Антибактериальные и антимикотические свойства гранулированных углеродный: сорбентов, модифицированным: олигомерами молочной кислоты Текст научной статьи по специальности «Промышленные биотехнологии»

Антибактериальные и антимикотические свойства гранулированных углеродных сорбентов, модифицированных олигомерами молочной кислоты

Л. Г. ПЬЯНОВА'2, В. Т. ДОЛГИХ3, В. А. ЛИХОЛОБОВ'2, Н. В. РУДАКОВ3, М. Г. ЧЕСНОКОВА3, А. В. СЕДАНОВА'

' Институт проблем переработки углеводородов СО РАН, Омск

2 Омский государственный технический университет МО РФ, Омск

3 Омский государственный медицинский университет МЗ РФ, Омск

Antibacterial and Antimycotic Properties of Granular Carbon Sorbents Modified With Lactic Acid Oligomers

L. G. P'YANOVA'2, V. T. DOLGIKH3, V. А. LIKHOLOBOV'2, N. V. RUDAKOV3, М. G. CHESNOKOVA3, А. V. SEDANOVA'

' Institute of Hydrocarbons Processing SB RAS, Omsk

2 Omsk State Technical University, Omsk

3 Omsk State Medical Academy, Omsk

Представлены результаты стендовых микробиологических исследований по определению антибактериальной и антимико-тической активности образцов углеродных сорбентов, модифицированных олигомерами молочной кислоты. Установлено, что исследуемые микроорганизмы — Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, Klebsiella pneumoniae и Escherichia coli проявляют устойчивость к большинству антимикробных препаратов, широко используемых в клинической практике для лечения инфекционных заболеваний бактериальной и грибковой природы. Выявлено антимикотическое действие модифицированных сорбентов в отношении дрожжеподобных грибов рода Candida вида albicans. Впервые установлено, что модифицированные сорбенты обладают выраженными антимикробными свойствами в отношении ассоциативной бактериально-грибковой культуры S.aureus + C.albicans, особенно углеродный сорбент, модифицированный 50% раствором молочной кислоты с последующей поликонденсацией.

Ключевые слова: углеродный сорбент, олигомеры молочной кислоты, антибактериальный спектр, антимикотические свойства.

Results of the microbiological bench testing of antibacterial and antimycotic activity of the carbon sorbents modified with lactic acid oligomers are presented. It was found that the studied microorganisms — Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalactiae, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus pyogenes, Klebsiella pneumonia, and Escherichia coli — are resistant to the majority of antimicrobial preparations that are widely used nowadays in clinical practice for treatment of bacterial and mycotic infectious diseases. Antimycotic effect of the modified sorbents toward yeast-like fungi Candida albicans was revealed. It was established for the first time that the modified sorbents have pronounced antimicrobial properties toward associative bacterial-fungal culture S.aureus + C.albicans, especially the carbon sorbent that was modified with a 50% lactic acid solution with subsequent polycondensation.

Keywords: carbon sorbent, lactic acid oligomers, antibacterial properties, antimycotic properties.

Введение

Нарушение микроэкологии с возрастанием этиологической роли условно-патогенных микроорганизмов под влиянием антимикробной терапии нередко сопровождается развитием резистентности возбудителей инфекционных заболеваний к антибактериальным и антимико-тическим препаратам. В связи с этим научные

© Коллектив авторов, 2017

Адрес для корреспонденции: 644099, Омск-99, ул. Ленина, 12. Омский государственный медицинский университет. E-mail: [email protected]

поисковые исследования по разработке новых соединений и методов лечения заболеваний, вызванных патогенными микроорганизмами, представляются актуальными [1, 2]. Перспективным методом является сорбционная терапия с использованием материалов, которые безопасны для организма и не содержат антибиотиков или антимикотиков. Они инактивируют патогенные микроорганизмы и выводят из макроорганизма продукты их жизнедеятельности, а также продукты нарушенного метаболизма и токсичные соединения, полученные из внеш-

Рис. 1. Гранулы углеродного гемосорбента ВНИИТУ-1.

а - вид гранул образца 1 (немодифицированный); б- снимок гранула под электронным сканирующим микроскопом при увеличении Х100; в - поверхность гранулы под электронным сканирующим микроскопом при увеличении Х3000.

Рис. 2. Морфологические формы микроорганизмов.

а — Escherichia coli; б — Candida albicans; в — Pseudomonas aeruginosa. Увеличение x900.

ней среды [3]. Известно, что гидроксикислоты (молочная, гликолевая и их олигомеры) проявляют антибактериальные свойства, подавляя рост патогенных микроорганизмов [4—6]. Лечебное действие углеродных сорбционных материалов объясняется их сорбционно-адгезивными свойствами [7, 8]. В Институте проблем переработки углеводородов СО РАН (ИППУ СО РАН) разработаны гранулированные углеродные сорбенты, модифицированные олигомерами гидро-ксикислот, в том числе молочной кислоты [9].

Цель настоящей работы — исследовать антибактериальное и антимикотическое действие образцов углеродных сорбентов в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов.

Материал и методы

Материалом для создания модифицированного сорбента послужил гранулированный гемосорбент ВНИИТУ-1 (образец № 1), разработанный в ИППУ СО РАН на основе наноди-сперсного углерода (регистрационное удостоверение № ФСР 2008/03492 от 25.09.2012 г.). Образец №1 — это углеродный сорбент, обработанный гидромеханически, окислен и стабилизирован до нормативных значений рН. Он представляет со-

бой сферические гранулы чёрного или серебристого цвета диаметром 0,63—1,00 мм без вкуса и запаха, характеризуется высокой химической чистотой (содержание углерода не менее 99,5%), практически полным отсутствием пылевидных частиц на поверхности и в порах (содержание минеральных примесей менее 0,15%, общей серы — не более 0,30%) и совместим с биологическими жидкостями. Образец №2 — это углеродный сорбент, модифицированный 20% раствором молочной кислоты с последующей поликонденсацией. Образец № 3 — углеродный гранулированный сорбент, модифицированный 50% раствором молочной кислоты с последующей поликонденсацией и образец № 4 — углеродный гранулированный сорбент, модифицированный 80% раствором молочной кислоты с последующей поликонденсацией. Вид гранул углеродного сорбента ВНИИТУ-1 (до модифицирования) и поверхность гранул представлены на рис. 1.

Предварительно патогенные и условно-патогенные микроорганизмы исследовали на чувствительность к антибиотикам (диски с антибиотиками компании Becton Dickinson and Company USA, производство Ireland, Benex, Limited). Использованы следующие тест-штаммы АТСС, полученные из ГИСК им. Л. А. Тарасевича: грамположительный патогенный Staphylococcus aureus, грамположительные условно-патогенные микроорганизмы Staphylococcus epidermidis, Streptococcus agalac-tiae, Enterococcus faecalis, Pseudomonas aeruginosa, а также клинические штаммы: Streptococcus pyogenes, Klebsiella pneumoniae и Escherichia coli. Морфологические формы исследованных микроорганизмов характеризовались разнообразием (рис. 2).

Идентификацию микроорганизмов проводили с использованием тест-систем производства PLIVA — Lachema Diagnostica (Чехия) в компьютерной программе «МИКРОБ Автомат». Антимикотические свойства сорбентов исследовали в отношении клинического штамма Candida albicans. Изучение активности действия углеродных сорбентов в отношении к бактериально-грибковой ассоциации проводили с использованием смешанной культуры S.aureus + C.albicans.

Оценку чувствительности патогенных и условно-патогенных микроорганизмов в отношении углеродных сорбци-онных материалов проводили с помощью диско-диффузионного метода. Суточную культуру соответствующего тест-микроорганизма, выращенную на скошенном 2% агаре Мюл-лера—Хинтон (ЗАО НИЦФ, Россия), смывали 5 мл стерильного изотонического раствора хлорида натрия; полученную суспензию микробов разводили физиологическим раствором до концентрации 1 млрд микробных тел в 1 мл по бактериальному стандарту мутности.

Перед началом исследований проводили стерилизацию гранулированных углеродных сорбентов в микробиологическом боксе БОВ-001-АМС СЛШ-М (ЗАО «Миасский завод», РФ) ультрафиолетовыми лучами с помощью ртутно-кварце-вой лампы (ООО»СибЭСТ, РФ) в течение 30 мин. В качестве контроля использовали немодифицированный гранулированный углеродный сорбент — образец № 1, который стерилизовали при 1 атм в течение 30 мин. Образцы сорбентов после стерилизации помещали в стерильные чашки Петри (ОАО «Медполимер», РФ).

Для тест-микроорганизмов в качестве питательной среды использовали 2% агар Мюллера—Хинтон (рН 7,2—7,4), который разливали в чашки Петри диаметром 90 мм в количестве 20 мл. Для микроорганизмов рода Streptococcus в качестве питательной среды использовали агар Мюллера—Хинтон с добавлением 5% дефибринированной бараньей крови. Дефиб-ринированную кровь вносили асептически в питательную основу после автоклавирования и охлаждения до 48—50°С.

В соответствии с правилами микробиологической техники на поверхность плотной агаровой среды в чашки Петри стерильной пипеткой наносили 1 мл суспензии суточной культуры микроорганизма в концентрации, эквивалентной стандарту мутности 0,5 по McFarland (содержание микроорга-

низмов 1,5х108 КОЕ/мл), равномерно распределяли по поверхности среды покачиванием, после чего удаляли избыток инокулюма пипеткой. После 30-минутного подсушивания чашек Петри в термостате при 37°С на поверхность среды, засеянную микроорганизмами, проводили аппликацию четырёх образцов гранулированных сорбентов с помощью пинцета на участке диаметром 10 мм каждый на расстоянии не менее 20 мм друг от друга. С каждой культурой использовали по три чашки.

После аппликации сорбентов чашки Петри с дисками выдерживали при комнатной температуре в течение 30 мин, а затем помещали в термостат кверху дном и инкубировали при температуре +37°С в течение 18—24 ч, в зависимости от вида тестируемого микроорганизма. После окончания инкубации проводили учёт результатов, измеряя диаметр зоны задержки роста микробов с точностью до 1 мм, учитывая диаметр участка нанесения гранул (10 мм). По величине зоны угнетения роста тест-микробов судили об антибактериальных свойствах гранулированных углеродных сорбентов.

Оценку антимикотических свойств сорбентов проводили по аналогичной методике. Готовили взвесь культуры дрожже-подобных грибов С.аШеат в изотоническом растворе хлорида натрия, содержащую 5,0х108 КОЕ/мл. В качестве питательной среды использовали агаризованную среду Сабуро. После нанесения сорбентов на засеянную питательную среду чашки выдерживали 30 мин при комнатной температуре, помещали в холодильник при температуре 10°С на 2 ч, после чего переносили в термостат для инкубации в течение 24—48 ч при 30°С.

Для оценки антибактериальной активности сорбентов в каждом случае измеряли диаметр зоны задержки (подавления) роста микроорганизмов. В случаях, если диаметр зоны задержки роста микробов составлял от 10 до 15 мм, считали, что сорбент проявляет слабое антибактериальное (антимико-тическое) действие. Если диаметр зоны подавления роста составлял от 15 до 20 мм, то считали, что сорбент обладает умеренно выраженным действием. При диаметре зоны подавления роста более 20 мм считали, что сорбент проявляет сильно выраженные биоспецифические свойства. Отсутствие зоны задержки роста микробов вокруг дисков свидетельствовало об отсутствии у сорбентов антибактериальных или анти-микотических свойств.

Таблица 1. Чувствительность условно-патогенных и патогенных микроорганизмов к антимикробным препаратам

Антимикробные препараты_Исследуемые штаммы микроорганизмов_

S.aureus S.epidermidis S.pyogenes S.agalactiae Е./аесаШ Рмегщтош К.риеитотие Е.соИ

Бензилпенициллин R R S S R R R R

Ампициллин R R S S S R R R

Оксациллин R R R R R R R R

Гентамицин S S R R R S S S

Эритромицин R S S S/R S R R R

Левомицетин R S S S R R S S

Ципрофлоксацин R S S/R R R S S S

Офлоксацин R S R R R R S S

Норфлоксацин R R R R R R S S

Доксициклин S S R R R R S S

Тетрациклин R S R R R R S S

Цефалотин S S R S R R R S

Цефазолин S S S S R R S S

Цефалексин S S S S R R S S

Цефоперазон R R S S R R S S

Цефотаксим R R R R R S S S

Цефтриаксон R R R R R S S S

Цефтазидим R R R R R S R S

Цефуроксим R S S S R R R R

Примечание. S - микроорганизм чувствителен к препарату; R - микроорганизм проявляет устойчивость (резистентность) к препарату; S/R - микроорганизм проявляет умеренную устойчивость к препарату.

Результаты и обсуждение

Чувствительность условно-патогенных и патогенных микроорганизмов оценивали в отношении 19 антимикробных препаратов. Интерпретацию результатов проводили согласно методическим указаниям [9]. Результаты этих исследований представлены в табл. 1.

Анализ полученных результатов исследований показал, что S.aureus был устойчив к 14 препаратам, S.epidemidis — к 8, штаммы S.pyogenes и S.agalactiae — к 10 препаратам, E.faecalis — к 17, Pмemgimsa — к 14, K.pneumomae — к 7 препаратам и E.coli — только к 5 препаратам. Изучение чувствительности C.albicans проводили в отношении 6 антимикотических препаратов. Результаты этих исследований представлены в табл. 2. Согласно полученным результатам штамм C.albicans оказался устойчивым к нистатину и амфотерицину В.

Таким образом, установлено, что исследованные микроорганизмы устойчивы к большинству препаратов, широко используемых в настоящее время в клинической практике для лечения инфекционных заболеваний бактериальной и грибковой природы. Полученные результаты исследований подтверждают существующую статистику о том, что резистентность возбудителей инфекционных заболеваний к антибиотикам достаточно высока. Необходимо учитывать и тот факт, что большинство антибактериальных пре-

паратов негативно влияют на микробиоценоз человека, увеличивают долю антибиотикорезис-тентных штаммов микроорганизмов, оказывают побочное действие на организм. Полученные результаты подчеркивают актуальность поиска новых подходов и соединений, отличающиеся по механизму действия от антибиотиков, обладающих высокой антибактериальной и антимикоти-ческой активностью.

Результаты изучения активности гранулированных углеродных сорбентов в отношении условно-патогенных и патогенных бактериальных культур по отмечающейся диффузии в агаре (зоне задержки роста, мм) представлены в табл. 3.

Полученные данные свидетельствуют об отсутствии антибактериальной активности у образца сорбента №1 углеродного сорбента. Образец №2 обладал слабо выраженным антибактериальным действием по отношению ко всем использованным штаммам. Образцы №3 и №4 проявляли умеренно выраженную активность в отношении тест-штаммов S.aureus, S.epidermidis, S.pyogenes, S.agalactiae, E.faecalis и P.aeruginosa, при этом они проявляли слабо выраженное действие в отношении штаммов K.pneumoniae и E.coli.

Образец №4 обладал наиболее выраженной антибактериальной активностью в сравнении с образцом №3 в отношении штаммов S.pyogenes, S.agalactiae, E.faecalis, являющихся представителями родов Streptococcus и Enterococcus. Проявле-

Таблица 2. Чувствительность дрожжеподобных грибов Calbicansii антимикотическим препаратам

Антимикотический препарат Степень чувствительности

Нистатин R

Амфотерицин В R

Клотримазол S

Флуконазол S

Кетоконазол S

Итраконазол S

Примечание. Б - микроорганизм чувствителен к препарату; К - микроорганизм проявляет устойчивость (резистентность) к препарату.

Таблица 3. Оценка чувствительности патогенной и условно-патогенной микрофлоры к исследуемым сорбентам при применении метода диффузии в агар

Исследуемые культуры

Образцы сорбента

№1 №2 №3 №4

S.aureus _ * ** **

S.epidermidis — * ** **

S.pyogenes _ * ** **

S.agalactiae _ * ** **

E.faecalis _ * ** **

P.aeruginosa _ * * *

K.pneumoniae _ * * *

E.coli _ * * *

Примечание. Здесь и в табл. 4: * - диаметр зоны задержки роста микробов (зона действия сорбента) от 10 до 15 мм (слабое антибактериальное действие сорбента); ** - диаметр зоны подавления роста от 15 до 20 мм (умеренно выраженное антибактериальное действие сорбента); *** - диаметр зоны подавления роста более 20 мм (сильно выраженные биоспецифические свойства сорбента); «-» - отсутствие зоны задержки роста микробов вокруг дисков (от-сутствиие у сорбентов антибактериальных свойств).

Таблица 4. Оценка чувствительности дрожжеподобных грибов рода Candida albicans и ассоциативной культуры (S.aureus+ C.albicans) в отношении исследуемых сорбентов методом диффузии в агар

Исследуемые культуры _Образцы сорбента_

№1 №2 №3 №4

C.albicans — ** *** ***

S.aureus + C.albicans — ** *** ***

ние данных антибактериальных свойств может быть связано с биологически активными свойствами молочной кислоты, используемой для модифицирования сорбента и выбранных для синтеза концентраций. Впервые было выявлено ингибирующее действие сорбентов в отношении S.aureus, S.epidermidis, S.pyogenes, S.agalactiae, E.faecalis, P.aeruginosa, K.pneumoniae, E.coli.

Проведены микологические исследования по оценке биоспецифических свойств углеродных сорбентов в отношении тест-культуры дрожжеподобного гриба рода Candida. Полученные результаты свидетельствуют о том, что образец №1 не проявлял антимикотических (противогрибковых) свойств, что выражалось в отсутствии зоны задержки роста дрожжеподоб-ного гриба. Вместе с тем, исследуемые образцы №2, №3 и №4 обладают выраженными антими-котическими свойствами в отношении тест-штаммов C.albicans (табл. 4). Наиболее высокая степень антимикотического действия выявлена у сорбента №3, который дал наибольшую зону задержки роста — 25 мм. Образец №2 проявлял умеренно выраженное антимикотическое действие (зона задержки роста 20 мм).

Согласно результатам проведённых испытаний установлено, что модифицированные сорбенты в отличие от немодифицированного образца №1 обладают выраженными антимикробными свойствами по отношению к ассоциативной бактериально-грибковой культуре S.aureus + C.albicans (см. табл. 4).

Образец №2 проявлял слабую активность в отношении бактериально-грибковой ассоциации (диаметр зоны задержки роста культуры 12 мм). Образцы сорбентов №3 и №4 проявляли достаточно сильно выраженную антибактериальную и антимикотическую активность в отношении исследуемой ассоциации и сформировали зоны задержки роста культуры диаметром 24 и 20 мм. Следует отметить наиболее выраженный эффект действия образца №3.

Высокие антибактериальные и антимикоти-ческие свойства модифицированных образцов углеродного сорбента могут быть обусловлены кислотно-основными свойствами нанесённого олигомера молочной кислоты: при контакте оли-

ЛИТЕРАТУРА

1. Самсонов К В. Сравнительная эффективность сорбции бактерий и бактериальных токсинов углеродными и углерод-минеральными

гомера с биологической средой снижается рН. Происходит локальное «закисление» среды за счёт процесса гидролиза образованного на сорбенте олигомера гидроксикислоты, что является губительным фактором для жизнедеятельности патогенных микроорганизмов.

Таким образом, исследуемые образцы представляют интерес для сорбционной терапии и могут быть рекомендованы для профилактики и лечения гинекологических, стоматологических, гастроэнтерологических заболеваний с целью коррекции микроэкологических нарушений. Актуальность проведения экспериментальных бактериологических и микологических исследований по оценке биоспецифического действия углеродных сорбентов, модифицированных 50%, 80% раствором молочной кислоты, подтверждает высокий удельный вес оппортунистических инфекций, вызванных бактериально-грибковыми ассоциациями, в которых потенциал патогеннос-ти бактериального возбудителя усиливается биопотенциалом дрожжеподобных грибов рода Candida, колонизирующих слизистую оболочку биотопов организма человека.

Выводы

1. Установлено, что исследованные микроорганизмы проявляли устойчивость к большинству препаратов, широко используемых в настоящее время в клинической практике для лечения инфекционных заболеваний бактериальной и грибковой природы.

2. Впервые было выявлено антимикотичес-кое действие у модифицированных сорбентов в отношении дрожжеподобных грибов рода Candida albicans, а также определена различная степень антимикотического действия исследуемых углеродных сорбентов.

3. Впервые установлено, что модифицированные сорбенты обладают выраженными антимикробными свойствами в отношении ассоциативной бактериально-грибковой культуры S.aureus + C.albicans. Следует отметить наиболее выраженный эффект на ассоциативную бактериально-грибковую флору сорбента №3, полученного модифицированием 50% раствором молочной кислоты с последующей поликонденсацией.

сорбентами. Бюллетень физиологии и патологии дыхания 2008; 296 48—50. / SamsonovK.V. Sravnitel'naja jeffektivnost' sorbcii bakterij i bakte-rial'nykh toksinov uglerodnymi i uglerod-mineral'nymi sorbentami. Bjulleten' fiziologii i patologii dykhanija 2008; 296 48—50. [in Russian]

2. BelikE.V, BrykalovA.V, BostanovaF.A. etal. Fabrication and study ofbio-logically active organosilica polymer composites used for application sorption. Fibre Chemistry 2008; 40 (5): 445-446. http://dx.doi.org/10.1007/ s10692-009-9080-7

3. Долгих B.T., Пъянова Л.Г., Баринов C.B. и др. Эффективность использования углеродного формованного сорбента ВНИИТУ-1 в акушерской практике. Общая реаниматология 2015; 11(4): 61—72. / Dolgikh V.T., P'janova L.G., Barinov S.V. i dr. Jeffektivnost' ispol'zovanija uglerodnogo formovannogo sorbenta VNIITU-1 v akusherskoj praktike. Obshhaja reanimatologija 2015; 11(4): 61—72. [in Russian]

4. Antimicrobial resistance: global report on surveillance. 2014. Электронный ресурс: [http://www.who.int/entity/drugresistance/publications/ infographic-antimicrobial-resistance-20140430.pdf]

5. Antimicrobial resistance threats in the United States. 2013. Электронный ресурс: [www.cdc.gov/drugresistance/threat-report-2013/pdf/ar-threats-2013-508.pdf].

6. Долгих B.T., Долгих Т.И, Пъянова Л.Г. и др. Антимикробная активность гранулированных углеродных сорбентов. Российский иммунологический журнал 2014; 8 (17), 3: 788—791. / Dolgikh V.T., Dolgikh T.I., P'janova L.G. i dr. Antimikrobnaja aktivnost' granulirovannykh uglerodnykh sorbentov. Rossijskij immunologicheskij zhurnal 2014; 8 (17), 3: 788—791. [in Russian]

СВЕДЕНИЯ ОБ АВТОРАХ:

Пъянова Лидия Георгиевна — к.б.н., старший научный сотрудник Института проблем переработки углеводородов СО РАН, Омск; доцент кафедры Нефтехимического института Омского государственного технического университета «Химическая технология и биотехнология», Омск Долгих Владимир Терентъевич — заслуженный деятель науки РФ, д.м.н., профессор, зав. кафедрой патофизиологии, клинической патофизиологии Омского государственного медицинского университета, Омск

Лихолобов Владимир Александрович — член-корреспондент РАН, д.х.н., профессор, научный руководитель, Институт проблем переработки углеводородов СО РАН, Омск; заве-

7. Бакланова О.Н., Пъянова Л.Г., Талзи В.П. и др. Модифицирование поверхности углеродного сорбента поли-М-винилпирролидоном для аппликационной медицины. Физикохимия поверхности и защита материалов 2012; 48 (4): 363—369. / Baklanova O.N., P'janovaL.G., Talzi V.P. i dr. Modifïcirovanie poverkhnosti uglerodnogo sorbenta poli-N-vinilpirrolidonom dlja applikacionnoj mediciny. Fizikokhimija poverkhnosti i zashhita materialov 2012; 48 (4): 363—369 [in Russian]

8. Пъянова Л.Г., Бакланова О.Н., Лихолобов В.А. и др. Исследование эффекта модифицирования поверхности углеродных сорбентов поли-N-винилпирролидоном комплексом физико-химических и микробиологических методов. Физикохимия поверхности и защита материалов 2013; 49(4); 408—417. / Pjanova L.G., Baklanova O.N., Likholobov V.A. i dr. Issledovanie jeffekta modificirovanija poverkhnosti uglerodnykh sorbentov poli-N-vinilpirrolidonom kompleksom fiziko-khimicheskikh i mikrobiologicheskikh metodov. Fizikokhimija poverkhnosti i zashhita materialov 2013; 49(4); 408—417. [in Russian]

9. Баринов С.В., Долгих В.Т., Долгих Т.И. и др. Разработка и применение формованных углеродных сорбентов при лечении хронического эндометрита. Сибирский медицинский журнал (Иркутск) 2014; 4: 55—59. / Barinov S.V., Dolgikh V.T., Dolgikh T.I. i dr. Razrabotka i primenenie for-movannykh uglerodnykh sorbentov pri lechenii khronicheskogo jendometri-ta. Sibirskij medicinskij zhurnal (Irkutsk) 2014; 4: 55—59. [in Russian]

дующий кафедрой Нефтехимического института Омского государственного технического университета «Химическая технология и биотехнология», Омск

Рудаков Николай Викторович — д.м.н., профессор, зав. кафедрой микробиологии, вирусологии и иммунологии Омского государственного медицинского университета, Омск Чеснокова Марина Геннадъевна — д.м.н., профессор; профессор кафедры микробиологии, вирусологии и иммунологии Омского государственного медицинского университета, Омск

Седанова Анна Викторовна — к.х.н., старший научный сотрудник Института проблем переработки углеводородов СО РАН, Омск