared with control. Concluded that the feeding of developed complex preparation to milky calves has an adaptogenic effect, it increases antioxidant protection, non-specific resistance and growth performance.
Keywords. calves, biological active substances, organic acids, carnitine, growth performance, natural resistance
Problemy biologii productivnykh zhivotnykh Problems of Productive Animals Biology, 2015: 104-111
Поступило в редакцию: 17.04.2015 Получено после доработки: 07.05.2015
Агафонова Анастасия Викторовна, к.б.н., с.н.с., т. 89109100715; Галочкина Валентина Петровна д.б.н., с.н.с., т. 89158626600; Галочкин Владимир Анатольевич д.б.н., проф. зав. лаб., т 89105239822
